RBM10（RNA-binding Motif Protein 10）也被称为S1-1，是一种RNA结合蛋白，调控各种pre-mRNA的选择性剪接。RBM10在细胞中广泛表达，在转录活跃的细胞中表达较强。由于RBM10突变与各种代谢过程和疾病关联紧密，其临床重要性日益凸显，...
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RBM10（RNA-binding Motif Protein 10）也被称为S1-1，是一种RNA结合蛋白，调控各种pre-mRNA的选择性剪接。RBM10在细胞中广泛表达，在转录活跃的细胞中表达较强。由于RBM10突变与各种代谢过程和疾病关联紧密，其临床重要性日益凸显，研究报道日渐活跃。RBM10突变引起的TARP综合征，是一种罕见的X连锁遗传病，包括多种畸形、发育迟缓以及先天性心脏病。此病发病率很低，患者多在婴幼儿时期死亡，即使存活，生命质量也受到严重影响。文章综述了RBM10蛋白的结构、亚细胞定位、功能，并综述了已报道的TARP综合征患者中RBM10基因突变不同的类型及其导致的临床表现差异。该综合征基因型-表型相关性证据正在不断出现。全面了解基因型-表型的多样性，有助于临床评估和诊断该疾病。
目的构建人T细胞活化核因子C2(NFATc2)基因启动子荧光素酶报告基因载体pGL3-NFATc2-promoter,检测其转录活性,探究二甲双胍和脂多糖对其转录活性的影响。方法利用UCSC网站查找人NFATc2基因的启动子序列并设计上下游引物PCR扩增人NFATc2基因启动子片段;用限制性内切酶KpnⅠ和HindⅢ双酶切质粒pGL3-basic,将人NFATc2基因启动子片段插入到pGL3-basic质粒,重组质粒命名为pGL3-NFATc2-promoter。将pGL3-NFATc2-promoter与内参质粒pRL-TK共转染293F细胞,检测其荧光素酶活性。同时构建人NFATc2基因启动子不同片段长度的报告基因载体并进行荧光素酶活性检测,分别给予不同浓度的二甲双胍和脂多糖处理24 h后检测二甲双胍和脂多糖对NFATc2转录活性的影响。进一步突变NFATC2基因启动子上转录因子RUNX2的结合位点探究二甲双胍和脂多糖对NFATc2的转录调控作用。结果研究成功构建了不同片段长度(2170、2077、1802、1651、1083、323 bp)的人NFATC2基因启动子荧光素酶报告基因载体pGL3-NFATc2-promoter,经酶切及测序鉴定完全正确。将不同片段长度的pGL3-NFATc2-promoter转染到293F细胞,发现pGL3-1651 bp具有最高转录活性,荧光素酶活性约为pGL3-2170 bp的3.3倍(1.8433±0.1457 vs 0.5467±0.0850)。中浓度(5 mmol/L)和高浓度(10 mmol/L)的二甲双胍分别上调pGL3-1651 bp的转录活性多达2.5、3倍(1.3467±0.1601 vs 0.8867±0.0321,1.8124±0.2771 vs 0.8867±0.0321)。不同剂量的脂多糖均能上调pGL3-1651 bp的转录活性不低于1.6倍(1.4813±0.0616 vs 0.8867±0.0321)。突变pGL3-1651 bp上的RUNX2结合位点后,二甲双胍和脂多糖上调的pGL3-1651 bp转录活性均受到抑制,转录活性下降(2.1667±0.1527 vs 1.233±0.1155;2.3667±0.2887 vs 1.1333±0.3786)。结论pGL3-NFATc2-promoter在293F细胞中能被转录激活,并证实脂多糖和二甲双胍转录激活pGL3-NFATc2-promoter依赖于转录因RUNX2。
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