检索结果-内蒙古大学图书馆

陆军军医大学学报 2024年第12期46卷 1353-1360页

作者：孙慧田湉熊廷蓉邹全明张笑恺杨宪王于重庆师范大学生命科学学院活性物质生物技术教育部工程研究中心重庆401331 陆军军医大学药学与检验医学系微生物与生化药学教研室国家免疫生物制品工程技术研究中心重庆400038 陆军军医大学士官学校基础部河北石家庄050081

目的探究印苦楝内酯(nimbolide,NIM)治疗金黄色葡萄球菌急性肺炎作用机制。方法通过气管插管构建小鼠金葡菌急性肺炎模型,NIM治疗后,观察小鼠生存率差异,平板培养分析肺部荷菌量变化,ELISA检测肺组织炎性细胞因子表达差异;ELISA及Wester... 详细信息

目的探究印苦楝内酯(nimbolide,NIM)治疗金黄色葡萄球菌急性肺炎作用机制。方法通过气管插管构建小鼠金葡菌急性肺炎模型,NIM治疗后,观察小鼠生存率差异,平板培养分析肺部荷菌量变化,ELISA检测肺组织炎性细胞因子表达差异;ELISA及Western Blot检测腹腔原代巨噬细胞感染金葡菌后,NIM对炎症细胞因子的表达水平及炎症通路激活的影响;慢病毒shRNA敲低原代腹腔巨噬细胞RNF114蛋白水平,通过ELISA及Western Blot探究NIM是否通过RNF114抑制炎症反应。结果金葡菌感染小鼠肺部后可导致急性死亡,NIM显著提高了小鼠生存率,下调小鼠肺部炎症细胞因子水平,但短期内不影响金葡菌肺部定植;巨噬细胞感染结果表明,NIM可能通过调控RNF114功能,下调ERK的磷酸化水平抑制MAPK通路激活,进而抑制炎症细胞因子的表达。结论NIM可能通过调控巨噬细胞RNF114功能,抑制MAPK通路激活进而抑制小鼠肺部炎症细胞因子的表达,最终抑制金葡菌急性肺部高炎症导致的小鼠死亡。

关键词：金黄色葡萄球菌 Nimbolide 巨噬细胞 RNF114

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新冠病毒DNA疫苗的研究现状及展望

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免疫学杂志 2022年第8期38卷 726-732页

作者：刘畅邹全明李海波陆军军医大学药学与检验医学系微生物与生化药学教研室国家免疫生物制品工程技术研究中心重庆400038

全球新冠病毒的流行对社会生产和人民生活都带来了严重的不利影响。疫苗是控制新冠病毒传播的有力武器,其中DNA疫苗具有安全、高成本效益以及易于生产的特点,更重要的是其可以诱导机体产生免疫应答并阻断病毒感染。本文综述了已进入临... 详细信息

全球新冠病毒的流行对社会生产和人民生活都带来了严重的不利影响。疫苗是控制新冠病毒传播的有力武器,其中DNA疫苗具有安全、高成本效益以及易于生产的特点,更重要的是其可以诱导机体产生免疫应答并阻断病毒感染。本文综述了已进入临床试验以及在临床前研究的新冠病毒DNA疫苗,并对其作用特点以及保护效果进行了分析。

关键词：新冠病毒 DNA疫苗展望

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不同免疫方式对新冠DNA疫苗应答效果的影响

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免疫学杂志 2022年第2期38卷 170-176,184页

作者：刘畅李郭成金喆薛若怡刘婧怡冯壤金滋力邹全明李海波陆军军医大学药学与检验医学系微生物与生化药学教研室国家免疫生物制品工程技术研究中心重庆400038

目的探究气管灌注和电脉冲肌肉导入2种免疫方式对新型冠状病毒(SARS-CoV-2)DNA疫苗免疫应答的影响。方法利用真核表达载体pVAX-1,设计并构建p RBD、p S-2P和p S-2P.3513种SARS-CoV-2 DNA疫苗。在第0、2和4周采用气管灌注以及电脉冲肌肉... 详细信息

目的探究气管灌注和电脉冲肌肉导入2种免疫方式对新型冠状病毒(SARS-CoV-2)DNA疫苗免疫应答的影响。方法利用真核表达载体pVAX-1,设计并构建p RBD、p S-2P和p S-2P.3513种SARS-CoV-2 DNA疫苗。在第0、2和4周采用气管灌注以及电脉冲肌肉导入2种方式免疫小鼠。末次免疫后2周,ELISA检测血清及阴道灌洗液特异性IgG抗体水平,肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)、鼻腔灌洗液(nasal solution,NS)以及阴道灌洗液(vaginal wash)特异性sIgA抗体水平;ELISpot检测免疫后小鼠脾细胞分泌特异性IFN-gamma的水平。结果气管灌注及电脉冲肌肉导入2种方式免疫SARS-CoV-2DNA疫苗,仅气管灌注免疫可诱导特异性呼吸道黏膜sIgA应答,而电脉冲肌肉导入诱导了更强的细胞免疫应答。与气管灌注pRBD相比,气管灌注pS-2P和p S-2P.351可诱导更强的黏膜免疫应答和细胞免疫应答。结论气管灌注和电脉冲肌肉导入2种免疫方式均可诱导特异性体液免疫以及细胞免疫应答,电脉冲肌肉导入诱导了更强的细胞免疫应答,而气管灌注在诱导呼吸道黏膜免疫应答方面更具优势。

关键词：新型冠状病毒 DNA疫苗气管灌注电脉冲肌肉导入免疫应答

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以新型脂肽为佐剂的LP-LNP构建及其对mRNA疫苗的增效作用

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陆军军医大学学报 2024年第17期46卷 1925-1933页

作者：曹静文迟宇李郭成程浩邓炎魏静朱吉高英英李海波佳木斯大学临床医学院黑龙江佳木斯154007 陆军军医大学(第三军医大学)药学与检验医学系微生物与生化药学教研室国家免疫生物制品工程技术研究中心重庆400038 重庆医科大学附属巴南医院检验科重庆401320

目的构建以新型脂肽为佐剂的递送系统脂肽-脂质纳米颗粒(lipopeptide-lipid nanoparticle,LP-LNP),初步探究其对mRNA疫苗的增效作用。方法设计并合成2种新型脂肽SS-10和SQ18,微流控技术将编码增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluores... 详细信息

目的构建以新型脂肽为佐剂的递送系统脂肽-脂质纳米颗粒(lipopeptide-lipid nanoparticle,LP-LNP),初步探究其对mRNA疫苗的增效作用。方法设计并合成2种新型脂肽SS-10和SQ18,微流控技术将编码增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,eGFP)、萤火虫荧光素酶(firefly luciferase,F-luc)和卵清白蛋白(ovalbumin,OVA)的mRNA包载到LP-LNP中,构建以新型脂肽为佐剂的mRNA递送系统;利用动态光散射法表征LP-LNP的粒径、多分散系数;利用HEK-Blue TM mTLR2报告细胞检测其Toll样受体2(Toll-like receptors 2,TLR2)的激活作用,筛选最优脂肽掺入比;将优选的LP-LNP-eGFP-mRNA转染至HEK293T细胞,荧光显微镜观察eGFP的表达;利用活体成像技术考察LP-LNP-F-luc-mRNA在小鼠体内的表达水平;流式细胞术评价LP-LNP-OVA-mRNA免疫小鼠后诱导引流淋巴结中树突状细胞(dendritic cells,DCs)成熟水平以及交叉递呈抗原的能力。结果脂肽SQ18和SS-10分别以0.50%、0.75%的摩尔比掺入后,得到的LP-LNP平均粒径分别为127和121 nm,平均多分散系数分别为0.11和0.08,包封率均在90%以上,且体外安全性好;该配方条件下激活TLR2的能力显著强于阳性对照Pam 2 CSK 4(P<0.01);优选的LP-LNP均可以实现有效的体外转染,其中SQ18以0.50%掺入制备的LP-LNP体内转染效果显著优于传统LNP(P<0.01),且可以显著促进引流淋巴结DCs的成熟以及抗原的交叉递呈(P<0.05)。结论以新型脂肽为佐剂的LP-LNP可以增强mRNA的递送能力,进一步提高mRNA疫苗的免疫效果。

关键词：脂质纳米颗粒 mRNA疫苗佐剂脂肽

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土贝母皂苷丙纳米乳的构建及其佐剂效应评价

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陆军军医大学学报 2025年第8期47卷 784-793页

作者：魏静刘姝琳叶演徐铭琦宋振邓炎孙红武马雷李海波佳木斯大学临床医学院黑龙江佳木斯陆军军医大学(第三军医大学)药学与检验医学系微生物与生化药学教研室国家免疫生物制品工程技术研究中心重庆重庆市沙坪坝区陈家桥医院检验科重庆

目的制备土贝母皂苷丙纳米乳(tubeimoside Ⅲ nanoemulsion,TBMⅢ-NE),并评价其疫苗佐剂效应。方法利用低能乳化法制备TBMⅢ-NE,采用动态光散射法表征TBMⅢ-NE的粒径和平均分散系数,透射电镜观察TBMⅢ-NE的形态,CCK-8法检测TBMⅢ-NE... 详细信息

目的制备土贝母皂苷丙纳米乳(tubeimoside Ⅲ nanoemulsion,TBMⅢ-NE),并评价其疫苗佐剂效应。方法利用低能乳化法制备TBMⅢ-NE,采用动态光散射法表征TBMⅢ-NE的粒径和平均分散系数,透射电镜观察TBMⅢ-NE的形态,CCK-8法检测TBMⅢ-NE对骨髓来源的树突状细胞(bone marrow-derived dendritic cells,BMDCs)的细胞毒性;红细胞溶血实验评价TBMⅢ-NE的体外安全性;激光共聚焦显微镜观察TBMⅢ-NE促进DC2.4对抗原的吞噬作用;TBMⅢ-NE与BMDCs共孵育后,利用流式细胞术检测BMDCs表面CD40、CD86、MHC-Ⅰ和CCR7的表达水平,酶联免疫吸附(ELISA)法检测BMDCs上清中细胞因子的表达水平;新冠病毒抗原RBD与TBMⅢ-NE联用免疫小鼠,ELISA测定小鼠血清中特异性IgG、IgG2a、IgG1抗体水平,酶联免疫斑点(ELISpot)法检测小鼠脾淋巴细胞中特异性分泌γ干扰素(IFN-γ)的细胞数量。结果制备的空白纳米乳(blank nanoemulsion,BNE)和TBMⅢ-NE的平均粒径分别为25.46 nm和25.89 nm,平均多分散系数分别为0.214和0.125,透射电镜观察TBMⅢ-NE呈均匀“球型”且分散性良好;当TBMⅢ-NE佐剂稀释400倍时,BMDCs存活率约为86%;与游离土贝母皂苷丙(TBMⅢ)相比,TBMⅢ-NE的溶血毒性显著降低(P<0.01);TBMⅢ-NE可促进DC2.4对抗原的吞噬,并显著提高BMDCs表面CCR7的表达水平(P<0.05),具有促进树突状细胞向淋巴结迁移的潜力;TBMⅢ-NE还可促进BMDCs培养上清中IL-6和IL-1β的表达(P<0.05);与RBD联用,TBMⅢ-NE可显著提升小鼠血清中特异性IgG、IgG2a、IgG1抗体的水平(P<0.01),并促进脾淋巴细胞中特异性IFN-γ的分泌(P<0.01),提示TBMⅢ-NE可以增强特异性T细胞免疫应答。结论成功构建出质量稳定、具有高效诱导体液和细胞免疫应答的TBMⅢ-NE。

关键词：土贝母皂苷丙纳米乳疫苗佐剂免疫效应

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新型抗菌化合物HL-J6与金黄色葡萄球菌PBP1的相互作用研究

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陆军军医大学学报 2025年第9期47卷 912-921页

作者：徐铭琦史祥睿刘威段浩魏静邓炎江悦高英英李海波佳木斯大学临床医学院黑龙江佳木斯陆军军医大学(第三军医大学)药学与检验医学系微生物与生化药学教研室国家免疫生物制品工程技术研究中心重庆重庆大学药学院重庆陆军军医大学(第三军医大学)全军免疫学研究所重庆重庆医科大学附属巴南医院检验科重庆

目的探究新型抗菌化合物HL-J6与金黄色葡萄球菌青霉素结合蛋白1(penicillinbinding protein 1, PBP1)的相互作用。方法以MRSA252基因组DNA为模板,PBP1F/R为上下游引物,以Nde I/Xho I为酶切位点构建表达质粒pET30a-pbp1-39-608。将质... 详细信息

目的探究新型抗菌化合物HL-J6与金黄色葡萄球菌青霉素结合蛋白1(penicillinbinding protein 1, PBP1)的相互作用。方法以MRSA252基因组DNA为模板,PBP1F/R为上下游引物,以Nde I/Xho I为酶切位点构建表达质粒pET30a-pbp1-39-608。将质粒转入大肠杆菌中进行表达并通过亲和层析纯化获得PBP1-39-608蛋白;利用肽聚糖侧链主干肽的硫酯类似物S2d作为底物,测定HL-J6对PBP1-39-608转肽酶活性的抑制作用;用微量热泳动技术(microscale thermophoresis,MST)检测HL-J6与PBP1-39-608的亲和力,并通过细胞热转移实验(cell thermal shift assay,CETSA)确证结合作用;分别利用AutoDock Vina和Desmond软件进行分子对接和动力学模拟,明确HL-J6与PBP1-39-608蛋白的结合模式和关键氨基酸残基。结果成功构建pET30a-pbp1-39-608重组质粒,诱导表达后,经纯化获得相对分子质量约为65×103的PBP1-39-608蛋白;HL-J6可呈时间依赖性抑制PBP1-39-608的转肽酶活性(P<0.001);HL-J6与PBP1-39-608的结合解离常数Kd约为64.92μmol/L;分子对接结果显示HL-J6通过与ILE-348、ASN-370、THR-516、PHE-423等主要氨基酸残基相互作用结合在PBP1-39-608的活性口袋,结合评分为-8.38 kcal/mol(<-5.00 kcal/mol);动力学模拟结果显示二者结合后50 ns趋于稳定。结论 HL-J6可显著抑制金黄色葡萄球菌PBP1的转肽酶活性,并与其存在稳定的相互作用。

关键词：金黄色葡萄球菌青霉素结合蛋白 HL-J6 重组蛋白:相互作用

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金黄色葡萄球菌感染非抗生素治疗手段研究进展

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中国抗生素杂志 2025年第1期50卷 15-21页

作者：广承灵张笑恺王于熊廷蓉邹全明重庆理工大学药学与生物工程学院重庆400054 中国人民解放军陆军军医大学药学与检验医学系微生物与生化药学教研室国家免疫生物制品工程技术研究中心重庆400038 中国人民解放军陆军军医大学士官学校基础部石家庄0500081 重庆大学重庆400044

抗生素一直是金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)感染的主要治疗方法。然而,由于出现了多种耐药性菌株,抗生素的疗效不再像过去那样明显。因此,研究人员开始探索非抗生素治疗金黄色葡萄球菌感染的方法,以寻找新的治疗途径。目前,非... 详细信息

抗生素一直是金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)感染的主要治疗方法。然而,由于出现了多种耐药性菌株,抗生素的疗效不再像过去那样明显。因此,研究人员开始探索非抗生素治疗金黄色葡萄球菌感染的方法,以寻找新的治疗途径。目前,非抗生素治疗金黄色葡萄球菌感染的方法包括免疫疗法、抗毒力因子疗法、光动力疗法(photodynamic therapy,以下简称PDT)、中草药提取物疗法、噬菌体疗法。免疫疗法通过激活机体免疫系统或调节免疫反应,提高机体对金黄色葡萄球菌的抵抗力,从而抑制感染。光动力疗法利用光敏剂(photosensitizer,以下简称PS)、光和内源性分子氧来根除病原微生物,实现治疗效果。此外,对中草药提取物、金葡菌噬菌体的研究也有所进展。通过深入研究这些物质的机制和应用方式,有望实现非抗生素治疗金黄色葡萄球菌感染的突破。本文将简要介绍目前一些非抗生素治疗方法的进展。

关键词：金黄色葡萄球菌耐药性非抗生素治疗手段中草药提取物

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吸入性疫苗递送研究进展

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中国生物制品学杂志 2024年第5期37卷 617-620,626页

作者：王颖(综述) 邹全明顾江(审校) 陆军军医大学药学与检验医学系微生物与生化药学教研室、国家免疫生物制品工程技术研究中心重庆400038

呼吸道是病原体感染最常见部位,也是诱导机体保护性免疫应答的重要场所。吸入性疫苗不仅能诱导黏膜局部产生抗原特异性免疫球蛋白A(immunoglobulin A,IgA),而且能激发全身性IgG抗体和局部呼吸道的细胞免疫应答。但由于缺乏有效的递送系... 详细信息

呼吸道是病原体感染最常见部位,也是诱导机体保护性免疫应答的重要场所。吸入性疫苗不仅能诱导黏膜局部产生抗原特异性免疫球蛋白A(immunoglobulin A,IgA),而且能激发全身性IgG抗体和局部呼吸道的细胞免疫应答。但由于缺乏有效的递送系统,使吸入性疫苗的研发进展缓慢。近年来,基于微粒的递送系统为吸入性疫苗的设计提供了新的思路,经合理设计后获得最佳理化特性的微粒疫苗不仅能防止抗原被酶降解,而且能靶向抗原递呈细胞,从而产生长期、有效的保护性免疫应答。目前吸入性流感疫苗Flumist已在国内外获批上市,2022年,我国批准全球首款吸入式新冠疫苗紧急使用,此外,还有大量吸入性疫苗已开始临床试验。本文就近年来吸入性疫苗递送的研究进展作一简要综述。

关键词：肺部吸入性疫苗递送系统

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大黄素抑制MRSA生物膜活性及其作用机制研究

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陆军军医大学学报 2022年第7期44卷 684-690页

作者：刘婧怡蔡仑段浩刘畅李海波刘明陆军军医大学(第三军医大学)药学与检验医学系微生物与生化药学教研室国家免疫生物制品工程技术研究中心重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)药学与检验医学系分析化学教研室重庆400038 佳木斯大学临床医学院黑龙江佳木斯154007

目的探究大黄素抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)生物膜作用及其机制。方法微量肉汤稀释法测定大黄素对MRSA标准株及5种不同地区临床分离株的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentrat... 详细信息

目的探究大黄素抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)生物膜作用及其机制。方法微量肉汤稀释法测定大黄素对MRSA标准株及5种不同地区临床分离株的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)和最低杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC),绘制抑菌曲线评估其动态抑菌效果;结晶紫染色测定大黄素抑制MRSA生物膜的作用,扫描电镜和激光共聚焦显微镜观察其对MRSA生物膜形态的影响;荧光定量PCR检测ica操纵子基因的表达。结果大黄素对不同MRSA菌株的MIC为2~8μg/mL,MBC为4~16μg/mL;大黄素可显著抑制MRSA生物膜的形成,并呈剂量依赖关系;大黄素对生物膜结构具有破坏作用,且显著增加了生物膜内死细菌的比例;荧光定量PCR结果提示大黄素显著下调了ica操纵子基因的表达。结论大黄素具有抑制MRSA生物膜的作用,并可能通过下调ica操纵子基因的表达抑制细菌生物膜的形成。

关键词：大黄素耐甲氧西林金黄色葡萄球菌生物膜 ica

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《生物技术制药》课程思政设计与实践探索

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中国药业 2023年第5期32卷 15-18页

作者：杨赟赵世博彭六生赵卓李海波鲁东水邹全明曾浩孙红武陆军军医大学药学与检验医学系微生物与生化药学教研室·国家免疫生物制品工程技术研究中心重庆400038

目的促进药学专业学生的知识与德育协调发展,实现德才兼备、以德为先的培养目标。方法对药学专业核心课程《生物技术制药》进行思政设计,从正反案例、中华传统文化、道德与伦理等方面深入挖掘各章节知识点的思政元素。结果《生物技术制... 详细信息

目的促进药学专业学生的知识与德育协调发展,实现德才兼备、以德为先的培养目标。方法对药学专业核心课程《生物技术制药》进行思政设计,从正反案例、中华传统文化、道德与伦理等方面深入挖掘各章节知识点的思政元素。结果《生物技术制药》的思政元素包括文化传承精神,职业精神,遵守法律法规,创新精神,直面困难、坚持科学精神等。通过基因工程制药、动物细胞工程制药、抗体工程制药、酶工程制药、发酵工程制药、蛋白质工程制药等核心章节,设计各章节思政元素的案例和设置点位。带教实践中,树立全员、全过程的《生物技术制药》课程思政新理念,结合背景知识及社会热点将课程教学与爱国主义融合,利用专业知识点背后的经典人文故事将课程教学与职业使命有机联系,以身边典型案例升华思政教学。结论《生物技术制药》课程的思政设计可实现知识传授、价值引导和能力培养的有机统一,培养出有品德、有能力、有责任的高素质药学人才。

关键词：《生物技术制药》思政教育教学设计人才培养药学教育

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