检索结果-内蒙古大学图书馆

利用Seahorse XF-96探讨不同细胞浓度和血清对线粒体功能的影响

局解手术学杂志 2022年第4期31卷 284-291页

作者：李晓栩崔宇阳一栋周晓英矫力王辰元杨诚忠史诗黄缄陆军军医大学高原军事医学系/高原生理学与病理学教研室/极端环境医学教育部重点实验室/全军高原医学重点实验室重庆400038 重庆医药高等专科学校生理教研室重庆401331

目的利用Seahorse XF-96探讨不同细胞浓度和血清对HUVEC细胞和U87细胞线粒体功能的影响。方法利用细胞线粒体应激试剂盒,在不同浓度的HUVEC细胞和U87细胞中加入抑制剂(寡霉素、解偶联剂、鱼藤酮和抗霉素A),根据细胞浓度分为2000组、400... 详细信息

目的利用Seahorse XF-96探讨不同细胞浓度和血清对HUVEC细胞和U87细胞线粒体功能的影响。方法利用细胞线粒体应激试剂盒,在不同浓度的HUVEC细胞和U87细胞中加入抑制剂(寡霉素、解偶联剂、鱼藤酮和抗霉素A),根据细胞浓度分为2000组、4000组、6000组和8000组,根据有无血清和不同的解偶联剂浓度分为血清+低解偶联剂组、血清+高解偶联剂组、无血清+低解偶联剂组和无血清+高解偶联剂组。在Seahorse XF-96中测定线粒体的耗氧率(OCR)和细胞外酸化率(ECAR),并比较HUVEC细胞和U87细胞各组线粒体的基础氧耗、质子漏、最大呼吸能力、非线粒体的氧耗、储备的呼吸能力、三磷酸腺苷(ATP)生成能力、线粒体呼吸潜力和偶联效率;比较HUVEC细胞和U87细胞之间上述指标的差异;观察血清和解偶联剂浓度对HUVEC细胞线粒体功能的影响。结果在HUVEC细胞和U87细胞中,2000组OCR显著低于4000组、6000组和8000组(P<0.01);2000组的ECAR显著低于4000组(P<0.01),4000组显著低于6000组和8000组(P<0.01)。在HUVEC细胞中,与2000组比较,6000组和8000组的基础氧耗、储备的呼吸能力、ATP生成能力和最大呼吸能力增强(P<0.05),8000组非线粒体的氧耗和质子漏增强(P<0.05);在U87细胞中,与2000组比较,6000组和8000组的基础氧耗、非线粒体的氧耗和最大呼吸能力增强(P<0.05),8000组ATP生成能力、储备的呼吸能力和质子漏增强(P<0.05);HUVEC细胞和U87细胞各组间线粒体的偶联效率和线粒体呼吸潜力比较差异均无统计学意义(P>0.05)。U87细胞8000组的质子漏高于HUVEC细胞(P<0.05);HUVEC细胞2000组、6000组和8000组的偶联效率高于U87细胞(P<0.05);HUVEC细胞6000组的ATP生成能力和储备的呼吸能力高于U87细胞(P<0.05);HUVEC细胞和U87细胞各组基础氧耗、最大呼吸能力、非线粒体的氧耗、线粒体呼吸潜力比较差异均无统计学意义(P>0.05)。血清+低解偶联剂组储备的呼吸能力和线粒体呼吸潜力高于无血清+低解偶联剂组(P<0.05),其余指标组间比较差异均无统计学意义(P>0.05);血清+高解偶联剂组和无血清+高解偶联剂组的线粒体功能各指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论随着细胞浓度的不断增加,HUVEC细胞和U87细胞的OCR和ECAR不断升高,细胞浓度会影响两种细胞线粒体的OCR和ECAR,HUVEC细胞和U87细胞的质子漏和偶联效率存在显著差异,血清会影响HUVEC细胞线粒体储备的呼吸能力和线粒体呼吸潜力。

关键词：线粒体能量代谢氧耗 Seahorse

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10年前后移居高原人群慢性高原病比较分析

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军事医学 2022年第2期46卷 90-94页

作者：高志奇谢慎威高文祥何文娟殷骏倪兵高钰琪陈德伟陆军军医大学高原军事医学系病理生理学教研室重庆400038 解放军陆军第953医院感染科西藏日喀则857000 陆军军医大学高原军事医学系高原特需药品与器材研究室重庆400038 极端环境医学教育部重点实验室全军高原医学重点实验室重庆400038

目的通过对久居高海拔地区人群进行慢性高原病(CMS)调查,并与10年前调查数据进行比较分析,了解CMS患病情况及10年前后变化情况,为CMS的预防和诊断提供依据。方法应用CMS调查量表对2019年3300-5400 m海拔地区的218名受试对象进行调查,... 详细信息

目的通过对久居高海拔地区人群进行慢性高原病(CMS)调查,并与10年前调查数据进行比较分析,了解CMS患病情况及10年前后变化情况,为CMS的预防和诊断提供依据。方法应用CMS调查量表对2019年3300-5400 m海拔地区的218名受试对象进行调查,分析其患病情况,并与2009年相同海拔范围的510名受试对象的调查数据进行比较,分析两批数据间的差异。结果 2019年调查对象的CMS患病率(15.60%)较2009年(31.18%)显著降低;在2019年调查对象中,低氧血症、呼吸困难、静脉曲张、局部感觉异常、头痛、耳鸣和血红蛋白浓度升高(≥21 g/dl)的发生率显著降低,紫绀、静脉曲张、局部感觉异常和头痛的评分显著降低,但在CMS患病人群中,睡眠障碍评分显著增高;CMS患病风险随累计高原生活时间显著增高。结论与2009年相比,2019年高原人群健康水平显著提高,可能与近年来高原人群健康关注度及生活水平提高有关;在各项症状反应评分中,睡眠障碍是影响居民健康的重要指标,在CMS预防和诊断过程中值得重点关注;科学控制高原停留时间,是减少CMS患病的关键手段。

关键词：高原低氧慢性高原病睡眠障碍

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低氧对小鼠生精小管的损伤作用及对精母细胞凋亡的诱导作用

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第三军医大学学报 2020年第6期42卷 576-582页

作者：殷骏柳君泽倪兵唐中伟高志奇赵力张梦洁陈德伟何文娟廖卫公陆军军医大学(第三军医大学)高原军事医学系:病理生理学教研室极端环境医学教育部重点实验室全军高原医学重点实验室重庆400038

目的探讨低氧暴露下小鼠生精小管病理损伤情况以及低氧对小鼠精母细胞(GC-2spd,GC-2)细胞凋亡的影响。方法40只3周龄雄性Balb/c小鼠按照Excel Random函数随机分为常氧组、低氧15、30、60 d组,低氧各组小鼠分别暴露于模拟海拔6000 m低压... 详细信息

目的探讨低氧暴露下小鼠生精小管病理损伤情况以及低氧对小鼠精母细胞(GC-2spd,GC-2)细胞凋亡的影响。方法40只3周龄雄性Balb/c小鼠按照Excel Random函数随机分为常氧组、低氧15、30、60 d组,低氧各组小鼠分别暴露于模拟海拔6000 m低压舱中减压15、30、60 d,常氧组在平原(海拔300 m)喂养,减压结束后取睾丸组织,HE和TUNEL染色检测睾丸生精小管的病理损伤;将体外培养的GC-2spd细胞,随机分为低氧组和常氧组,低氧组细胞置1%氧和5%二氧化碳低氧培养箱中培养48、60和72 h,常氧组置21%氧和5%二氧化碳培养箱中培养48、60和72 h。采用流式细胞技术、TUNEL检测法、培养液上清乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)活性测定和培养液caspase-3/8/9活性测定等方法来检测GC-2细胞凋亡情况。结果低氧15、30、60 d组小鼠睾丸生精小管生精细胞凋亡率分别为(37.2±5.4)%、(66.3±6.4)%、(73.5±8.2)%,均显著高于常氧组凋亡率(4.6±1.4)%,P<0.01,流式细胞术检测低张性缺氧(低氧)48、60、72 h组细胞凋亡率为(15.43±1.47)%、(44.10±14.10)%、(63.36±12.74)%,显著高于常氧48、60、72 h组细胞的凋亡率(4.18±1.40)%、(5.45%±2.30)%、(14.47±8.21)%,(P<0.01),TUNEL法显示低氧48、60、72 h组凋亡细胞数/视野(200×)为22±3、55±5、82±12,显著高于常氧48、60、72 h组5±1、8±2、15±4(P<0.01),低氧48 h组LDH值(1.28±0.18)U/mL显著高于常氧48 h组(0.48±0.09)U/mL(P<0.01),低氧48 h组caspase-3/8/9值分别为12.20±0.42、2.73±0.60、10.90±0.40,显著高于常氧48 h组7.67±0.45、16.20±0.56、7.03±0.25,(P<0.01)。结论低氧对小鼠生精小管的损伤可能是通过诱导精母细胞凋亡产生。

关键词：凋亡低氧精母细胞

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运动性功能筛查在高原部队官兵损伤风险评估中的应用研究

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华南国防医学杂志 2021年第8期35卷 570-573页

作者：唐中伟张钢黄河张鹏殷骏黄庆愿陆军军医大学高原军事医学系病理生理学教研室/教育部极端环境医学重点实验室/高原医学重点实验室重庆400038 西藏军区总医院内分泌科陆军军医大学高原军事医学系寒区教研室/教育部极端环境医学重点实验室/高原医学重点实验室重庆400038

目的了解我国高原部队官兵训练损伤风险,探索功能性运动筛查(functional movement screen,FMS)评分与不同海拔高度官兵训练水平的关系。方法本研究随机抽取了驻高原部队164名官兵进行FMS筛查测试。结果我国高原部队官兵FMS测试整体平均... 详细信息

目的了解我国高原部队官兵训练损伤风险,探索功能性运动筛查(functional movement screen,FMS)评分与不同海拔高度官兵训练水平的关系。方法本研究随机抽取了驻高原部队164名官兵进行FMS筛查测试。结果我国高原部队官兵FMS测试整体平均得分15.95分,FMS 15分确定为高原部队官兵训练损伤风险评估的临界值。不同海拔高度下部队官兵的受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线下面积(area under the curve,AUC)为0.703(P=0.000),表明FMS评分能用于预测官兵训练损伤的风险。结论FMS测试评分可以作为预测高原部队官兵训练损伤风险的参考指标;海拔越高官兵训练损伤风险越大。

关键词：高原部队运动性功能筛查功能性运动筛查风险评估

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丁酸对缺氧血管内皮细胞一氧化氮分泌的影响及机制研究

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第三军医大学学报 2020年第7期42卷 639-645页

作者：杨诚忠冯岚陈德伟张钢高钰琪谭小玲陆军军医大学(第三军医大学)高原军事医学系:高原生理学与病理学教研室重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)高原军事医学系:高原特需药品与器材研究室病理生理学教研室重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)高原军事医学系:全军高原医学重点实验室重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)高原军事医学系:极端环境医学教育部重点实验室重庆400038

目的研究缺氧血管内皮细胞分泌一氧化氮(NO)下降的机制,探讨丁酸的干预作用。方法人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)分为常氧组(21%O2,N)、缺氧组(1%O2,H)、缺氧+溶剂对照组(H+D)、缺氧+丁酸组(H+B)、缺... 详细信息

目的研究缺氧血管内皮细胞分泌一氧化氮(NO)下降的机制,探讨丁酸的干预作用。方法人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)分为常氧组(21%O2,N)、缺氧组(1%O2,H)、缺氧+溶剂对照组(H+D)、缺氧+丁酸组(H+B)、缺氧+干扰对照组(H+Ci)和缺氧+siRNA干扰组(H+Si)。硝酸还原法检测HUVECs培养上清液NO水平;荧光定量PCR检测一氧化氮合酶(eNOS)的mRNA水平,Western blot检测eNOS蛋白水平、乙酰化水平以及组蛋白去乙酰化酶3(histone deacetylase 3,HDAC3)蛋白水平。免疫共沉淀技术检测HDAC3和eNOS的相互作用。结果缺氧6 h后,HUVECs培养上清中NO水平降低,与常氧组相比,差异具有统计学意义(P<0.05);缺氧组HUVECs中eNOS蛋白水平降低,但eNOS的mRNA水平没有明显变化。与常氧组相比,缺氧组HUVECs中,HDAC3的蛋白表达没有变化,但HDAC3与eNOS的结合增加,eNOS的乙酰化水平下降。与缺氧+干扰对照组相比,缺氧+siRNA干扰组细胞中eNOS的蛋白水平显著升高。缺氧+丁酸(4 mmol/L)处理组HUVECs培养上清中NO水平升高,与缺氧+溶剂对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05);同时,缺氧+丁酸(4 mmol/L)处理组HUVECs细胞中eNOS蛋白水平升高。缺氧+丁酸(4 mmol/L)处理组HUVECs中HDAC3与eNOS的结合减少,eNOS乙酰化水平降低。结论缺氧促进HDAC3和eNOS结合,抑制eNOS的乙酰化,可能通过降低eNOS蛋白的稳定性,抑制NO分泌,而丁酸可以抑制这一过程。

关键词： NO eNOS HDAC3 丁酸缺氧

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病理生理学实验课程准备工作的体会

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中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 2021年第12期 265-266页

作者：殷骏唐中伟高志奇邓芳倪兵陆军军医大学(第三军医大学)高原军事医学系病理生理学教研室·教育部极端环境医学重点实验室·中国人民解放军高原医学重点实验室重庆400038

病理生理学实验准备是病理生理学实验教学的关键组成部分,关系病理生理学教学与实验的全局,实验准备的好坏对于实验教学的顺利开展及理论教学的深化均具有重要意义。结合多几年来负责实验准备工作,浅谈病理生理学实验教学准备中的几点... 详细信息

病理生理学实验准备是病理生理学实验教学的关键组成部分,关系病理生理学教学与实验的全局,实验准备的好坏对于实验教学的顺利开展及理论教学的深化均具有重要意义。结合多几年来负责实验准备工作,浅谈病理生理学实验教学准备中的几点体会。

关键词：病理生理学实验教学自身素质实验室管理

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缺氧对大鼠肺成纤维细胞甲酰肽受体1表达的影响

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第三军医大学学报 2020年第6期42卷 568-575页

作者：李晓栩黄缄矫力崔宇杨诚忠魏铭陆军军医大学(第三军医大学)高原军事医学系:高原生理学与病理学教研室重庆4400038 陆军军医大学(第三军医大学)高原军事医学系:极端环境医学教育部重点实验室重庆4400038 陆军军医大学(第三军医大学)高原军事医学系:全军高原医学重点实验室重庆4400038 重庆医科大学基础医学院干细胞与组织工程研究室病理生理学教研室重庆400016

目的研究缺氧对大鼠肺成纤维细胞甲酰肽受体1(formyl peptide receptor 1,FPR1)表达的影响。方法分离大鼠肺成纤维细胞,用48孔Boyden趋化小室观察大鼠成纤维细胞在不同浓度(0、10、100、1000 nmol/L组)的FPR激动剂(fMLF)作用下的趋化能... 详细信息

目的研究缺氧对大鼠肺成纤维细胞甲酰肽受体1(formyl peptide receptor 1,FPR1)表达的影响。方法分离大鼠肺成纤维细胞,用48孔Boyden趋化小室观察大鼠成纤维细胞在不同浓度(0、10、100、1000 nmol/L组)的FPR激动剂(fMLF)作用下的趋化能力。将细胞置于低氧培养箱中培养(1%O2,5%CO2,94%N2,37℃)24 h,取细胞培养上清,结合FPR特异性拮抗剂tBoc处理,检测缺氧培养上清中FPR介导的趋化活性。将细胞分为常氧组[普通培养箱(5%CO2,95%空气,37℃)]和缺氧组[置低氧培养箱中培养(1%O2,5%CO2,94%N2,37℃)2、12、24 h],用免疫印迹、PCR检测大鼠肺成纤维细胞FPR1和FPR激活物膜联蛋白A1(annexin A1,AnxA1)的蛋白、mRNA水平。不同浓度fMLF作用下细胞中FPR1、AnxA1的蛋白水平。使用tBoc预处理细胞并缺氧24 h后,检测FPR1、AnxA1的蛋白水平。结果fMLF可明显引起大鼠肺成纤维细胞趋化100 nmol/L组引起趋化至膜下侧的细胞数增多最为显著(P<0.05)。缺氧后的细胞培养上清趋化活性显著高于常氧组(P<0.05),加入tBoc后其趋化活性显著降低(P<0.05),降低程度显著高于常氧组。缺氧12 h,肺成纤维细胞的FPR1蛋白水平显著增加(P<0.05)。缺氧12、24 h与缺氧0 h组相比较,AnxA1的蛋白水平显著增加(P<0.05)。与常氧组相比较肺成纤维细胞的FPR1、AnxA1的mRNA水平显著增加(P<0.05);随着fMLF浓度的升高,FPR1和AnxA1的蛋白表达水平逐渐增加,100、1000 nmol/L组与0 nmol/L组相比,具有显著性差异(P<0.05)。甲酰肽受体拮抗剂tBoc可以显著削弱此效应。结论原代培养的大鼠肺成纤维细胞表达FPR1,缺氧促进大鼠肺成纤维细胞FPR1及其激活物表达与分泌,FPR1激活可进一步增强受体及其激活物的表达与分泌。

关键词：成纤维细胞缺氧趋化甲酰酞受体

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基于MOOC的高原生理学教学改革的启示与思考

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中华医学教育探索杂志 2020年第3期19卷 291-295页

作者：崔宇黄缄矫力陈德伟陆军军医大学高原军事医学系高原生理学与病理学教研室/极端环境医学教育部重点实验室/全军高原医学重点实验室重庆400038 陆军军医大学高原军事医学系病理生理学教研室重庆400038

高原生理学是高原医学的核心基础学科,是高原医学专业本科生的专业必修课程。高原生理学目前主要采取传统讲授式教学,教学方式相对单一,在一定程度上影响了学生的学习效果。慕课(massive open online course,MOOC)是新近涌现出的一种在... 详细信息

高原生理学是高原医学的核心基础学科,是高原医学专业本科生的专业必修课程。高原生理学目前主要采取传统讲授式教学,教学方式相对单一,在一定程度上影响了学生的学习效果。慕课(massive open online course,MOOC)是新近涌现出的一种在线开发课程,其教育理念先进。在当前军队改革的大背景条件下,将MOOC有效结合到高原生理学课程教学中,使教学模式得到转变的同时提高教学质量和促进教学相长。这样不仅能全面提高学生的学习效果,更有助于提高高原军事医学学生的岗位任职能力,有效服务高原部队。

关键词：高原医学慕课教学改革

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陆军某部夏季野外驻训前后皮肤病发病情况调查

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西南军医 2020年第3期22卷 222-225页

作者：唐中伟严鑫陆军军医大学高原军事医学系病理生理学教研室/极端环境医学教育部重点实验室/全军高原医学重点实验室重庆400038 陆军第75集团军77231部队卫生连云南临沧677000

目的了解陆军某部皮肤病发病情况及夏季野外驻训前后皮肤病发病情况变化,为制定科学防治策略提供依据。方法采用流行病学调查方法对陆军某部5138名官兵夏季野外驻训前后皮肤病发病情况进行调查,讨论可能致病因素。结果野外驻训前四个月... 详细信息

目的了解陆军某部皮肤病发病情况及夏季野外驻训前后皮肤病发病情况变化,为制定科学防治策略提供依据。方法采用流行病学调查方法对陆军某部5138名官兵夏季野外驻训前后皮肤病发病情况进行调查,讨论可能致病因素。结果野外驻训前四个月时间部队主要以真菌性皮肤病为主,发病率为50.8%,细菌性皮肤病和病毒性皮肤病发病率依次为16.0%、10.7%;野外驻训4个月时间以日照、高温出汗、摩擦等造成的物理性皮肤病显著增多为主要特点,新增病例多见于新兵。驻地位于热带地区,训练强度大、个人卫生习惯不良、驻训条件差等可能是皮肤病高发的主要因素。结论皮肤病已跃升为驻热带部队官兵的主要疾病,其中多数为真菌性皮肤病,夏季强化训练后物理性皮肤病显著增多,应针对发病因素提出防治措施。

关键词：部队夏季野外驻训皮肤病

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病理生理学实验课教学改革探讨

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中华医学教育探索杂志 2019年第5期18卷 469-471页

作者：高志奇唐中伟何文娟倪兵殷骏张梦洁陈德伟陆军军医大学高原军事医学系病理生理学教研室/极端环境医学教育部重点实验室/全军高原医学重点实验室重庆400038

病理生理学的理论来源于实验研究,实验教学是病理生理学课程的重要组成部分。通过实验教学可以培养学生独立思考和综合分析能力,提高学生实践技能,并加强其对理论知识的掌握和应用.但现有的病理生理学实验课教学存在诸多弊端,需要进行... 详细信息

病理生理学的理论来源于实验研究,实验教学是病理生理学课程的重要组成部分。通过实验教学可以培养学生独立思考和综合分析能力,提高学生实践技能,并加强其对理论知识的掌握和应用.但现有的病理生理学实验课教学存在诸多弊端,需要进行针对性的教学改革,通过建立“以学为中心”的教学理念,合理安排实验课程,优化实验课教学内容,综合应用多种教学方式等途径进行病理生理学实验教学改革,全面提升病理生理学实验教学质量,有效提高学生理论知识水平和综合实践能力。

关键词：病理生理学实验教学教学改革科研思维

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