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陕西省植物学会2024年学术研讨会

作者：覃月杨佳慧杨嘉琪刘梦晨孙学苏高静张岗颜永刚陈莹陕西中医药大学药学院/陕西省秦岭中草药应用开发工程技术研究中心/陕西省中医药管理局"秦药"研发重点实验室

目的:探讨山茱萸果实内果皮硬化过程中细胞特征及木质素的积累变化。方法:以山茱萸果实内果皮为材料,采用果实形态观察法、组织化学定位法、超微技术及扫描电镜对不同发育时期山茱萸果实内果皮异细胞观察;采用间苯三酚–HCl法观察内果... 详细信息

目的:探讨山茱萸果实内果皮硬化过程中细胞特征及木质素的积累变化。方法:以山茱萸果实内果皮为材料,采用果实形态观察法、组织化学定位法、超微技术及扫描电镜对不同发育时期山茱萸果实内果皮异细胞观察;采用间苯三酚–HCl法观察内果皮木质化过程,测定山茱萸果实不同发育时期木质素、纤维素和半纤维素含量,通过多组学方法分析其相关酶活性的变化规律。结果表明:(1)异细胞位于山茱萸果实内果皮,在发育早期体积较小,周围细胞呈不规则形状,细胞质浓厚。随着异细胞体积增大,细胞质颜色较深,大液泡中积累电子致密物质,发育后期,内果皮开始木质化,大液泡充满木质化细胞。山茱萸内果皮会随着果实发育而变硬,内果皮发生木质化会形成硬果核。(2)木质素、纤维素和半纤维素是植物细胞壁及果核硬壳的主要构成成分,在山茱萸果核中木质素含量积累最高,其次为半纤维素、纤维素。木质素的积累随果实发育呈上升趋势,木质素的积累与PAL、CCR、CAD以及POD活性的变化呈负相关。(3)PAL、C4H、CSE、POD、CAD、CCR的表达量在山茱萸的幼果期(YG)最高,随着山茱萸果实发育,木质素含量增高,其表达量呈现下降趋势;COMT和F5H的表达量在山茱萸的熟果期(SG)最高,与木质素积累趋势一致。结论:扫描电镜发现异细胞内壁三种不同形态,可能与物质的积累以及异细胞发育时期的不同相关,且异细胞及其周围细胞可能是山茱萸内果皮物质积累的主要部位。山茱萸果核硬化与木质素的积累相关,PAL、CCR、CAD以及POD的活性在幼果期较高成熟期趋于稳定,COMT(Cluster-10622.34014、Cluster-10622.61621和Cluster-10622.63048),F5H(Cluster-10622.70695)与对香豆酸(p-Coumaric acid)呈显著正相关,推测可能参与木质素合成。

关键词：山茱萸内果皮异细胞木质素果核硬化

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南五味子多糖对高糖损伤INS-1细胞及糖尿病小鼠的改善作用

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中南药学 2024年第11期22卷 2858-2863页

作者：王娇娇康惠丽冯石卜姜祎宋小妹邓翀陕西中医药大学陕西咸阳712046 陕西省中药基础与新药研究重点实验室陕西咸阳712046 陕西中医药大学药学院/陕西省秦岭中草药应用开发工程技术研究中心陕西咸阳712046 陕西省中医药管理局“秦药”研发重点实验室陕西咸阳712046

目的结合体内外实验研究南五味子多糖(SSP)对高糖损伤大鼠胰岛细胞瘤细胞系INS-1细胞及糖尿病小鼠的影响,以期为防治糖尿病提供理论支持。方法SSP干预高糖损伤INS-1细胞,采用CCK8法检测各组细胞活力,ELISA法测定细胞上清液胰岛素含量,... 详细信息

目的结合体内外实验研究南五味子多糖(SSP)对高糖损伤大鼠胰岛细胞瘤细胞系INS-1细胞及糖尿病小鼠的影响,以期为防治糖尿病提供理论支持。方法SSP干预高糖损伤INS-1细胞,采用CCK8法检测各组细胞活力,ELISA法测定细胞上清液胰岛素含量,比色法检测SOD及GSH-Px活性与MDA含量,DCFH-DA荧光探针法检测ROS水平。建立糖尿病小鼠模型,随机分为NC组、Mod组、Met组、SSP-Low组、SSP-Hig组。给药21 d,记录小鼠体重变化。给药结束后,检测小鼠口服葡萄糖耐量、SOD活性和胰岛素水平以及胰腺组织病理变化。结果对于高糖损伤的INS-1细胞,SSP能够提高胰岛素分泌水平(P<0.01),使SOD及GSH-Px活性显著上升(P<0.01),MDA含量和ROS水平显著下降(P<0.01);对于糖尿病小鼠,SSP能够升高体重,改善糖耐量异常,使胰岛素水平和SOD活性增加(P<0.05),胰岛内细胞数量增多,改善胰岛形态。结论南五味子多糖对高糖损伤的INS-1细胞和糖尿病小鼠具有改善作用,值得进一步深入研究。

关键词：南五味子多糖 INS-1细胞糖尿病

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大黄酒蒸前后对正常小鼠血清炎症因子及肠道菌群的影响

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陕西中医药大学学报 2023年第2期46卷 43-52页

作者：张桥赵重博宋艺君张丽颜永刚乐世俊唐于平陕西中医药大学陕西省中药饮片工程技术中心陕西咸阳712046 南京中医药大学翰林学院江苏泰州225300 陕西中医药大学/陕西省秦岭中草药应用开发工程技术研究中心陕西咸阳712046 陕西中医药大学/陕西省中医药管理局中药配伍重点研究室陕西咸阳712046

目的比较大黄酒蒸前后对正常小鼠血清炎症因子及肠道菌群的作用差异,进而探讨酒蒸缓和大黄副作用(腹泻)的潜在作用机制。方法84只雄性ICR小鼠随机分为空白组、生大黄及熟大黄高、中、低(8、4、1 g·kg^(-1))剂量组,空白组给予等体积... 详细信息

目的比较大黄酒蒸前后对正常小鼠血清炎症因子及肠道菌群的作用差异,进而探讨酒蒸缓和大黄副作用(腹泻)的潜在作用机制。方法84只雄性ICR小鼠随机分为空白组、生大黄及熟大黄高、中、低(8、4、1 g·kg^(-1))剂量组,空白组给予等体积的0.9%生理盐水,生大黄及熟大黄各组给予相应水煎液,连续灌胃14 d(1次/1 d),分别在第7 d、14 d观察小鼠精神状态,收集粪便测定粪便含水量并进行16S rRNA测序,采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-6(IL-6)水平,采用苏木精-伊红(HE)染色进行小鼠小肠组织病理学观察。结果与空白组比较,生大黄高、中剂量组及熟大黄高剂量组粪便含水率均显著升高,熟大黄升高程度小于生大黄。与空白组比较,生、熟大黄对小鼠小肠具有不同程度的损伤,随着给药时间的延长,生大黄高剂量组损伤加剧,而熟大黄各组变化不明显。与空白组比较,生、熟大黄均可升高血清中TNF-α、IL-6、IFN-γ含量,且熟大黄各组含量的升高程度小于生大黄组。与空白组比较,生、熟大黄组肠道菌群分类单元(OTUs)总数及Alpha多样性降低,而熟大黄组降低程度略小于生大黄组。与空白组比较,生、熟大黄均可升高链球菌属(Streptococcus)、志贺氏菌属(Shigella)丰度,然熟大黄对其影响程度小于生大黄,此外,生大黄可降低乳杆菌属(Lactobacillus)丰度,而熟大黄对其影响没有显著性。结论生大黄引起腹泻的原因可能主要是由肠道菌群的失调以及炎症因子水平异常所导致,熟大黄能够在一定程度上缓解肠道菌群的失调,抑制炎症因子的表达,进而缓解生大黄所致腹泻的副作用。

关键词：大黄酒蒸小鼠炎症因子肠道菌群

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南五味子二氯甲烷部位化学成分结构鉴定及对HepG2和INS-1细胞的影响

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中南药学 2024年第11期22卷 2851-2857页

作者：冯石卜王娇娇姜祎张化为宋小妹黄文丽谢允东张东东李玉泽邓翀陕西中医药大学陕西咸阳712046 陕西省中药基础与新药研究重点实验室陕西咸阳712046 陕西中医药大学药学院/陕西省秦岭中草药应用开发工程技术研究中心陕西咸阳712046 陕西省中医药管理局“秦药”研发重点实验室西安712046

目的探讨南五味子二氯甲烷部位(SDP)对HepG2细胞胰岛素抵抗和INS-1细胞高糖损伤的影响。方法采用1×10^(-6) mol·L^(-1)胰岛素建立HepG2细胞胰岛素抵抗和30 mmol·L^(-1)葡萄糖建立INS-1细胞高糖损伤模型,并使用不同浓度... 详细信息

目的探讨南五味子二氯甲烷部位(SDP)对HepG2细胞胰岛素抵抗和INS-1细胞高糖损伤的影响。方法采用1×10^(-6) mol·L^(-1)胰岛素建立HepG2细胞胰岛素抵抗和30 mmol·L^(-1)葡萄糖建立INS-1细胞高糖损伤模型,并使用不同浓度的南五味子二氯甲烷部位进行干预。检测HepG2细胞中三酰甘油(TG)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、细胞内活性氧(ROS)、腺苷三磷酸水平(ATP)、葡萄糖水平;检测INS-1细胞中MDA、SOD、过氧化物歧化酶(GSH)、ROS、基础葡萄糖(BIS)和高糖(GSIS)水平;并采用UPLC-MS/MS法分析SDP中的化学成分。结果经胰岛素诱导48 h的HepG2细胞,模型组TG、MDA、ROS葡萄糖升高(P<0.01),SOD、ATP降低,经SDP干预后,TG、MDA、ROS均有所回调,SOD、ATP显著升高;经高糖诱导48 h的INS-1细胞,模型组MDA、ROS升高(P<0.01),SOD、GSH-Px、BIS、GSIS降低(P<0.01),SDP干预后MDA、ROS回调(P<0.01),SOD、GSH-Px、BIS、GSIS上升(P<0.01)。从SDP样品中共成功鉴定出1824个化学成分,其中134个木脂素类、283个酚酸类、283个香豆素等其他类化合物,而木脂素类化合物相对含量最高。结论SDP能改善HepG2细胞胰岛素抵抗和INS-1细胞高糖损伤,分析了SDP化学成分,为防治T2DM提供实验依据。

关键词：南五味子 HepG2细胞 INS-1细胞 UPLC-MS/MS

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山茱萸果核提取物不同洗脱部位对急性药物性肝损伤的作用研究

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中南药学 2023年第3期21卷 652-656页

作者：张婷冯石卜姜祎张化为宋小妹张东东李玉泽黄文丽邓翀陕西中医药大学陕西咸阳712046 陕西省中药基础与新药研究重点实验室陕西咸阳712046 陕西中医药大学药学院/陕西省秦岭中草药应用开发工程技术研究中心陕西咸阳712046 陕西省中医药管理局“秦药”研发重点实验室陕西咸阳712046

目的研究山茱萸果核提取物大孔树脂不同洗脱部位对对乙酰氨基酚(APAP)所致小鼠急性肝损伤(ALI)的保护作用。方法通过大孔吸附树脂将山茱萸果核提取物分别用0%、30%、60%和90%乙醇进行洗脱,得到4个洗脱部位(ESCOA、ESCOB、ESCOC、ESCOD)... 详细信息

目的研究山茱萸果核提取物大孔树脂不同洗脱部位对对乙酰氨基酚(APAP)所致小鼠急性肝损伤(ALI)的保护作用。方法通过大孔吸附树脂将山茱萸果核提取物分别用0%、30%、60%和90%乙醇进行洗脱,得到4个洗脱部位(ESCOA、ESCOB、ESCOC、ESCOD)。再以生化检测和组织病理学结果,评价山茱萸果核不同洗脱部位的低、高剂量组(以生药量计为4.68 g·kg^(-1)、12.48 g·kg^(-1))对APAP所致小鼠ALI的保护作用。结果组织病理学观察结果表明,模型组小鼠的肝组织可见炎性细胞浸润,伴有肝细胞变性、片状坏死,而山茱萸果核ESCOA高剂量组、ESCOB低剂量组及ESCOC各剂量组对这些病变均有不同程度的改善;生化检测结果表明,与模型组相比,各组小鼠血清中谷丙转氨酶水平均显著降低,ESCOA低剂量组和ESCOC各剂量组小鼠血清中谷草转氨酶水平显著降低,各组小鼠肝脏组织中SOD水平均显著升高,ESCOA低剂量组、ESCOB高剂量组、ESCOC各剂量组小鼠肝脏组织中GSH-Px显著升高,ESCOA低剂量组及ESCOC、ESCOD各剂量组小鼠血清中MDA水平显著降低。结论山茱萸果核提取物的不同洗脱部位均对APAP所致小鼠ALI有一定的保护作用,其机制可能与抗氧化应激反应有关。

关键词：急性肝损伤大孔吸附树脂山茱萸果核

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药用大黄全长转录组测序分析及Ⅲ型聚酮合成酶家族基因鉴定

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中国现代中药 2023年第3期25卷 533-543页

作者：杜鹃王雪茹李依民杜桥高静王楠彭亮张岗陕西中医药大学药学院/陕西省秦岭中草药应用开发工程技术研究中心陕西西安712046 陕西中医药大学陕西省中医药管理局“秦药”研发重点实验室陕西西安712046 陕西中医药大学省部共建特色秦药资源研究开发国家重点实验室(培育) 陕西咸阳712083 道地药材国家重点实验室北京100700

目的:利用全长转录组测序技术挖掘药用大黄蒽醌类成分合成中的关键酶Ⅲ型聚酮合成酶(PKSⅢ)家族基因。方法:利用PacBio SequelⅡ平台进行药用大黄全长转录组测序,数据通过非冗余蛋白(NR)、Swiss-Prot、京都基因与基因组百科全书(KEGG)... 详细信息

目的:利用全长转录组测序技术挖掘药用大黄蒽醌类成分合成中的关键酶Ⅲ型聚酮合成酶(PKSⅢ)家族基因。方法:利用PacBio SequelⅡ平台进行药用大黄全长转录组测序,数据通过非冗余蛋白(NR)、Swiss-Prot、京都基因与基因组百科全书(KEGG)、真核生物相邻类的聚簇(KOG)、基因本体(GO)数据库进行功能注释。筛选PKSⅢ家族基因全长并进行编码蛋白生物信息特征分析,借助MEGA 6.0构建PKSⅢ家族基因系统发育进化树。结合RNA-Seq数据分析,运用TBtools计算PKSⅢ家族基因的相对表达量。结果:共获得原始数据55.50 GB,52960条高质量转录本,平均长度1712.56 bp;50007条Isoforms在NR、Swiss-Prot、KEGG和KOG数据库中得到注释。GO分类注释到生物过程、细胞组分和分子功能3个类别的65个小组。KEGG代谢通路共有17637条转录本被注释于137条通路中,其中标准次生代谢通路15条。筛选到16个含开放阅读框的Isoforms,编码8个PKSⅢ家族基因,包括RoALS1-3(芦荟松合酶)、RoCHS1-3(查耳酮合酶)、RoSTS(二苯乙烯合酶)和RoPKS(聚酮合成酶)等,编码蛋白长度为391~393 aa,无信号肽或跨膜结构域,均定位于细胞质中。编码蛋白序列保守,磷酸化及糖基化位点和数目各异。大多数PKSⅢ家族基因Isoforms在药用大黄根和根茎中表达量高。药用大黄PKSⅢ家族基因与掌叶大黄、虎杖、拟南芥基因汇于一支,亲缘关系近。结论:获得药用大黄全长转录组信息特征,鉴定了8个药用大黄PKSⅢ家族基因,明确了序列及表达特征,为药用大黄蒽醌类成分合成的分子机制研究提供参考。

关键词：药用大黄全长转录组 Ⅲ型聚酮合成酶蒽醌生物信息学

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掌叶大黄GRAS基因家族的鉴定及表达分析

掌叶大黄GRAS基因家族的鉴定及表达分析

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陕西省植物学会2024年学术研讨会

作者：杜桥唐璟李依民张明英高静彭亮冯昭张岗陕西中医药大学药学院/陕西省秦岭中草药应用开发工程技术研究中心陕西中医药大学陕西省中医药管理局"秦药"研发重点实验室陕西中医药大学省部共建特色秦药资源研究开发国家重点实验室(培育)

目的基于全长转录组测序挖掘掌叶大黄Rheum palmatum ***基因家族成员,并分析其在掌叶大黄叶、根和根茎中的表达及MeJA处理下的表达模式。方法利用生物信息学对掌叶大黄GRAS成员进行系统发育、保守结构域、蛋白理化性质和亚细胞定位分析... 详细信息

目的基于全长转录组测序挖掘掌叶大黄Rheum palmatum ***基因家族成员,并分析其在掌叶大黄叶、根和根茎中的表达及MeJA处理下的表达模式。方法利用生物信息学对掌叶大黄GRAS成员进行系统发育、保守结构域、蛋白理化性质和亚细胞定位分析;基于转录组数据对RpGRASs基因的组织表达模式进行RNA-seq分析,RT-qPCR对筛选到的3个RpGRASs进行MeJA处理下的表达模式检测。结果在掌叶大黄全长转录组数据中共鉴定得到39个RpGRASs成员。RpGRASs蛋白主要为不稳定亲水蛋白,定位于细胞核、叶绿体和细胞质;各蛋白二级结构主要为无规则卷曲和α螺旋;系统发育将该家族分为PAT1、DELLA、HAM、SHR、SCR和SCL4/7等6个亚族;GRAS蛋白C端均含有典型的LHRI、VHIID、LHRII、PFYRE和SAW基序。RpGRASs基因表达具有组织特异性,在药用部位根及根茎中高表达的RpGRAS17、RpGRAS18、RpGRAS20受MeJA显著诱导。结论掌叶大黄GRAS转录因子基因家族的系统鉴定及组织和MeJA诱导下的基因表达特征,为后续深入研究GRAS基因的功能奠定基础。

关键词：掌叶大黄 GRAS转录因子 MeJA 基因家族表达模式

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肉桂复合丁香处理对“夏黑”葡萄贮藏品质的影响

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食品工业 2021年第5期42卷 115-119页

作者：孙思胜张晓娟张岗李光辉张贺庆张化阁许昌学院食品与药学院/河南省食品安全生物标识快检技术重点实验室许昌461000 军事科学院军需工程技术研究所北京100104 陕西中医药大学药学院/陕西省秦岭中草药应用开发工程技术研究中心咸阳712046 舞钢市沁丰园林业专业合作社平顶山462500

以"夏黑"葡萄为试验材料,探讨不同浓度的肉桂复合丁香提取物结合1.5%壳聚糖处理对"夏黑"葡萄果实采后贮藏品质的影响。结果表明,与对照相比,肉桂复合丁香提取物结合壳聚糖涂膜处理对采后"夏黑"葡萄果实... 详细信息

以"夏黑"葡萄为试验材料,探讨不同浓度的肉桂复合丁香提取物结合1.5%壳聚糖处理对"夏黑"葡萄果实采后贮藏品质的影响。结果表明,与对照相比,肉桂复合丁香提取物结合壳聚糖涂膜处理对采后"夏黑"葡萄果实的腐烂率的上升具有一定抑制作用,在一定程度上延缓了VC含量、可溶性固形物含量以及果实硬度的下降速度,保持了果实的感官品质。其中,以肉桂复合丁香提取物结合壳聚糖涂膜的C4((9 g肉桂+20 g丁香+1.5%壳聚糖)/L)对采后"夏黑"葡萄果实的贮藏品质保持最佳。

关键词： “夏黑”葡萄肉桂复合丁香提取物贮藏品质

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怀牛膝可培养内生真菌的多样性研究

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安徽农业科学 2022年第10期50卷 149-151,156页

作者：孙思胜张晓娟马传贵刘洋洋陈林张岗许昌学院食品与药学院/河南省食品安全生物标识快检技术重点实验室河南许昌461000 军事科学院军需工程技术研究所北京100010 北京京诚生物科技有限公司北京102600 中国医学科学院药用植物研究所海南分所海南海口570216 黄河科技学院郑州市天然产物合成生物学重点实验室河南省小分子新药研发国际联合实验室河南郑州450063 陕西中医药大学药学院/陕西省秦岭中草药应用开发工程技术研究中心陕西咸阳712046

[目的]探讨道地药材怀牛膝(Achyranthes bidentata Blume)内生真菌的多样性组成及定殖情况。[方法]通过组织块分离法,选取二年生怀牛膝茎部和根部作为分离对象,进行内生真菌分离,并采用形态学和分子生物学2种方法对分离得到的真菌进行... 详细信息

[目的]探讨道地药材怀牛膝(Achyranthes bidentata Blume)内生真菌的多样性组成及定殖情况。[方法]通过组织块分离法,选取二年生怀牛膝茎部和根部作为分离对象,进行内生真菌分离,并采用形态学和分子生物学2种方法对分离得到的真菌进行鉴定。[结果]从怀牛膝材料中共分离纯化获得136株内生真菌,其中根部分离得到86株,茎部分离得到50株,根据形态和分子生物学特征,它们属于8目11科11属;其中,怀牛膝根部内生真菌定殖率较高(65.0%),茎部内生真菌定殖率较低(37.5%)。茎部分离的内生真菌只有8种,根部分离得到11种。[结论]怀牛膝根部内生真菌表现出了较高的种属多样性。在怀牛膝根部分离的内生真菌中,优势菌属是镰孢属和Moesziomyces。

关键词：怀牛膝内生真菌根部茎部多样性

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