检索结果-内蒙古大学图书馆

分子植物育种 2017年第8期15卷 3046-3056页

作者：王柳凤樊连梅刘更森姜雪娇原永兵青岛农业大学园艺学院青岛市现代农业质量与安全工程重点实验室青岛266109

花色苷是调控果实着色的主要色素之一,具有多种保健功能。为探索花色苷在乌桃果实成熟过程中的降解与果胶裂解酶的关系,利用已报到的碧桃果胶裂解酶基因序列设计特异引物,从乌桃中克隆出果胶裂解酶基因PpPL,PpPL包括1239bp的开放阅读框... 详细信息

花色苷是调控果实着色的主要色素之一,具有多种保健功能。为探索花色苷在乌桃果实成熟过程中的降解与果胶裂解酶的关系,利用已报到的碧桃果胶裂解酶基因序列设计特异引物,从乌桃中克隆出果胶裂解酶基因PpPL,PpPL包括1239bp的开放阅读框,编码413个氨基酸。利用荧光定量PCR检测PpPL在果实不同成熟度及不同组织中的表达,数据显示,乌桃PpPL基因的表达量随着果实的成熟及花色苷的降解呈现递增的趋势,且在果实成熟末期表达量明显增多;不同组织中PpPL基因均有表达,同一成熟度,其相对表达量从少到多依次为:幼果果肉<叶<幼果果皮<茎,推测PpPL可能参与花色苷的降解。

关键词：乌桃果胶裂解酶花色苷基因克隆表达分析

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桃果实铜锌超氧化物歧化酶基因PpCuZnSOD的克隆与分析

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核农学报 2013年第4期27卷 408-417页

作者：吴军帅李培环李鼎立董晓颖段艳欣青岛农业大学园林园艺学院/青岛市现代农业质量与安全工程重点实验室山东青岛266109

从已构建的硬肉桃(Prunus persica L.)双久红果实SSH文库中获得4条铜锌超氧化物歧化酶(CuZnSOD)基因的ESTs,通过blast比对和电子克隆后进行了序列拼接和经RT-PCR方法,获得桃果实铜锌超氧化物歧化酶基因PpCuZnSOD全长cDNA序列(GenBank登... 详细信息

从已构建的硬肉桃(Prunus persica L.)双久红果实SSH文库中获得4条铜锌超氧化物歧化酶(CuZnSOD)基因的ESTs,通过blast比对和电子克隆后进行了序列拼接和经RT-PCR方法,获得桃果实铜锌超氧化物歧化酶基因PpCuZnSOD全长cDNA序列(GenBank登录号:JX217743)。该基因全长665bp,包含一个459bp的ORF(120bp-578bp),编码152个氨基酸,推测蛋白分子量为15.38kDa,理论等电点为5.60。该基因具有典型的高度保守的Cu2+和Zn2+活化中心及特征信号,其氨基酸序列与其他植物的CuZnSOD具有很高的相似性。生物信息学分析结果表明,该蛋白定位于细胞质中,是非跨膜的非分泌性亲水蛋白。二级结构分析结果表明,该蛋白主要由无规则卷曲和延伸链等蛋白质二级结构元件构成,三维结构预测结果显示,PpCuZnSOD有3个转角环和8个折叠构成桶状的活性中心。系统进化分析结果表明PpCuZnSOD与小金海棠(Malus xiaojinensis)sod2同源关系最近,而与荔枝(Lichichinensis)、龙眼(Dimocarpus longan)和拟南芥(Arabidopsis trifoliate)等亲缘关系较远。QPCR结果表明,PpCuZnSOD在幼果中表达量最高,雌蕊和雄蕊次之,花瓣和叶片中表达量最少;果实成熟前后,PpCuZnSOD在硬肉芽变桃双久红果实中的表达量显著高于软肉桃川中岛白桃中的表达量,表明该基因可能在维持果实质地和硬度方面有一定作用。本研究结果为进一步研究该基因在桃果实成熟软化中的作用奠定了基础。

关键词：桃 PpCuZnSOD基因克隆生物信息学基因表达

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富士苹果果实中突触小泡蛋白基因(MdVAMP)的克隆及其表达

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分子植物育种 2020年第8期18卷 2475-2483页

作者：商利娟陈京菁樊连梅王永章原永兵青岛农业大学园艺学院青岛市现代农业质量与安全工程重点实验室青岛266109

花青素是植物中最广泛存在的次生代谢物之一,是不同颜色花和果实色泽的关键色素。花青苷通常在细胞质中合成,于液泡中积累。虽然花青苷的生物合成途径已被深入研究,但它们从细胞质到液泡的转运以及显示红色的机制仍然不清楚。本试验通过... 详细信息

花青素是植物中最广泛存在的次生代谢物之一,是不同颜色花和果实色泽的关键色素。花青苷通常在细胞质中合成,于液泡中积累。虽然花青苷的生物合成途径已被深入研究,但它们从细胞质到液泡的转运以及显示红色的机制仍然不清楚。本试验通过RACE技术成功克隆出富士苹果及其芽变中MdVAMP cDNA序列的总长度。该基因cDNA序列全长994 bp,具有660 bp的开放阅读框(ORF),编码219个氨基酸。同源性分析表明,MdVAMP基因与沙梨同源性最高。定量PCR结果表明,MdVAMP基因在‘长富2’苹果及芽变果实摘袋后表达趋势与其花青苷含量变化相一致,芽变果实中MdVAMP基因表达量和花青苷含量均显著高于‘长富2’苹果。进一步在不同富士品种中研究发现,MdVAMP基因表达水平与花青苷含量密切相关。亚细胞定位结果显示MdVAMP主要定位于细胞质。该研究表明,MdVAMP基因可能参与了花青苷的转运和积累,这为进一步研究苹果果皮着色和花青苷转运提供了一定的科学基础。

关键词：富士苹果花青苷转运 MdVAMP 基因表达分析亚细胞定位

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TPA质构分析硬肉桃果实采后质地变化

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食品科学 2013年第20期34卷 273-276页

作者：袁成龙董晓颖李培环李鼎立段艳欣青岛农业大学园艺学院、青岛市现代农业质量与安全工程重点实验室山东青岛266109

应用质地多面分析(TPA)测试法,以硬肉桃品种‘双久红’和常规品种‘川中岛白桃’果实为试材,研究两品种果实采后不同贮藏时间的质地变化。结果表明:随贮藏时间延长,两品种桃果实的硬度、黏力、黏性和咀嚼性均呈先上升后下降的趋势,且相... 详细信息

应用质地多面分析(TPA)测试法,以硬肉桃品种‘双久红’和常规品种‘川中岛白桃’果实为试材,研究两品种果实采后不同贮藏时间的质地变化。结果表明:随贮藏时间延长,两品种桃果实的硬度、黏力、黏性和咀嚼性均呈先上升后下降的趋势,且相同贮藏时间‘双久红’果实的参数值均极显著高于‘川中岛白桃’(P<0.01);‘双久红’果实的硬度形变量随贮藏时间延长而增加,与对照的呈相反的变化趋势;两品种桃果实的内聚性变化均较平稳,且差异不显著。相关性分析表明,桃果实黏力、黏性、咀嚼性与硬度均存在极显著正相关(P<0.01),弹性、内聚性与其他质构参数之间相关性较差。

关键词：质地多面分析桃果实质地

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桃果实PpPAE基因的原核表达载体构建与诱导表达

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华北农学报 2014年第2期29卷 18-21页

作者：丛丽君王滨段艳欣吴军帅冯静青岛农业大学园艺学院青岛市现代农业质量与安全工程重点实验室山东青岛266109

为构建桃果胶乙酰酯酶(PpPAE)基因的原核表达载体pET-32a(+)-PpPAE,并获得稳定高效表达的重组蛋白,以青岛市现代农业质量与安全工程重点实验室前期获得的PpPAE基因(GenBank登录号KF017595)序列为依据,设计引物并扩增其cDNA片段,重组到... 详细信息

为构建桃果胶乙酰酯酶(PpPAE)基因的原核表达载体pET-32a(+)-PpPAE,并获得稳定高效表达的重组蛋白,以青岛市现代农业质量与安全工程重点实验室前期获得的PpPAE基因(GenBank登录号KF017595)序列为依据,设计引物并扩增其cDNA片段,重组到原核表达载体pET-32a(+)中,将重组表达载体转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,并用IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳分析表达产物。结果表明,已成功构建原核表达载体pET-32a(+)-PpPAE,重组质粒在0.1 mmol/L IPTG浓度下诱导4 h后,有大量融合蛋白表达,分子量约为64 kDa。为进一步研究该蛋白的功能奠定了基础。

关键词：桃果胶乙酰酯酶原核表达

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桃PpmMDH基因克隆及采后激素处理下的表达分析

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农业生物技术学报 2019年第4期27卷 624-635页

作者：张姗姗王滨李静媛沈俊岭马春晖黄永红段艳欣青岛市现代农业质量与安全工程重点实验室/青岛农业大学园艺学院青岛农业大学食品科学与工程学院

苹果酸脱氢酶在植物的生长发育中发挥重要作用。本研究克隆了桃(Prunus persica)苹果酸脱氢酶(malate dehydrogenase, mMDH)基因(PpmMDH),分析了其序列特征及其在硬肉和软肉桃品种不同桃组织及果实成熟前后的表达情况,并探讨了不同激素... 详细信息

苹果酸脱氢酶在植物的生长发育中发挥重要作用。本研究克隆了桃(Prunus persica)苹果酸脱氢酶(malate dehydrogenase, mMDH)基因(PpmMDH),分析了其序列特征及其在硬肉和软肉桃品种不同桃组织及果实成熟前后的表达情况,并探讨了不同激素处理对桃果实中PpmMDH基因表达的影响。结果表明,克隆得到了PpmMDH基因,GenBank登陆号为KF017594,该cDNA片段长度为1 239bp,具有1个1 020 bp的ORF,编码339个氨基酸,序列分析表明,PpmMDH编码的氨基酸序列与其他植物的mMDH蛋白有较高的相似性,系统进化分析结果表明PpmMDH与梅(Prunus mume)和甜樱桃(***)同源关系最近。qRT-PCR结果表明,PpmMDH在雄蕊中表达量较高(P<0.05),其次是花瓣,在叶片、幼果和雌蕊中表达量较低。果实成熟软化后期,PpmMDH在硬肉桃'双久红'果实中的表达量高于软肉桃'川中岛白桃'的。脱落酸(abscisic acid, ABA)、萘乙酸(1-naphthylacetic acid, NAA)、乙烯利(ethephon,ETH)处理桃果实得出,软肉桃果实成熟软化过程中PpmMDH的表达与乙烯有拮抗作用,硬肉桃与软肉桃在果实成熟与贮藏过程中内源激素动态不同,PpmMDH表达水平与酶活动态不同。上述结果表明,PpmMDH不一定是维持果实硬度的上游基因,但是在软肉桃与硬肉桃不同材料间表现出了与生理差异同步的酶活差异。本研究结果为进一步探索PpmMDH在桃果实成熟软化中的作用提供了科学依据。

关键词：桃 PpmMDH 基因克隆激素处理表达分析

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桃果实PpCuZnSOD基因的原核表达、纯化与鉴定

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果树学报 2013年第2期30卷 185-190页

作者：吴军帅丛丽君段艳欣董晓颖王滨李培环青岛农业大学园艺学院.青岛市现代农业质量与安全工程重点实验室山东青岛266109

【目的】为了实现桃铜锌超氧化物歧化酶在大肠杆菌中的高效表达,获得表达稳定、蛋白纯度高、活性强的工程菌,【方法】将前期获得的PpCuZnSOD基因(GenBank登录号:JX217743)重组到原核表达载体pET-32a(+)中,并转化到Escherichia coli BL21... 详细信息

【目的】为了实现桃铜锌超氧化物歧化酶在大肠杆菌中的高效表达,获得表达稳定、蛋白纯度高、活性强的工程菌,【方法】将前期获得的PpCuZnSOD基因(GenBank登录号:JX217743)重组到原核表达载体pET-32a(+)中,并转化到Escherichia coli BL21(DE3)宿主菌,经IPTG进行诱导表达。对表达产物进行SDS-PAGE和Western blotting检测,镍柱亲和层析纯化,并采用Brad Ford方法测定融合蛋白浓度,黄嘌呤氧化法分析其酶活。【结果】成功的构建了原核表达载体pET-32a(+)-PpCuZnSOD,并获得分子质量约为35 kDa的诱导表达产物,纯化后融合蛋白浓度为183.7 mg·L-1,活性为5.23×103U·mg-1。【结论】成功构建了桃pET-32a(+)-PpCuZnSOD原核表达载体,表达量高、稳定性强,重组表达产物具有较高CuZnSOD酶活性,为桃CuZnSOD酶的进一步研究奠定了基础。

关键词：桃 PpCuZnSOD 原核表达纯化鉴定

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无纺布果袋对‘沾冬2号’冬枣果实微域环境及品质的影响

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北方园艺 2018年第24期 65-69页

作者：王文文沈俊岭樊连梅王永章原永兵青岛农业大学园艺学院青岛市现代农业质量与安全工程重点实验室山东青岛266109

以‘沾冬2号’冬枣为试材,在冬枣果实套无纺布果袋条件下,测定了枣果生长期间袋内外温度及空气相对湿度,并分析了白熟期、脆熟期和完熟期冬枣外观品质及相关指标,研究了无纺布果袋对‘沾冬2号’冬枣微域环境和果实品质的影响,以期为应... 详细信息

以‘沾冬2号’冬枣为试材,在冬枣果实套无纺布果袋条件下,测定了枣果生长期间袋内外温度及空气相对湿度,并分析了白熟期、脆熟期和完熟期冬枣外观品质及相关指标,研究了无纺布果袋对‘沾冬2号’冬枣微域环境和果实品质的影响,以期为应用无纺布果袋套袋技术生产优质冬枣提供技术支撑。结果表明:套袋导致袋内温度升高、湿度下降;袋内最高温度比袋外最高温度高1～2℃。套袋后冬枣果实枣皮光滑、机械损伤较小,并且在白熟期、脆熟期、完熟期与不套袋相比果皮亮度分别提高了3.06%、16.46%、9.88%;果实可溶性糖含量分别降低了0.21%、1.99%、0.94%;可滴定酸含量分别升高了42.85%、13.79%、9.20%;维生素C含量分别降低了0.30、0.17、0.09mg·g-1,但差异均未达显著水平。套袋能明显改变冬枣果实微域环境,改善枣果外观品质,对其内在品质无明显影响。

关键词：冬枣无纺布果袋微域环境果实品质

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苹果M_7砧木组织培养与抗性筛选

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江苏农业科学 2014年第10期42卷 52-54页

作者：段艳欣青岛农业大学园艺学院/青岛市现代农业质量与安全工程重点实验室山东青岛266109

以M7组培苗为试验材料,进行继代扩繁和卡那霉素抗性筛选研究。结果表明,M7芽苗在MS+4.0 mg/L6-BA+0.3 mg/L IBA(3%蔗糖)固体培养基中继代时,出现严重的玻璃化,而MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA(3%蔗糖)固体培养基可大大改善其玻璃化程度... 详细信息

以M7组培苗为试验材料,进行继代扩繁和卡那霉素抗性筛选研究。结果表明,M7芽苗在MS+4.0 mg/L6-BA+0.3 mg/L IBA(3%蔗糖)固体培养基中继代时,出现严重的玻璃化,而MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA(3%蔗糖)固体培养基可大大改善其玻璃化程度,使其恢复健康生长;卡那霉素对M7叶片再生、新梢增殖、新梢生根均有抑制作用,并且随卡那霉素浓度增加,M7叶片再生率、新梢增殖率、新梢生根率不断下降;M7叶片愈伤组织形成、愈伤组织生根、新梢增殖及新梢生根对卡那霉素的敏感浓度分别为20、5、40、10 mg/L。

关键词：苹果M7砧木组织培养玻璃化抗性筛选

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一种快速分离苹果果肉单细胞的方法

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江苏农业科学 2017年第16期45卷 138-139,167页

作者：邢文曦王永章刘成连青岛农业大学园艺学院/青岛市"现代农业质量与安全工程"重点实验室山东青岛266109

单细胞是生物体的基本单位,提取具有活性的单细胞是研究果实发育的基础。以苹果为材料,研究不同酶液组合和酶解时间对苹果果肉单细胞分离的影响。结果表明,苹果果肉在0.1%离析酶、暗酶解0.5 h时,为理想的苹果果肉单细胞分离条件。

关键词：苹果单细胞离析酶酶解浓度酶解时间

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