检索结果-内蒙古大学图书馆

中华疾病控制杂志 2023年第5期27卷 587-592页

作者：卫美蓉王笑峰罗兵西京学院医学院基础医学教研室西安710123 青岛大学医学院基础医学院微生物学教研室青岛266021

目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)人肺腺癌转移相关的转录本1(metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1,MALATl)及生长阻滞特异性转录本5(growth arrest specific transcript 5,GAS5)基因多态性与肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)易感性的关联。方法收集225例HCC患者的癌组织及220例健康体检者外周静脉血标本,提取癌组织及血标本的DNA分别当作本病例对照研究的病例组与对照组。同时利用TaqMan MGB等位基因分型试剂盒对两组病例MALAT1 rs11227209及GAS5 rs55829688位点的单核苷酸多态性(single nucleotide olymorphism,SNP)进行检测,采用SPSS 17.0软件分析实验结果。结果MALAT1 rs11227209位点基因型频率(CC、CG、GG)在病例组中分布为:46.2%、42.7%、11.1%,在对照组中分布为:50.0%、42.7%、7.3%。分别进行纯合突变基因型CC与显性模型CG+GG基因型组比较,以及纯合野生基因型GG与隐性模型CG+CC基因型组的比较,发现两组基因型分布差异无统计学意义(χ^(2)=0.636,P=0.425;χ^(2)=1.933,P=0.164)。GAS5 rs55829688基因型频率(TT、TC、CC)在病例组中的分布为:45.3%、43.6%、11.1%,在对照组中的分布为:57.7%、38.2%、4.1%。病例组CC基因型人群分布高于对照组(OR=3.459,95%CI:1.546~7.738,P=0.003)。病例组C等位基因携带频率也高于对照组(OR=1.624,95%CI:1.208~2.184,P=0.001);C等位基因为风险基因,个体携带C等位基因可以增加罹患HCC的风险(OR=1.647,95%CI:1.132~2.395,P=0.009)。遗传易感性分层分析结果显示,女性患者携带GAS5 rs55829688 CT+TT基因型可降低HCC的发病风险(OR=0.161,95%CI:0.045~0.580,P=0.005),且≥50岁人群分组中若携带该位点CT+TT基因型,则HCC发病风险也降低(OR=0.232,95%CI:0.074~0.728,P=0.012)。结论GAS5 rs55829688位点SNP与HCC的发病风险相关,携带CC基因型个体HCC的发病风险增高。同时年龄及性别和GAS5 rs55829688位点的SNP可能会共同影响HCC的发病风险。而MALAT1 rs11227209位点SNP与HCC发病风险无相关性。

关键词：肝细胞癌长链非编码RNA 人肺腺癌转移相关的转录本1 生长阻滞特异性转录本5 单核苷酸多态性易感性

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人疱疹病毒7型被膜蛋白pp85的原核表达及应用

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中华微生物学和免疫学杂志 2006年第1期26卷 10-13页

作者：王笑峰孙坚萍罗兵王云青岛大学医学院微生物学教研室 266021

目的构建人疱疹病毒7型（HHV7）被膜蛋白pp85编码基因（ORF U14）的原核表达载体，并进行原核表达。方法应用HHV7标准株Glasgow感染SupT1细胞，PCR技术扩增HHV7 ORF U14基因的主要抗原决定簇编码区（328～533AA），目的基因与原核表... 详细信息

目的构建人疱疹病毒7型（HHV7）被膜蛋白pp85编码基因（ORF U14）的原核表达载体，并进行原核表达。方法应用HHV7标准株Glasgow感染SupT1细胞，PCR技术扩增HHV7 ORF U14基因的主要抗原决定簇编码区（328～533AA），目的基因与原核表达载体pThioHis A连接后，转化宿主菌*** BL21，IPTG诱导融合蛋白表达，经镍-螯合物琼脂糖树脂柱亲和层析纯化获得重组抗原。重组蛋白电泳后转至PVDF膜，与HHV7阳性血清进行免疫印迹反应。结果 DNA序列分析表明，目的基因序列与HHV7标准毒株Glasgow相应序列完全一致，SDS-PAGE可观察到相对分子质量（Mr）为35．7×10^3融合蛋白的表达，免疫印迹反应显示重组抗原具有较高的特异性。结论 HHV7重组抗原具有较好的抗原性，进一步完善后可用于HHV7抗体的检测。

关键词：人疱疹病毒7型 Western blot 被膜蛋白pp85 原核表达

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lncRNA HOTAIR 和H19 SNPs与胃癌及EB病毒相关胃癌遗传易感性的关系

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中国病理生理杂志 2020年第11期36卷 2030-2036页

作者：卫美蓉王笑峰罗兵西京学院医学院陕西西安710123 青岛大学医学院基础医学院微生物学教研室山东青岛266021

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)H19及HOTAIR基因多态性与胃癌和EB病毒相关胃癌(EBVaGC)易感性的关系。方法:研究对象选择EB病毒阴性胃癌(EBVnGC)组织65例、EBVaGC组织50例及115例健康人外周血标本,并从中提取其DNA备用。选择H19 rs3024... 详细信息

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)H19及HOTAIR基因多态性与胃癌和EB病毒相关胃癌(EBVaGC)易感性的关系。方法:研究对象选择EB病毒阴性胃癌(EBVnGC)组织65例、EBVaGC组织50例及115例健康人外周血标本,并从中提取其DNA备用。选择H19 rs3024270和rs3741219,以及HOTAIR rs4759314和rs874945共4个基因多态性位点,利用Taq-Man MGB等位基因分型试剂盒对各单核苷酸多态性(SNP)位点基因进行分型,统计分析实验结果。结果:H19及HOTAIR的SNPs在全部标本中均符合Hardy-Weinberg平衡。(1)H19 rs3024270位点的SNP在胃癌组与对照组中的差异有统计学意义(P<0.05);其中G等位基因为保护基因,个体携带G等位基因可显著降低罹患胃癌的风险(P<0.01);(2)HOTAIR rs4759314位点在胃癌组与对照组中基因型和等位基因分布频率均有显著差异(P<0.05);基因型为GG的人群,胃癌的发病风险显著增加(P<0.05);且胃癌的风险基因可能是G等位基因,携带G等位基因人群罹患胃癌的风险显著增加(P<0.05);(3)H19 rs3741219及HOTAIR rs874945位点的各基因型及等位基因频率在两组间无显著差异(P>0.05);(4)HOTAIR rs4759314位点G等位基因在EBVaGC组的分布高于EBVnGC组,而EBVaGC和EBVnGC组间其他SNPs的分布差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:H19 rs3024270和HOTAIR rs4759314位点的SNPs与胃癌的发病风险有关,但与EBVaGC的发病风险之间未观察到明确的关联性。

关键词：胃癌长链非编码RNA H19基因 HOTAIR基因 EB病毒单核苷酸多态性易感性

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黄芩素作为佐剂对抗原提呈细胞的免疫增强作用

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免疫学杂志 2016年第8期32卷 645-650页

作者：刘泽媛张丽张丽娜钱冬萌王爽王斌青岛大学基础医学院微生物学教研室 266071

目的从体外和体内2个方面检测黄芩素对抗原提呈细胞的免疫增强活性,为促进临床肿瘤免疫治疗的发展提供实验基础。方法在体外实验中,以LPS作为阳性对照,不同浓度的黄芩素分别刺激DC2.4细胞系和RAW264.7细胞系,应用流式细胞仪检测2种细胞... 详细信息

目的从体外和体内2个方面检测黄芩素对抗原提呈细胞的免疫增强活性,为促进临床肿瘤免疫治疗的发展提供实验基础。方法在体外实验中,以LPS作为阳性对照,不同浓度的黄芩素分别刺激DC2.4细胞系和RAW264.7细胞系,应用流式细胞仪检测2种细胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ表达量变化;在体内试验中,以弗式完全佐剂与灭活的肿瘤抗原作为阳性对照,黄芩素与灭活的肿瘤抗原作为实验组对小鼠进行免疫,免疫3 d后对其免疫效果进行评价。结果在体外实验中,不同浓度的黄芩素分别刺激DC2.4和RAW264.7细胞后,细胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ都有不同程度表达上调,在体内实验中,不同浓度的黄芩素可使抗原提呈细胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ都有不同程度表达上调,同时使细胞因子IL-12和TNF-α有不同程度表达上调,而使IL-10表达下调。结论黄芩素在体外和体内具有较强的激活抗原提呈细胞的作用,并且使抗原提呈细胞表面标志和细胞因子上调,黄芩素有可能成为具有潜在应用价值的肿瘤细胞疫苗佐剂。

关键词：黄芩素抗原提呈细胞佐剂疫苗黑色素瘤

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携有胰岛素样生长因子1重组腺病毒对链脲佐菌素诱导胰岛β细胞损害的保护性研究

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中华实验和临床病毒学杂志 2007年第2期21卷 188-190页

作者：陈志红李堂罗兵朱伟孙若鹏山东大学齐鲁医院儿科济南250012 青岛大学医学院附属医院儿科青岛大学医学院微生物学教研室济宁医学院微生物学教研室

目的构建含有鼠胰岛素样生长因子-1（rIGF-1）重组腺病毒，研究rIGF-1在链脲佐菌素（STZ）诱导胰岛B细胞损害中的作用。方法构建重组腺病毒并感染RINm5F细胞，ELISA、Western blotting检测rIGF-1蛋白表达；STZ诱导细胞破坏，检测培养上... 详细信息

目的构建含有鼠胰岛素样生长因子-1（rIGF-1）重组腺病毒，研究rIGF-1在链脲佐菌素（STZ）诱导胰岛B细胞损害中的作用。方法构建重组腺病毒并感染RINm5F细胞，ELISA、Western blotting检测rIGF-1蛋白表达；STZ诱导细胞破坏，检测培养上清中N0水平，胰岛素释放试验进行功能测定，流式细胞检测细胞凋亡，四甲基偶氮唑盐法检测细胞存活率。结果成功构建含有rIGF-1基因重组腺病毒，病毒滴度为4．0×10^8 pfu／ml，rIGF-1在细胞内外有效表达，并具有抑制STZ诱导胰岛β细胞凋亡和NO产生、保护细胞胰岛素分泌和促进细胞增殖的活性。结论胰岛口细胞局部表达IGF-1能够保护细胞功能，抑制NO产生，使胰岛口细胞免受诱导凋亡因子的损害，提高细胞存活率。STZ诱导胰岛B细胞凋亡可能与NO介导有关。

关键词：胰岛素样生长因子-1 链脲菌素腺病毒科胰岛p细胞

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螺杆菌感染与原发性肝癌的相关性研究

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中华医学杂志 2005年第6期85卷 391-395页

作者：宣世英李宁施永新孙樱张健姜文杰强新青岛大学医学院附属青岛市立医院肝病科 266011 青岛大学医学院微生物学教研室

目的　探讨螺杆菌感染与人类原发性肝癌(PLC)的相关性。方法　选取 21例PLC患者的肝癌组织为研究对象(实验组), 12例非肝癌手术患者的肝组织作对照组。参照文献设计螺杆菌属细菌 16SrRNA基因特异性引物,进行聚合酶链反应 (PCR)扩增,扩... 详细信息

目的　探讨螺杆菌感染与人类原发性肝癌(PLC)的相关性。方法　选取 21例PLC患者的肝癌组织为研究对象(实验组), 12例非肝癌手术患者的肝组织作对照组。参照文献设计螺杆菌属细菌 16SrRNA基因特异性引物,进行聚合酶链反应 (PCR)扩增,扩增产物经Southern杂交证实,并将PCR产物进行测序及同源性比较。同时,将两组标本制成病理切片用于螺杆菌属的cDNA mRNA原位杂交实验。通过定性和定位测定评价肝组织螺杆菌感染与PLC的相关性。结果　实验组 62%(13 /21)的肝癌组织中检出螺杆菌属 16SrRNA存在,而对照组无阳性检出 (P<0 .01)。所有PCR产物经Southern杂交得到证实。利用原位杂交技术检测实验组和对照组标本螺杆菌属 16SrRNA mRNA,实验组有 13例阳性,对照组均为阴性 (P<. 0 01 )。比较显示,肝癌组织中的螺杆菌属16SrRNA序列与幽门螺杆菌的 16SrRNA序列有 97 80%的同源性。结论　PLC患者肝组织中可能存在螺杆菌属感染且感染率较高,提示螺杆菌感染与PLC的发生可能存在某种相关性。

关键词：螺杆菌感染对照组原发性肝癌肝癌组织肝组织检出阳性 16SrRNA PCR产物 Southern杂交

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青岛地区产ESBLs菌株Ⅰ类整合子的分布与耐药性分析

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中国抗生素杂志 2014年第4期39卷 306-310页

作者：高昂王昕凝石志源丁印于红青岛大学医学院临床医学系青岛266071 青岛大学医学院医学微生物学教研室青岛266071

目的研究临床分离的多重耐药产ESBLs菌株中I类整合子的分布及其与ESBLs菌株耐药性之间的关系。方法收集青岛市立医疗集团临床分离鉴定的非重复大肠埃希菌89株及肺炎克雷伯菌86株，应用双纸片增效法进行ESBLs菌株鉴定，K—B纸片扩散法测... 详细信息

目的研究临床分离的多重耐药产ESBLs菌株中I类整合子的分布及其与ESBLs菌株耐药性之间的关系。方法收集青岛市立医疗集团临床分离鉴定的非重复大肠埃希菌89株及肺炎克雷伯菌86株，应用双纸片增效法进行ESBLs菌株鉴定，K—B纸片扩散法测定其对16种常用抗菌药物的敏感性，PCR法检测I类整合子的整合酶基因，分析I类整合子与细菌耐药性的关系。结果105株细菌鉴定为ESBLs阳性，产ESBLs菌对16种常用抗菌药物的耐药率为1．9％～93.3％，I类整合予的检出率为66．7％，I类整合子阳性和阴性产ESBLs菌株对16种抗菌药物的耐药率差异无统计学意义（P〉0．051。结论青岛地区产ESBLs菌中I类整合子流行广泛，但仍需进一一步研究其在ESBLs菌株多重耐药性中的作用机制。

关键词： I类整合子超广谱 β-内酰胺酶耐药性

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外源性人乳头状瘤病毒16型E7基因对子宫颈癌细胞周期的影响

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中华妇产科杂志 2006年第9期41卷 612-617页

作者：戴淑真孔守芳黄丽丽罗兵青岛大学医学院附属医院妇产科 266003 青岛大学医学院附属医院微生物学教研室 266003

目的了解外源性人乳头状瘤病毒16型(HPV16)E7基因对子宫颈癌细胞周期的影响。方法从宫颈癌标本中经 PCR 扩增回收 HPV16 E7基因片段,将正确的 E7基因片段插入到穿梭质粒 pAdrTrack-CMV 中,与骨架质粒 pAdEasy-1在大肠埃希菌 Bj5183中同... 详细信息

目的了解外源性人乳头状瘤病毒16型(HPV16)E7基因对子宫颈癌细胞周期的影响。方法从宫颈癌标本中经 PCR 扩增回收 HPV16 E7基因片段,将正确的 E7基因片段插入到穿梭质粒 pAdrTrack-CMV 中,与骨架质粒 pAdEasy-1在大肠埃希菌 Bj5183中同源重组,重组腺病毒质粒转染人胚肾细胞株 HEK-293细胞,包装表达 E7基因的腺病毒,然后转染 HPV18阳性的宫颈癌细胞株HeLa 细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测转染后 HeLa 细胞的增殖情况,以吸光度(A)值表示;流式细胞仪检测转染前后 HeLa 细胞的细胞周期和细胞周期蛋白 D1表达的变化。结果在 HEK-293细胞中,可以收获高转染效率的腺病毒。在荧光显微镜下,可以观察到 HEK-293细胞和 HeLa 细胞中均有绿色荧光蛋白的表达。提取 HEK-293细胞 RNA,RT-PCR 技术可以检测到 E7基因的表达。MTT 比色法检测结果显示,转染后 HeLa 细胞的 A 值最低为0.38±0.02,最高为0.96±0.01,分别与转染前的0.27±0.03比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。流式细胞仪检测结果显示,转染12h后,S 期细胞占(36.0±2.0)%,转染24h 后为(49.9±4.2)%,分别与转染前的(26.0±0.4)%比较,差异均有统计学意义(P<0.05);转染前、后细胞周期蛋白 D1阳性表达率分别为22.4%、55.2%,两者比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论携带 HPV16 E7基因的腺病毒可转染子宫颈癌 HeLa细胞,并在 HeLa 细胞内表达,HPV16 E7基因的表达进一步影响 HeLa 细胞的细胞周期蛋白的表达,促进 HeLa 细胞增殖,可望用于治疗宫颈癌。

关键词：宫颈肿瘤癌基因蛋白质类,病毒性转染 HeLa细胞

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长学制医学微生物学实验教学体系构建

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微生物学通报 2008年第1期35卷 117-119页

作者：于红张文卿丁守怡吕锐孟林青岛大学医学院微生物学教研室青岛266071

针对目前医学微生物学实验教学中的突出问题,从实验内容和实验教学手段等方面入手,探索建立一整套适用于七年制及长学制学生的实验课程教学体系,体现创新教育教学的理念。

关键词：医学微生物学实验教学学生七年制

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七年制学生医学微生物学教学体会

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微生物学通报 2006年第3期33卷 170-172页

作者：于红张文卿青岛大学医学院微生物学教研室青岛266021

在七年制学生医学微生物学的教学中,利用多媒体课件组织教学,运用启发式教学法,注重知识更新,加强与临床学科的联系;开展双语教学,提高学生的专业英语水平;重视实验课教学,培养学生的科研思维和动手能力,学生的综合素质得到明显提高。

关键词：医学微生物学教学学生七年制

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