检索结果-内蒙古大学图书馆

不同RNA抽提方法对激光显微切割分离小鼠牙胚样品总RNA浓度及完整度影响的研究

口腔医学 2013年第7期33卷 446-449页

作者：党平聂敏媛董亮崔三哲汤楚华史亮郑翰圣董蕊施生根解放军第306医院口腔科北京100101 天津市大港油田总医院口腔科天津300280 韩国延世大学口腔医学院口腔生物学教研室首尔120752 首都医科大学口腔医学院口腔医学研究所北京100050

目的观察不同RNA抽提方法对激光显微切割(laser microdissection,LMD)分离牙胚样品总RNA浓度及完整度影响。方法本实验按照RNA抽提的不同方式分为试剂盒组、经典Trizol法组以及改良Trizol法组。以LMD技术获取胚胎17d(embryonic 17,E17)... 详细信息

目的观察不同RNA抽提方法对激光显微切割(laser microdissection,LMD)分离牙胚样品总RNA浓度及完整度影响。方法本实验按照RNA抽提的不同方式分为试剂盒组、经典Trizol法组以及改良Trizol法组。以LMD技术获取胚胎17d(embryonic 17,E17)和出生后2 d(postnatal 2,PN2)两时期CD1小鼠下颌第一磨牙的牙胚组织;以3种不同方法提取各组总RNA后再以安捷伦公司的2100生物分析仪所提供的核糖体RNA 28 S/18 S比值(28 S/18 S ratio)、RNA完整度数值(RNA in-tegrity number,RIN),以及样品电泳图的图形来综合判断样品完整度。比较各组RNA的浓度和完整度,以SPSS软件进行统计分析。结果改良Trizol法所获得RNA浓度最高,与其余2组相比,差异均有显著性;经典Trizol法组RNA浓度略高于试剂盒组,但差异并无显著性;3组间以RIN值、28 S/18 S以及样品电泳图的图形为完整度指标进行比较,均无显著性差异。结论3种RNA抽提方式对样品总RNA获得率和完整度的影响,以改良Trizol法提取的总RNA获得率最高,而3种方法对所提取总RNA完整度影响无统计学差异。改良Trizol法将有利于获得符合高通量实验质检标准的芯片实验样本。

关键词：激光显微切割技术牙胚发育间充质 RNA完整度小鼠

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Oct-3/4和klf5在小鼠磨牙牙根发育过程中的表达研究

Oct-3/4和klf5在小鼠磨牙牙根发育过程中的表达研究

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全国第八次牙体牙髓病学学术会议

作者：张莉 Eizo Nakagawa Han-Sung-Jung 陈智解剖发育生物学口腔颌面部硬组织研究中心韩国延世大学牙科学院口腔医学教育部重点实验室(武汉大学) 武汉大学口腔医院/口腔医学院

目的:探讨在牙根发育过程中,维持牙根端保持增殖和延伸的分子机制,研究干细胞标记分子Oct-3/4和klf5在牙根发育中的表达分布。材料和方法:采用免疫组化技术和原位杂交技术,分别检测小鼠牙根发育各阶段标本中Oct-3/4蛋白和klf5 mRNA的定... 详细信息

目的:探讨在牙根发育过程中,维持牙根端保持增殖和延伸的分子机制,研究干细胞标记分子Oct-3/4和klf5在牙根发育中的表达分布。材料和方法:采用免疫组化技术和原位杂交技术,分别检测小鼠牙根发育各阶段标本中Oct-3/4蛋白和klf5 mRNA的定位表达。结果:在牙根发育启动之前(PN4),Oct-3/4和klf5均表达在颈环细胞的胞浆和胞核中;上皮根鞘形成之后(PN6到PN20),Oct-3/4蛋白持续表达在牙根端细胞的胞核中。Klf5mRNA信号表达在PN6的上皮根鞘细胞中,但是随着牙根的发育过程,表达逐渐减弱。牙根发育即将完成时(PN20),只有连续的上皮根鞘末端有klf5信号的表达。结论:Oct-3/4和klf5在发育期中的小鼠磨牙根端表达的时空特异性,提示它们参与调控牙根的发育和延长。

关键词：牙根发育牙根延长 Oct-3/4A和Oct-3/4B klf5 干细胞

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不同乙醇预处理方式对LMD分离牙胚组织总RNA完整度的影响

引用

中华老年口腔医学杂志 2012年第5期10卷 265-268,303页

作者：党平聂敏媛董亮崔三哲汤楚华史亮郑翰圣董蕊施生根解放军第306医院口腔科副教授北京100101 天津大港油田总医院口腔科主治医师天津300280 韩国延世大学口腔医学院解剖发育学教研室教授首尔120752 首都医科大学口腔医学院口腔医学研究所副教授北京100050

目的:探求不同乙醇预处理方式是否对激光显微切割(Laser microdissection,LMD)技术分离获得的小鼠牙胚组织总RNA完整度有影响。以提高LMD技术获取样品的完整度,使之满足后续基因芯片等高通量实验对样品的质检要求。方法:本实验按照LMD... 详细信息

目的:探求不同乙醇预处理方式是否对激光显微切割(Laser microdissection,LMD)技术分离获得的小鼠牙胚组织总RNA完整度有影响。以提高LMD技术获取样品的完整度,使之满足后续基因芯片等高通量实验对样品的质检要求。方法:本实验按照LMD切割前是否乙醇预处理的方式分为无预处理LMD组、梯度乙醇处理组以及100%乙醇处理组三组。以LMD技术获取胚胎17天(Embryonic 17,E17)和出生后2天(Postnatal 2,PN2)两时期CD1小鼠下颌第一磨牙的牙胚组织;提取各组总RNA,再以核糖体RNA 28s/18s比值、RNA完整度数值(RNA Integrity Number,RIN),以及样品电泳图的图形来综合判断样品完整度。数据进行统计分析。结果:100%乙醇处理组,RIN值最高且与另两组相比差异有显著性,梯度乙醇处理组RIN值与无预处理LMD组相比,并无显著性差异;以28s/18s比值为指标,100%乙醇预处理组高于其它两组,但差异并无显著性;梯度乙醇处理组与无预处理LMD组间差异亦无统计学意义。结论:100%乙醇直接处理方式更适合用于LMD切割样品的防降解预处理,可显著减少切割过程中的组织RNA完整度破坏。该步操作将有利于获得符合高通量实验质检标准的芯片实验样本。

关键词：激光显微切割技术牙胚发育间充质 RNA完整度

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