检索结果-内蒙古大学图书馆

第一军医大学学报 1999年第3期19卷 236-238页

作者：吕海马学军金大地史占军景宗森第一军医大学南方医院骨科广州510515 中国预防医学科学院病毒学研究所基因工程国家重点实验室北京100054

目的体外评价几种国产干扰素联合阿霉素的抗骨肉瘤活性及其协同效应。方法采用MTT比色法，体外对比检测阿霉素及几种国内临床常用重组干扰素（rhIFNα2a、rhIFNα1b、rhIFNα1c、rhIFNβ和rhIFNγ）的抗骨肉瘤细胞增殖活性。分别将几种... 详细信息

目的体外评价几种国产干扰素联合阿霉素的抗骨肉瘤活性及其协同效应。方法采用MTT比色法，体外对比检测阿霉素及几种国内临床常用重组干扰素（rhIFNα2a、rhIFNα1b、rhIFNα1c、rhIFNβ和rhIFNγ）的抗骨肉瘤细胞增殖活性。分别将几种干扰素与阿霉素联合用药，对比检测其抗骨肉瘤的协同作用。结果rhIFNα2a为5×104IU/L、rhIFNα1b为3.75×105IU／L、thIFNalc为1.25×105IU／L、rhIFNβ为5×105IU／L时，细胞生长抑制率均达到50％：rhIFNγ对0S732细胞生长无明显抑制作用；rhIFNα1c与ADM合用时有明显的协同增强效应。结论rhIFNα2a、rhIFNa1b、rhIFNβ、rhIFNαlc对骨肉瘤细胞的生长有明显的抑制作用，其中以rhIFNα2a和rhIFNα1c作用最为明显；上述4种IFNs与阿霉素合用均呈协同增强效应；rhIFNγ在体外对骨肉瘤细胞无明显抑制作用。

关键词：骨肉瘤干扰素 MTT比色法毒性

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流行性感冒病毒核酸疫苗研究进展

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中国计划免疫 1999年第6期5卷 359-362页

作者：安乃莉张智清中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室北京100052

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无症状女性人群及宫颈炎患者泌尿生殖道标本的沙眼衣原体MOMP基因分布

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中国皮肤性病学杂志 1999年第4期13卷 197-198页

作者：罗宪玲汪玎妍蒋文玲邝素娟郭辉玉侯云德杨新科广东省老年医学研究所中心实验室中山医科大学微生物教研室北京中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室

目的了解广东省部分地区沙眼衣原体泌尿生殖道感染者的基因型分布特点。方法运用扩增沙眼衣原体外膜蛋白（ＭＯＭＰ）基因限制性内切酶片段长度多态性（ＲＦＬＰ）方法对无症状女性及宫颈炎患者泌尿生殖道标本进行了基因分型检测。结果... 详细信息

目的了解广东省部分地区沙眼衣原体泌尿生殖道感染者的基因型分布特点。方法运用扩增沙眼衣原体外膜蛋白（ＭＯＭＰ）基因限制性内切酶片段长度多态性（ＲＦＬＰ）方法对无症状女性及宫颈炎患者泌尿生殖道标本进行了基因分型检测。结果基因Ｅ型在两组人群中分布最高，宫颈炎患者以Ｆ、Ｇ二型多见，无症状组以Ｄ型多见。结论实验结果对进一步分析常见的沙眼衣原体慢性迁延感染机理提供了实验依据。

关键词：沙眼衣原体宫颈炎基因分型泌尿生殖道

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噬菌体呈现技术研制特异性人抗骨肉瘤干扰素

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第一军医大学学报 1999年第3期19卷 226-228页

作者：吕海金大地史占军景宗森郑燕芳马学军第一军医大学南方医院骨科广州510515 珠江医院肿瘤科广州510282 中国预防医学科学院病毒学研究所基因工程国家重点实验室北京100054

目的利用噬菌体表面呈现技术研制高活性、特异性抗骨肉瘤干扰素。方法将干扰素IFNαlc／86DDNA插入噬菌体质粒载体pCANTAB5E，并构建噬菌体IFNαlc／86DAB环突变文库；通过在OS732细胞上竞争性亲合洗脱、MTT法对比检测抗肿瘤活性，筛选... 详细信息

目的利用噬菌体表面呈现技术研制高活性、特异性抗骨肉瘤干扰素。方法将干扰素IFNαlc／86DDNA插入噬菌体质粒载体pCANTAB5E，并构建噬菌体IFNαlc／86DAB环突变文库；通过在OS732细胞上竞争性亲合洗脱、MTT法对比检测抗肿瘤活性，筛选针对OS732细胞的高活性噬菌体-IFN突变体。结果获得2个噬菌体-IFN突变体，其抗OS732细胞增殖活性较突变母体分别提高4和16倍。结论αl型干扰素可在噬菌体表面正确折叠表达。这一技术可用于研制高活性特异性IFN。

关键词：噬菌体呈现表面呈现技术骨肉瘤人a型干扰素

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21世纪生物技术发展趋向与药物创新

21世纪生物技术发展趋向与药物创新

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中国科协首届学术年会

作者：侯云德中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室中国工程院

本文概括了我国生物技术发展的历史,生物技术在药物创新中的地位,从未来社会需求来看研制新药的发展前景,提出人类进入21世纪,开发提高人类生存质量的药物和防治传染病和恶性肿瘤的发展趋向。近10年来,由于国家"863"高技术发... 详细信息

本文概括了我国生物技术发展的历史,生物技术在药物创新中的地位,从未来社会需求来看研制新药的发展前景,提出人类进入21世纪,开发提高人类生存质量的药物和防治传染病和恶性肿瘤的发展趋向。近10年来,由于国家"863"高技术发展计划的实施,我国从事新生物技术开发的商业性机构也迅速发展,但是大都以诊断试剂为主,规模

关键词：细胞疫苗抗原决定簇创新药物结构与功能发展趋向

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应用固定化金属亲和层析纯化His6融合甲状旁腺激素相关蛋白

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中国生物制品学杂志 1999年第2期12卷 94-97页

作者：钭理强周小明刘红兵安乃莉姚立红郭应禄张智清北京医科大学第一医院泌尿外科研究所北京100034 同济医科大学附属同济心血管内科武汉430030 中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室北京100052

应用原核细胞高效表达载体在大肠杆菌表达了N端带 6个组氨酸的重组人PTHrP。利用其对金属鳌合层析介质的亲合性 ,采用含盐咪唑梯度洗脱 ,一步纯化即可得到纯度大于 90 %且具有生物学活性的重组PTHrP ,并进一步制备了抗PTHrP单克隆抗体... 详细信息

应用原核细胞高效表达载体在大肠杆菌表达了N端带 6个组氨酸的重组人PTHrP。利用其对金属鳌合层析介质的亲合性 ,采用含盐咪唑梯度洗脱 ,一步纯化即可得到纯度大于 90 %且具有生物学活性的重组PTHrP ,并进一步制备了抗PTHrP单克隆抗体。应用His6纯化标签的固定化金属亲和层析 (IMAC) ,极大地方便了目的蛋白的纯化 ,为进一步研究PTHrP的生物学特性及其在临床诊断治疗中的应用奠定了基础。

关键词：亲和层析 PTHrP IMAC 纯化

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21世纪生物技术发展趋向与药物创新

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学会 1999年第11期 5-5页

作者：侯云德中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室

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腺病毒伴随病毒载体介导的I型单纯疱疹病毒胸苷激酶基因转移及其杀肿瘤效应

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中华实验和临床病毒学杂志 1998年第3期12卷 207-212页

作者：姚二梅冯泽华吴小兵颜子颖侯云德中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室

目的研究腺病毒伴随病毒（ＡＡＶ）载体介导杀肿瘤基因的转移及其在肿瘤治疗方面的应用。方法应用作者构建的腺病毒伴随病毒载体，克隆Ｉ型单纯疱疹病毒胸苷激酶（ＨＳＶＩ－ＴＫ）基因，构建质粒ｐＡＣＴＫ－１９。用ｐＡＣＴＫ－１９... 详细信息

目的研究腺病毒伴随病毒（ＡＡＶ）载体介导杀肿瘤基因的转移及其在肿瘤治疗方面的应用。方法应用作者构建的腺病毒伴随病毒载体，克隆Ｉ型单纯疱疹病毒胸苷激酶（ＨＳＶＩ－ＴＫ）基因，构建质粒ｐＡＣＴＫ－１９。用ｐＡＣＴＫ－１９转染５型腺病毒（Ａｄ５）感染的重组ＡＡＶ包装细胞系ＡＥ１２０１，获得重组病毒ｒＡＡＶ／ＡＣＴＫ。再用此重组病毒感染肺癌细胞系Ａ５４９，并联合丙氧鸟苷（ＧＣＶ）作用，研究其体外对肺癌细胞的杀伤作用。结果重组ｒＡＡＣ／ＡＣＴＫ的滴度为３４×１０５ＣＦＵ／ｍｌ，感染肺癌细胞系Ａ５４９，实现了ＴＫ基因的转移及与细胞染色体的整合和表达，对Ａ５４９细胞具有杀伤作用。

关键词：腺病毒伴随病毒胸苷激酶基因杀瘤效应

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通用型腺病毒伴随病毒载体的构建

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中华实验和临床病毒学杂志 1998年第2期12卷 147-150页

作者：姚二梅冯泽华郑毅侯云德中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室

目的构建含腺病毒伴随病毒（ＡＡＶ）基因组两端的反向重复序列（ＩＴＲｓ）和表达必须元件如启动子、多克隆位点和ＰｏｌｙＡ信号的通用型载体质粒ｐＡＣＲ－Ｎｅｏ，并获得重组ＡＡＶ（ｒＶＶ／ＡＣＲ－Ｎｅｏ）。方法通过ＤＮＡ重组... 详细信息

目的构建含腺病毒伴随病毒（ＡＡＶ）基因组两端的反向重复序列（ＩＴＲｓ）和表达必须元件如启动子、多克隆位点和ＰｏｌｙＡ信号的通用型载体质粒ｐＡＣＲ－Ｎｅｏ，并获得重组ＡＡＶ（ｒＶＶ／ＡＣＲ－Ｎｅｏ）。方法通过ＤＮＡ重组技术，将ＳＶ４０ＰｏｌｙＡ、Ｎｅｏ基因、ＣＭＶ－ＩＥ启动子和多克隆位点组成表达盒子，取代含ＡＡＶ全基因组质粒ｐＳＳＶ９中ＡＡＶ结构基因部分，构建成质粒ｐＡＣＲ－Ｎｅｏ。用ｐＡＣＲ－Ｎｅｏ转染５型腺病毒（Ａｄ５）感染的重组ＡＡＶ包装细胞系ＡＥ１２０１，能获得重组病毒ｒＡＡＶ／ＡＣＲ－Ｎｅｏ。提取ｒＡＡＶ／ＡＣＲ－Ｎｅｏ感染细胞的染色体，用Ｓｏｕｔｈｅｍ杂交分析重组病毒基因组在感染细胞中的存在情况。结果质粒ｐＡＣＲ－Ｎｅｏ转染包装细胞系后所得ｒＡＡＶ／ＡＣＲ－Ｎｅｏ滴度为４．２×１０５ＣＦＵ／ｍｌ，并且ｒＡＡＶ／ＡＣＲ－Ｎｅｏ能在转导细胞内实现其基因组与细胞染色体的整合。结论成功地构建了通用型ＡＡＶ载体，为今后的ＡＡＶ载体研究。

关键词：腺病毒伴随病毒载体 ITRS

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用噬菌体表面表达技术筛选及表达抗重组人促红细胞生成素单链抗体ScFv

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中华实验和临床病毒学杂志 1998年第1期12卷 38-42页

作者：钟凌文吴淑华杨翔梁米芳侯云德中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室

目的获得抗重组人红细胞生成素（ｒｈＥＰＯ）的单链抗体（ＳｃＦｖ），为得到纯度高、活力强的重组人红细胞生成素（ｒｈＥＰＯ）产品和制备红细胞生成素（ＥＰＯ）检测试剂盒奠定基础。方法采用噬菌体表面表达和重组抗体技术，从已建... 详细信息

目的获得抗重组人红细胞生成素（ｒｈＥＰＯ）的单链抗体（ＳｃＦｖ），为得到纯度高、活力强的重组人红细胞生成素（ｒｈＥＰＯ）产品和制备红细胞生成素（ＥＰＯ）检测试剂盒奠定基础。方法采用噬菌体表面表达和重组抗体技术，从已建立的鼠抗ｒｈＥＰＯ杂交瘤细胞株Ｄ３中克隆出抗ｒｈＥＰＯ单链抗体ＳｃＦｖ基因片段，经噬菌体表面呈现，与固相抗原ｒｈＥＰＯ结合，“吸附—洗脱—富集”，酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测，酶切鉴定及ＰＣＲ扩增鉴定，将阳性克隆重组质粒转化非抑制型Ｅ．ｃｏｌｉＨＢ２１５１，诱导表达抗ｒｈＥＰＯ单链抗体，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ和Ｄｏｔ－ｂｌｏｔ杂交检测其抗原特异性。最后对阳性克隆进行序列测定，进行序列分析。结果挑选出了噬菌体表面表达抗ｒｈＥＰＯ单链抗体的阳性克隆，可溶性表达的单链抗体主要分布于细菌培养上清中，并且保留了亲本单抗对ｒｈＥＰＯ的抗原特异性和免疫活性。表达产物分子量约为３２ｋＤ左右。结论本实验成功地获得了抗ｒｈＥＰＯ抗体的可变区ＶＨ、ＶＬ基因，并表达出单链抗体ＳｃＦｖ片段。

关键词：噬菌体促红细胞生成素重组抗体

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