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上海农业学报 2023年第3期39卷 10-16页

作者：张丹朱秋瑾谭琦宋春艳于海龙王瑞娟尚晓冬刘建雨上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403

利用原生质体再生技术对白色金针菇退化菌株进行复壮,研究复壮后菌株与正常菌株的菌丝生长性状及工厂化栽培的农艺性状,并对复壮前后的菌株进行了基于转录组的单核苷酸多态性检测和特异表达基因分析。结果表明:原生质体再生技术是白色... 详细信息

利用原生质体再生技术对白色金针菇退化菌株进行复壮,研究复壮后菌株与正常菌株的菌丝生长性状及工厂化栽培的农艺性状,并对复壮前后的菌株进行了基于转录组的单核苷酸多态性检测和特异表达基因分析。结果表明:原生质体再生技术是白色金针菇菌种复壮的有效手段,复壮菌株的菌丝生长速率、生育期、原基形成时间、菇盖直径、菌柄长度、单瓶子实体数量以及单瓶产量可恢复至正常菌株水平。复壮菌株较退化菌株的遗传背景发生了变化,其单核苷酸多态性位点数比退化菌株多,且大部分位于基因密码子区域。复壮菌株中与细胞吞噬、能量代谢、抗氧化、细胞骨架构建以及细胞DNA甲基化修饰等相关的基因特异表达。

关键词：金针菇菌种退化复壮原生质体再生单核苷酸多态性

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灵芝液态发酵中溶氧调控三萜合成及活性研究

灵芝液态发酵中溶氧调控三萜合成及活性研究

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中国菌物学会2024年学术年会

作者：冯杰姜幸怡刘艳芳唐传红颜梦秋张劲松上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室

灵芝是我国珍贵的食药两用真菌,其三萜类物质具有显著的药理活性。液态发酵是获取灵芝三萜的有效途径,其中溶氧浓度是影响三萜合成的关键因素。本研究探究了溶氧调控对灵芝三萜合成的影响,并建立了基于溶氧调控的高效液态发酵技术体系... 详细信息

灵芝是我国珍贵的食药两用真菌,其三萜类物质具有显著的药理活性。液态发酵是获取灵芝三萜的有效途径,其中溶氧浓度是影响三萜合成的关键因素。本研究探究了溶氧调控对灵芝三萜合成的影响,并建立了基于溶氧调控的高效液态发酵技术体系。首先,通过振荡-静置两阶段培养方式,发现5 L发酵罐中,当通气量为1.5 vvm(相对溶氧浓度约10.5%)时,三萜含量最高达30.04 mg/g,较5.69%溶氧浓度时增加了4.4倍。空间代谢组学分析显示,溶氧条件影响糖类代谢和三萜合成途径,特别是异戊烯基焦磷酸(IPP)参与的三萜生物合成途径。其次,为了提升三萜合成效率和产量,本研究开发了振荡-静置循环培养法。通过人工神经网络和遗传算法优化,确定最佳循环培养组合为振荡2.8 d-静置7.3d-振荡0.2 d-静置0.3 d。在此条件下,灵芝三萜含量达到20.82 mg/g,产量达129.09 mg/L,较传统方法提高了324.78%,且培养周期缩短至10.6 d。再次,在3 L、5 L和50 L规模的发酵罐中验证了振荡-静置循环培养法的放大效果。结果表明,在最佳溶氧条件下(通气量1.5 vvm、转速150 r/min),各规模发酵罐中三萜产量分别为217.92 mg/L、221.43 mg/L和197.07 mg/L,较摇瓶水平分别提高了68.81%、71.53%和52.66%。最后,振荡-静置循环培养发酵产物的抗氧化和抗肿瘤作用研究表明,不同规模培养菌丝体均展现显著抗氧化和抗肿瘤活性。抗氧化活性随浓度升高而稳定,抗肿瘤活性在6.25μg/mL浓度下显著抑制L1210细胞,对K562细胞抑制效果略低。50 L发酵规模下菌丝体醇提物在体内实验中显著抑制肿瘤生长,125μg/mL浓度下效果最佳。此外,该提取物在31.2μg/mL浓度下促进肿瘤细胞凋亡能力优于阳性对照索拉非尼。

关键词：灵芝三萜液态发酵溶氧振荡-静置循环培养生物活性

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香菇菌棒集约化生产技术规程

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上海农业学报 2023年第3期39卷 100-108页

作者：周峰董浩然章炉军李玉姜宁宋春艳尚晓冬谭琦于海龙上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403

针对目前香菇菌棒集约化、设施化生产各环节缺乏操作规范的产业问题,通过多年、多点、多平台技术研发、参数优化及产业化应用,形成了香菇菌棒集约化生产技术规程。该技术规程在现有国家和行业标准的基础上,进一步规范和涵盖了菌棒集约... 详细信息

针对目前香菇菌棒集约化、设施化生产各环节缺乏操作规范的产业问题,通过多年、多点、多平台技术研发、参数优化及产业化应用,形成了香菇菌棒集约化生产技术规程。该技术规程在现有国家和行业标准的基础上,进一步规范和涵盖了菌棒集约化生产过程中的厂区选址及布局、设施设备、品种选择、栽培基质、料棒制作、灭菌、冷却、接种、菌棒培养、菌棒贮存等环节的作业技术要求及香菇菌棒集约化生产模式的核心技术,并针对菌棒制作过程出现的微孔、胀袋、灭菌不彻底、污染等问题提出了相应对策。该研究可为促进适合我国现阶段香菇生产模式的转型升级提供技术支撑。

关键词：香菇菌棒集约化设施化技术规程生产模式

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我国香菇工厂现状及液体菌种技术在产业中的实践

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食药用菌 2023年第4期31卷 213-218页

作者：李玉刘四海尚晓冬李巧珍宋春艳周峰谭琦国家食用菌工程技术研究中心农业部应用真菌资源与利用重点开放实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海201403 河南金海生物科技有限公司河南卢氏472200

香菇工厂化企业在我国逐渐增多,利用设施设备制棒、采用大棚出菇的“设施制棒,生态出菇”模式在很长一段时期内将会是我国香菇栽培的主流模式。我国香菇企业按运作模式分为以国内出鲜香菇为主和以出口香菇菌棒为主两种类型,其技术和经... 详细信息

香菇工厂化企业在我国逐渐增多,利用设施设备制棒、采用大棚出菇的“设施制棒,生态出菇”模式在很长一段时期内将会是我国香菇栽培的主流模式。我国香菇企业按运作模式分为以国内出鲜香菇为主和以出口香菇菌棒为主两种类型,其技术和经营方式不同,不同企业遭遇困难不同,举例并剖析优秀企业的技术特点和运营模式。指出液体菌种直接接种香菇菌棒技术已经在我国香菇企业成功规模化应用,使制种周期缩短60天以上,制种成本下降,满袋时间缩短,助力企业实现良好经济效益。

关键词：香菇菌棒液体菌种工厂化

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野生香菇菌株农艺性状分析及其子实体氨基酸营养评价

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上海农业学报 2023年第1期39卷 32-39页

作者：黄卫华陈洪雨鲍大鹏杨瑞恒陶祥生吴国锋黄建锋庆元县食用菌产业中心(庆元县食用菌科研中心) 丽水323800 上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403

为发掘优质香菇种质资源,从50个野生香菇菌株中筛选优秀菌株,检测其子实体中氨基酸水平,通过主成分分析(PCA)方法分析样品间氨基酸差异,并基于氨基酸评分(AAS)、IOM模式评分(IOMS)和化学评分(CS)评估其营养价值。结果表明:有49个菌株可... 详细信息

为发掘优质香菇种质资源,从50个野生香菇菌株中筛选优秀菌株,检测其子实体中氨基酸水平,通过主成分分析(PCA)方法分析样品间氨基酸差异,并基于氨基酸评分(AAS)、IOM模式评分(IOMS)和化学评分(CS)评估其营养价值。结果表明:有49个菌株可以出菇,优选出11个菌株,最高产量达291.77 g∕袋。回归分析表明子实体产量和朵数呈正相关(R2=0.8406)。各优选菌株栽培香菇的干品中氨基酸总量达到13.24%-16.29%,其中必需氨基酸(IAA)占比为41.13%-42.39%。PCA抽取的两个主成分分别解释82.89%和9.15%的样品差异。19号、9号和20号菌株栽培的香菇在氨基酸水平上具有优势。AAS和IOMS显示各优选菌株栽培香菇蛋白质中的IAA达到WHO和IOM的推荐要求,但CS模型显示香菇蛋白质营养价值总体不如鸡蛋蛋白质,甲硫氨酸是香菇蛋白质中的优势氨基酸。

关键词：香菇菌株生物转化率氨基酸营养价值

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不同碳氮源对花脸香蘑胞外酶活性的影响

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菌物学报 2021年第12期40卷 3286-3303页

作者：陆欢王小艳尚晓冬王瑞娟徐宁上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部应用真菌资源与利用重点开放实验室囯家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点实验室上海201403 湖南省食用菌研究所湖南长沙410013

以花脸香蘑Lepista sordida为材料,研究其分别在9种碳源和11种氮源液体培养条件下不同阶段pH值和葡萄糖浓度的变化,以及不同碳氮源对其所分泌的木质素过氧化物酶、羧甲基纤维素酶、锰过氧化物酶和漆酶活性的影响。结果表明,pH值在不同... 详细信息

以花脸香蘑Lepista sordida为材料,研究其分别在9种碳源和11种氮源液体培养条件下不同阶段pH值和葡萄糖浓度的变化,以及不同碳氮源对其所分泌的木质素过氧化物酶、羧甲基纤维素酶、锰过氧化物酶和漆酶活性的影响。结果表明,pH值在不同碳源培养后期变化显著(P<0.05),而在不同氮源培养阶段无明显变化(P>0.05),葡萄糖浓度和菌丝量在不同碳氮源中也无显著差异(P<0.05)。不同碳源和氮源培养基对花脸香蘑木质素过氧化物酶、羧甲基纤维素酶、锰过氧化物酶和漆酶活性均具有影响(P<0.05)。木糖和米糠有利于花脸香蘑分泌羧甲基纤维素酶(P<0.05),红糖和牛肉浸膏有利于其分泌漆酶(P<0.05),白砂糖和豆粉有利于其分泌锰过氧化物酶(P<0.05),木糖和尿素有利于其分泌木质素过氧化物酶(P<0.05)。本研究为选择合适培养基以提高花脸香蘑生物转化效率提供了理论基础。

关键词：花脸香蘑碳氮源胞外酶 pH 值菌丝生物量

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温度对梯棱羊肚菌抗氧化酶活及其基因表达的影响

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菌物学报 2021年第12期40卷 3276-3285页

作者：白静陈明杰唐利华杜军华冯志勇张津京陈辉国家食用菌工程技术研究中心农业农村部南方食用菌资源与利用重点开放实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海201403 上海海洋大学食品学院上海201306 青海师范大学青海西宁810008

大田栽培条件下,环境温度无法精确调控,温度胁迫是影响羊肚菌生长发育的重要因素。抗氧化酶和抗氧化活性物质是羊肚菌抵御逆境胁迫的重要因子。温度胁迫下,羊肚菌菌丝会通过增加相应酶活性来减少活性氧的积累,降低对细胞的损伤。作者研... 详细信息

大田栽培条件下,环境温度无法精确调控,温度胁迫是影响羊肚菌生长发育的重要因素。抗氧化酶和抗氧化活性物质是羊肚菌抵御逆境胁迫的重要因子。温度胁迫下,羊肚菌菌丝会通过增加相应酶活性来减少活性氧的积累,降低对细胞的损伤。作者研究了不同温度对梯棱羊肚菌菌丝生长、抗氧化酶(超氧化物歧化酶SOD、过氧化氢酶CAT、谷胱甘肽还原酶GR、谷胱甘肽过氧化物酶GPX)活性及其基因表达和抗氧化活性物质的影响,结果显示:在5–25℃的温度区间内,随着温度的增加,菌丝生长速度加快,菌丝的老化速度也加快;对抗氧化酶活性研究发现,SOD、GPX和GR在低温下活性更高,CAT在高温下活性更高;抗氧化活性物质含量会随温度升高而增加,如还原型抗坏血酸(AsA)和还原型谷胱甘肽(GSH);温度越高,羊肚菌菌丝中H_(2)O_(2)、O_(2)^(-)和丙二醛含量也随之增加。因此,在温度胁迫下,羊肚菌通过启动不同的抗氧化酶和抗氧化活性物质来减少活性氧含量,缓解菌丝损伤,本研究为探讨温度对羊肚菌种质质量的影响和栽培条件优化提供了基础数据支撑。

关键词：梯棱羊肚菌抗氧化酶基因表达活性氧

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液态发酵用灵芝优势菌株的筛选及应用研究

液态发酵用灵芝优势菌株的筛选及应用研究

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中国菌物学会2023年学术年会

作者：冯杰刘艳芳唐庆九唐传红刘利平张劲松农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所

灵芝是我国著名的药用真菌,研究历史悠久。20世纪50年代,我国灵芝产业迅速发展,随后又开展了灵芝的液态发酵技术,由于其具有周期短、发酵条件易控制、产品质量稳定等特点逐渐成为研究的重点。然而,我国灵芝种质资源丰富,质量参差不齐,... 详细信息

灵芝是我国著名的药用真菌,研究历史悠久。20世纪50年代,我国灵芝产业迅速发展,随后又开展了灵芝的液态发酵技术,由于其具有周期短、发酵条件易控制、产品质量稳定等特点逐渐成为研究的重点。然而,我国灵芝种质资源丰富,质量参差不齐,缺少适用于液态发酵的优势菌株。本研究对实验室保藏的41株灵芝菌株进行筛选,分别筛选出高产胞内外多糖的菌株,然后在50 L发酵罐中进行放大发酵,进一步探究其液态发酵中多糖的生长变化,为多糖的产业化应用提供科学数据。主要研究结果如下:(1)筛选出液态发酵高产灵芝菌丝体多糖的优势菌株。通过液态发酵的方式对实验室保藏的41株灵芝杂交菌株在菌丝体干重、胞内多糖含量、多糖得率、分子量分布特征和细胞免疫活性等方面进行了系统分析。筛选出菌丝体干重最高的菌株GZ04,菌丝体干重为29.86 g/L,比亲本G0130、G0154分别提高95%、63%;胞内多糖得率最高的菌株GZ02,胞内多糖得率为1.34 g/L,比亲本G0130、G0154分别提高64%、101%。分子量分布特征表明杂交菌株胞内多糖组分与亲本相比无明显改变,但不同组分间含量差异较大。菌丝体水提物在200μg/mL浓度下均具有明显的刺激巨噬细胞分泌NO的能力。对高产胞内多糖优势菌株GZ02进行50L发酵罐的小试发酵实验,发酵168 h后,菌丝体干重高达23.14 g/L,胞内多糖得率为1.43 g/L,为利用液态发酵技术生产灵芝多糖提供了科学的数据,为液态发酵灵芝胞内多糖的产业化应用提供参考,具有重要的经济意义。(2)筛选出液态发酵高产灵芝胞外多糖的优势菌株。通过液态发酵的方式对实验室保藏的41株灵芝杂交菌株在胞外多糖得率、多糖含量、分子量分布特征和细胞免疫活性等方面进行了系统分析。筛选出胞外多糖得率最高的菌株GZ07,胞外多糖得率为3.58 g/L,比亲本G0119、G0130分别提高72%、87%。分子量分布特征表明杂交菌株胞外多糖组分与亲本相比无明显改变,但不同组分间含量差异较大。胞外多糖在200μg/mL浓度下均具有明显的刺激巨噬细胞分泌NO的能力。对高产胞外多糖优势菌株GZ07进行50 L发酵罐的小试发酵实验,发酵168 h后,胞外多糖得率为4.07 g/L,为利用液态发酵技术生产灵芝多糖提供了科学的数据,为液态发酵灵芝胞外多糖的产业化应用提供参考,具有重要的经济意义。

关键词：灵芝液态发酵菌株筛选菌丝体多糖

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CWI和HOG信号通路基因在斑玉蕈不同发育阶段的表达模式

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菌物学报 2021年第6期40卷 1388-1399页

作者：吴雪兰郝海波黄建春王倩陈明杰冯志勇陈辉张津京上海市农业科学院食用菌研究所上海市农业遗传育种重点开放实验室农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海201403 南京农业大学生命科学学院南京210014

为了更清楚地了解MAPK信号通路中的细胞壁完整性信号通路(cell wall integrity,CWI)和高渗透压甘油(high-osmolarity glycerol pathway,HOG)信号通路对斑玉蕈菌丝成熟、原基形成和子实体发育过程的影响及调节作用,对MAPK信号通路中的CWI... 详细信息

为了更清楚地了解MAPK信号通路中的细胞壁完整性信号通路(cell wall integrity,CWI)和高渗透压甘油(high-osmolarity glycerol pathway,HOG)信号通路对斑玉蕈菌丝成熟、原基形成和子实体发育过程的影响及调节作用,对MAPK信号通路中的CWI和HOG信号通路基因在斑玉蕈不同菌丝培养时间(40、60、80和100d)和不同生长发育关键时期(24h、菌丝恢复期、菌丝转色期、原基期和子实体期)的表达模式进行分析,以期揭示这两条信号通路基因参与调节斑玉蕈菌丝的生长、子实体的形成和发育的作用。在斑玉蕈的CWI和HOG信号通路中经分析鉴定一共获得了15个关键基因。CWI信号通路基因表达分析表明:在菌丝培养的40-100d的过程中,大部分CWI信号通路基因在第60天时表达量最高,其中rho1、ssk1、ssk2和ste20的基因表达量上调了2-5倍,在第80-100天时出现持续下降。在HOG信号通路中的大部分基因也在菌丝培养的第60天表达量达到最高。其中sho1、ste20、ssk1和ssk2基因的表达量上调最为显著,而hog1基因的表达量在菌丝培养的第40-100天呈持续下降。子实体形成过程中两条通路的大部分基因在原基形成时期表达量最高,而在子实体时期表达量下调。其中HOG信号通路中的ssk2基因表达量上调最为显著。以上结果说明在菌丝生长过程中第60天时菌丝细胞生长增殖最为旺盛,而在第80天开始菌丝细胞基本开始停止生长,菌丝也逐渐达到成熟。同时在菌丝增殖生长过程中,斑玉蕈持续地上调CWI信号通路基因的表达来调控菌丝细胞壁的完整性,从而控制菌丝细胞壁的形成。其中bck1、mkk1和slt2基因可能对斑玉蕈菌丝细胞的分裂增殖和细胞壁的形成以及诱导子实体形成起到关键作用。

关键词： MAPK信号途径细胞壁完整性斑玉蕈菌丝生长子实体发育

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香菇‘沪香F6’菌棒低温冷冻及出菇温度比较试验

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食用菌 2024年第5期46卷 44-46,70页

作者：姜宁李玉董浩然刘四海李正鹏李巧珍于海龙周峰上海市农业科学院食用菌研究所/农业部南方食用菌资源利用重点实验室/国家食用菌工程技术研究中心/上海市农业遗传育种重点开放实验室上海奉贤201403 河南金海生物科技有限公司河南三门峡472000

‘沪香F6’由上海市农业科学院与河南金海食用菌研究院联合选育,其产量高、抗逆性强、易管理。试验探究低温冷冻菌棒及出菇温度对‘沪香F6’子实体生长速度、产量及品质的影响。结果:低温冷冻处理菌棒对‘沪香F6’子实体的生长速度及总... 详细信息

‘沪香F6’由上海市农业科学院与河南金海食用菌研究院联合选育,其产量高、抗逆性强、易管理。试验探究低温冷冻菌棒及出菇温度对‘沪香F6’子实体生长速度、产量及品质的影响。结果:低温冷冻处理菌棒对‘沪香F6’子实体的生长速度及总产量无显著影响,但显著提高其A级菇产量及比例。出菇温度显著影响‘沪香F6’子实体生长速度及产量:温度22~23℃,子实体生长速度加快,第1潮产量显著降低,单棒总产量仅617.11 g,子实体品质下降,A级菇占比仅33.66%;温度18~19℃,子实体总产量高,单棒达742.04 g,优质菇(A级菇及B级菇)比例高,达87.42%,且比14~15℃出菇菇潮期缩短4~6 d,丰产提质的同时提高了库房利用率。工厂化栽培‘沪香F6’香菇,低温冷冻处理菌棒,控制出菇温度18~19℃,可获得高产优质的香菇子实体。

关键词：香菇低温冷冻出菇温度

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