检索结果-内蒙古大学图书馆

解剖科学进展 2012年第5期18卷 473-477页

作者：贾娇坤鲁玲玲杨慧首都医科大学 08级七年制临床3班北京100069 首都医科大学基础医学院神经生物学系北京神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点实验室教育部神经变性病学重点实验室北京100069

帕金森病(Parkinson's disease,PD)是一种以黑质纹状体多巴胺能神经元选择性丢失和残存神经元胞质中出现嗜酸性包涵体即Lewy体为典型病理特征的进行性神经变性疾病。DJ-1基因突变后可引起常染色体隐性遗传的早发家族性PD。DJ-1蛋白... 详细信息

帕金森病(Parkinson's disease,PD)是一种以黑质纹状体多巴胺能神经元选择性丢失和残存神经元胞质中出现嗜酸性包涵体即Lewy体为典型病理特征的进行性神经变性疾病。DJ-1基因突变后可引起常染色体隐性遗传的早发家族性PD。DJ-1蛋白的确切功能到目前为止还不清楚,有研究表明,DJ-1可通过自身氧化、调节抗氧化基因的转录,抑制ASK1活性,激活ERK1/2信号通路,阻止线粒体损伤所致的细胞凋亡。本文将主要对DJ-1抗氧化应激相关机制及其与帕金森病的关系简单综述。

关键词： DJ-1蛋白抗氧化应激帕金森病关机 ERK1/2信号通路多巴胺能神经元常染色体隐性遗传发病

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浅谈药理学生创新能力的培养

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中华医学科研管理杂志 2012年第1期25卷 43-44页

作者：潘燕李锋李敏李学军北京大学医学部基础医学院药理学系国家天然药物与仿生药物重点实验室北京大学系统生物学研究所 100191 首都医科大学北京神经科学研究所北京市神经再生及修复研究重点实验教育部神经变性病学重点实验室

药理学是一门实验性很强的学科，注重学生创新能力的培养是极其必要的。本文通过总结药理学理论、实验教学中存在的问题和归纳药理学教学的创新性举措，包括结合药理学实验课教学的验证性和指导性实验，采取开放实验室的创新人才培养方... 详细信息

药理学是一门实验性很强的学科，注重学生创新能力的培养是极其必要的。本文通过总结药理学理论、实验教学中存在的问题和归纳药理学教学的创新性举措，包括结合药理学实验课教学的验证性和指导性实验，采取开放实验室的创新人才培养方案，依靠研究室先进的实验设备、实验手段，让医学生有更多的机会参与到实验中来，充分地发挥学生主动学习和探索问题的能力。实践证明，该培养方案极大地激发了医学生对药理学习和实验研究的兴趣，培养了医学生严谨的科研思维，并使之具备发现问题、解决问题的能力。药理学是临床与基础，医学与药学的桥梁科学。在药理学教学过程中重视学生的综合素质和创新能力的培养，对于培养一名合格的医学生是极其重要的。

关键词：药理学创新能力人才培养

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甘露糖受体在正常和炎症小鼠脑内小胶质细胞的表达

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解剖学报 2011年第2期42卷 145-150页

作者：陈芸鞠莉莉王蓓蓓曾辉徐群渊首都医科大学北京神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点实验室教育部神经变性病重点实验室北京100069

目的确定脑内小胶质细胞是否表达甘露糖受体,以及在不同脑区甘露糖受体的表达是否存在差异,以进一步明确小胶质细胞的功能。方法 C57小鼠26只,分为侧脑室炎症模型组(10只)、全身炎症模型组(6只)和正常对照组(10只)。通过注射细菌脂多糖(... 详细信息

目的确定脑内小胶质细胞是否表达甘露糖受体,以及在不同脑区甘露糖受体的表达是否存在差异,以进一步明确小胶质细胞的功能。方法 C57小鼠26只,分为侧脑室炎症模型组(10只)、全身炎症模型组(6只)和正常对照组(10只)。通过注射细菌脂多糖(LPS)建立全脑急性炎症模型,用免疫荧光双标技术对小鼠脑组织冷冻切片进行染色,激光共焦显微镜下观察小胶质细胞(Iba-1阳性)或激活小胶质细胞(OX-6阳性)与甘露糖受体(CD206)的共定位,比较皮层、海马、纹状体、黑质和小脑5个脑区小胶质细胞和CD206共定位比例的差异。结果正常小鼠和急性侧脑室炎症小鼠皮层内的部分小胶质细胞(包括Iba-1阳性细胞与OX-6阳性细胞)有CD206表达,CD206阳性小胶质细胞的比例分别是83%和94%;激活小胶质细胞(表达OX-6)与CD206有共定位,CD206阳性细胞中的激活小胶质细胞在皮层、海马、纹状体、黑质和小脑的比例分别是79%、81%、74%、53%和66%,而激活小胶质细胞中的CD206阳性细胞的比例则是63%、48%、49%、53%和52%。结论脑内静息和激活的小胶质细胞都能够表达甘露糖受体,表达量受炎症因素的影响并在不同脑区存在差异,其中黑质内CD206阳性细胞中的激活小胶质细胞的比例明显低于其他脑区;激活小胶质细胞中CD206阳性细胞的比例则在海马偏低。

关键词：小胶质细胞炎症甘露糖受体免疫荧光小鼠

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脑内炎症对黑质多巴胺能神经元的选择性损伤作用

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解剖学报 2011年第3期42卷 296-299页

作者：张艳新李军泉徐群渊首都医科大学北京神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点实验室教育部神经变性病重点实验室北京100069

目的探讨脑内炎症反应对中脑黑质多巴胺能神经元的选择性变性作用。方法健康SD雄性大鼠10只,随机分为实验组和对照组,实验组行脂多糖(LPS)右侧脑室定位注射,对照组注射生理盐水。注射后48周用免疫组织化学或组织化学法观察黑质多巴胺能... 详细信息

目的探讨脑内炎症反应对中脑黑质多巴胺能神经元的选择性变性作用。方法健康SD雄性大鼠10只,随机分为实验组和对照组,实验组行脂多糖(LPS)右侧脑室定位注射,对照组注射生理盐水。注射后48周用免疫组织化学或组织化学法观察黑质多巴胺能、中缝核5-羟色胺能及基底核胆碱能3种不同类型神经元的变性及上述不同脑区小胶质细胞的激活情况。结果免疫组织化学染色显示,LPS组在黑质、海马、纹状体、中缝核部位均可见到OX6阳性小胶质细胞,说明不同脑区均出现炎症反应。不同类型神经元染色结果显示,LPS组黑质多巴胺能神经元胞体变小、染色变浅、突起减少甚至消失,神经元数量比对照组减少40.1%(P<0.01);5-羟色胺能神经元及胆碱能神经元形态及数量均无明显改变。结论脑室注射LPS导致的脑内炎症反应可选择性引起黑质多巴胺能神经元变性损伤。

关键词：帕金森病脂多糖炎症多巴胺能神经元免疫组织化学大鼠

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以微流体技术构建纹状体神经元流道图案的形态学研究

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生物物理学报 2011年第2期27卷 145-153页

作者：罗亚黎高侃徐群渊首都医科大学北京神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点实验室教育部神经变性病学重点实验室北京100069

在以微流体技术加工的聚乙烯亚胺(polyethyleneimine,PEI)及层粘连蛋白(laminin,LN)混合物材料上,培养纹状体神经元图案式黏附、生长,为制备神经芯片打好基础。以微流体印刷方法在硅片上微加工四种不同的黏附底物:LN、带正电荷的多聚赖... 详细信息

在以微流体技术加工的聚乙烯亚胺(polyethyleneimine,PEI)及层粘连蛋白(laminin,LN)混合物材料上,培养纹状体神经元图案式黏附、生长,为制备神经芯片打好基础。以微流体印刷方法在硅片上微加工四种不同的黏附底物:LN、带正电荷的多聚赖氨酸(poly-L-lysine,PLL)、PEI和PEI+LN混合物。体外分离培养新生乳鼠纹状体神经元,评价神经元在不同图案化黏附底物上的黏附存活、突起生长状态及形成流道图案的差异;在PEI+LN混合物图案中观察不同线间距对构建神经元流道图案的效果。结果表明,在PEI、PLL及PEI+LN图案表面生长的神经元数量明显大于LN组;神经元在PEI+LN混合底物上与单纯PEI、LN、PLL相比更能形成完整的流道图案,在流道间距处于150μm及200μm时更为清晰。研究证实,通过微流体微加工后,由PEI与LN混合形成的粘附底物经优化流道图案规格后,能有效地构建神经元流道图案,有利于制备神经芯片。

关键词：微流体技术聚乙烯亚胺细胞培养

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PINK1与α-synuclein相互作用结构域鉴定

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中国生物工程杂志 2011年第12期31卷 10-14页

作者：付越姣段春礼龚普盛贾焕珍张建亮赵春礼鲁玲玲赵焕英袁星星杨慧首都医科大学北京神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点实验室神经变性病教育部重点实验室北京100069

目的:确定PINK1与α-synuclein相互作用的结构域。方法:将PINK1不同结构域质粒(pcDNA3.1-3xFlag-hPINK1WT,pcDNA3.1-3xFlag-hPINK1(G309D),pcDNA3.1-3xFlag-hPINK1(ΔN35),pcDNA3.1-3xFlag-hPINK1(ΔC145),pcDNA3.1-3xFlag-hPINK1(156～509),pcDNA3.1-3xFlag-hPINK1(Δ156～581),pcDNA3.1-3xFlag-vector)分别和pCMV-Myc-α-synuclein质粒共转染人胚肾HEK293T细胞,通过免疫共沉淀(Co-IP)技术验证PINK1与α-synuclein相互作用的结构域;同时进行免疫细胞化学染色,利用激光扫描共聚焦显微镜观察两种蛋白的共定位关系。结果:Co-IP实验结果表明PINK1与α-synuclein相互作用的结构域为PINK1的激酶结构域。免疫细胞化学实验也证实α-synuclein只与含激酶结构域的PINK1蛋白在细胞中存在共定位关系。结论:PINK1与α-synuclein相互作用的结构域位于其激酶结构域。

关键词： PINK1 α-synuclein 激酶结构域免疫共沉淀

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MicroRNA在建立DJ-1基因敲减细胞模型中的应用

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基础医学与临床 2011年第5期31卷 515-519页

作者：赵莎莎鲁玲玲高华吕瓅赵焕英杨慧首都医科大学神经生物学系北京神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点实验室神经变性病教育部重点实验室北京100069

目的与传统的siRNA方法建立基因敲减模型不同,探讨合成microRNA（miRNA）在DJ-1基因敲减细胞模型中的应用。方法构建针对DJ-1基因的合成miRNA载体,合成DJ-1基因的siRNA干扰片段。在脂质体介导下,将上述两种小干扰RNA载体或片段分别转染M... 详细信息

目的与传统的siRNA方法建立基因敲减模型不同,探讨合成microRNA（miRNA）在DJ-1基因敲减细胞模型中的应用。方法构建针对DJ-1基因的合成miRNA载体,合成DJ-1基因的siRNA干扰片段。在脂质体介导下,将上述两种小干扰RNA载体或片段分别转染MN9D细胞系,应用real-time PCR和Western blot检测目的基因DJ-1的mRNA和蛋白表达。结果与对照组相比,转染合成microRNA的MN9D细胞中,DJ-1的mRNA水平下调90%（P〈0.05）,蛋白水平下调70%~85%（P〈0.05）;而转染siRNA的MN9D细胞中,DJ-1的mRNA水平下调50%~70%（P〈0.05）,蛋白水平下调20%~50%（P〈0.05）。结论 microRNA与siRNA均可作为基因敲减的重要研究手段。与传统的siRNA相比,合成microRNA对目的DJ-1的干扰效率更为显著。

关键词： DJ-1 microRNA siRNA RNA干扰

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甘丙肽抑制大鼠垂体腺瘤细胞体外侵袭性

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基础医学与临床 2011年第6期31卷 656-660页

作者：马克乾孙静李杰闫竹青鲁润春贾旺徐志卿首都医科大学神经生物学系北京神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点实验室北京100069 北京市神经外科研究所北京100050

目的探讨甘丙肽对大鼠垂体腺瘤细胞侵袭性的作用及其受体机制。方法提取大鼠垂体腺瘤GH3细胞RNA,反转录后测定甘丙肽及其3个受体亚型的表达情况;将大鼠垂体腺瘤GH3细胞分为对照组、甘丙肽药物处理组和选择性甘丙肽2型受体激动剂AR-M1896... 详细信息

目的探讨甘丙肽对大鼠垂体腺瘤细胞侵袭性的作用及其受体机制。方法提取大鼠垂体腺瘤GH3细胞RNA,反转录后测定甘丙肽及其3个受体亚型的表达情况;将大鼠垂体腺瘤GH3细胞分为对照组、甘丙肽药物处理组和选择性甘丙肽2型受体激动剂AR-M1896组,利用MTT方法检测对照组和实验组在给药后12、24和36 h各分组细胞活力,观察其增殖情况;应用Transwell侵袭模型观察各组腺瘤细胞侵袭能力。结果甘丙肽与其3个受体亚型在大鼠垂体腺瘤GH3细胞中均有表达,其中以受体2表达量较高;各组细胞在药物处理12、24和36 h时细胞增殖无显著差异;GH3细胞Transwell侵袭实验中甘丙肽药物组侵袭细胞数量明显少于对照组(P<0.01);甘丙肽受体激动剂AR-M1896组与对照组相比腺瘤细胞侵袭性明显降低(P<0.05);AR-M1896与甘丙肽对GH3细胞的抑制效果差异无显著性。结论甘丙肽能明显抑制大鼠垂体腺瘤细胞的侵袭性,且此作用可能主要由甘丙肽2型受体介导。

关键词：脑垂体腺瘤侵袭性甘丙肽 GH3细胞 Transwell模型

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喹啉酸所致亨廷顿病动物模型

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中国实验动物学报 2011年第1期19卷 84-88页

作者：邢秋云李峰首都医科大学基础医学院北京100069 首都医科大学北京神经科学研究所北京市神经再生及修复研究重点实验室教育部神经变性病学重点实验室北京100069

亨廷顿病(Huntington's disease,HD)是以不自主舞蹈样动作、进行性认知障碍,痴呆为特征的一种常见染色体显性遗传病。兴奋性毒性作用是目前公认的HD发病机制之一,其中喹啉酸(quinolinic acid,QA)作为神经兴奋性毒素,可以损伤相应神... 详细信息

亨廷顿病(Huntington's disease,HD)是以不自主舞蹈样动作、进行性认知障碍,痴呆为特征的一种常见染色体显性遗传病。兴奋性毒性作用是目前公认的HD发病机制之一,其中喹啉酸(quinolinic acid,QA)作为神经兴奋性毒素,可以损伤相应神经元,导致大脑功能障碍,从而可有效模拟HD的相关改变。本文将就QA动物模型在模拟HD时的优缺点和目前QA在药物研究、疾病治疗等不同方面的应用进行综述。

关键词：亨廷顿病喹啉酸模型,动物应用

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基因重组型人SORL1蛋白质片段的原核表达和纯化

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首都医科大学学报 2011年第6期32卷 798-801页

作者：李爽李尧华叶懿文李昕于顺杨慧陈彪首都医科大学宣武医院老年病研究所神经生物学研究室教育部神经变性病重点实验室北京100053 首都医科大学北京神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点实验室教育部神经变性病重点实验室北京100069

目的制备基因重组型人SORL1蛋白质片段,为探讨阿尔茨海默病的发病机制提供实验基础。方法采用PCR方法扩增人sorl1 cDNA编码区5 923～6 260 bp片段,克隆入原核表达载体pET-28a(+)中。用大肠杆菌BL21(DE3)plysS表达重组质粒,用液相色谱法... 详细信息

目的制备基因重组型人SORL1蛋白质片段,为探讨阿尔茨海默病的发病机制提供实验基础。方法采用PCR方法扩增人sorl1 cDNA编码区5 923～6 260 bp片段,克隆入原核表达载体pET-28a(+)中。用大肠杆菌BL21(DE3)plysS表达重组质粒,用液相色谱法纯化基因重组蛋白。结果 PCR扩增产物为358 bp,其ATG和TGA之间的结构与人sorl1 cDNA的5 923～6 260 bp区完全一致。基因重组质粒在大肠杆菌BL21(DE3)plysS中高效表达,其表达产物存在于包涵体组分中。纯化的基因重组蛋白在SDS-PAGE中表现为单一条带,表观分子量约为13 000。结论人sorl1 cDNA的5 923～6 260 bp片段在原核细胞中大量表达,纯化后的基因重组蛋白可尝试用于抗体的制备。

关键词：含L(DLR类)A重复分拣蛋白相关受体基因重组蛋白阿尔茨海默病

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