检索结果-内蒙古大学图书馆

生物化学与生物物理学报 2003年第6期35卷 536-541页

作者：鲁玲玲苏玉金赵春礼邹西峰侯少平徐群渊杨慧首都医科大学北京神经科学研究所、北京市神经再生修复研究重点实验室首都医科大学北京神经科学研究所、北京市神经再生修复研究重点实验室北京100054

目的是探索骨髓基质细胞的分离培养、鉴定及其接受并表达TH基因的能力。实验中通过密度梯度离心法成功地从成年SD大鼠骨髓中分离获得了骨髓基质干细胞 ,并用流式细胞仪对其进行鉴定 ,纯度可达 75 %。进一步采用复制缺陷型腺相关病毒载... 详细信息

目的是探索骨髓基质细胞的分离培养、鉴定及其接受并表达TH基因的能力。实验中通过密度梯度离心法成功地从成年SD大鼠骨髓中分离获得了骨髓基质干细胞 ,并用流式细胞仪对其进行鉴定 ,纯度可达 75 %。进一步采用复制缺陷型腺相关病毒载体介导的基因转染方法 ,将之改造成为携带lacZ与TH基因的工程细胞 ,经X gal染色和TH免疫组化检测 ,转染效率为 (74 .6± 19.4 ) %。实验结果表明骨髓基质细胞易于接受并表达外源基因 ,有望作为运载细胞应用于帕金森病的基因治疗。

关键词：骨髓基质细胞帕金森病腺相关病毒载体 TH基因

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酪氨酸羟化酶和左旋芳香族氨基酸脱羧酶基因的细胞表达及活性检测

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生理学报 2003年第5期55卷 583-588页

作者：苏月段春礼赵春礼赵焕英徐群渊杨慧首都医科大学北京神经科学研究所北京市神经再生修复重点实验室北京 100054 首都医科大学北京神经科学研究所北京市神经再生修复重点实验室

由于在帕金森病中合成多巴胺所需的酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)和左旋芳香族氨基酸脱羧酶(aromatic L-amino acid decarboxylase,AADC)活性明显降低,所以补充多巴胺合成酶成为基因治疗帕金森病研究的主要手段。我们分别构建... 详细信息

由于在帕金森病中合成多巴胺所需的酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)和左旋芳香族氨基酸脱羧酶(aromatic L-amino acid decarboxylase,AADC)活性明显降低,所以补充多巴胺合成酶成为基因治疗帕金森病研究的主要手段。我们分别构建了重组逆转录病毒载体pLHCX/TH及pLNCX/AADC,通过脂质体介导将带有目的基因的载体分别转到包装细胞PA317中,经筛选得到产病毒的细胞PA317/TH和PA317/AADC,采用免疫组化、原位杂交方法检测目的基因表达;细胞经裂解后进行的酶促反应产物多巴胺以高压液相电化学方法检测证明所克隆的TH及AADC基因具有功能活性;这两种基因工程改造细胞可以完成酶促动力学的功能,使L-dopa及多巴胺产生明显增加。本研究为用TH和AADC双基因对帕金森病进行基因治疗提供了一定的依据。

关键词：细胞生物学帕金森病酪氨酸羟化酶芳香族氨基酸左旋脱羧酶逆转录病毒载体基因治疗

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骨髓基质细胞在细胞移植与基因治疗中的应用

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中国生物工程杂志 2003年第10期23卷 9-14页

作者：张敏杨慧首都医科大学北京神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点实验室北京100054

骨髓基质细胞是研究最广泛的成体干细胞 ,用于临床细胞移植与基因治疗有诸多优点 ,论述了具有多向分化潜能的骨髓基质细胞。

关键词：骨髓基质细胞细胞移植基因治疗干细胞

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植入PHPMA水凝胶对脑损伤后胶质瘢痕形成的抑制性影响

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神经解剖学杂志 2003年第4期19卷 383-387页

作者：侯少平姬曼范昱玮孙晓红崔福斋徐群渊首都医科大学北京神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点实验室北京100054 清华大学材料科学与工程系北京100084

人工合成 PHPMA水凝胶材料。利用此材料修补急性损伤的大鼠脑皮质缺损区 ,评价其对创伤后胶质瘢痕形成的影响以及在神经组织再生中的作用。合成的水凝胶材料经检测分析性状后植入预先造成的大脑皮质空腔内 ,4周以后灌注取脑 ,观察植入... 详细信息

人工合成 PHPMA水凝胶材料。利用此材料修补急性损伤的大鼠脑皮质缺损区 ,评价其对创伤后胶质瘢痕形成的影响以及在神经组织再生中的作用。合成的水凝胶材料经检测分析性状后植入预先造成的大脑皮质空腔内 ,4周以后灌注取脑 ,观察植入材料和周围组织整合结果以及星形胶质细胞在材料周围和内部的浸润状况 ,确定有无胶质瘢痕的形成 ,并进行超微结构分析。结果表明 ,植入材料可和周围组织良好整合 ,二者交界处细胞分布弥散 ,星形胶质细胞无过度聚集现象 ;植入材料内部有轴突样结构生长和血管发生。本研究结果提示 ,利用 PHPMA水凝胶填补脑损伤后的空洞可抑制胶质瘢痕的形成 ,有利于损伤部位神经组织的再生。

关键词： PHPMA水凝胶胶质瘢痕神经再生大鼠脑损伤

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温控性永生化大鼠中脑神经干细胞系的建立

温控性永生化大鼠中脑神经干细胞系的建立

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中国细胞生物学学会第八届会员代表大会暨学术大会

作者：张海燕兰兰赵春礼王蓓蓓段德义徐群渊首都医科大学北京市神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点研究室首都医科大学北京市神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点研究室首都医科大学北京市神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点研究室首都医科大学北京市神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点研究室首都医科大学北京市神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点研究室首都医科大学北京市神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点研究室

本研究构建了温度敏感型猴病毒40大T抗原突变株A58[SV40 tsA58]逆转录病毒载体pLXSN/tsA58,采用LipofectAMINE转染包装细胞系PT67,G418筛选稳定表达tsA58基因的细胞克隆,测定不同克隆的病毒滴度,获得滴度较高的细胞株,收集对数生长期病... 详细信息

本研究构建了温度敏感型猴病毒40大T抗原突变株A58[SV40 tsA58]逆转录病毒载体pLXSN/tsA58,采用LipofectAMINE转染包装细胞系PT67,G418筛选稳定表达tsA58基因的细胞克隆,测定不同克隆的病毒滴度,获得滴度较高的细胞株,收集对数生长期病毒上清。利用tsA58病毒上清感染体外培养孕13天SD胎鼠中脑神经干细胞后,经G418及温度[33℃]双重筛选,获得稳定表达tsA58基因的单细胞克隆株,经扩增培养后鉴定

关键词：永生化 SV40 tsA58 神经干细胞

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中国人单胺氧化酶A基因的EcoRV酶切位点多态性与帕金森病的相关性

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中国神经科学杂志 2003年第4期19卷 255-259页

作者：江小华徐群渊杨静芳董秀敏杨慧陈彪首都医科大学神经科学研究所北京市神经再生修复重点实验室首都医科大学宣武医院神经科华北煤炭医学院组胚学教研室河北唐山063000

目的 :探讨多巴胺代谢酶—单胺氧化酶 A基因EcoRV酶切位点多态性与帕金森病 (Parkinsondisease,PD)遗传易感性的关系。方法 :选择PD病人 2 87例 (包括发病年龄小于等于 5 0岁的早发型PD和发病年龄大于5 0岁的晚发型PD)和正常对照 16 4... 详细信息

目的 :探讨多巴胺代谢酶—单胺氧化酶 A基因EcoRV酶切位点多态性与帕金森病 (Parkinsondisease,PD)遗传易感性的关系。方法 :选择PD病人 2 87例 (包括发病年龄小于等于 5 0岁的早发型PD和发病年龄大于5 0岁的晚发型PD)和正常对照 16 4例 ,利用PCR RFLP技术分析了单胺氧化酶 A(MAO A)EcoRV酶切位点多态性在PD病人与正常对照之间分布频率的差异。结果 :MAO A基因EcoRV酶切位点在总体对照组和总体PD病人之间的分布没有显著差异 ;根据发病年龄分组后 ,不管是早发PD病人还是晚发PD病人 ,与对照组相比等位基因和基因型频率均无显著性差别。按性别分组后发现 ,男性PD和对照组的基因型频率或是等位基因频率存在显著性差异。结论 :研究结果支持MAO A基因多态性与PD相关的假说 ,而且表明此关系与PD发病年龄和性别有关。

关键词：中国人单胺氧化酶-A 基因 EcoRV酶切位点多态性帕金森病遗传易感性

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Sertoli细胞诱导中脑神经干细胞定向分化的初步研究

Sertoli细胞诱导中脑神经干细胞定向分化的初步研究

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中国细胞生物学学会第八届会员代表大会暨学术大会

作者：刘靖张海燕赵春礼高福禄徐群渊河北医科大学组织胚胎学教研室首都医科大学北京神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点研究室北京 100054 首都医科大学北京神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点研究室河北承德医学院首都医科大学北京神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点研究室

睾丸支持细胞[Sertoli细胞]是生精细胞的支架,为精子发生及成熟提供必需的营养物质。近年来对Sertoli细胞的研究显示Sertoli细胞能分泌多种调节蛋白及生长因子,其中IL-1、IL-6以及Shh与多巴胺能神经元的分化密切相关。本研究将体外分离... 详细信息

睾丸支持细胞[Sertoli细胞]是生精细胞的支架,为精子发生及成熟提供必需的营养物质。近年来对Sertoli细胞的研究显示Sertoli细胞能分泌多种调节蛋白及生长因子,其中IL-1、IL-6以及Shh与多巴胺能神经元的分化密切相关。本研究将体外分离的大鼠Sertoli细胞与孕13天大鼠胚胎中脑神经干细胞共培养5、7、10、14天后,免疫荧光检测神经干细胞Nestin、β-Ⅲtublin、多巴胺能神经元标记物酪氨酸羟化酶(tyrosinehydroxylase,TH)的表达情况。结果显示:随着共培养时间的延长,神经干细胞中Nestin

关键词： Sertoli细胞神经干细胞多巴胺能神经元分化

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人AADC基因在cos-7细胞中的表达和活性检测

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中国组织化学与细胞化学杂志 2002年第4期11卷 365-369页

作者：杨慧赵焕英张智段德义蔡青徐群渊首都医科大学北京神经科学研究所北京市神经再生修复重点实验室 100054

目的　研究人芳香族左旋氨基酸脱羧酶 (AADC)基因在多巴胺代谢过程中的作用。方法　从人胎儿黑质组织中提取总RNA ,以RT PCR法扩增AADCcDNA片段 ,克隆于 pGEM T载体中。测序正确后再构建真核表达载体 ,转染猴肾成纤维细胞COS 7,原位杂... 详细信息

目的　研究人芳香族左旋氨基酸脱羧酶 (AADC)基因在多巴胺代谢过程中的作用。方法　从人胎儿黑质组织中提取总RNA ,以RT PCR法扩增AADCcDNA片段 ,克隆于 pGEM T载体中。测序正确后再构建真核表达载体 ,转染猴肾成纤维细胞COS 7,原位杂交检测AADC表达 ,加入L DOPA后 ,用高效液湘色谱测定转AADC细胞的多巴胺(DA)生成量 ,以了解转基因细胞AADC基因的功能活性。结果　RT PCR扩增出 144 2bp的cDNA片段与Genbank[NM 0 0 0 790 ]登录的序列相同 ,构建真核表达载体 pBK RSV AADC ,原位杂交证实其在COS 7表达阳性率为 70 % - 80 % ,在AADC活性作用下实验组的DA生成量是对照组的 4倍以上 (P <0 0 1)。结论　所克隆的AADC基因可在真核细胞中表达并具有生物活性。可望用于帕金森病的基因治疗。

关键词：人AADC基因 cos-7细胞表达活性检测芳香族左旋氨基酸脱羧酶帕金森病基因治疗原位杂交多巴胺

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人Ⅱ型囊泡单胺转运体基因的克隆

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中国组织化学与细胞化学杂志 2002年第3期11卷 259-263页

作者：张京钟余爽段德义苏玉金杨慧徐群渊首都医科大学北京神经科学研究所北京市神经再生修复重点实验室北京100054

目的　为获得人Ⅱ型囊泡单胺转运体 (vesicularmonominetransporter 2VMAT2 )以治疗帕金森病 ,克隆添加Kozak序列的VMAT2cDNA ,用于真核细胞表达。方法　从人胎脑中提取总RNA ,逆转录成cDNA ,设计一对引物用PCR方法扩增目的cDNA片段并... 详细信息

目的　为获得人Ⅱ型囊泡单胺转运体 (vesicularmonominetransporter 2VMAT2 )以治疗帕金森病 ,克隆添加Kozak序列的VMAT2cDNA ,用于真核细胞表达。方法　从人胎脑中提取总RNA ,逆转录成cDNA ,设计一对引物用PCR方法扩增目的cDNA片段并将其重组于 pGEM Easy T载体中 ,酶切鉴定插入片段后 ,进行全序列测定。结果　RT PCR扩增到 16 37bp的带有Kozak序列的cDNA片段。结论　克隆人VMAT2cDNA片断。

关键词：基因克隆帕金森病人Ⅱ型囊泡单胞转运体

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人胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)的克隆,表达及活性检测

人胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)的克隆,表达及活性检测

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中国解剖学会2002年年会

作者：岳凤鸣杨慧高福禄赵焕英赵春礼徐群渊首都医科大学神经科学研究所北京市神经再生修复重点实验室河北医科大学

本课题试图用基因重组和转移技术,使成纤维细胞获得表达IGF-1的能力,然后将其导入体内,以期IGF-1能够长期稳定表达,且具有生物活性,从而达到治疗糖尿病及其并发症的目的。从胎儿肝脏中提取总RNA,RT-PCR扩增得到710bp特异性片段;将测序... 详细信息

本课题试图用基因重组和转移技术,使成纤维细胞获得表达IGF-1的能力,然后将其导入体内,以期IGF-1能够长期稳定表达,且具有生物活性,从而达到治疗糖尿病及其并发症的目的。从胎儿肝脏中提取总RNA,RT-PCR扩增得到710bp特异性片段;将测序正确的片段亚克隆到pCI-neo表达质粒,脂质体

关键词：胰岛素样生长因子- hIGF-1 活性检测

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