检索结果-内蒙古大学图书馆

神经科学通报 2005年第6期21卷 425-431页

作者：邹西峰徐群渊首都医科大学北京神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点实验室

骨髓源干细胞(BONE MARROW-DERIVED STEM CELLS,BMDSCS)能否迁移至脑组织并分化为神经胶质细胞和神经细胞是近年来成体干细胞研究的热点领域。有一些学者采用Y染色体和GFP基因作为骨髓源细胞标记物,通过血行输入受体动物后,在脑组织内... 详细信息

骨髓源干细胞(BONE MARROW-DERIVED STEM CELLS,BMDSCS)能否迁移至脑组织并分化为神经胶质细胞和神经细胞是近年来成体干细胞研究的热点领域。有一些学者采用Y染色体和GFP基因作为骨髓源细胞标记物,通过血行输入受体动物后,在脑组织内发现了标记阳性细胞,并证实这些细胞有向神经胶质细胞和神经细胞分化的趋势;另有一些学者也采用GFP基因作为细胞标记物,但在受体动物脑组织并未发现标记阳性细胞。这些实验结果差异可能与观察时间长短、细胞标记方法和神经组织中标记基因沉默事件有关。就迁移到脑组织的BMDSCS 是否与宿主神经细胞整合的问题,有研究认为存在转分化(TRANSDIFFERENTIATION)机制,也有实验发现BMDSCS与小脑PURKINJE神经元之间有细胞融合现象。细胞转分化和细胞融合有可能是中胚层来源的BMDSCS向神经外胚层细胞变化的两种必要机制。讨论这些问题对阐明神经细胞的新老更替、损伤和修复机制是很有意义的。

关键词：骨髓源干细胞神经胶质神经元转分化细胞融合

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嗅球切除对成年大鼠侧脑室外侧壁新生细胞增殖和分化的影响

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解剖学报 2007年第6期38卷 631-635页

作者：孟艳刘丙方蔡青高尔静徐群渊首都医科大学宣武医院老年病研究中心中国教育部神经变性病重点实验室北京100053 首都医科大学北京神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点实验室北京100069

目的研究嗅球切除后成年大鼠侧脑室外侧壁(SVZ)新生细胞增殖和分化的情况,进一步探讨嗅球对SVZ神经生发活动的影响。方法建立成年SD雄性大鼠右侧嗅球切除模型,并分别存活4周和12周,利用Nissl染色、多唾液酸神经细胞黏附分子(PSA-NCAM)和... 详细信息

目的研究嗅球切除后成年大鼠侧脑室外侧壁(SVZ)新生细胞增殖和分化的情况,进一步探讨嗅球对SVZ神经生发活动的影响。方法建立成年SD雄性大鼠右侧嗅球切除模型,并分别存活4周和12周,利用Nissl染色、多唾液酸神经细胞黏附分子(PSA-NCAM)和BrdU免疫组织化学染色的方法观察了成年SD大鼠嗅球切除后存活不同时间两侧吻侧迁移流(RMS)BrdU阳性细胞数占总细胞百分比的变化以及两侧RMSPSA-NCAM阳性细胞的形态学变化。结果1·嗅球切除后不同时间点,嗅球切除侧RMS的细胞数增加,BrdU免疫阳性细胞数增加,但BrdU免疫阳性细胞数占总细胞数的百分比随嗅球切除后大鼠存活时间的延长而下降,且以RMS的吻侧部分下降更明显;2·嗅球切除后,在切除侧断端吻侧颗粒层和RMS均出现较对照侧更多的具有较长突起的PSA-NCAM阳性细胞。结论嗅球切除后仍有新生神经元沿RMS向吻侧迁移,但其增殖率随时间延长下调;嗅球的切除似乎并没有影响成神经细胞的分化。

关键词：嗅球切除增殖分化免疫组织化学大鼠

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α-突触核蛋白各结构域与MN9D细胞线粒体的关系

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解剖学报 2008年第5期39卷 626-630页

作者：张韬赵焕英赵春礼杨慧首都医科大学神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点实验室神经变性病教育部重点实验室北京100069

目的探讨α-突触核蛋白（α-synuclein）各结构域与MN9D细胞线粒体的关系。方法用PCR方法获得α-synuclein/1~65（N），α-synuclein/61~95（A）及α-synuclein/96~140（C）基因片段，克隆入真核表达质粒pLNCX2，经测序正确后以脂质体转... 详细信息

目的探讨α-突触核蛋白（α-synuclein）各结构域与MN9D细胞线粒体的关系。方法用PCR方法获得α-synuclein/1~65（N），α-synuclein/61~95（A）及α-synuclein/96~140（C）基因片段，克隆入真核表达质粒pLNCX2，经测序正确后以脂质体转染PT-67细胞，挑取单克隆并扩增，收集上清感染MN9D细胞，分别用Real Time PCR检测细胞基因表达水平，免疫组织化学染色检测蛋白表达，激光扫描共焦显微镜检测蛋白与线粒体共定位，流式细胞术检测细胞状态及线粒体膜电位状态。结果成功构建了pLNCX2/N、pLNCX2/NAC及pLNCX2/C基因片段的重组真核表达质粒，获得了可稳定表达α-synuclein各基因片段的MN9D细胞株。通过激光扫描共焦显微镜观察，可见α-synuclein/N端与线粒体存在共定位关系；α-synuclein/NAC主要在核内聚集表达；α-synuclein/C端在胞质和胞核内均有表达。JC1染色流式细胞术检测显示，过表达α-synuclein/N实验组细胞线粒体膜电位降低。结论α-synuclein的N端可能定位于线粒体，并参与调节线粒体功能；α-synuclein/NAC虽具有疏水性但却能穿过核膜，聚集在核仁周围；α-synuclein的C端定位于胞质和核内可能参与多种细胞功能。

关键词： α-突触核蛋白片段线粒体帕金森病流式细胞术免疫组织化学 MN9D细胞

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使用Y染色体特异性探针追踪检测大鼠脑内移植细胞

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基础医学与临床 2007年第9期27卷 1043-1047页

作者：李娜赵焕英杨慧首都医科大学北京市神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点实验室教育部神经变性病学重点实验室北京100069

目的探讨准确高效追踪检测脑内移植来源细胞的方法。方法克隆雄性大鼠Y染色体SRY基因的一个片段,并且将该片段标记成DNA探针,对大鼠的脑切片进行原位杂交。结果使用大鼠Y染色体SRY基因片段标记的探针后,可以特异性检测雌性大鼠脑内来源... 详细信息

目的探讨准确高效追踪检测脑内移植来源细胞的方法。方法克隆雄性大鼠Y染色体SRY基因的一个片段,并且将该片段标记成DNA探针,对大鼠的脑切片进行原位杂交。结果使用大鼠Y染色体SRY基因片段标记的探针后,可以特异性检测雌性大鼠脑内来源于雄性大鼠的移植细胞。结论使用原位杂交方法可以有效、准确地追踪检测移植细胞。

关键词：原位杂交 Y染色体细胞移植

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5-HT_(1A)受体蛋白在PC12细胞膜转运的动态变化

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基础医学与临床 2010年第5期30卷 487-491页

作者：金艳燕吕琼闫竹青高尔静赵春礼张进禄徐志卿首都医科大学神经生物学系北京神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点实验室北京100069

目的在神经元样PC12活细胞上进行实时、可视和定量研究5-羟色胺1A受体的时空分布、膜转运和信号传导机制。方法运用RT-PCR方法获得小鼠5-HT1A基因,并插入到pEGFP-N1真核表达载体中。采用阳离子脂质体方法将质粒转染至PC12细胞和HEK293... 详细信息

目的在神经元样PC12活细胞上进行实时、可视和定量研究5-羟色胺1A受体的时空分布、膜转运和信号传导机制。方法运用RT-PCR方法获得小鼠5-HT1A基因,并插入到pEGFP-N1真核表达载体中。采用阳离子脂质体方法将质粒转染至PC12细胞和HEK293细胞中,通过G418筛选出稳定表达5-HT1A-EGFP的PC12细胞系。运用激光共聚焦成像系统观察活细胞中5-HT1A-EGFP的表达情况,利用光漂白荧光恢复(FRAP)技术在PC12细胞膜局部漂白后观察5-HT1A-EGFP荧光蛋白在细胞膜上转运的情况。结果克隆所获得的小鼠5-HT1A基因是准确的。5-HT1A-EGFP蛋白清晰的分布于PC12和HKE293细胞膜上。通过FRAP技术观察到漂白区域的细胞膜在100s内有部分恢复,说明受体在细胞膜上发生转运。结论建立了稳定表达5-HT1A-EGFP融合蛋白的PC12细胞系,并利用活细胞成像和FRAP技术观察分析并证实了5-HT1A受体在PC12细胞的膜表面的表达和转运的动态变化。

关键词： 5-羟色胺1A受体(5-HT1A) G蛋白偶联受体(GPCRs) 绿色荧光蛋白(GFP) PC12细胞光漂白荧光恢复技术(FRAP)

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α-synuclein对小剂量鱼藤酮导致的线粒体损伤的调控作用研究

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中国生物工程杂志 2007年第12期27卷 6-10页

作者：鲁玲玲梁源段春礼赵春礼赵焕英杨慧首都医科大学北京神经科学研究所北京市神经再生与修复研究重点实验室教育部神经变性病学重点实验室北京100069

建立稳定表达α-synuclein基因的人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y细胞,鱼藤酮作用1、2、4周后分别提取各组细胞线粒体,检测其complexⅠ功能、线粒体膜肿胀度和超氧阴离子的含量。结果显示在1、2周时过表达α-synuclein基因的细胞与对照组... 详细信息

建立稳定表达α-synuclein基因的人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y细胞,鱼藤酮作用1、2、4周后分别提取各组细胞线粒体,检测其complexⅠ功能、线粒体膜肿胀度和超氧阴离子的含量。结果显示在1、2周时过表达α-synuclein基因的细胞与对照组细胞相比,前者的complexⅠ的活性高,线粒体膜肿胀度轻,线粒体超氧阴离子的含量少,但4周后,前者的complexⅠ活性明显低于后者,线粒体膜肿胀度及线粒体内超氧阴离子的含量均显示前者高于后者。由此可见过表达α-synuclein基因的细胞在早期对鱼藤酮的损伤有一定的抵抗作用,但长期作用后可能有加重损伤的作用。提示PD患者多巴胺能神经元内α-synuclein的增高可能对小剂量鱼藤酮导致的线粒体损伤存在双重调节作用。

关键词： α-synuclein 线粒体功能障碍帕金森病

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人脐血干细胞定向分化为神经细胞的诱导方法

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中国临床康复 2006年第17期10卷 143-145页

作者：王屹季凤清杨慧首都医科大学北京神经科学研究所北京神经再生修复研究重点实验室北京市100069 首都医科大学组织学胚胎学教研室北京市100069

目的:分析人脐血干细胞在体外和体内向神经细胞分化的不同诱导条件。资料来源:应用计算机检索Medline数据库1990-01/2005-10相关脐带血干细胞向神经细胞分化文章,检索词为“umbilicalcordblood,mesenchymalstemcells,neuraldifferentiation”,分别组合进行检索,限定文章语言种类为English,同时计算机检索中文期刊数据库2000-01/2005-10相关脐带血间充质干细胞向神经分化文章,检索词为:“脐带血,间充质干细胞,神经分化”,分别组合进行检索,限定文章语言种类为中文。资料选择:初审资料,选取包括人脐血干细胞分化为神经细胞的文章。纳入标准:①脐带血间充质干细胞。②间充质干细胞向神经细胞分化。排除标准:①脐带血造血干细胞。②文献综述,重复研究,Meta分析类文章。资料提炼:共收集到68篇符合要求的文章,查找全文,选取其中近期相关文章19篇。将所有文章按照脐血干细胞诱导分化体外实验和体内实验进行分类综合。资料综合:脐带血干细胞来源丰富、采集方便、安全,且体外扩增迅速,在体外和体内一定条件下可以分化为神经细胞,然而不同的诱导条件对其分化的影响有不同,人们运用各种手段希望能找到诱导效率较高的诱导方法,包括几种化学诱导剂联合,生长因子之间配伍,化学诱导剂与生长因子联合,或应用接近生理状态的条件培养基等。在改进诱导条件的同时人们开始关注单一表型的细胞群作为实验对象是否能有效地提高诱导效率。研究者以期找到一种高效率而具有应用价值的诱导方法,为将脐带血干细胞应用于神经科学领域提供有力的证据。结论:人脐血干细胞在体外和体内一定条件下可以分化为神经细胞,应用于中枢神经系统疾病的细胞治疗具有广阔前景,然而寻找高效实用的诱导方法仍需要进一步研究。

关键词：干细胞细胞分化综述文献神经细胞

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Akt/mTOR信号通路在海人酸损伤大鼠海马组织中的激活

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基础医学与临床 2010年第6期30卷 630-634页

作者：方金林吴春春孙晓红徐群渊段德义首都医科大学北京神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点实验室教育部神经变性病重点实验室北京100069

目的研究Akt/mTOR信号通路在海人酸(KA)诱导的大鼠海马神经元损伤中的激活和HIF1α的表达情况。方法成年SD大鼠随机分为3组,其中2组接受脑室注射,1组为假手术组。大鼠麻醉后颅骨钻孔但侧脑室注射KA1.0μg(KA组)或等体积生理盐水(NS组)... 详细信息

目的研究Akt/mTOR信号通路在海人酸(KA)诱导的大鼠海马神经元损伤中的激活和HIF1α的表达情况。方法成年SD大鼠随机分为3组,其中2组接受脑室注射,1组为假手术组。大鼠麻醉后颅骨钻孔但侧脑室注射KA1.0μg(KA组)或等体积生理盐水(NS组)或相应位置颅骨钻孔但不予注射(假手术组)。8和16 h及1、3和5 d后,用Western blot观察Akt和mTOR的表达及其磷酸化水平,用免疫组化观察HIF1α的表达情况。结果尼氏染色显示,KA组大鼠海马CA3区1 d时即开始有死亡,5 d时累及CA1区。Akt在KA损伤16 h后就开始激活并持续至第5天;mTOR于第1天开始激活,第3天时达峰值。CA3区的HIF1α于第1天明显升高,CA1区的HIF1α表达则于3 d时明显升高。NS组和假手术组上述各指标变化均不明显。结论 KA诱导激活大鼠海马中Akt/mTOR通路,可能调节神经元的存活。

关键词：海人酸 Akt/mTOR通路 HIF1α 大鼠

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人脐血非造血干细胞的基本特性

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中国临床康复 2006年第29期10卷 50-52,i0002页

作者：王屹季凤清孙海梅赵春礼曾晓蓓杨慧首都医科大学北京神经科学研究所北京神经再生修复研究重点实验室北京市100069 首都医科大学组织学胚胎学教研室北京市100069

目的:通过对体外培养人脐血来源非造血干细胞生长特性的观察和对细胞免疫表型的检测,探讨人脐血来源非造血干细胞的一般特性,为进一步研究人脐血来源非造血干细胞提供依据。方法:实验于2005-01/10在首都医科大学北京神经科学研究所和首... 详细信息

目的:通过对体外培养人脐血来源非造血干细胞生长特性的观察和对细胞免疫表型的检测,探讨人脐血来源非造血干细胞的一般特性,为进一步研究人脐血来源非造血干细胞提供依据。方法:实验于2005-01/10在首都医科大学北京神经科学研究所和首都医科大学组织学胚胎学教研室实验室完成。脐带血由首都医科大学附属天坛医院提供,经密度梯度离心法分离新鲜脐带血,获取的单个核细胞进行培养。①倒置显微镜下观察细胞形态。②培养基中加入白血病抑制因子或用Mescencult间充质干细胞培养基进行培养,记录细胞生长状况。③流式细胞术分析脐血单个核细胞的免疫表型。结果:①人脐血非造血干细胞形态观察:较低密度接种细胞并不能形成大量贴壁细胞,而以5×106细胞密度接种则在48～72h后出现贴壁的梭形细胞,培养过程中细胞形态逐渐形成均一梭形。②生长特性:人脐血非造血干细胞接种5d后增殖速度加快,随后的几天内保持较快的增殖速度,15d后进入平台期。高糖DMEM培养基+胎牛血清和高糖DMEM培养基+胎牛血清+白血病抑制因子,两种培养体系在细胞增殖上未显示差异,白血病抑制因子并没有显著改善人脐血非造血干细胞生长增殖速度。③免疫表型:新鲜脐血经分离得到的单个核细胞中有少量CD34阳性细胞,CD90,CD166阳性细胞比例分别为(24.18±5.46)%和(36.44±6.26)%;人脐血非造血干细胞体外培养10d左右无CD34阳性细胞,CD166阳性细胞的比例达(76.48±4.54)%,较单个核细胞中CD166阳性细胞比例明显增高,并且表达HLA-ABC,而少量表达HLA-DR。结论:合适的细胞接种密度有利于人脐血非造血干细胞贴壁生长。白血病抑制因子并不能增加体外培养的人脐血非造血干细胞的生长增殖速度。人脐血非造血干细胞体外培养10d左右可以获得纯度较高的CD166阳性细胞。

关键词：脐带胎血流式细胞术

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骨髓基质细胞在细胞移植与基因治疗中的应用

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中国生物工程杂志 2003年第10期23卷 9-14页

作者：张敏杨慧首都医科大学北京神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点实验室北京100054

骨髓基质细胞是研究最广泛的成体干细胞 ,用于临床细胞移植与基因治疗有诸多优点 ,论述了具有多向分化潜能的骨髓基质细胞。

关键词：骨髓基质细胞细胞移植基因治疗干细胞

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