检索结果-内蒙古大学图书馆

基础医学与临床 2010年第6期30卷 630-634页

作者：方金林吴春春孙晓红徐群渊段德义首都医科大学北京神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点实验室教育部神经变性病重点实验室北京100069

目的研究Akt/mTOR信号通路在海人酸(KA)诱导的大鼠海马神经元损伤中的激活和HIF1α的表达情况。方法成年SD大鼠随机分为3组,其中2组接受脑室注射,1组为假手术组。大鼠麻醉后颅骨钻孔但侧脑室注射KA1.0μg(KA组)或等体积生理盐水(NS组)... 详细信息

目的研究Akt/mTOR信号通路在海人酸(KA)诱导的大鼠海马神经元损伤中的激活和HIF1α的表达情况。方法成年SD大鼠随机分为3组,其中2组接受脑室注射,1组为假手术组。大鼠麻醉后颅骨钻孔但侧脑室注射KA1.0μg(KA组)或等体积生理盐水(NS组)或相应位置颅骨钻孔但不予注射(假手术组)。8和16 h及1、3和5 d后,用Western blot观察Akt和mTOR的表达及其磷酸化水平,用免疫组化观察HIF1α的表达情况。结果尼氏染色显示,KA组大鼠海马CA3区1 d时即开始有死亡,5 d时累及CA1区。Akt在KA损伤16 h后就开始激活并持续至第5天;mTOR于第1天开始激活,第3天时达峰值。CA3区的HIF1α于第1天明显升高,CA1区的HIF1α表达则于3 d时明显升高。NS组和假手术组上述各指标变化均不明显。结论 KA诱导激活大鼠海马中Akt/mTOR通路,可能调节神经元的存活。

关键词：海人酸 Akt/mTOR通路 HIF1α 大鼠

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

甘丙肽2型受体在HEK293细胞中的表达及内化过程

引用

生物物理学报 2010年第5期26卷 373-379页

作者：吕琼金艳燕吴波路雅静李晓晓赵春礼徐志卿首都医科大学神经生物学系北京神经科学研究所北京神经再生修复研究重点实验室北京100069 首都医科大学组胚教研室北京100069 Departments of Neuroscience Karolinska Institutet

构建了在甘丙肽2型受体(GalR2)N端带myc表位标签的真核表达载体,并将其转染到HEK293细胞,进而应用免疫荧光细胞化学方法结合激光扫描共聚焦显微技术观察GalR2蛋白的亚细胞分布和膜转运过程。Western blot结果发现转染组myc-GalR2蛋白水... 详细信息

构建了在甘丙肽2型受体(GalR2)N端带myc表位标签的真核表达载体,并将其转染到HEK293细胞,进而应用免疫荧光细胞化学方法结合激光扫描共聚焦显微技术观察GalR2蛋白的亚细胞分布和膜转运过程。Western blot结果发现转染组myc-GalR2蛋白水平呈高表达。myc-GalR2主要分布在细胞膜上,少量分布于胞浆中。当给予甘丙肽(10-7mol/L)刺激后,5min时可见细胞膜上myc-GalR2明显减少,胞浆内myc-GalR2增多,15min时膜上myc-GalR2几乎全部消失。表明GalR2受体与配体结合后发生内化,且受体蛋白内化为时间依赖性的转运过程,证实在HEK293细胞GalR2会出现配体依赖性内化。同时,以已知膜蛋白5-HT1AR的内化作为对照,可见在给予甘丙肽刺激以后,5-HT1AR没有发生内化,受体蛋白仍然表达在膜上。此外,通过测定胞内钙水平激活情况来检测其信号通路激活情况,表明myc对GalR2功能没有明显影响。

关键词：表位标签甘丙肽2型受体(GalR2) G蛋白耦联受体(GPCRs) HEK293细胞膜转运

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

神经干细胞与透明质酸水凝胶材料生物相容性的研究

引用

神经解剖学杂志 2010年第5期26卷 481-486页

作者：肖丽丽王颖徐群渊首都医科大学北京神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点实验室教育部神经变性病学重点实验室北京100069

目的:评价神经干细胞与改性透明质酸水凝胶支架新材料的生物相容性,研究该透明质酸水凝胶支架作为中枢神经组织工程载体材料的可行性,为用组织工程及干细胞技术治疗中枢神经系统损伤提供基础。方法:以冷冻干燥法制备透明质酸水凝胶材料... 详细信息

目的:评价神经干细胞与改性透明质酸水凝胶支架新材料的生物相容性,研究该透明质酸水凝胶支架作为中枢神经组织工程载体材料的可行性,为用组织工程及干细胞技术治疗中枢神经系统损伤提供基础。方法:以冷冻干燥法制备透明质酸水凝胶材料支架,通过化学接枝法将抗Nogo受体抗体(Anti-NogoR)和多聚赖氨酸(poly-l-lysine,PLL)分子接枝到水凝胶上对其改性,制成新的支架材料。体外培养胚胎13.5d大鼠前脑泡神经干细胞.将神经干细胞与生物支架共培养,通过扫描电镜观察透明质酸水凝胶的内部结构及神经干细胞在支架材料上的粘附与生长情况,通过细胞免疫组织化学技术观察神经干细胞在透明质酸水凝胶材料上的存活与分化情况。结果:制备的透明质酸水凝胶材料具有疏松的三维多孔结构,神经干细胞在支架材料上能够粘附并且有突起长出,生长良好。神经干细胞在支架材料上能够分化。结论:神经干细胞与经过改性的透明质酸水凝胶新材料有很好的生物相容性,能够在材料上存活分化。该新透明质酸水凝胶材料有望作为修复中枢神经损伤的组织工程载体。

关键词：神经干细胞生物材料透明质酸水凝胶神经组织工程分化 Nogo受体抗体多聚赖氨酸

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

移植壳聚糖导管修复大鼠坐骨神经缺损

引用

神经解剖学杂志 2010年第5期26卷 507-512页

作者：张皑峰苏增艳杨朝阳李晓光首都医科大学附属北京友谊医院口腔科北京100050 首都医科大学神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点实验室教育部神经变性病学重点实验室北京100069

目的:研究移植结合了碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的壳聚糖导管促进周围神经损伤再生的情况。方法:成年Wistar大鼠造成10mm坐骨神经缺损后,以壳聚糖导管(移植组,10只)作桥梁桥接神经两断端,以假手术组和单纯损伤组(造成10mm坐骨神经缺... 详细信息

目的:研究移植结合了碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的壳聚糖导管促进周围神经损伤再生的情况。方法:成年Wistar大鼠造成10mm坐骨神经缺损后,以壳聚糖导管(移植组,10只)作桥梁桥接神经两断端,以假手术组和单纯损伤组(造成10mm坐骨神经缺损后,不加以任何干预措施)各10只分别为阳性和阴性对照,术后通过肉眼观察和神经微丝(NF)、乙酰胆碱酯酶(AChE)免疫组织化学染色方法对损伤神经局部及远端靶肌肉运动终板的再生情况进行观察。结果:移植组大鼠术后3个月,新生的神经纤维已越过缺损部位并到达损伤远端。免疫组织化学染色显示:术后3个月,移植组大鼠坐骨神经缺损处再生组织内可观察到均匀、密集分布的NF免疫阳性纤维,且在腓肠肌终板区内可见AChE免疫阳性终末,至5个月时阳性染色明显增强。在术后3个月时可见新生的运动终板,但轮廓不规则、边界不清晰;而在5个月时,新生的运动终板的形态与密度均接近假手术组水平。结论:结合了bFGF的壳聚糖导管对缺损的坐骨神经修复具有良好的桥梁作用和促进神经生长及终板再生的作用。

关键词：壳聚糖导管碱性成纤维细胞生长因子坐骨神经神经再生运动终板乙酰胆碱酯酶大鼠

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

人DAT基因的克隆及其对MN9D细胞多巴胺代谢的影响

引用

神经解剖学杂志 2010年第6期26卷 573-577页

作者：周岩张京钟赵春礼赵焕英徐群渊首都医科大学神经科学研究所北京市神经损伤修复重点实验室北京100069

目的:探讨人多巴胺(DA)转运体(dopamine transporter,DAT)基因过表达对单胺类递质代谢的效应。方法:从人胎脑中提取总RNA,RT-PCR方法扩增DAT cDNA片段,重组于pGEM-T-EASY载体中并进行全序列测定。重组真核表达载体pLNCX2-DAT转染MN9D细... 详细信息

目的:探讨人多巴胺(DA)转运体(dopamine transporter,DAT)基因过表达对单胺类递质代谢的效应。方法:从人胎脑中提取总RNA,RT-PCR方法扩增DAT cDNA片段,重组于pGEM-T-EASY载体中并进行全序列测定。重组真核表达载体pLNCX2-DAT转染MN9D细胞,Western Blot检测DAT的表达,高压液相(high-performance liquid chromatography,HPLC)法检测细胞内外DA含量的变化。结果:RT-PCR方法扩增得到1981bp的cDNA片段,测序结果表明所得到的片段与DAT序列完全一致;Westein Blot证实转染后的MN9D细胞(实验组)内DAT基因表达明显高于对照组(P<0.05);HPLC结果表明实验组中细胞内外的DA含量明显高于对照组(P<0.05)。结论:DAT高表达明显促进DA的循环和利用,为帕金森病的基因治疗提供了理论依据。

关键词：帕金森病多巴胺转运体基因表达 MN9D细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

人PINK1抗血清的制备及其免疫活性物质在大鼠脑组织中的表达

引用

首都医科大学学报 2010年第3期31卷 343-347页

作者：李继胜李尧华李昕于顺王年强高华孙晓红杨慧首都医科大学北京神经科学研究所北京神经再生修复研究重点实验室教育部神经变性病学重点实验室首都医科大学宣武医院老年病研究所神经生物学研究室教育部神经变性病重点实验室

目的制备帕金森病相关蛋白PINK1抗血清并检测其在大鼠脑组织中的表达特征。方法制备人PINK1基因重组蛋白,免疫新西兰大耳白兔获得抗PINK1抗血清;通过盐析法初步纯化、Western blotting法鉴定抗血清的敏感性和特异性、免疫组化法检测PINK... 详细信息

目的制备帕金森病相关蛋白PINK1抗血清并检测其在大鼠脑组织中的表达特征。方法制备人PINK1基因重组蛋白,免疫新西兰大耳白兔获得抗PINK1抗血清;通过盐析法初步纯化、Western blotting法鉴定抗血清的敏感性和特异性、免疫组化法检测PINK1在大鼠脑中的分布。结果人PINK1基因重组蛋白以包涵体形式在大肠杆菌中高效表达;纯化蛋白制备兔抗血清经盐析纯化后,兔抗人PINK1抗血清特异性识别人PINK1基因重组蛋白及大鼠脑匀浆中40000和66000的蛋白质,与预期结果一致;免疫组化染色显示PINK1广泛分布在嗅球、皮质、海马、纹状体、小脑、黑质和红核。结论制备了一种兔抗人PINK1多克隆抗血清;PINK1广泛分布于大鼠中枢神经系统;为以后深入研究PINK1表达的组织分布、细胞内定位及其生物学功能提供了有效地实验工具。

关键词： PINK1 抗血清大鼠重组蛋白

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

脊髓重建管对T8损伤大鼠后肢运动终板的调节与维持

引用

中国康复理论与实践 2010年第3期16卷 205-208页

作者：苏增艳杨朝阳李晓光首都医科大学北京神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点实验室教育部神经变性病学重点实验室北京市100069

目的观察大鼠脊髓损伤后及脊髓重建管诱导脊髓再生修复过程中后肢骨骼肌运动终板形态结构与不同类型肌纤维终板区乙酰胆碱酯酶(AChE)的变化情况。方法43只成年Wistar大鼠随机分为脊髓T8单纯损伤组(Cx组)、脊髓T8损伤+脊髓重建管移植修复... 详细信息

目的观察大鼠脊髓损伤后及脊髓重建管诱导脊髓再生修复过程中后肢骨骼肌运动终板形态结构与不同类型肌纤维终板区乙酰胆碱酯酶(AChE)的变化情况。方法43只成年Wistar大鼠随机分为脊髓T8单纯损伤组(Cx组)、脊髓T8损伤+脊髓重建管移植修复组(CxTp组)和正常对照组(Co组),术后2周、4周、3个月、6个月、12个月经灌注固定后取出大鼠双下肢腓肠肌、比目鱼肌和趾长伸肌,分别用氯化金染色(压片法)观察运动终板结构形态和Karnovsky-Roots直接法染色检测AChE的变化。结果Cx组和CxTp组大鼠术后运动终板结构形态与AChE活性均发生改变。Cx组终板自术后3个月起发生明显的退行性改变,AChE活性亦呈线性下降;CxTp组终板结构与形态相对稳定,没有退变迹象,术后3个月起AChE活性显著高于同时间点Cx组。结论大鼠脊髓损伤后,运动终板发生进行性退变,脊髓重建管移植修复可以阻止终板的退行性变,使其向着利于神经康复的方向发生着AChE的复活与结构形态的可塑性变化。

关键词：脊髓损伤脊髓修复运动终板乙酰胆碱酯酶(ACHE) 大鼠

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

甘丙肽受体:表达,膜转运、分捡与信号传导

甘丙肽受体:表达,膜转运、分捡与信号传导

引用

中国生理学会第23届全国会员代表大会暨生理学学术大会

作者：徐志卿首都医科大学神经生物学系北京神经科学研究所北京神经再生修复研究重点实验室

甘丙肽是一种广泛分布于中枢神经系统和外周组织中的神经肽,目前甘丙肽受体有三个亚型已被克隆,即甘丙肽1型受体(GalR1)、甘丙肽2型受体(GalR2)和甘丙肽3型受体(GalR3),均为G蛋白偶联受体。大量的研究工作已证明,甘丙肽通过与其受体结... 详细信息

甘丙肽是一种广泛分布于中枢神经系统和外周组织中的神经肽,目前甘丙肽受体有三个亚型已被克隆,即甘丙肽1型受体(GalR1)、甘丙肽2型受体(GalR2)和甘丙肽3型受体(GalR3),均为G蛋白偶联受体。大量的研究工作已证明,甘丙肽通过与其受体结合参与许多生理和病理过程,例如我们以往的工作提示甘丙肽受体可以作为抗忧郁治疗的新药物靶点,因此对其深入研究将有助于阐述在抑郁症发生和治疗过程中的甘丙肽作用机制。我们发现GalR1和GalR2与甘丙肽结合后都会迅速发生笼型蛋白介导内化,但GalR1内化后在其C端的YXX(?)基序导引下,被转运到溶酶体降解。而GalR2内化后大部分会通过再循环回到细胞膜上复敏。此外,我们发现GalR2还存在配体非依赖性的固有内化。利用siRNA技术我们发现GalR2的信号传导除了通过G蛋白依赖性通路,还可以通过G蛋白非依赖性-视紫红质抑制蛋白依赖性通路。我们还发现,甘丙肽通过GalR2激活PI3 kinase信号通路而抑制PC12细胞的分化并引发细胞凋亡。用GalR2的C端作为bait进行酵母双杂交实验,我们筛选到以下九类与GalR2-C端相互作用的蛋白:(1)与受体内在化和转运相关;(2)参与磷酸化修饰;(3)氧化还原及能量代谢相关;(4)调控细胞凋亡;(5)与mRNA结合调控其剪接、编辑和翻译;(6)与DNA结合调控基因转录;(7)参与细胞粘附作用;(8)分子伴侣;(9)调控化学基团转移。提示GalR2在细胞内存在复杂的调控机制。

关键词：甘丙肽受体信号传导细胞凋亡

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

甘丙肽与人垂体腺瘤侵袭性相关关系研究

甘丙肽与人垂体腺瘤侵袭性相关关系研究

引用

中国生理学会第23届全国会员代表大会暨生理学学术大会

作者：马克乾孙静鲁润春冉然杨予涛贾旺徐志卿首都医科大学神经生物学系北京神经科学研究所北京神经再生修复研究重点实验室

垂体腺瘤是颅内常见的良性肿瘤,占颅内肿瘤总数的15%。目前药物治疗效果欠佳,手术难以完全切除,术后内分泌缓解率低,复发率高。因此有必要对其侵袭生长方式机制进行研究,从而开发出新的诊治分子靶点。甘丙肽是脑内重要的神经肽之一,其... 详细信息

垂体腺瘤是颅内常见的良性肿瘤,占颅内肿瘤总数的15%。目前药物治疗效果欠佳,手术难以完全切除,术后内分泌缓解率低,复发率高。因此有必要对其侵袭生长方式机制进行研究,从而开发出新的诊治分子靶点。甘丙肽是脑内重要的神经肽之一,其受体有三个亚型,均属于G蛋白耦联受体家族,可参与许多大脑功能活动,包括情绪、学习和记忆、疼痛和镇痛、内分泌及摄食等过程,研究发现甘丙肽及其受体与下丘脑-垂体-肾上腺轴关系密切,且我们以往的工作也证明甘丙肽可以抑制肿瘤细胞的增殖。目的:探讨甘丙肽及其受体在垂体腺瘤侵袭性发生中的作用及其可能的机制,并进一步研究甘丙肽及其相关的调节因子是否可作为一种可能的治疗方法应用于临床。结果:通过实时定量PCR同时检测bFGF、甘丙肽及其三个受体亚型(甘丙肽受体1型、2型和3型)的表达,发现:(1)侵袭组中bFGF的表达高于非侵袭组,组间比较有显著性差异;(2)非侵袭组中甘丙肽的表达高于侵袭组,组间比较有显著性差异,而其三个受体亚型的表达组间的差别比较无显著性差异;(3)甘丙肽的表达与垂体腺瘤的侵袭性呈负相关。结论:甘丙肽可能可以作为评价垂体腺瘤侵袭性的生物学指标,且可能对垂体腺瘤侵袭性有抑制作用,有可能成为侵袭性垂体腺瘤临床诊治的新靶点。

关键词：垂体腺瘤侵袭性甘丙肽相关关系研究

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

酵母双杂交筛选甘丙肽2型受体C端相互作用蛋白

酵母双杂交筛选甘丙肽2型受体C端相互作用蛋白

引用

中国生理学会第23届全国会员代表大会暨生理学学术大会

作者：宫夏霓路雅静杨予涛徐志卿首都医科大学神经生物学系北京神经科学研究所北京神经再生修复研究重点实验室

甘丙肽(Galanin)是一个广泛分布于神经系统和外周组织中的神经肽。通过与其受体结合,Galanin参与调节认知、觉醒、摄食、生殖等生理过程。过去的研究表明,甘丙肽2型受体(GalR2)具有抗抑郁的作用,因此我们对于GalR2进行了重点的研究。Ga... 详细信息

甘丙肽(Galanin)是一个广泛分布于神经系统和外周组织中的神经肽。通过与其受体结合,Galanin参与调节认知、觉醒、摄食、生殖等生理过程。过去的研究表明,甘丙肽2型受体(GalR2)具有抗抑郁的作用,因此我们对于GalR2进行了重点的研究。GalR2属于G蛋白耦联受体家族(GPCRs),其C端胞内区对激活下游通路和调控受体转运都起着重要作用。我们用人GalR2的C端作为bait,人脑cDNA文库作为prey进行酵母双杂交实验,筛选与GalR2-C端相互作用的蛋白。实验结果显示,与GalR2-C端相互作用的蛋白大致分为如下几类:1.与受体内在化和转运相关,如clathrin;2.参与磷酸化修饰;3.氧化还原及能量代谢相关;4.调控细胞凋亡;5.与mRNA结合调控其剪接、编辑和翻译,如含有RRM结构域的蛋白可参与mRNA前体的剪接;6.与DNA结合调控基因转录,如一些含有锌指结构的蛋白可以与DNA结合而调控转录;7.参与细胞粘附作用;8.分子伴侣;9.调控化学基团转移。这提示我们GalR2在细胞内存在复杂的调控机制。筛选和鉴定与GalR2-C端相互作用蛋白,可以为进一步研究GalR2分选、转运和调节的分子和细胞机制提供重要的实验依据和思路。

关键词：甘丙肽2型受体(GalR2) G蛋白耦联受体(GPCR) 酵母双杂交

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：