检索结果-内蒙古大学图书馆

中山大学学报（医学科学版） 2012年第4期33卷 434-439页

作者：田映红柏林王宁黔赵岩南方医科大学基础医学院生理学教研室广东广州510515

【目的】观察离子型谷氨酸受体AMPA受体和NMDA受体在leptin参与神经病理性痛机制中的作用。【方法】用膜片钳全细胞模式记录leptin是否影响正常大鼠脊髓切片背角Ⅱ层神经元AMPA受体和NMDA受体介导的电流;大鼠鞘内注射leptin,持续14 d,在... 详细信息

【目的】观察离子型谷氨酸受体AMPA受体和NMDA受体在leptin参与神经病理性痛机制中的作用。【方法】用膜片钳全细胞模式记录leptin是否影响正常大鼠脊髓切片背角Ⅱ层神经元AMPA受体和NMDA受体介导的电流;大鼠鞘内注射leptin,持续14 d,在第1,3,7,14天检测热痛阈和机械痛阈。在第14天处死动物,用免疫组化法和western blot检测脊髓背角AMPA受体和NMDA受体的表达。【结果】灌流液中加入leptin能增加NMDA受体介导的电流,并有剂量依赖性,100nmol/L leptin的作用最显著,leptin对AMPA受体介导的电流无影响;大鼠鞘内注射leptin,在第14天明显降低热痛阈和机械痛阈;leptin增加了脊髓背角NMDA受体亚单位NR1的表达,但是对AMPA受体亚单位GluR1的表达无影响。NMDA受体拮抗剂MK-801可抑制并逆转leptin诱导的痛行为及抑制leptin诱导的NR1表达增多。【结论】Leptin可能通过影响NMDA受体参与神经病理性痛的发生。

关键词：神经病理性痛 AMPA受体 NMDA受体 leptin

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精神科攻击风险评估中的行动研究

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中华护理杂志 2014年第8期49卷 914-918页

作者：姚秀钰李峥封砚村安凤荣胡丽丽侯冷冰程艮北京市北京协和医学院护理学院 100144 首都医科大学附属北京安定医院六病区首都医科大学附属北京安定医院护理部首都医科大学附属北京安定医院科教科首都医科大学附属北京安定医院八病区

目的探讨我国精神科护理实践中在攻击行为风险评估方面存在的问题，在行动中不断完善攻击风险评估的临床实践。方法采用行动研究法，在识别问题后，按照“计划．行动一观察．反思”的螺旋过程．依次引入攻击风险筛查量表（V-RISK-10）、... 详细信息

目的探讨我国精神科护理实践中在攻击行为风险评估方面存在的问题，在行动中不断完善攻击风险评估的临床实践。方法采用行动研究法，在识别问题后，按照“计划．行动一观察．反思”的螺旋过程．依次引入攻击风险筛查量表（V-RISK-10）、Brcset攻击行为量表（BVC），并分别在376例住院患者和289例出院患者、281例住院患者中进行验证，收集使用者意见，探讨使用效果。结果两个工具的接受性均较好，改善了攻击行为风险评估的护理实践。攻击风险筛查量表在住院患者中的ROC曲线下面积达0．63[95％CI（0．57—0．69）]，出院患者中为0．62[95％CI（0．51-0．73）]。BVC量表的受试者工作特性曲线下面积达0．85[95％CI（0．80～0．91）]，对患者攻击行为具有较好的预测性。结论攻击风险筛查量表和BVC攻击行为量表是适合我国精神科使用的攻击风险评估工具，工具的使用可协助护士的临床护理工作。行动研究法在开展研究的同时，可有效提高和改善临床护理实践，值得在精神科护理领域尝试。

关键词：精神病科医院暴力行动研究

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中性粒细胞为主型尘螨过敏哮喘小鼠模型的建立

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细胞与分子免疫学杂志 2020年第8期36卷 687-692页

作者：李毅袁青黄国平叶迎春于红谢翔年四季西南医科大学基础医学院免疫实验室四川泸州646000

目的使用屋尘螨提取物(HDM)建立中性粒细胞为主型小鼠哮喘模型。方法按照随机数字表法,将16只无特定病原体(SPF)级BALB/c小鼠分为对照组和模型组。模型组给予HDM滴鼻致敏及激发,对照组小鼠给予等量生理盐水。末次激发后24 h,采用BUXCO... 详细信息

目的使用屋尘螨提取物(HDM)建立中性粒细胞为主型小鼠哮喘模型。方法按照随机数字表法,将16只无特定病原体(SPF)级BALB/c小鼠分为对照组和模型组。模型组给予HDM滴鼻致敏及激发,对照组小鼠给予等量生理盐水。末次激发后24 h,采用BUXCO小鼠无创肺功能仪测量气道呼气间歇(Penh)值确定气道阻力,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)计数细胞数并进行炎细胞分类,HE染色观察肺组织炎细胞浸润程度。实时定量PCR检测白细胞介素6(IL-6)、IL-17F、IL-1βmRNA表达,微量样本多指标流式蛋白定量技术(CBA)检测BALF中IL-4、IL-6、IL-17F、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果与对照组相比,模型组Penh值明显升高,气管及血管旁炎症比对照组明显加重;模型组小鼠IL-6、IL-17F、IL-1βmRNA水平增加,BALF细胞数及中性粒细胞数明显增加,BALF中促中性粒细胞型细胞因子IL-6、IL-17F、TNF-α水平明显升高。结论成功建立了中性粒细胞为主型尘螨过敏小鼠哮喘模型。

关键词：屋尘螨提取物(HDM) 中性粒细胞哮喘气道炎症

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U251细胞MCT1、4在氧糖剥夺后的表达变化及其意义

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重庆医科大学学报 2017年第10期42卷 1234-1239页

作者：陈玉琴侯姣姣魏小于杨美重庆医科大学神经科学中心重庆医科大学基础医学院解剖教研室重庆400016

目的:观察氧糖剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)后,神经胶质瘤细胞U251的乳酸转运和单羧酸转运蛋白(monocarboxylate transporter,MCT)1、4的表达变化,以探讨胶质瘤增殖生长的分子机制。方法:U251细胞随机分为对照组和模型组(OGD... 详细信息

目的:观察氧糖剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)后,神经胶质瘤细胞U251的乳酸转运和单羧酸转运蛋白(monocarboxylate transporter,MCT)1、4的表达变化,以探讨胶质瘤增殖生长的分子机制。方法:U251细胞随机分为对照组和模型组(OGD组),模型组的干预时间点为1、3、6 h。四甲基偶氮唑盐比色法(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)检测细胞增殖生长情况,HE染色观察细胞的形态变化,乳酸试剂盒检测细胞培养液中的乳酸含量,免疫荧光和免疫印迹观察MCT1和MCT4的表达变化情况。结果:与对照组相比,随着氧糖剥夺时间延长,模型组细胞增殖能力下降(对照组、OGD 1 h、OGD 3 h、OGD 6 h组的光密度值分别为0.584±0.031、0.537±0.046、0.441±0.079和0.200±0.011),细胞培养液中的乳酸浓度增高(对照组、OGD 1 h、OGD 3 h、OGD 6 h组乳酸浓度值分别为0.150±0.029、0.707±0.022、1.167±0.024和1.325±0.023)。MCT1、4的表达上调,并随氧糖剥夺时间延长其表达逐渐增强(MCT1:F=46.256,P=0.000;MCT4:F=247.400,P=0.000)。细胞培养液中加入MCTs的抑制剂4-CIN后,其乳酸浓度降低(对照组、150μmol/L组、425μmol/L组的乳酸浓度值分别为0.249±0.012、0.222±0.016、0.167±0.117)。结论:U251细胞氧糖剥夺后,随着细胞培养液中乳酸浓度增加,MCT1、4亦表达上调,而细胞的增殖生长能力下降;抑制MCT的表达,细胞培养液中的乳酸浓度降低,提示MCT1、4可能通过参与神经胶质瘤缺血缺氧微环境中乳酸的转运,进而调控细胞的增殖生长过程。

关键词：单羧酸转运蛋白神经胶质瘤氧糖剥夺

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肿瘤外泌体对免疫细胞的作用

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免疫学杂志 2018年第10期34卷 911-916页

作者：周虎张丽峰冷静广西医科大学基础医学院免疫学教研室南宁530021

外泌体是细胞主动分泌的双层囊泡小体,广泛存在于各种体液中,直径通常为30～100 nm。外泌体能将其携带的的脂类、蛋白质、核酸等多种重要的生物功能分子运输到受体细胞中,起到物质传递与信息交流的作用。肿瘤来源外泌体(tumor-derived e... 详细信息

外泌体是细胞主动分泌的双层囊泡小体,广泛存在于各种体液中,直径通常为30～100 nm。外泌体能将其携带的的脂类、蛋白质、核酸等多种重要的生物功能分子运输到受体细胞中,起到物质传递与信息交流的作用。肿瘤来源外泌体(tumor-derived exosomes,TEXs)与肿瘤的发生发展密切相关,既可作为抗原引发抗肿瘤免疫,更重要的是,也可负向调控多种免疫细胞功能,帮助肿瘤细胞免疫逃逸。本文主要对外泌体在多种肿瘤中对各类免疫细胞的调控作用进行分析总结。

关键词：外泌体肿瘤免疫调节树突状细胞

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聚合物基仿生医用胶黏剂的开发与应用

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功能高分子学报 2021年第2期34卷 93-113页

作者：吴可可赵益涛吴敏李越胡志奇卢智慧郭金山南方医科大学基础医学院组织胚胎学教研室广州510515 南方医科大学南方医院整形美容外科广州510515

生物医用胶黏剂有望代替手术缝合线用于伤口闭合,可广泛用于皮肤、内脏、心血管、骨和牙齿等软/硬组织伤口的再生修复,市场前景广阔;然而,在湿态下如何使其对生物组织产生强力黏附一直是科学界面临的难题。为解决这一难题,研究者模拟自... 详细信息

生物医用胶黏剂有望代替手术缝合线用于伤口闭合,可广泛用于皮肤、内脏、心血管、骨和牙齿等软/硬组织伤口的再生修复,市场前景广阔;然而,在湿态下如何使其对生物组织产生强力黏附一直是科学界面临的难题。为解决这一难题,研究者模拟自然界中各种动、植物的黏附策略,开发了一系列仿生医用胶黏剂。本文总结了各种聚合物基仿生医用胶黏剂的开发及其在手术伤口黏合、日常伤口护理、慢性伤口再生修复、骨折黏合固定等软/硬组织再生修复以及局部药物递送和原位治疗等领域中的应用,并展望了医用胶黏剂的未来发展方向,包括其在医疗美容领域的应用前景。

关键词：生物医用胶黏剂仿生黏附组织再生修复医疗美容

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嗜酸乳杆菌GGDEF和EAL结构域相关蛋白的表达、纯化及活性分析

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南方医科大学学报 2017年第5期37卷 633-639页

作者：何嘉辉孙洁丽闫文娟王方南方医科大学南方医院口腔科广东广州510515 南方医科大学基础医学院神经生物学教研室广东广州510515

目的鉴定嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)中含GGDEF和EAL结构域相关蛋白的功能。为进一步研究环二鸟苷酸(c-di-GMP)在该菌株中的调控机制奠定基础。方法从嗜酸乳杆菌ATCC4356基因组中PCR扩增出NH13_07045-GGDEF、NH13_07050和NH13_07055这3个基因片段,分别构建其重组表达质粒。经鉴定后,转入大肠杆菌表达宿主中,用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组蛋白,经直链淀粉树脂纯化后进行体外酶活性实验,再通过高效液相色谱检测反应产物。结果通过PCR扩增的目的基因片段经重组质粒双酶切后其大小与预期相符,测序结果与Gen Bank中嗜酸乳杆菌ATCC4356基因序列一致,表明重组质粒构建成功。SDS-PAGE和Western Blot检测表达的重组蛋白相对分子质量分别约为59000(含GGDEF结构域)、67000(含EAL结构域)和72000(含EAL结构域),与预期大小吻合。经树脂亲和柱纯化及浓缩获得目的蛋白。高效液相色谱分析结果显示,NH13_07045-GGDEF的表达产物体外无明显双鸟苷酸环化酶(DGC)活性,NH13_07050的表达产物体外具有磷酸二酯酶(PDE)活性,而NH13_07055的表达产物在体外无明显PDE活性。结论在本研究的3种基因中,NH13_07050的表达产物在体外具有磷酸二酯酶(PDE)的活性。为研究环二鸟苷酸在嗜酸乳杆菌中的调控机制提供了实验依据。

关键词：嗜酸乳杆菌环二鸟苷酸 GGDEF结构域 EAL结构域酶活性检测高效液相色谱

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血清抗百日咳毒素中和抗体检测方法的建立及应用

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中国生物制品学杂志 2021年第1期34卷 93-96页

作者：张雨笑谌志筠孙琳何秋水首都医科大学基础医学院病原生物学系北京100069 首都医科大学附属北京儿童医院呼吸疾病研究室北京100045 芬兰图尔库大学医学微生物和免疫学系图尔库20520

目的建立血清抗百日咳毒素(pertussis toxin,PT)中和抗体的检测方法,并进行应用。方法将不同浓度的PT蛋白(0.1~105.5 ng/mL)和105个/mL的CHO细胞悬浮液加入96孔板,均100μL/孔,37℃孵育24 h,显微镜下观察细胞簇集程度,确定中和试验中PT... 详细信息

目的建立血清抗百日咳毒素(pertussis toxin,PT)中和抗体的检测方法,并进行应用。方法将不同浓度的PT蛋白(0.1~105.5 ng/mL)和105个/mL的CHO细胞悬浮液加入96孔板,均100μL/孔,37℃孵育24 h,显微镜下观察细胞簇集程度,确定中和试验中PT的最适终浓度。将待检血清(1∶4~1∶4 096)及最适终浓度的PT加入96孔板,均50μL/孔,37℃中和3 h;加入105个/mL的CHO细胞悬浮液,100μL/孔,继续培养24 h,镜下观察细胞簇集程度。用建立的方法检测8份健康人血清样品的中和抗体含量,重复检测4次,计算变异系数(CV)。采用PT-IgG抗体ELISA试剂盒及建立的方法分别检测109份20~39岁健康人群血清样本的PT-IgG抗体及PT中和抗体水平,并分析两者的分布情况及相关性。结果确定PT最适终浓度为0.84 ng/m L。8份血清样品重复检测4次的CV为0.00%~12.28%。109份健康人血清中和抗体效价分布范围为<4~256,中位数为32,几何平均效价(GMT)为27.12(95%CI:20.78~35.39);PT-IgG抗体分布范围为0.03~184.80 IU/mL,中位数为21.17 IU/mL,GMT为13.33 IU/mL(95%CI:9.95~17.87 IU/mL)。PT-IgG IU/mL抗体浓度与中和抗体效价呈明显相关性(r=0.77,P <0.01),部分血清存在抗体浓度高,中和抗体效价低的现象。结论成功建立了血清抗PT中和抗体的检测方法,该方法具有良好的重复性,可用于评价抗PT中和抗体的功能。

关键词：百日咳百日咳毒素 CHO细胞 IgG抗体中和抗体

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黑色素细胞中过量表达Pax610Neu基因对MITF和TYR的影响

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中国农业科学 2016年第11期49卷 2214-2221页

作者：聂瑞强杨玉静谢建山范瑞文高文俊董常生山西农业大学动物科技学院山西医科大学基础医学院

【目的】MITF和β-catenin是黑色素生成通路中重要的调节基因,而Pax6通过调控MITF和β-catenin来调控黑色素细胞的黑色素生成,通过对只含有正常Pax6 paird domain的前102个氨基酸的Pax610Neu的研究,来探究Pax610Neu是否还有生物学功能,... 详细信息

【目的】MITF和β-catenin是黑色素生成通路中重要的调节基因,而Pax6通过调控MITF和β-catenin来调控黑色素细胞的黑色素生成,通过对只含有正常Pax6 paird domain的前102个氨基酸的Pax610Neu的研究,来探究Pax610Neu是否还有生物学功能,以及Pax6对其下游基因的作用机理。【方法】根据NCBI查找到的Pax610Neu基因序列设计PCR引物,克隆Pax610Neu,收集所得基因片段送华大基因测序确认。后通过对Pax610Neu和慢病毒表达载体的序列分析来筛选合适的酶切位点,通过分析选取Sal I和Xba I作为酶切位点,设计含有Sal I和Xba I酶切位点的PCR引物,大量克隆Pax610Neu基因,从而通过胶回收得到含有Sal I和Xba I酶切位点的Pax610Neu基因。将含有酶切位点的目的片段与T载体相连,并送华大基因测序。将与T载体连接成功的质粒导入感受态细胞使其大量扩增,提取质粒,双酶切后,胶回收,得到大量含有Sal I和Xba I酶切位点的Pax610Neu基因片段,将其与含有小鼠tyrp2特异性启动子和绿色荧光蛋白(GFP)的慢病毒表达载体相连接,送华大基因测序确认。将连接好的慢病毒表达载体导入感受态细胞使其大量扩增,通过质粒中提试剂盒获得大量去内毒素的Pax610Neu慢病毒真核表达载体。将慢病毒真核表达载体通过细胞转染导入到培养的绵羊黑色素细胞中,使其过量表达。收集细胞,分别通过观察绿色荧光蛋白和使用RT-PCR来检测转染效率,使用RT-PCR和Western blot来检测MITF和TYR在m RNA和蛋白水平的变化,同时检测黑色素细胞中黑色素生成量的变化。【结果】与正常组相比,在m RNA水平,MITF显著升高3.2倍(P<0.05),TYR升高1.31倍,由此得出,Pax610Neu可以有效促进MITF m RNA的产生,对TYR m RNA产生的影响不是太显著;在蛋白质水平,MITF显著升高8.24倍(P<0.001),TYR显著升高2.09倍(P<0.001),由此得出,Pax610Neu可以显著提高MITF、TYR蛋白的产生;同时黑色素细胞产生黑色素的量显著升高1.22倍(P<0.05),由此得出Pax610Neu可以有效促进黑色素细胞黑色素的生成。【结论】只含有正常Pax6 paird domain前102个氨基酸的Pax610Neu,仍然可以在黑色素细胞中与MITF相互作用,同时间接调控TYR的表达,从而使黑色素细胞黑色素的生成量发生改变。

关键词： Pax610Neu Pax6 MITF TYR 黑色素

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黄花蒿花粉破坏鼻黏膜上皮细胞紧密连接的实验研究

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中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2020年第5期55卷 465-471页

作者：雒红霞孟亚萍王浩江韩海阳乔瑞红张小宁冯彦王彤山西医科大学第一医院耳鼻咽喉头颈外科太原030001 山西医科大学基础医学院太原030001 山西医科大学公共卫生学院太原030001

目的探讨黄花蒿花粉对鼻黏膜上皮细胞(HNEpC)紧密连接的损伤作用及机制。方法体外培养HNEpC,采用不同质量浓度黄花蒿花粉(0、20、40、80、100、160、200μg/ml)分别干预细胞24 h,CCK-8法检测细胞增殖活性;p38丝裂原素活化蛋白激酶(p38MA... 详细信息

目的探讨黄花蒿花粉对鼻黏膜上皮细胞(HNEpC)紧密连接的损伤作用及机制。方法体外培养HNEpC,采用不同质量浓度黄花蒿花粉(0、20、40、80、100、160、200μg/ml)分别干预细胞24 h,CCK-8法检测细胞增殖活性;p38丝裂原素活化蛋白激酶(p38MAPK)抑制剂SB203580干预HNEpC前后,Western Blot法检测p38MAPK信号通路表达及其磷酸化水平;免疫荧光化学染色法、Western Blot法和实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)观察细胞紧密连接Occludin、Claudin-1的表达和分布情况。采用SPSS 21.0软件分析数据。结果CCK-8结果显示,与对照组相比,不同质量浓度黄花蒿花粉干预6 h后,HNEpC增殖活性均增高(P值均<0.05);干预12 h后,20、40、80、100、160μg/ml组的HNEpC增殖活性未见明显改变(P值均>0.05),200μg/ml组降低(P<0.05);干预24 h后,20、40μg/ml组的细胞增殖活性未见明显改变(P值均>0.05),80、100、160、200μg/ml组降低(P值均<0.05)。免疫荧光染色可见正常对照组Occludin和Claudin-1蛋白定位于细胞膜上,表达多,围绕细胞膜形成环状结构;而在高浓度黄花蒿花粉干预下,其表达水平下降,出现断裂、模糊,分布不均匀。Western Blot和qPCR实验结果表明,干预24 h后,黄花蒿花粉(40、80、100、160、200μg/ml)干预组HNEpC Claudin-1蛋白及其mRNA表达水平较对照组降低(mRNA表达量分别为0.567±0.214、0.443±0.109、0.462±0.160、0.497±0.134、0.388±0.076比1.001±0.067,P值均<0.05),而Occludin蛋白及其mRNA仅在200μg/ml黄花蒿花粉处理组降低(mRNA表达量为0.631±0.109比1.016±0.026,P<0.05),其他处理组均增高(mRNA表达量分别为1.258±0.134、1.827±0.1034、2.429±0.077、1.707±0.085、1.477±0.066比1.016±0.026,P值均<0.05)。Western Blot结果表明,100、160、200μg/ml黄花蒿花粉干预24 h后,磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)表达增加。SB203580能够抑制黄花蒿花粉引起的紧密连接蛋白Occludin表达下降(mRNA表达量为1.255±0.179比0.631±0.109,P<0.05),而对Claudin-1蛋白表达无影响。结论黄花蒿花粉可能通过激活p38MAPK信号通路,破坏HNEpC的紧密连接。

关键词：鼻炎,变应性连接蛋白类闭锁蛋白 p38丝裂原活化蛋白激酶类

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