检索结果-内蒙古大学图书馆

生理学报 2004年第2期56卷 263-268页

作者：于顺刘雪梅李尧华吕国蔚陈彪首都医科大学宣武医院老年病研究所神经生物学研究室北京100053 首都医科大学神经生物学系北京100054

利用本研究室制备的抗α-突触核蛋白(α-Synuclein,α-SYN)单克隆抗体作为研究工具,在一种低氧预适应小鼠模型上研究了重复急性低氧对大脑皮层中α-SYN表达的影响。Western blot分析结果表明,小鼠在经过重复急性低氧刺激后,皮层脑组织内... 详细信息

利用本研究室制备的抗α-突触核蛋白(α-Synuclein,α-SYN)单克隆抗体作为研究工具,在一种低氧预适应小鼠模型上研究了重复急性低氧对大脑皮层中α-SYN表达的影响。Western blot分析结果表明,小鼠在经过重复急性低氧刺激后,皮层脑组织内α-SYN蛋白含量呈现规律性的变化,表现为第一次急性低氧后明显增加,而经过重复低氧第4次后则回落,接近正常水平;免疫组化染色结果显示,α-SYN免疫阳性物质除存在于神经元的末梢外,还存在于某些神经元的核中。分析大脑皮质细胞核呈α-SYN免疫阳性的神经元的密度发现,核呈α-SYN阳性的神经元密度也在第一次急性低氧后明显增加,而经过重复低氧第4次后回落。以上结果提示,重复急性低氧能够改变α-SYN在脑内的表达水平以及α-SYN核阳性神经元的数量。这种变化的机制和生理意义有待于进一步探讨。

关键词：低氧 α-突触核蛋白神经元细胞核

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α-突触核蛋白在大鼠脑神经元中的亚细胞定位

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基础医学与临床 2008年第7期28卷 686-691页

作者：李昕刘光伟殷娟娟李尧华陈彪于顺首都医科大学宣武医院老年病研究所神经生物学研究室

目的研究α-突触核蛋白(α-SYN)在大鼠脑神经元的亚细胞分布。方法利用2种新的识别不同表位的抗α-SYN单克隆抗体2E3和3D5,应用免疫组织化学、免疫荧光标记和Western blot分析法对α-SYN在大鼠脑神经元的分布进行观察。结果2E3单抗检测... 详细信息

目的研究α-突触核蛋白(α-SYN)在大鼠脑神经元的亚细胞分布。方法利用2种新的识别不同表位的抗α-SYN单克隆抗体2E3和3D5,应用免疫组织化学、免疫荧光标记和Western blot分析法对α-SYN在大鼠脑神经元的分布进行观察。结果2E3单抗检测到α-SYN主要存在于神经元的突触前终末;3D5单抗除了能够检测到突触前终末的α-SYN外,还可以检测到α-SYN在神经细胞核的大量存在。Western blot分析表明,2种抗体在胞质和核组分中均可以检测到一个19 ku的蛋白,与α-SYN的表观分子质量一致。结论α-SYN免疫活性物质不仅存在于脑神经元的突触前神经末梢,而且也存在于核中,但识别不同表位的抗体对不同亚细胞部位的α-SYN的结合能力不同。

关键词： α-突触核蛋白细胞核神经元大鼠

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parkin基因启动子区-258T/G多态性增加晚发帕金森病的发病风险

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中华神经科杂志 2004年第2期37卷 122-125页

作者：邹海强陈彪冯秀丽李昕董秀敏首都医科大学宣武医院神经内科北京100053 北京老年病研究所神经生物学研究室

目的　探讨parkin基因启动子区 - 2 5 8T/G多态性位点与帕金森病 (Parkinson’sdisease,PD)的相关性 ,尤其是该多态与PD发病年龄的关系。方法　应用聚合酶链反应 (PCR)、变性高效液相和测序等方法分析parkin基因 - 2 5 8T/G多态性位点... 详细信息

目的　探讨parkin基因启动子区 - 2 5 8T/G多态性位点与帕金森病 (Parkinson’sdisease,PD)的相关性 ,尤其是该多态与PD发病年龄的关系。方法　应用聚合酶链反应 (PCR)、变性高效液相和测序等方法分析parkin基因 - 2 5 8T/G多态性位点在PD患者和健康对照间分布频率的差异。结果　检测了 2 99例PD患者和 15 6名健康对照。总体分析发现 ,PD组G等位基因频率和T/G +G/G基因型频率高于对照组 ,但差异无显著意义。将PD组按年龄分层后 ,6 0岁以上PD患者parkin基因 -2 5 8T/G多态G等位基因频率 (5 6 6 % )明显高于健康对照组 (4 2 6 % ) ,OR =1 76 ,95 %CI为 1 15～2 6 9(P =0 0 0 6 4 ) ,而 6 0岁以下发病者与对照相比差异无显著意义。相应的基因型频率 (T/G +G/G)在 6 0岁以上发病PD组为 80 9% ,对照组为 6 9 9% ,两者虽未达统计学差异 ,但PD组明显高于对照组。OR =1 82 ,95 %CI为 0 87～ 3 88。年龄分层后的趋势分析显示相对危险度与PD发病年龄间存在正相关联系。结论　研究结果证实 - 2 5 8T/G多态可能是中国人晚发PD的一个危险因素。

关键词： parkin基因启动子区帕金森病 PD 遗传学基因多态性

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α-突触核蛋白调控大鼠线粒体复合体Ⅰ活性

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基础医学与临床 2008年第9期28卷 925-929页

作者：刘光伟殷娟娟李昕谢胜男李尧华于顺首都医科大学宣武医院老年病研究所神经生物学研究室

目的研究α-突触核蛋白(α-SYN)在大鼠不同脑区线粒体的表达及对线粒体呼吸链复合体Ⅰ活性的影响。方法用免疫印迹方法检测不同脑区线粒体中α-SYN表达量的变化并测定α-SYN向分离线粒体的转运;通过观察340nm处NADH吸收值的变化测定线... 详细信息

目的研究α-突触核蛋白(α-SYN)在大鼠不同脑区线粒体的表达及对线粒体呼吸链复合体Ⅰ活性的影响。方法用免疫印迹方法检测不同脑区线粒体中α-SYN表达量的变化并测定α-SYN向分离线粒体的转运;通过观察340nm处NADH吸收值的变化测定线粒体呼吸链复合体Ⅰ的活性。结果线粒体α-SYN在不同脑区的表达量不同。人重组α-SYN与分离线粒体进行孵育后,以剂量依赖的方式转运到线粒体内。将不同浓度人重组α-SYN与线粒体孵育后,线粒体复合体Ⅰ活性下降,并且呈明显的量-效关系。结论线粒体α-SYN在不同脑区的表达量不同。线粒体的α-SYN有可能来源于胞质α-SYN向线粒体的转运,并调节复合体Ⅰ的活性。

关键词： α-突触核蛋白线粒体脑复合体I 大鼠

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基因定量检测方法研究进展

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中华医学遗传学杂志 2007年第1期24卷 76-79页

作者：马慧莉陈彪首都医科大学宣武医院北京老年病研究所神经生物学室、神经内科北京100053

基因定量检测已经成为研究基因组变异以及由于基因重组所引起的相关疾病的重要手段。大片段的基因组的重复和缺失可以引起致病突变。使用PCR和测序等定性检测方法很难探测到杂合状态的缺失和重复，因此探寻高效、可靠、灵敏的基因定量... 详细信息

基因定量检测已经成为研究基因组变异以及由于基因重组所引起的相关疾病的重要手段。大片段的基因组的重复和缺失可以引起致病突变。使用PCR和测序等定性检测方法很难探测到杂合状态的缺失和重复，因此探寻高效、可靠、灵敏的基因定量检测方法是当务之急。在过去的几年中已经相继出现了一些自动高效的技术方法。现在可用的基因定量方法大致可以分成3类：DNA印迹技术，细胞遗传学方法和以PCR扩增为基础的定量。本文对基因定量的最新进展作一综述，探讨其优缺点以期对定量研究方法的选择有所帮助。

关键词：基因定量基因缺失基因重复突变检测

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帕金森病患者的睡眠异常

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中华神经科杂志 2006年第3期39卷 193-195页

作者：刘姝陈彪蔡彦宁李丽萍王玉平首都医科大学北京宣武医院老年病研究所神经生物学室神经内科100053 首都医科大学北京宣武医院老年病研究所神经电生理中心 100053

目的研究帕金森病患者睡眠障碍发生及其特点和影响因素。方法收集患者病史资料并应用多导睡眠仪对10例帕金森病患者及5名健康对照进行多导睡眠监测。受试者分为3组：对照组、帕金森病Hoehn-Yahr（H＆Y）Ⅰ级组及帕金森病H＆YⅡ-Ⅳ级组... 详细信息

目的研究帕金森病患者睡眠障碍发生及其特点和影响因素。方法收集患者病史资料并应用多导睡眠仪对10例帕金森病患者及5名健康对照进行多导睡眠监测。受试者分为3组：对照组、帕金森病Hoehn-Yahr（H＆Y）Ⅰ级组及帕金森病H＆YⅡ-Ⅳ级组。每组均包括男性3例，女性2例。结果3组年龄分别为（54．4±5、7）岁、（57．6±14．5）岁、（58．2±10．7）岁，年龄之间的差异无统计学意义（F=0．232，P=0．794）。对照组浅慢波睡眠时间为（70．6±7．8）min，而H＆YⅠ级组患者浅慢波睡眠时间为（81．4±6．1）min，显著高于对照组（P=0.008）；对照组睡眠效率为75、6％±12．8％，快动眼睡眠（REM）潜伏期为（116±48）min，浅慢波睡眠所占比例为70．6％±7、8％，REM所占比例为14．8％±5．5％，总睡眠时间为（372．8±53．4）min，而H＆YⅡ～Ⅳ级组患者睡眠效率43．6％±16．0％（P=0．003）、REM所占比例7．3％±6．1％（P=0．003）及总睡眠时间（244．3±103．2）min（P=0．006）均显著低于对照组，REM睡眠潜伏期（281±86）min（P=0．000）及浅慢波睡眠时间（85．3±7．9）min（P=0．000）显著高于对照组。经相关分析，睡眠潜伏期、浅慢波睡眠时间与疾病病程存在显著正相关（r分别为0．889、o．492；P值分别为0．000、0．006），而睡眠效率、深慢波睡眠时间及总睡眠时间与疾病病程有显著负相关（r分别为-0．626、-0．723、-0．728：P值均为0．000）。结论研究结果显示，帕金森病患者在患病早期已经存在夜间睡眠时间减少、睡眠效率下降、睡眠潜伏期延长及睡眠结构的改变等异常，而且有随疾病进展而加重的趋势。

关键词：帕金森病多导睡眠描记术睡眠障碍睡眠结构

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Parkin基因新的多态位点IVS3-20 T→C增加早发性帕金森病的发病风险

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中华医学遗传学杂志 2004年第3期21卷 219-223页

作者：邹海强陈彪马秋兰李昕杨静芳冯秀丽董秀敏李勇杰首都医科大学宣武医院神经内科北京老年病研究所神经生物学研究室北京100053

目的　确定 parkin基因第 3内含子区新的多态位点 IVS3- 2 0 T→ C多态与帕金森病( Parkinson's disease,PD)的相关性 ,尤其是该多态与 PD发病年龄的关系。方法　经 PCR扩增后 ,用变性高效液相色谱和 DNA自动测序等方法分析了 312例... 详细信息

目的　确定 parkin基因第 3内含子区新的多态位点 IVS3- 2 0 T→ C多态与帕金森病( Parkinson's disease,PD)的相关性 ,尤其是该多态与 PD发病年龄的关系。方法　经 PCR扩增后 ,用变性高效液相色谱和 DNA自动测序等方法分析了 312例 PD患者和 2 36名正常对照 parkin基因 IVS3- 2 0 T→C多态性位点分布频率的差异。结果　总体分析未发现 C/C纯合型 ,PD组 T/C基因型频率和 C等位基因频率与对照组相比有明显升高 ,但差异无显著性。将 PD组按年龄分层后 ,4 5岁以下 PD患者 IVS3- 2 0 T→C多态 T/C基因型频率 ( 7.0 7% )明显高于正常对照组 ( 2 .12 % ) ,OR=3.5 2 ,95 % CI为 0 .97～ 13.13( P=0 .0 2 6 3)。 C等位基因频率 ( 3.90 % )也明显高于正常对照组 ( 1.0 6 % ) ,OR=3.4 2 ,95 % CI为 0 .96～ 12 .5 7( P=0 .0 2 76 )。而 4 5岁以上 PD组与正常对照组相比差异无显著性。年龄分层后的趋势分析显示 parkin基因 IVS3- 2 0 T/C多态性相对危险度与 PD发病年龄间存在负相关联系。结论　发现了 parkin基因 IVS3- 2 0T→C多态位点 ,并提示 IVS3- 2 0 T→ C多态位点可能是中国人散发性早发

关键词： Parkin基因多态位点 IVS3-20T→C 早发性帕金森病发病风险

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利用巢式聚合酶链反应检测单个胚胎小体细胞中时钟基因的表达

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基础医学与临床 2006年第12期26卷 1313-1318页

作者：关云谦蔡彦宁谢淑朱宛宛徐艳玲张愚陈彪首都医科大学宣武医院老年病研究所细胞治疗室北京100053 首都医科大学宣武医院老年病研究所神经生物学室北京100053

目的建立一组灵敏的检测时钟基因(c lock gene)的巢式聚合酶链反应(nested PCR)方法,并检测小鼠胚胎小体(EB)来源的单细胞中重要时钟基因的表达情况。方法培养小鼠胚胎干细胞(mESC),体外诱导分化为EB,提取总RNA并进行反转录,用BMAL1、CL... 详细信息

目的建立一组灵敏的检测时钟基因(c lock gene)的巢式聚合酶链反应(nested PCR)方法,并检测小鼠胚胎小体(EB)来源的单细胞中重要时钟基因的表达情况。方法培养小鼠胚胎干细胞(mESC),体外诱导分化为EB,提取总RNA并进行反转录,用BMAL1、CLOCK、CRY1和CRY2基因特异引物进行巢式聚合酶链反应,电泳检测扩增产物,从而建立相应的巢式PCR反应体系。利用膜片钳获取胚胎小体来源的单个细胞,通过巢式PCR反应检测相应时钟基因的表达情况。结果确定了BMAL1、CLOCK、CRY1和CRY2基因的扩增参数。证明在此条件下无非特异扩增,并且能够检测到至少两个拷贝的目的分子。利用此检测体系发现,部分胚胎小体细胞中BMAL1、CLOCK、CRY1和CRY2时钟基因环路不完整。结论巢式PCR方法能够灵敏地、而且特异地从单细胞中检测出一组时钟基因的表达,时钟基因的转录在胚胎小体细胞中并不一致,即时钟基因的环路不完整。时钟基因可能在细胞分化过程中发挥着某种作用。

关键词：胚胎小体巢式聚合酶链反应时钟基因单细胞

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神经营养因子基因修饰的神经干细胞在帕金森病大鼠模型中的治疗作用

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中华老年医学杂志 2010年第1期29卷 58-62页

作者：徐胜利周明陈彪首都医科大学宣武医院北京市老年病研究所神经生物学研究室 100053

目的观察人胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）转染的大鼠神经于细胞移植对帕金森病（PD）模型大鼠的治疗作用。方法制备PD大鼠模型并将成功模型分为PD模型组、神经干细胞组和GDNF基因修饰神经干细胞组。细胞移植后，动态观察动物行为学... 详细信息

目的观察人胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）转染的大鼠神经于细胞移植对帕金森病（PD）模型大鼠的治疗作用。方法制备PD大鼠模型并将成功模型分为PD模型组、神经干细胞组和GDNF基因修饰神经干细胞组。细胞移植后，动态观察动物行为学变化，定量分析黑质多巴胺能神经元、纹状体多巴胺及其代谢产物的变化。结果GDNF基因修饰神经于细胞移植能有效改善实验动物的行为学表现，细胞移植后第5周时，PD模型组、神经干细胞组和GDNF基因修饰的神经于细胞组90min内的旋转圈数分别为（993．9±159．1）圈、（956．7±136．3）圈和（433．6±100．9）圈，GDNF基因修饰的神经干细胞组可显著减少PD模型大鼠向损伤侧旋转的圈数（F=95．694，P=0．000）；第7周时，PD模型组的90min内的旋转圈数为（964．2±152．0）圈，神经干细胞对照组和GDNF基因修饰的神经干细胞组分别为（909．2±136．3）圈和（399．4±84．4）圈（F=106．134，p=0．000）；第9周时，PD模型组、神经干细胞组和GDNF基因修饰的神经干细胞组90min内的旋转圈数分别为（909．5±152．2）圈、（865．5±129．1）圈和（312．2±63．7）圈（F=151．100，P=0．000）。GDNF基因修饰神经于细胞移植能有效提高损伤侧纹状体内的多巴胺及其代谢产物水平，PD模型组、神经干细胞组和GDNF基因修饰干细胞组毒素注射侧多巴胺含量分别为（3．3±0．3）ng／mg组织、（3．7±1．3）ng／mg组织和（7．5±0．8）ng／mg组织，GDNF基因修饰的干细胞组多巴胺水平明显高于神经干细胞组和PD模型组（F--59．543，P一0．000）；GDNF基因修饰神经干细胞组二羟基苯乙酸水平明显高于神经干细胞组和PD模型组，分别为（o．9±0．1）ng／mg组织、（0．6±0．2）ng／mg组织和（0．5±0．1）ng／mg组织（F一17．293，P一0．000）；PD模型组、神经干细胞组和GDNF基因修饰干细胞组毒素注射侧高香草酸（HVA）水平分别为（0．5±0．1）ng／mg组织、（0．6±0．2）ng／mg组织和（o．9±0．1）ng／mg组织，GDNF基因修饰神经干细胞组HVA水平明显高于神经干细胞组和PD模型组（F=35．175，P=0．000）。结论GDNF基因修饰神经干细胞移植能有效改善损伤黑质-纹状体的多巴胺系统功能，GDNF基因治疗具有潜在的临床应用价值。

关键词：帕金森病胶质细胞源性神经营养因子干细胞移植基因疗法

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急性重复低氧对小鼠脑组织血氧饱和度、线粒体功能以及ATP水平的影响

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中国病理生理杂志 2008年第4期24卷 755-758页

作者：谢胜男李昕李尧华刘耀波于顺首都医科大学宣武医院老年病研究所神经生物学研究室首都医科大学宣武医院低氧医学研究所北京100053

目的:探讨急性重复低氧对脑组织血氧饱和度与线粒体功能的影响。方法:将BALB/c小鼠置于低氧密闭罐中,通过小鼠呼吸消耗罐内氧造成罐内低氧,以小鼠出现喘呼吸为低氧耐受极限,然后将小鼠转到另一低氧密闭罐中,依此类推,连续进行5次低氧。... 详细信息

目的:探讨急性重复低氧对脑组织血氧饱和度与线粒体功能的影响。方法:将BALB/c小鼠置于低氧密闭罐中,通过小鼠呼吸消耗罐内氧造成罐内低氧,以小鼠出现喘呼吸为低氧耐受极限,然后将小鼠转到另一低氧密闭罐中,依此类推,连续进行5次低氧。记录小鼠每次的缺氧耐受时间、局部脑组织血氧饱和度,测定每次低氧暴露结束时的脑组织的线粒体复合体I活性和ATP含量。结果:小鼠的缺氧耐受时间随缺氧暴露次数增加而显著延长。脑组织血氧饱和度在第1、2次缺氧暴露时急剧下降,但在第3、4、5低氧暴露时先小幅度下降再逐渐恢复至正常水平,然后再缓慢降低。脑组织线粒体复合体I的活性随着缺氧次数的增加逐渐被抑制,ATP含量在第1次低氧暴露结束时低于正常水平,在第3、5次低氧暴露结束时高于正常水平。结论:急性重复低氧导致脑组织血氧饱和度降低的速度减慢、线粒体功能抑制以及脑组织ATP水平增高,后者很可能是动物脑组织耐缺氧能力增强的重要机制。

关键词：低氧小鼠脑线粒体氧饱和度

来源：评论

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