检索结果-内蒙古大学图书馆

解剖学报 2007年第3期38卷 286-290页

作者：陈秀莲陈瑞于培兰孙林古同男周秀艳首都医科大学基础医学院生化与分子生物学系首都医科大学燕京医学院生物化学教研室北京101300

目的观察小鼠脑缺血再灌注以及高压氧治疗后海马脑红蛋白表达的变化,探讨高压氧对脑红蛋白表达的影响及其意义。方法雌性C57BL/6N小鼠随机分为假手术对照组、缺血再灌注48h组(48h I/R组)及缺血再灌注48h加高压氧治疗组(48h HBO组)。对... 详细信息

目的观察小鼠脑缺血再灌注以及高压氧治疗后海马脑红蛋白表达的变化,探讨高压氧对脑红蛋白表达的影响及其意义。方法雌性C57BL/6N小鼠随机分为假手术对照组、缺血再灌注48h组(48h I/R组)及缺血再灌注48h加高压氧治疗组(48h HBO组)。对各组小鼠脑组织神经元进行HE及免疫组织化学染色、图像学分析及统计学处理。结果48h I/R组及48h HBO组的脑红蛋白表达均高于假手术组(P<0.01和P<0.001),48hHBO组吸光度高于48h I/R组(P<0.01)。结论高压氧对缺血性脑损伤有显著治疗作用,提高脑红蛋白的表达水平可能是其治疗的机制之一。

关键词：高压氧脑红蛋白脑缺血-再灌注免疫组织化学小鼠

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微波辐照对小鼠脑内MDA、DA和NE含量及NOS活性的影响

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基础医学与临床 2004年第3期24卷 350-351页

作者：侯燕芝陈瑞陈安宇于培兰史小苓孙林王锐首都医科大学基础医学院生物化学教研室北京100054 首都医科大学基础医学院生物医学工程系医学仪器教研室北京100054

近年来，微波辐照对人体健康的影响越来越受到医学界的关注。有研究表明2 450MHz微波具有较强的生物学效应为探讨短促但持续多天的微波辐照对机体的损伤机制，我们分别选用了频率2 450、900、450和45MHz，功率密度100mW／cm~2的微波，每... 详细信息

近年来，微波辐照对人体健康的影响越来越受到医学界的关注。有研究表明2 450MHz微波具有较强的生物学效应为探讨短促但持续多天的微波辐照对机体的损伤机制，我们分别选用了频率2 450、900、450和45MHz，功率密度100mW／cm~2的微波，每日3次，每次1．5s，连续照射小鼠90d，观察了这些条件下微波辐照对小鼠脑内多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)丙二醛(MDA)含量和一氧化氮合酶(NOS)活性的影响。

关键词：微波辐照小鼠脑内MDA DA NE 含量 NOS活性生物学效应损伤机制

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裸质粒与脂质体介导转染方法对大鼠平滑肌细胞CYP2J3基因表达的影响

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首都医科大学学报 2009年第4期30卷 481-485页

作者：常静曾翔俊王红霞穆晶刘琨王瑛李珊珊张立克首都医科大学基础医学院病理生理学教研室首都医科大学基础医学院生物化学教研室

目的比较脂质体介导法和裸质粒直接转染法导入CYP2J3基因表达的效率。方法将CYP2J3真核表达质粒导入原代培养大鼠平滑肌细胞,用半定量RT-PCR方法检测CYP2J3 mRNA表达,Western blotting方法测定CYP2J3蛋白表达,高效液相色谱法测定培养液1... 详细信息

目的比较脂质体介导法和裸质粒直接转染法导入CYP2J3基因表达的效率。方法将CYP2J3真核表达质粒导入原代培养大鼠平滑肌细胞,用半定量RT-PCR方法检测CYP2J3 mRNA表达,Western blotting方法测定CYP2J3蛋白表达,高效液相色谱法测定培养液11,12-EET含量。实验分为裸质粒转染组(2J3)、脂质体介导转染组(L2J3)和对照组,转染后24h和48h收集细胞。结果转染后24h,2个转染组CYP2J3 mRNA表达均较对照组明显增高,差异有统计学意义(P<0.01);L2J3组蛋白含量较对照组低,差异有统计学意义(P<0.01),2J3组蛋白含量较L2J3组高,差异有统计学意义(P<0.05)。培养液11,12-EET含量在3组间差异无统计学意义。转染后48h2个转染组CYP2J3 mRNA表达较24h时弱,但仍较对照组高,脂质体转染组较裸质粒转染组CYP2J3 mRNA表达增强;2J3组及L2J3组蛋白含量均较对照组低,差异有统计学意义(P<0.01);2个转染组培养液中11,12-EET浓度较对照组高,脂质体转染组表达高于裸质粒转染组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论裸质粒直接转染能成功导入CYP2J3基因并表达产物。

关键词：细胞色素P450单氧化酶 CYP2J3 裸质粒基因转染环-二十碳三烯酸

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单纯疱疹病毒Ⅱ型感染极早期对离体人动脉平滑肌细胞原癌基因c-sis及c-myc表达的影响

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中国循环杂志 1999年第2期14卷 88-90页

作者：唐槐静段胜仲洪嘉玲湖北医科大学基础医学院生物化学教研室首都医科大学生物化学教研室中国医学科学院肿瘤研究所

目的：观察单纯疱疹病毒Ⅱ型（ＨＳＶ－２）感染极早期对离体人动脉平滑肌细胞（ｈＡＳＭＣ）原癌基因ｃ－ｓｉｓ及ｃ－ｍｙｃ表达的影响。方法：采用不同感染剂量的ＨＳＶ－２吸附单层ｈＡＳＭＣ１小时作为病毒感染细胞模型，应用Ｎｏ... 详细信息

目的：观察单纯疱疹病毒Ⅱ型（ＨＳＶ－２）感染极早期对离体人动脉平滑肌细胞（ｈＡＳＭＣ）原癌基因ｃ－ｓｉｓ及ｃ－ｍｙｃ表达的影响。方法：采用不同感染剂量的ＨＳＶ－２吸附单层ｈＡＳＭＣ１小时作为病毒感染细胞模型，应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交方法观察上述原癌基因表达。结果：病毒吸附细胞后０分钟、３０分钟、６０分钟，病毒感染组［５感染复数（ＭＯＩ）和１０ＭＯＩ；ＭＯＩ＝空斑形成单位／细胞数（ＰＦＵ／细胞数）］均比对照组的原癌基因ｃ－ｓｉｓ、ｃ－ｍｙｃ表达增加，且基因表达与感染时间也有关。结论：ＨＳＶ－２感染可以诱导ｈＡＳＭＣ原癌基因ｃ－ｓｉｓ、ｃ－ｍｙｃ表达增加，该作用可能是病毒促进ｈＡＳＭＣ异常增殖进而参与动脉粥样硬化或血管成形术后再狭窄形成的分子机制之一。

关键词：单纯疱疹病毒感染动脉平滑肌细胞原癌基因

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肿瘤病毒诱导细胞异常增殖作用机制的研究进展

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病毒学报 2000年第1期16卷 90-93页

作者：唐槐静段胜仲洪嘉玲姚学军湖北医科大学基础医学院生物化学教研室武汉430071 首首都医科大学生物化学教研室北京100054 湖北医科大学病毒学研究所细胞生物室

肿瘤是当前危害人类健康最严重的疾病,它以细胞增殖为主要病变特征.自从1911年Rous发现鸡肉瘤病毒可以使鸡发生白血病,人们就将病毒与肿瘤联系起来.本文就肿瘤病毒诱导细胞异常增殖作用机制方面分两部分进行阐述.

关键词：肿瘤病毒细胞异常增殖分子机制

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用于脑缺血小鼠海马SOD1表达的改进灌注固定法

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动物学杂志 2007年第4期42卷 70-74页

作者：李宝红贺旭于培兰马惠苹孙林陈瑞鄢雯首都医科大学生化系细胞与分子生物学教学实验中心北京100069 首都医科大学燕京医学院生物化学教研室北京101300

常规灌注固定法多用于兔和大鼠等较大动物,并存在一些不足。改进了灌注固定法流程、灌注溶液的配方、流速、用量以及灌注装置,将其用于在显微操作下制备的缺血再灌注C57BL/6N小鼠模型,并对其海马进行H.E染色和免疫组织化学SOD1基因表达... 详细信息

常规灌注固定法多用于兔和大鼠等较大动物,并存在一些不足。改进了灌注固定法流程、灌注溶液的配方、流速、用量以及灌注装置,将其用于在显微操作下制备的缺血再灌注C57BL/6N小鼠模型,并对其海马进行H.E染色和免疫组织化学SOD1基因表达。结果显示,改进的灌注固定法使组织切片结构更加清晰,海马免疫阳性神经元定位于胞浆。缺血再灌注组(24hI/R)海马神经元SOD1表达比假手术对照组(sham-o)减少,而高压氧治疗组(24hHBO)SOD1表达有所恢复。表明改进的灌注固定法用于缺血再灌注C57BL/6N小鼠海马SOD1基因表达效果良好,结果可靠。实验结果提示,高压氧的治疗机制之一可能是通过增加SOD1基因表达而实现的。

关键词： C57 BL/6N小鼠缺血再灌注免疫组织化学超氧化物歧化酶-1(SOD1) 高压氧灌注固定

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人源性Notch1跨膜段真核表达载体的构建及鉴定

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首都医科大学学报 2009年第4期30卷 500-503页

作者：张凯举余和芬张玉祥首都医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系教研室

目的构建人源性Notch1跨膜段(notch1 transmembrane domain,NTM)真核表达载体pcDNA3-NTM,并观察其在真核细胞中的表达。方法通过反转录-聚合酶链反应从人胰腺癌细胞系BxPC3细胞中获得编码Notch1跨膜段的cDNA,定向克隆至C端带flag蛋白标... 详细信息

目的构建人源性Notch1跨膜段(notch1 transmembrane domain,NTM)真核表达载体pcDNA3-NTM,并观察其在真核细胞中的表达。方法通过反转录-聚合酶链反应从人胰腺癌细胞系BxPC3细胞中获得编码Notch1跨膜段的cDNA,定向克隆至C端带flag蛋白标签序列的真核表达载体pcDNA3中,经酶切和测序鉴定正确后,应用脂质体法转染HeLa细胞,并通过蛋白免疫印迹法检测细胞内Notch1跨膜区的表达。结果构建了真核表达载体pcDNA3-NTM,将其转染HeLa细胞48h后,蛋白免疫印迹法检测到细胞内Notch1跨膜段的表达显著增高。结论成功构建了真核表达载体pcDNA3-NTM,为研究Notch信号的活化机制及其在胰腺癌发生发展中的作用奠定了基础。

关键词： Notch信号 NTM 人胰腺癌真核表达载体

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双抗体夹心法检测3-硝基酪氨酸方法的建立及应用

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中国应用生理学杂志 2009年第4期25卷 569-572页

作者：闫莉许言午王晓梁武烨田珏杨光照马秀瑞刘慧荣山西医科大学生理学教研室山西太原030001 上海中医药大学基础医学院生物化学教研室上海201203 首都医科大学病理生理学教研室北京100069

目的:建立一种准确、快速的双抗体夹心酶免疫吸附的方法,以定量检测组织中过氧亚硝基阴离子的水平。方法:分别以小鼠源性抗3-硝基酪氨酸单克隆IgG抗体和兔源性抗3-硝基酪氨酸IgG抗体为包被抗体和检测抗体,采用正交设计方法摸索以上各抗... 详细信息

目的:建立一种准确、快速的双抗体夹心酶免疫吸附的方法,以定量检测组织中过氧亚硝基阴离子的水平。方法:分别以小鼠源性抗3-硝基酪氨酸单克隆IgG抗体和兔源性抗3-硝基酪氨酸IgG抗体为包被抗体和检测抗体,采用正交设计方法摸索以上各抗体的浓度,建立定量检测3-硝基酪氨酸(3-NT)的双抗体夹心ELISA法。同时,测定心肌缺血再灌注大鼠心肌组织3-NT的含量。结果:本研究建立的双抗体夹心ELISA法检测3-NT的最低检测下限为0.10 ***-1,具有良好线性关系的检测范围是(0.15～7.50)***-1(r2=0.995);心肌缺血再灌注组大鼠的心肌组织中的3-NT水平为(1022.42±97.35)*** pro-1,明显高于假手术组(246.58±56.52 *** pro-1,P<0.01)。结论:本研究建立的定量检测3-NT的双抗体夹心ELISA法能够方便、准确、快速地检测组织中3-NT的含量,为定量检测组织中ONOO-的水平提供了新的方法。

关键词：过氧亚硝基阴离子硝基化酪氨酸酶联免疫吸附测定

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E2F1介导8-氯-腺苷引起的人肺癌细胞H1299的凋亡

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中国生物化学与分子生物学报 2008年第9期24卷 861-865页

作者：冯丽艳杨生永安国顺李淑艳倪菊华贾弘禔首都医科大学生物化学与分子生物学系北京100069 重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆400016 北京大学医学部生物化学与分子生物学系北京100083

8-氯-腺苷(8-Cl-adenosine,8-Cl-Ado)可诱导人非小细胞性肺癌细胞H1299发生凋亡,但其分子机制还没有阐明.首先用四唑盐(MTT)比色法检测了8-Cl-Ado对H1299细胞的生长抑制作用.进一步采用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测了8-Cl-Ad... 详细信息

8-氯-腺苷(8-Cl-adenosine,8-Cl-Ado)可诱导人非小细胞性肺癌细胞H1299发生凋亡,但其分子机制还没有阐明.首先用四唑盐(MTT)比色法检测了8-Cl-Ado对H1299细胞的生长抑制作用.进一步采用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测了8-Cl-Ado处理H1299细胞后,procaspase-3的激活情况以及E2F1的蛋白水平.通过用pcDNA-HA-E2F1表达载体和pSUPER-E2F1 RNA干扰载体分别转染H1299细胞,研究在E2F1过表达和RNA干扰(RNAinterference,RNAi)两种情况下对凋亡的影响.实验结果表明,8-Cl-Ado可抑制H1299细胞的生长,激活凋亡关键执行蛋白procaspase-3,升高E2F1蛋白水平.当E2F1过表达后,同时伴有procaspase-3的激活,而E2F1表达受到抑制后,与对照相比,8-Cl-Ado引起的procaspase-3的激活被明显抑制,说明E2F1介导8-Cl-Ado引起的人肺癌细胞H1299的凋亡.

关键词： 8-氯-腺苷 E2F1 凋亡非小细胞性肺癌

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AXIN2罕见变异与人类神经管畸形的相关性研究

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陆军军医大学学报 2023年第24期45卷 2503-2511页

作者：徐雪冰李建婷包怡华郭金王芳张霆杨淑艳潍坊医学院临床医学院儿科学教研室山东潍坊261053 山西医科大学生物化学与分子生物学教研室太原030001 首都儿科研究所生化免疫研究室北京100020

目的探索AXIN2基因变异与神经管畸形(neural tube defects,NTDs)发生的相关性。方法收集2004年6月-2013年12月山西省9家医院引产的100例NTDs胎儿肌肉组织样本,对其全基因组测序结果中的AXIN2基因的变异进行生物信息学分析,在相应的样本... 详细信息

目的探索AXIN2基因变异与神经管畸形(neural tube defects,NTDs)发生的相关性。方法收集2004年6月-2013年12月山西省9家医院引产的100例NTDs胎儿肌肉组织样本,对其全基因组测序结果中的AXIN2基因的变异进行生物信息学分析,在相应的样本中利用Sanger测序证实变异结果。在NE-4C细胞系中转染AXIN2野生型及AXIN2变异型质粒,利用免疫荧光和蛋白免疫印迹实验进行基因功能验证,对携带AXIN2变异的人NTDs样本进行分析。结果在100例NTDs样本中发现AXIN2基因上有5种变异,对其中3种变异[c.959A>T(p.D320V)、c.1250C>T(p.A417V)和c.1634G>A(p.G545E)]进行功能验证。细胞蛋白免疫印迹实验表明,D320V(P<0.05)和G545E(P<0.001)变异下调AXIN2蛋白表达,但3种变异均不影响β-catenin蛋白表达水平;免疫荧光实验表明,3种变异不影响AXIN2蛋白的亚细胞定位。在携带D320V及G545E变异的NTDs胚胎肌肉组织中,AXIN2的蛋白表达水平显著低于对照[D320V(P<0.05),G545E(P<0.01)]。结论NTDs样本中鉴定到的AXIN2变异D320V及G545E下调AXIN2蛋白表达量,可能通过引起Wnt信号通路异常激活而导致神经管畸形的发生。

关键词：神经管畸形 AXIN2 遗传变异 Wnt信号通路

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