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晚期糖基化终产物受体和低密度脂蛋白受体相关蛋白在慢性脑血流低灌注大鼠皮层和海马的改变

解剖学报 2009年第2期40卷 204-210页

作者：刘宏邢安凤刘国贞李良首都医科大学基础医学院病理学教研室北京100069 首都医科大学燕京医学院组织胚胎学教研室北京101300

目的研究慢性脑血流低灌注对脑内受体介导的β-淀粉样肽（Aβ）转运蛋白晚期糖基化终产物受体（RAGE）和低密度脂蛋白受体相关蛋白1（LRP-1））含量及分布的影响。方法采用双侧颈总动脉永久性结扎大鼠模型,应用免疫组织化学和免疫印迹... 详细信息

目的研究慢性脑血流低灌注对脑内受体介导的β-淀粉样肽（Aβ）转运蛋白晚期糖基化终产物受体（RAGE）和低密度脂蛋白受体相关蛋白1（LRP-1））含量及分布的影响。方法采用双侧颈总动脉永久性结扎大鼠模型,应用免疫组织化学和免疫印迹方法对脑内RAGE和LRP-1进行定位和定量检测。结果免疫组织化学结果显示,与对照组相比,RAGE在皮层及海马组织中血管内皮细胞上的表达从低灌注10d起增多,而神经元上表达从低灌注30d起减少,且这种变化一直持续到低灌注180d;LRP-1的分布变化则与之相反。免疫印迹结果显示,皮层和海马中RAGE含量在低灌注术后10d即开始明显增加,且在缺血的不同时间点与相应的对照组比较都明显增多（P〈0.05）;LRP-1变化较晚,在缺血180d时明显增多（P〈0.05）。结论慢性脑血流低灌注可使RAGE、LRP-1在脑组织中的表达增高,同时在神经元、血管中的分布发生改变,这种变化可导致Aβ在脑内的聚集,可能在阿尔茨海默病（AD）早期发病过程中起重要作用。

关键词：晚期糖基化终产物受体低密度脂蛋白受体相关蛋白1 慢性脑血流低灌注 β-淀粉样肽阿尔茨海默病免疫组织化学免疫印迹法大鼠

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胶原蛋白具有促进肿瘤相关巨噬细胞向M1型极化的作用

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解剖学报 2019年第4期50卷 445-450页

作者：苏小薇吴波孙海梅杜雅兰周德山季凤清首都医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室

目的以临床结直肠肿瘤患者标本和原位癌小鼠模型以及小鼠腹腔巨噬细胞为研究对象,探讨结直肠肿瘤微环境中胶原蛋白促进肿瘤相关巨噬细胞极化的作用。方法应用免疫荧光染色检测结直肠癌患者肿瘤组织巨噬细胞的分布,检测原位癌模型小鼠肿... 详细信息

目的以临床结直肠肿瘤患者标本和原位癌小鼠模型以及小鼠腹腔巨噬细胞为研究对象,探讨结直肠肿瘤微环境中胶原蛋白促进肿瘤相关巨噬细胞极化的作用。方法应用免疫荧光染色检测结直肠癌患者肿瘤组织巨噬细胞的分布,检测原位癌模型小鼠肿瘤组织巨噬细胞的量和分布;Masson染色肿瘤组织内胶原纤维。提取小鼠腹腔巨噬细胞,接种于不同浓度Ⅰ型胶原蛋白包被的培养皿,Real-time PCR检测巨噬细胞的肿瘤坏死因子(TNF)、诱导型一氧化氮合酶(i NOS)、CD163、CD206等基因表达。结果人结肠癌组织标本和小鼠原位癌模型可见巨噬细胞主要分布于肿瘤组织的间质,主要为M1型,肿瘤实质部分巨噬细胞主要为M2型;细胞实验表明,胶原蛋白明显促进巨噬细胞向促进炎症抑制肿瘤的M1型巨噬细胞极化,抑制巨噬细胞向促进肿瘤的M2型极化;Masson染色可见间质内含有大量胶原纤维,而肿瘤实质细胞周围胶原纤维较少。结论胶原蛋白具有促进巨噬细胞向M1型极化的作用,而肿瘤实质细胞周围胶原纤维减少,可能与巨噬细胞向M2型极化,发挥促进肿瘤发生发展的作用有关。

关键词： Ⅰ型胶原蛋白巨噬细胞结直肠癌极化实时定量聚合酶链反应人小鼠

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慢性脑血流低灌注对大鼠脑内β-淀粉样肽的影响

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解剖学报 2009年第2期40卷 193-198页

作者：邢安凤任乐荣王珏李良首都医科大学燕京医学院组织学胚胎学教研室北京101300 首都医科大学基础医学院病理学教研室北京100069

目的研究慢性脑血流低灌注对大鼠脑内β-淀粉样肽（Aβ）及淀粉样前体蛋白（APP）表达和分布的影响。方法双侧颈总动脉结扎大鼠制作慢性脑血流低灌注动物模型,应用免疫组织化学方法检测皮质和海马CA1区APP、Aβ1-40、Aβ1-42的表达与分... 详细信息

目的研究慢性脑血流低灌注对大鼠脑内β-淀粉样肽（Aβ）及淀粉样前体蛋白（APP）表达和分布的影响。方法双侧颈总动脉结扎大鼠制作慢性脑血流低灌注动物模型,应用免疫组织化学方法检测皮质和海马CA1区APP、Aβ1-40、Aβ1-42的表达与分布;刚果红染色检测血管的淀粉样变;放射免疫分析法检测手术后10d、30d、90d和180d大鼠脑皮质及海马的Aβ含量;免疫印迹法检测大脑皮质和海马的APP含量。结果免疫组织化学染色显示低灌注90d模型组海马CA1区APP、Aβ1-40的表达较对照组明显增加（两者均P〈0.05）,低灌注180d模型组皮质和海马CA1区APP、Aβ1-40和Aβ1-42的表达均增加（除皮质Aβ1-40P〈0.01外,其余均P〈0.05）;Aβ1-40阳性反应产物均匀分布于胞质内,Aβ1-42阳性反应产物在神经元胞质内呈颗粒状聚集。刚果红染色显示,术后180d脑实质内小血管发生淀粉样改变。放射免疫分析法和免疫印迹法结果显示,大鼠术后90d海马Aβ和APP含量开始增高（两者均P〈0.05）,180d皮质Aβ和APP的含量增高（AβP〈0.05,APPP〈0.01）。结论慢性脑血流低灌注可引发大鼠脑内Aβ含量的升高,可能在阿尔茨海默病（AD）早期发病过程中有重要意义。

关键词：慢性脑血流低灌注阿尔茨海默病 β-淀粉样肽淀粉样前体蛋白免疫组织化学免疫印迹法放射免疫法大鼠

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直接和间接共培养条件下小鼠子宫自然杀伤细胞与树突状细胞相互作用的比较

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中国组织工程研究 2012年第31期16卷 5793-5798页

作者：王景王伟翁静首都医科大学基础医学院组织胚胎学教研室北京市100069 首都医科大学燕京医学院组织胚胎学教研室北京市101300

背景:子宫自然杀伤细胞与树突状细胞可以相互作用,但相互间作用是否必须直接接触还存在不同的观点。目的:对比直接和间接共培养条件下子宫自然杀伤细胞与树突状细胞之间的相互作用,明确两者相互作用的方式。方法:将树突状细胞和子宫自... 详细信息

背景:子宫自然杀伤细胞与树突状细胞可以相互作用,但相互间作用是否必须直接接触还存在不同的观点。目的:对比直接和间接共培养条件下子宫自然杀伤细胞与树突状细胞之间的相互作用,明确两者相互作用的方式。方法:将树突状细胞和子宫自然杀伤细胞进行直接接触共培养,设为直接共培养组;在2种细胞Transwell系统中进行共培养,设为间接共培养组。观察培养细胞的生长状况,酶联吸附法检测培养上清白细胞介素10,12、转化生长因子β细胞因子的浓度,流式细胞术检测各组细胞表面标志CD86的表达情况。结果与结论:与单独培养树突状细胞和子宫自然杀伤细胞相比,直接和间接共培养组培养液上清中白细胞介素10,12、转化生长因子β浓度均增加(P<0.05),尤以白细胞介素10浓度增加明显(P<0.05),CD86的表达明显增高(P<0.05)。直接共培养组白细胞介素10,12和转化生长因子β浓度更高(P<0.05),表达CD86的细胞含量更多(P<0.05)。证实子宫自然杀伤细胞可以促进树突状细胞成熟,而树突状细胞促进子宫自然杀伤细胞的分泌,两者通过细胞间的直接接触而相互作用。

关键词：子宫自然杀伤细胞树突状细胞共培养 Transwell 组织工程

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酪氨酸激酶受体KIT在小鼠结肠黏膜上皮的表达及其功能

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解剖学报 2013年第3期44卷 393-396页

作者：康倩薛红孙海梅李小双张国权梁元晶周德山首都医科大学基础医学院组织学胚胎学教研室北京100069

目的探讨酪氨酸激酶受体KIT在小鼠结肠黏膜上皮的表达及作用。方法应用Western blotting和RT-PCR技术检测c-kit基因及KIT蛋白在野生型C57BL/6小鼠结肠黏膜上皮的表达;用免疫荧光染色显示野生型C57BL/6小鼠以及乙基亚硝酸钠(ENU)诱变的c-... 详细信息

目的探讨酪氨酸激酶受体KIT在小鼠结肠黏膜上皮的表达及作用。方法应用Western blotting和RT-PCR技术检测c-kit基因及KIT蛋白在野生型C57BL/6小鼠结肠黏膜上皮的表达;用免疫荧光染色显示野生型C57BL/6小鼠以及乙基亚硝酸钠(ENU)诱变的c-kit基因点突变纯合子小鼠(Wadsm/m)结肠黏膜上皮KIT阳性细胞的部位;腹腔注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)(30 mg/kg)观察对比野生型以及Wadsm/m小鼠结肠黏膜上皮BrdU掺入情况及动态变化,分析KIT在结肠黏膜上皮更新过程的作用。结果 RT-PCR检测结果表明,在野生型小鼠结肠黏膜组织表达c-kit基因,Western blotting证明在肠黏膜组织存在KIT蛋白;免疫荧光染色显示,KIT阳性细胞位于结肠黏膜上皮,主要位于肠腺隐窝基底部,但是Wadsm/m小鼠KIT阳性细胞数以及KIT蛋白表达量较野生型小鼠明显减少;BrdU掺入实验发现,Wadsm/m小鼠远端结肠黏膜上皮BrdU摄入和更新速度较野生型小鼠明显减慢。结论结肠黏膜上皮表达KIT蛋白与结肠黏膜上皮的更新密切相关。

关键词： KIT 肠上皮更新结肠黏膜免疫印迹法小鼠

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蜕膜自然杀伤细胞在人早孕期基蜕膜和壁蜕膜的分布比较

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首都医科大学学报 2011年第2期32卷 259-262页

作者：王伟王景翁静首都医科大学燕京医学院组织学与胚胎学教研室首都医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室

目的对比蜕膜自然杀伤(decidual natural killer,dNK)细胞在人早孕期同一个体基蜕膜和壁蜕膜中的分布,探讨其在早孕期的可能作用。方法采用HE染色和免疫组织化学方法标记细胞角蛋白7阳性细胞以区分壁蜕膜和基蜕膜,进而检测CD56的表达,... 详细信息

目的对比蜕膜自然杀伤(decidual natural killer,dNK)细胞在人早孕期同一个体基蜕膜和壁蜕膜中的分布,探讨其在早孕期的可能作用。方法采用HE染色和免疫组织化学方法标记细胞角蛋白7阳性细胞以区分壁蜕膜和基蜕膜,进而检测CD56的表达,从而显示壁蜕膜和基蜕膜中dNK细胞的数量。结果基质中有细胞角蛋白7阳性的绒毛外滋养层细胞的是基蜕膜标记;CD56呈阳性反应的dNK细胞在基蜕膜中的数量明显多于(P<0.01)壁蜕膜。结论蜕膜自然杀伤细胞在人正常早孕蜕膜中的分布不同,其可能与滋养层细胞的侵入有关。

关键词：蜕膜自然杀伤细胞基蜕膜壁蜕膜

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有关《人体解剖学》和《组织学与胚胎学》教材所用名词不一致的思考

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解剖学杂志 2014年第1期37卷 122-123页

作者：翁静周德山首都医科大学基础医学院组织胚胎学教研室北京100069

《人体解剖学》和《组织学与胚胎学》是医学基础课程，涉及很多医学名词，这些名词是传递科学概念的重要工具。国内对于解剖学、组织学与胚胎学名词的规范化历来十分重视，进行了多次的修订。为了适应新技术的发展、协调学科间交叉名词... 详细信息

《人体解剖学》和《组织学与胚胎学》是医学基础课程，涉及很多医学名词，这些名词是传递科学概念的重要工具。国内对于解剖学、组织学与胚胎学名词的规范化历来十分重视，进行了多次的修订。为了适应新技术的发展、协调学科间交叉名词，全国自然科学名词审定委员会和中国解剖学会领导下的解剖学名词审定委员会分别在1991年和1993年公布并出版了《人体解剖学名词》、《组织学名词》和《胚胎学名词》^[1-2]。

关键词：《组织学与胚胎学》《人体解剖学》医学名词胚胎学名词解剖学名词教材医学基础课程中国解剖学会

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尿激酶免疫脂质体靶向溶栓治疗兔肺动脉血栓栓塞

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中华心血管病杂志 2009年第11期37卷 1035-1038页

作者：吕翠平杨慧王珏董小黎华北煤炭医学院组织学与胚胎学教研室唐山063000 首都医科大学病理教研室

目的观察以抗纤维蛋白D-二聚体单克隆抗体（DDmAb）为靶向装置的血栓靶向尿激酶（urokinase，UK）免疫脂质体（liposome，Lip）的溶栓效果。方法新西兰大白兔32只，随机分为4组，每组8只，每只兔均采用自体血栓栓子颈静脉注入法建立急... 详细信息

目的观察以抗纤维蛋白D-二聚体单克隆抗体（DDmAb）为靶向装置的血栓靶向尿激酶（urokinase，UK）免疫脂质体（liposome，Lip）的溶栓效果。方法新西兰大白兔32只，随机分为4组，每组8只，每只兔均采用自体血栓栓子颈静脉注入法建立急性肺动脉血栓栓塞模型。各组经股静脉输入不同溶栓剂进行溶栓治疗，通过观察右心室压变化及比较肺内残留栓子评价各组溶栓疗效。4组分别为阴性对照组（输入TBS缓冲液），阳性对照组（输入15万IU／kg UK），UK-Lip组（输入3万IU／kg尿激酶脂质体，反相蒸发法制备），DDmAb—UK-Lip组（输入3万IU／kg尿激酶免疫脂质体，戊二醛交联法连接UK-Lip和DDmAb制备）。结果栓塞后各组右心室压均明显升高（P均〈0．01），平均升高（6．75±6．82）mmHg（1mmHg=0．133kPa）。阴性对照组溶栓结束时右心室压[（40．15±11．22）mmHg]与溶栓即刻[（41．67±14．23）mmHg]相比下降轻微，阳性对照组和DDmAb-UK—Lip组降到与正常近似[阳性对照组和DDmAb—UK—Lip组溶栓结束时与栓塞前右心室压分别为（34．71±8．67）mmHg比（33．98±9．32）mmHg和（30．65±6．67）mmHg比（30．77±6．85）mmHg，P均〉0．05]，UK—Lip组情况居于阴性对照组和阳性对照组及DDmAb—UK—Lip组之间。阳性对照组及DDmAb-UK—Lip组栓子溶解最充分，残留栓子数近似（P〉0．05），UK—Lip组栓子部分溶解，阴性对照组栓子未溶解。阳性对照组的心、肝、肾组织明显出血，其他组内脏未见明显病理学改变。结论DDmAb-UK—Lip治疗急性肺动脉血栓栓塞的尿激酶用量仅为单独应用尿激酶的1／5即达到相似的溶栓效果，且不良反应较少，以DDmAb—UK—Lip进行靶向溶栓可能是肺动脉血栓栓塞的一种理想溶栓方式。

关键词：肺栓塞血栓溶解疗法尿纤溶酶原激活物脂质体

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共沉默miR-221-3p/222-3p表达抑制骨髓间充质干细胞增殖及促成软骨分化

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中国组织工程研究 2015年第50期19卷 8056-8061页

作者：闫继红杨姝孙海梅曹丹丹张秀英季凤清郭多吴波孙婷怡周德山首都医科大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学系组织胚胎学教研室北京市100069

背景:基于干细胞的组织工程技术作为治疗骨关节损伤修复的有效手段,具有广泛的应用前景。研究表明miRNA在调控干细胞向软骨分化过程中具有重要的作用。目的:探讨共感染慢病毒介导的反义miR-221-3p/222-3p(microRNA-221-3p,microRNA-222-... 详细信息

背景:基于干细胞的组织工程技术作为治疗骨关节损伤修复的有效手段,具有广泛的应用前景。研究表明miRNA在调控干细胞向软骨分化过程中具有重要的作用。目的:探讨共感染慢病毒介导的反义miR-221-3p/222-3p(microRNA-221-3p,microRNA-222-3p)对人骨髓间充质干细胞成软骨分化的作用,为临床软骨损伤修复提供新的策略。方法:利用miRNA基因芯片技术筛选转化生长因子β3诱导人骨髓间充质干细胞成软骨分化过程中不同阶段表达差异的miRNA,并利用荧光实时定量PCR(RT-q PCR)验证;构建慢病毒人反义miR-221-3p/222-3p载体(Lv-miR-221-3p-inhibition,Lv-miR-222-3p-inhibition)并共转染人骨髓间充质干细胞,空载体组(Lv-GFP)以及未转染组作为对照。利用CCK-8法检测沉默miR-221-3p/222-3p 6 d后细胞的增殖情况;通过番红O染色法、免疫组织化学方法以及RT-PCR验证各组软骨诱导21 d后软骨分化相关标志物的表达。结果与结论:构建的Lv-miRNA-221-3p/222-3p inhibition共转染人骨髓间充质干细胞,成功沉默了细胞中的miR-221-3p/222-3p表达水平;miRNA基因芯片与RT-q PCR验证结果显示miR-221-3p/222-3p在软骨分化后期表达明显降低;转染组与未转染组以及空载体组相比:1细胞增殖明显受到抑制。2番红O染色以及免疫组织化学显示软骨分化特征标志物硫酸软骨素以及Ⅱ型胶原表达增强。3RT-qPCR也证实硫酸软骨素以及Ⅱ型胶原的mRNA表达也明显上调。结果显示沉默人骨髓间充质干细胞miRNA-221-3p/222-3p,抑制了细胞增殖并促进了成软骨分化。

关键词：骨髓间质干细胞细胞分化微RNAs 组织工程干细胞骨髓干细胞成软骨分化 miR-221-3p miR-222-3p 慢病毒表达载体骨髓间充质干细胞沉默miRNA 国家自然科学基金

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药物流产后子宫出血与蜕膜MMP-3、MMP-9及TIMP-1表达的相关性

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中国妇幼保健 2010年第7期25卷 977-980页

作者：魏静波翁静华北煤炭医学院组织胚胎学教研室河北唐山063000 首都医科大学组织胚胎学教研室

目的:探讨米非司酮药流产后子宫出血与蜕膜基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其抑制物-1(TIMP-1)表达含量变化的关系。方法:选取要求终止妊娠的、停经8周之内的早孕妇女,自愿选择药物流产或人工流产两种方法之一,分... 详细信息

目的:探讨米非司酮药流产后子宫出血与蜕膜基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其抑制物-1(TIMP-1)表达含量变化的关系。方法:选取要求终止妊娠的、停经8周之内的早孕妇女,自愿选择药物流产或人工流产两种方法之一,分为人工流产组、药流不全组、药流完全组各20例。收集3组蜕膜组织采用10%甲醛固定,石蜡包埋,应用免疫组织化学方法检测MMP-3、MMP-9、TIMP-1的表达,图象分析仪定量分析。结果:MMP-3、MMP-9和TIMP-1主要分布于子宫蜕膜上皮细胞、腺上皮及基质细胞的细胞浆内。药流不全出血区MMP-3、MMP-9的表达强度显著增强(P<0.01);TIMP-1的表达强度显著减弱(P<0.01)。结论:米非司酮作用于蜕膜上皮细胞、腺上皮细胞及基质细胞使其表达MMP-3、MMP-9增多,TIMP-1减少,且两者比例失调,导致细胞外基质退化,血管脆性增加,发生出血。

关键词：药物流产子宫出血 MMP-3 MMP-9 TIMP-1

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