检索结果-内蒙古大学图书馆

基础医学与临床 2012年第1期32卷 16-20页

作者：贾焕珍鲁玲玲龚普盛付越姣赵春礼段春礼杨慧首都医科大学神经生物学系北京神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点实验室神经变性病教育部重点实验室北京100069

目的探讨PINK1基因对多巴胺合成的调节作用。方法用高压液相色(HPLC)电化学方法检测多巴胺(DA)含量,用Western blots和Real-Time PCR法检测DA合成限速酶酪氨酸羟化酶(TH)和多巴脱羧酶(DDC)的表达量,通过免疫共沉淀(Co-IP)和免疫组织化... 详细信息

目的探讨PINK1基因对多巴胺合成的调节作用。方法用高压液相色(HPLC)电化学方法检测多巴胺(DA)含量,用Western blots和Real-Time PCR法检测DA合成限速酶酪氨酸羟化酶(TH)和多巴脱羧酶(DDC)的表达量,通过免疫共沉淀(Co-IP)和免疫组织化学染色观察PINK1和TH之间是否存在相互作用。结果 PINK1基因敲减后,细胞内DA水平为5.356±0.536μg/L,显著低于对照组的11.630±1.559μg/L(P<0.05);TH mRNA和蛋白的表达分别为0.371±0.140和0.195±0.062,显著低于对照组的1.009±0.152和0.386±0.044(P<0.05);DDC mRNA和蛋白的表达分别为0.396±0.124和0.149±0.029,显著低于对照组的1.100±0.070和0.323±0.037(P<0.05);免疫荧光化学检测PINK1和TH存在共定位,Co-IP显示PINK1和TH存在相互作用。结论 PINK1可以通过调控DA的合成酶TH和DDC的表达影响DA的合成。

关键词： PINK1 RNA干扰酪氨酸羟化酶 MN9D细胞

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MicroRNA在建立DJ-1基因敲减细胞模型中的应用

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基础医学与临床 2011年第5期31卷 515-519页

作者：赵莎莎鲁玲玲高华吕瓅赵焕英杨慧首都医科大学神经生物学系北京神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点实验室神经变性病教育部重点实验室北京100069

目的与传统的siRNA方法建立基因敲减模型不同,探讨合成microRNA（miRNA）在DJ-1基因敲减细胞模型中的应用。方法构建针对DJ-1基因的合成miRNA载体,合成DJ-1基因的siRNA干扰片段。在脂质体介导下,将上述两种小干扰RNA载体或片段分别转染M... 详细信息

目的与传统的siRNA方法建立基因敲减模型不同,探讨合成microRNA（miRNA）在DJ-1基因敲减细胞模型中的应用。方法构建针对DJ-1基因的合成miRNA载体,合成DJ-1基因的siRNA干扰片段。在脂质体介导下,将上述两种小干扰RNA载体或片段分别转染MN9D细胞系,应用real-time PCR和Western blot检测目的基因DJ-1的mRNA和蛋白表达。结果与对照组相比,转染合成microRNA的MN9D细胞中,DJ-1的mRNA水平下调90%（P〈0.05）,蛋白水平下调70%~85%（P〈0.05）;而转染siRNA的MN9D细胞中,DJ-1的mRNA水平下调50%~70%（P〈0.05）,蛋白水平下调20%~50%（P〈0.05）。结论 microRNA与siRNA均可作为基因敲减的重要研究手段。与传统的siRNA相比,合成microRNA对目的DJ-1的干扰效率更为显著。

关键词： DJ-1 microRNA siRNA RNA干扰

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骨髓干细胞来源的星形胶质细胞参与脑损伤后胶质界膜的形成

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南方医科大学学报 2009年第12期29卷 2391-2393页

作者：邹西峰朱军李建民张海燕赵春礼徐群渊华北煤炭医学院附属医院神经外科河北唐山063000 首都医科大学北京神经科学研究所/北京市神经再生修复研究重点实验室/教育部神经变性疾病学重点实验室北京100069 首都医科大学细胞生物学系北京100069

目的探讨骨髓干细胞来源的星形胶质细胞是否参与脑损伤后胶质界膜的形成。方法将制作好的雌性Sprague-Dawley大鼠脑损伤模型24h后经尾静脉植入GFP标记的雄性Sprague-Dawley大鼠的骨髓源干细胞。在植入后2、4和8周取脑,用GFAP荧光免疫组... 详细信息

目的探讨骨髓干细胞来源的星形胶质细胞是否参与脑损伤后胶质界膜的形成。方法将制作好的雌性Sprague-Dawley大鼠脑损伤模型24h后经尾静脉植入GFP标记的雄性Sprague-Dawley大鼠的骨髓源干细胞。在植入后2、4和8周取脑,用GFAP荧光免疫组织化学方法显示星形胶质细胞,GFP显示骨髓来源细胞,观察损伤组织边缘的胶质界膜中是否存在GFP/GFAP双阳性细胞。结果在损伤组织边缘可见骨髓干细胞来源的星形胶质细胞。结论骨髓干细胞来源星形胶质细胞参与脑损伤后胶质界膜的形成。这对脑外伤的恢复和组织工程材料的植入有重要的意义。

关键词：骨髓源干细胞星形胶质细胞胶质界膜脑损伤绿色荧光蛋白

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基因重组型人SORL1蛋白质片段的原核表达和纯化

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首都医科大学学报 2011年第6期32卷 798-801页

作者：李爽李尧华叶懿文李昕于顺杨慧陈彪首都医科大学宣武医院老年病研究所神经生物学研究室教育部神经变性病重点实验室北京100053 首都医科大学北京神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点实验室教育部神经变性病重点实验室北京100069

目的制备基因重组型人SORL1蛋白质片段,为探讨阿尔茨海默病的发病机制提供实验基础。方法采用PCR方法扩增人sorl1 cDNA编码区5 923～6 260 bp片段,克隆入原核表达载体pET-28a(+)中。用大肠杆菌BL21(DE3)plysS表达重组质粒,用液相色谱法... 详细信息

目的制备基因重组型人SORL1蛋白质片段,为探讨阿尔茨海默病的发病机制提供实验基础。方法采用PCR方法扩增人sorl1 cDNA编码区5 923～6 260 bp片段,克隆入原核表达载体pET-28a(+)中。用大肠杆菌BL21(DE3)plysS表达重组质粒,用液相色谱法纯化基因重组蛋白。结果 PCR扩增产物为358 bp,其ATG和TGA之间的结构与人sorl1 cDNA的5 923～6 260 bp区完全一致。基因重组质粒在大肠杆菌BL21(DE3)plysS中高效表达,其表达产物存在于包涵体组分中。纯化的基因重组蛋白在SDS-PAGE中表现为单一条带,表观分子量约为13 000。结论人sorl1 cDNA的5 923～6 260 bp片段在原核细胞中大量表达,纯化后的基因重组蛋白可尝试用于抗体的制备。

关键词：含L(DLR类)A重复分拣蛋白相关受体基因重组蛋白阿尔茨海默病

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5羟色胺1A受体亚型的内在化研究

5羟色胺1A受体亚型的内在化研究

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中国神经科学学会第四次会员代表大会暨第八届全国学术会议

作者：金艳燕李晓晓吕琼徐志卿北京首都医科大学神经生物学系北京神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点实验室教育部神经变性病重点实验室

目的 5-羟色胺是脑内一类重要的单胺类神经递质。目前的研究认为,5-羟色胺通过与不同受体亚型结合,发挥各种生理及病理作用,参与了对情绪、焦虑、睡眠、体温、食欲、性行为、运动、心血管功能、痛觉等功能的调制。5羟色胺1A型受体亚型（... 详细信息

目的 5-羟色胺是脑内一类重要的单胺类神经递质。目前的研究认为,5-羟色胺通过与不同受体亚型结合,发挥各种生理及病理作用,参与了对情绪、焦虑、睡眠、体温、食欲、性行为、运动、心血管功能、痛觉等功能的调制。5羟色胺1A型受体亚型（5HT1A受体）属于G蛋白偶联受体,激活后可与Gi/o/z蛋白偶联,抑制腺苷酸环化酶的活性,促使神经元K电导增加并发生超极化。本文的目的是运用带有荧光蛋白标记的5HT1A受体,在活细胞内实时观察受体的表达及内在化过程,采用Texas-red转铁蛋白标记细胞内体,并对5HT1A受体的内在化机制做初步探讨。为进一步研究5HT1A受体在细胞内的转运和信号转导机制做准备。方法通过分子克隆方法构建出表达5HT1A-EGFP融合蛋白的真核表达质粒,瞬时转染PC12细胞系中,并通过药物G418筛选,培养出能够稳定表达羧基端带有绿色荧光蛋白标签的5HT1A受体的PC12细胞系。在此基础上,给予细胞浓度在10-4 M的5-HT刺激,分别在0min、5min 30min、60min、120min时间点观察5HT1A-EGFP内在化的过程。结果通过激光共聚焦显微镜的观察,在无药物刺激的情况下,大部分5HT1A-EGFP在PC12细胞膜表面分布。5-HT刺激5min时5HT1A-EGFP仍然在细胞膜表面,没有明显的下膜改变。30min开始,有极少量的细胞出现5HT1A-EGFP内在化,120mim达到最大,内在化率约为10-15%。Texas-red转铁蛋白标记细胞内体,内在化的5HT1A-EGFP在内体与转铁蛋白有共定位。结论我们的结果显示在稳定表达5HT1A-EGFP的PC12细胞系5-HT刺激可引起5HT1A内在化但不明显,且其过程可能是由内体-网格蛋白包被小凹的受体内在化途径介导的。

关键词： G蛋白偶联受体 5羟色胺1A受体内在化网格蛋白

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DJ-1抗氧化应激相关机制及其与帕金森发病的关系

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解剖科学进展 2012年第5期18卷 473-477页

作者：贾娇坤鲁玲玲杨慧首都医科大学 08级七年制临床3班北京100069 首都医科大学基础医学院神经生物学系北京神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点实验室教育部神经变性病学重点实验室北京100069

帕金森病(Parkinson's disease,PD)是一种以黑质纹状体多巴胺能神经元选择性丢失和残存神经元胞质中出现嗜酸性包涵体即Lewy体为典型病理特征的进行性神经变性疾病。DJ-1基因突变后可引起常染色体隐性遗传的早发家族性PD。DJ-1蛋白... 详细信息

帕金森病(Parkinson's disease,PD)是一种以黑质纹状体多巴胺能神经元选择性丢失和残存神经元胞质中出现嗜酸性包涵体即Lewy体为典型病理特征的进行性神经变性疾病。DJ-1基因突变后可引起常染色体隐性遗传的早发家族性PD。DJ-1蛋白的确切功能到目前为止还不清楚,有研究表明,DJ-1可通过自身氧化、调节抗氧化基因的转录,抑制ASK1活性,激活ERK1/2信号通路,阻止线粒体损伤所致的细胞凋亡。本文将主要对DJ-1抗氧化应激相关机制及其与帕金森病的关系简单综述。

关键词： DJ-1蛋白抗氧化应激帕金森病关机 ERK1/2信号通路多巴胺能神经元常染色体隐性遗传发病

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浅谈药理学生创新能力的培养

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中华医学科研管理杂志 2012年第1期25卷 43-44页

作者：潘燕李锋李敏李学军北京大学医学部基础医学院药理学系国家天然药物与仿生药物重点实验室北京大学系统生物学研究所 100191 首都医科大学北京神经科学研究所北京市神经再生及修复研究重点实验教育部神经变性病学重点实验室

药理学是一门实验性很强的学科，注重学生创新能力的培养是极其必要的。本文通过总结药理学理论、实验教学中存在的问题和归纳药理学教学的创新性举措，包括结合药理学实验课教学的验证性和指导性实验，采取开放实验室的创新人才培养方... 详细信息

药理学是一门实验性很强的学科，注重学生创新能力的培养是极其必要的。本文通过总结药理学理论、实验教学中存在的问题和归纳药理学教学的创新性举措，包括结合药理学实验课教学的验证性和指导性实验，采取开放实验室的创新人才培养方案，依靠研究室先进的实验设备、实验手段，让医学生有更多的机会参与到实验中来，充分地发挥学生主动学习和探索问题的能力。实践证明，该培养方案极大地激发了医学生对药理学习和实验研究的兴趣，培养了医学生严谨的科研思维，并使之具备发现问题、解决问题的能力。药理学是临床与基础，医学与药学的桥梁科学。在药理学教学过程中重视学生的综合素质和创新能力的培养，对于培养一名合格的医学生是极其重要的。

关键词：药理学创新能力人才培养

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骨髓干细胞来源的星形胶质细胞参与脑损伤后胶质界膜的形成

骨髓干细胞来源的星形胶质细胞参与脑损伤后胶质界膜的形成

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中华医学会河北省神经外科分会2007年学术会议

作者：邹西峰朱军李建珉张海燕赵春礼高尔静徐群渊华北煤炭医学院附属医院神经外科首都医科大学细胞生物学系首都医科大学北京神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点实验室教育部神经变性疾病学重点实验首都医科大学医学实验与测试中心

目的：探讨骨髓干细胞来源的星形胶质细胞是否参与脑损伤后胶质界膜的形成。方法：将制作好的雌性sprague-Dawley大鼠脑损伤模型24小时后经尾静脉植入GFP标记的雄性Sprague-Dawley大鼠的骨髓源干细胞。在植入后2周、4周组和8周取脑,... 详细信息

目的：探讨骨髓干细胞来源的星形胶质细胞是否参与脑损伤后胶质界膜的形成。方法：将制作好的雌性sprague-Dawley大鼠脑损伤模型24小时后经尾静脉植入GFP标记的雄性Sprague-Dawley大鼠的骨髓源干细胞。在植入后2周、4周组和8周取脑,用GFAP荧光免疫组织化学方法显示星形胶质细胞,GFP显示骨髓来源细胞,观察损伤组织边缘是否存在GFP/GFAP双阳性细胞。结果：在损伤组织边缘可见骨髓干细胞来源的星形胶质细胞。结论：骨髓干细胞来源星形胶质细胞参与脑损伤后胶质界膜的形成。

关键词：绿色荧光蛋白骨髓源干细胞脑损伤星形胶质细胞免疫组织化学

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