检索结果-内蒙古大学图书馆

心肺血管病杂志 2018年第7期37卷 687-691页

作者：李凤娟魏苏宁王绿娅徐国恒首都医科大学附属北京安贞医院-北京市心肺血管疾病研究所教育部心血管重塑相关疾病重点实验室科研基地建设-心血管重大疾病防治协同创新中心 100029 北京大学基础医学院生理学与病理生理学系

目的:研究雌激素减少导致肝细胞脂质沉积的可能机制,为围绝经期女性非酒精性脂肪肝的研究奠定实验基础。方法:采用油酸诱导建立肝细胞脂肪变性模型,设置DMSO对照组、油酸模型组、油酸+雌激素实验组,尼罗红染色法鉴定肝细胞内脂质沉积情... 详细信息

目的:研究雌激素减少导致肝细胞脂质沉积的可能机制,为围绝经期女性非酒精性脂肪肝的研究奠定实验基础。方法:采用油酸诱导建立肝细胞脂肪变性模型,设置DMSO对照组、油酸模型组、油酸+雌激素实验组,尼罗红染色法鉴定肝细胞内脂质沉积情况。免疫荧光染色和蛋白免疫印记实验检测脂滴包被蛋白Perilipin2(Plin2)的表达变化。结果:成功建立油酸诱导肝细胞脂肪变性模型,尼罗红染色可见高亮橘红色的脂滴形成。雌激素剂量依赖性的减少油酸诱导的肝细胞内脂质沉积。免疫荧光染色显示雌激素能够明显抑制油酸诱导的Plin2的表达,荧光信号降低。蛋白免疫印迹实验证实雌激素能够减少Plin2的蛋白表达水平,DMSO对照组、油酸诱导模型组和雌激素实验组Plin2蛋白表达相对光密度分别为0.409±0.051、0.739±0.060、0.438±0.061,雌激素显著性减少了油酸诱导的Plin2的蛋白表达水平(P<0.05)。结论:雌激素能够减少肝细胞内的脂质沉积,可能是通过抑制脂滴包被蛋白Plin2而实现。

关键词：脂滴包被蛋白非酒精性脂肪肝雌激素

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医学研究生在当代医学研究中“代谢组学分析技术平台”应用能力的培养

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继续医学教育 2017年第1期31卷 31-32页

作者：王媛王雪刘燕檀鑫王绿娅杜杰首都医科大学附属北京安贞医院/北京市心肺血管疾病研究所/心血管重塑相关疾病教育部重点实验室/心血管重大疾病防治协同创新中心北京100029

代谢组学分析技术平台目前已广泛的应用于医学以及临床研究的领域。该平台可以对代谢物进行高灵敏度检测和准确定量分析,发现由疾病所引起的体内特征性生物标志物,并将其广泛运用到临床疾病的诊断与研究过程中。培养医学研究生对代谢组... 详细信息

代谢组学分析技术平台目前已广泛的应用于医学以及临床研究的领域。该平台可以对代谢物进行高灵敏度检测和准确定量分析,发现由疾病所引起的体内特征性生物标志物,并将其广泛运用到临床疾病的诊断与研究过程中。培养医学研究生对代谢组学分析技术平台的应用能力,增强其对代谢组学的原理、方法、应用、数据分析的理解和使用,为医学研究生利用代谢组学分析技术平台发现及解决临床疾病的诊断、治疗等建立坚实的基础。

关键词：代谢组学医学研究生科研能力

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新型主动脉夹层免疫缺陷动物模型的建立

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心肺血管病杂志 2017年第4期36卷 309-313页

作者：刘璐鑫王春筱王绿娅杜杰首都医科大学附属北京安贞医院-北京市心肺血管疾病研究所教育部心血管重塑相关疾病重点实验室科研基地建设-心血管重大疾病防治协同创新中心 100029

目的:构建缺乏免疫反应的新型主动脉夹层(AD)动物模型,并研究不同的造模药物剂量,为探讨人源性活性物质在AD发生发展中的作用奠定实验基础。方法:将52只裸鼠随机分为实验组(42只)和对照组(10只)。实验组42只随机分为A、B、C、D四组,使... 详细信息

目的:构建缺乏免疫反应的新型主动脉夹层(AD)动物模型,并研究不同的造模药物剂量,为探讨人源性活性物质在AD发生发展中的作用奠定实验基础。方法:将52只裸鼠随机分为实验组(42只)和对照组(10只)。实验组42只随机分为A、B、C、D四组,使用不同剂量给予β-氨基丙腈(BAPN)饮水28d和血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)皮下灌泵24h;对照组正常饮水28d。每7天测量一次体质量,观察体质量改变;第28天处死存活裸鼠,观察血管直观变化,使用HE和EVG染色观察形态学改变,并计算各组AD形成率及破裂率。结果:对照组无AD形成,实验组部分小鼠可见明显的主动脉扩张及壁内血肿,血管可见内膜撕裂、血细胞进入管壁,弹力纤维紊乱或断裂,证实形成AD。实验A、B、C、D组形成率分别为50%、90%、70%及80%,破裂率分别为41.67%、80%、20%及70%。结论:成功构建简单、方便的主动脉夹层免疫缺陷动物模型,并形成不同的形成、破裂率,以适应不同研究方案。

关键词：主动脉夹层免疫缺陷动物 β-氨基丙腈血管紧张素Ⅱ 动物模型

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内源性凝血物质在急性Stanford A型主动脉夹层围手术期的变化

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心肺血管病杂志 2017年第7期36卷 528-533页

作者：李嘉晨关欣亮刘欧姜文剑王晓龙刘愚勇李海洋兰峰张宏家贡鸣首都医科大学附属北京安贞医院心脏外科-北京市心肺血管疾病研究所心血管疾病精准医学北京实验室教育部心血管重塑相关疾病重点实验室北京大血管疾病诊疗中心北京市大血管外科植入式人工材料工程技术研究中心 100029

目的:揭示接受低温停循环下弓部替换手术的急性Stanford A型主动脉夹层患者围手术期内源性凝血物质的变化情况,寻找纠正围手术期凝血功能障碍的新靶点。方法:收集2013年01月至2015年09月,在北京安贞医院经主动脉造影(CTA)确诊急性Stanfo... 详细信息

目的:揭示接受低温停循环下弓部替换手术的急性Stanford A型主动脉夹层患者围手术期内源性凝血物质的变化情况,寻找纠正围手术期凝血功能障碍的新靶点。方法:收集2013年01月至2015年09月,在北京安贞医院经主动脉造影(CTA)确诊急性Stanford A型主动脉夹层,并接受低温停循环手术的88例患者的血液样本,分别在术前至术后5个标志性时间点,检测具有代表性的内源性凝血物质(凝血因子Ⅻ及Ⅻa,内源性凝血刺激因子前激肽释放酶,缓激肽,高分子激肽原,组蛋白-DNA复合物)的水平,并与外源性凝血物质(凝血因子Ⅶ,凝血因子Ⅶa)的变化规律进行比较。结果:与凝血因子Ⅶ相比,凝血因子Ⅻ从TI^T2表现出更为显著的下降趋势(凝血因子Ⅻ从T1~T2的下降趋势为42%,凝血因子Ⅶ从T1~T2的下降趋势为20%,P<0.001)。凝血因子Ⅶ在T4基本恢复至T1水平(P<0.001),而凝血因子Ⅻ在T4时的水平仍未恢复至T1水平(P=0.01)。缓激肽术前水平即显著高于正常,在术中低温停循环过程中降至最低,随后逐渐升高至术前水平以上,术后4h到达顶峰;其他刺激因子在术前至术后24h,5个时间点则无明显变化趋势(P>0.05)。结论:与凝血因子Ⅶ相比,凝血因子Ⅻ在低温停循环手术中受抑制更显著,术后恢复至术前水平所需时间更长;而作为内源性凝血刺激因子的缓激肽,在围手术期与凝血因子Ⅻ具有相似的变化规律。凝血因子Ⅻ及缓激肽可能成为纠正围手术期凝血功能障碍的新靶点。

关键词：急性主动脉夹层内源性凝血物质凝血因子Ⅻ 低温停循环

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谈精准医学时代“基因组学”在医学研究生培养中的重要性

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中国医药导报 2017年第1期14卷 113-116页

作者：陈欣孙宇郭俊潘胜发北京大学第三医院骨科北京100191 首都医科大学附属北京安贞医院北京市心肺血管疾病研究所心血管重塑相关疾病教育部重点实验室心血管重大疾病防治协同创新中心北京100029

精准医学是医学科学发展趋势,基因组学是实现精准医学的重要手段。常见病、罕见病的基因组学研究及药物基因组学在精准医学时代得到广泛应用。因此,基因组学教学应紧跟学科发展的步伐,使医学研究生既能掌握基因组学的基础知识,又能及时... 详细信息

精准医学是医学科学发展趋势,基因组学是实现精准医学的重要手段。常见病、罕见病的基因组学研究及药物基因组学在精准医学时代得到广泛应用。因此,基因组学教学应紧跟学科发展的步伐,使医学研究生既能掌握基因组学的基础知识,又能及时了解最新的基因组学发展及应用,通过学习这门课程提高研究生的科研能力和水平,并为他们将来从事临床工作打下良好的基础。这也要求基因组学教学模式进行相应调整,适应精准医学时代基因组学快速发展的要求,拓展医学研究生的基础知识面,培养出具有多个学科交叉背景的医学人才。

关键词：精准医学基因组学医学研究生培养

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脂质运载蛋白2对腹主动脉瘤小鼠巨噬细胞表型转化的调节

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中国医药 2017年第3期12卷 447-451页

作者：孙颉李玉琳武栗妃张聪聪王绿娅杜杰首都医科大学附属北京安贞医院心血管重塑相关疾病教育部重点实验室科研基地建设心血管重大疾病防治协同创新中心(2011协同创新中心)北京市心肺血管疾病研究所 100029

目的探讨脂质运载蛋白2（LCN2）对弹力蛋白酶灌注诱导的腹主动脉瘤病变中巨噬细胞表型的影响。方法10只野生型雄性C57BL／6小鼠和10只LCN2基因敲除（LCN2-／-）雄性小鼠分别列为野生型灌注组和LN2-／-灌注组，开腹肾下腹主动脉给予1％... 详细信息

目的探讨脂质运载蛋白2（LCN2）对弹力蛋白酶灌注诱导的腹主动脉瘤病变中巨噬细胞表型的影响。方法10只野生型雄性C57BL／6小鼠和10只LCN2基因敲除（LCN2-／-）雄性小鼠分别列为野生型灌注组和LN2-／-灌注组，开腹肾下腹主动脉给予1％弹力蛋白酶灌注8min。于灌注后14d采用颈椎脱臼法处死小鼠并获取腹主动脉瘤组织样本，采用免疫组织化学法和实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测小鼠病变组织中白细胞介素1β（IL-1β）、IL-6、肿瘤坏死因子α（TNF—α）、趋化蛋白1（MCP—1）、IL—10的表达水平。另外分离野生型小鼠和LCN2-／-小鼠各6只的骨髓巨噬细胞，以脂多糖刺激6h，PCR检测细胞中IL-1β、IL-6、TNF—α、MCP-1和IL-10水平，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞上清液中IL-1β、IL-6、TNF—α、MCP-1和IL-10水平；体外分别给予磷酸盐缓冲液（PBS）和LCN2预处理野生型小鼠巨噬细胞，30min后给予脂多糖刺激6h，分别检测上述指标。组间做比较。结果与野生型灌注组比较，LCN2-／-灌注组的IL-1β、IL-6、TNF-α、MCP-1的表达水平明显升高，IL-10的表达水平明显降低，差异有统计学意义[（0．0119±0．0051）比（0．0028±0．0013）、（0．0134±0．0053）比（0．0036±0．0016）、（0．0129±0．0061）比（0．0031±0．0020）、（0．0125±0．0042）比（0．0024±0．0005）、（0．0003±0．0001）比（0．0029±0．0022）]（P〈0．01或P〈0．05）。体外脂多糖刺激下，LCN2-／-巨噬细胞较野生型巨噬细胞IL—1β、IL-6、TNF-α、MCP-1的表达明显增多，而IL-10明显降低，差异有统计学意义（P〈0．05）。体外培养野生型巨噬细胞给予LCN2预处理，与PBS预处理比较，IL—10明显增多，同时抑制IL—1β，IL-6，TNF-α，MCP-1的产生（P〈0．01或P〈0．05）。结论LCN2可以通过调节巨噬细胞由M1型向M2型转化抑制弹力蛋白酶灌注诱导的腹主动脉瘤。

关键词：主动脉瘤腹脂质运载蛋白2 巨噬细胞表型转化

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利用CRISPR／Cas9技术建立基因外显子敲除小鼠模型

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中华老年医学杂志 2016年第7期35卷 768-772页

作者：刘燕张晓萍王绿娅杜杰首都医科大学附属北京安贞医院北京市心肺血管疾病研究所心血管重塑相关疾病教育部重点实验室科研基地建设-心血管重大疾病协同创新中心 100029

目的利用CRISPR／Cas9系统建立钙结合蛋白S100a9基因外显子定向敲除小鼠。方法在S100a9基因第1个外显子5’端及第2个外显子3’端设计gRNA靶点，体外转录获得gRNA，利用Cas9蛋白体外检测gRNA切割效率。选取效率高的gRNA和Cas9mRNA注射C5... 详细信息

目的利用CRISPR／Cas9系统建立钙结合蛋白S100a9基因外显子定向敲除小鼠。方法在S100a9基因第1个外显子5’端及第2个外显子3’端设计gRNA靶点，体外转录获得gRNA，利用Cas9蛋白体外检测gRNA切割效率。选取效率高的gRNA和Cas9mRNA注射C57BL／6小鼠受精卵，进行胚胎移植，利用PCR和测序方法检测F0代小鼠S100a9基因外显子敲除情况。结果F0代出生9只小鼠，PCR鉴定其中4只具有长片段删除，效率为44．4％；测序鉴定3只小鼠完全敲除了第1和第2外显子，1只敲除了第2外显子。结论成功建立利用CRISPR／Cas9系统定向敲除基因外显子的方法，获得了S100a9基因第1和第2外显子敲除的小鼠。

关键词：小鼠基因敲除外显子

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主动脉血管平滑肌细胞凋亡和Hippo-YAP信号通路作用于主动脉夹层发病的研究进展

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中华胸心血管外科杂志 2016年第1期32卷 -页

作者：姜文剑兰峰张宏家 100029 首都医科大学附属北京安贞医院心脏外科北京市心肺血管疾病研究所教育部心血管重塑相关疾病重点实验室北京大血管疾病诊疗中心北京市大血管外科植入式人工材料工程技术研究中心

主动脉夹层是一种致命的心血管疾病,主动脉血管平滑肌的凋亡是造成主动脉夹层发生的重要原因.而新近发现的Hippo-YAP信号传导通路在血管平滑肌的功能调节中发挥重要作用,进而造成许多心血管疾病的发生.本文旨在回顾现有的关于主动脉血... 详细信息

主动脉夹层是一种致命的心血管疾病,主动脉血管平滑肌的凋亡是造成主动脉夹层发生的重要原因.而新近发现的Hippo-YAP信号传导通路在血管平滑肌的功能调节中发挥重要作用,进而造成许多心血管疾病的发生.本文旨在回顾现有的关于主动脉血管平滑肌凋亡和Hippo-YAP信号传导通路在心血管疾病,特别是主动脉夹层发病中作用机制的研究.

关键词：动脉瘤夹层肌平滑血管细胞凋亡心血管疾病信号处理计算机辅助信号传导主动脉主动脉疾病

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CRISPR/Cas9基因编辑系统中两种gRNA活性检测方法比较

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心肺血管病杂志 2016年第7期35卷 563-568页

作者：刘燕任卫红王绿娅张晓萍高诗娟武威李凤娟杜杰北京市心肺血管疾病研究所-首都医科大学附属北京安贞医院心血管重塑相关疾病教育部重点实验室科研基地建设-心血管重大疾病协同创新中心 100029

目的:比较CRISPR/Cas9系统中gRNA活性检测的两种方法,即利用Surveyor/T7E1核酸酶检测方法或利用Cas9蛋白的体外检测方法。方法:一方面构建表达Cas9和特异gRNA的质粒,转染NIH3T3细胞,然后提取DNA,利用T7E1核酸内切酶检测gRNA介导Cas9切割... 详细信息

目的:比较CRISPR/Cas9系统中gRNA活性检测的两种方法,即利用Surveyor/T7E1核酸酶检测方法或利用Cas9蛋白的体外检测方法。方法:一方面构建表达Cas9和特异gRNA的质粒,转染NIH3T3细胞,然后提取DNA,利用T7E1核酸内切酶检测gRNA介导Cas9切割靶DNA并产生indel突变的效率;另一方面,设计引物并利用PCR扩增出gRNA的DNA模板片段,通过体外转录获得gRNA,利用Cas9蛋白及gRNA进行体外反应检测切割效率。结果:利用Cas9蛋白体外酶切可以检测到较高的gRNA活性,然而通过T7E1核酸酶方法检测gRNA在细胞中活性整体偏低,且在不同基因之间差异较大。结论:细胞Surveyor/T7E1法与Cas9蛋白体外酶切法检测到的gRNA活性不完全一致,体外活性检测法不能替代。

关键词： CRISPR/Cas9 gRNA活性 Surveyor/T7E1检测体外检测

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医学研究生"高通量测序技术"应用能力的培养

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现代生物医学进展 2016年第31期16卷 6182-6185页

作者：郭俊李小燕蔡伦王绿娅杜杰首都医科大学附属北京安贞医院-北京市心肺血管疾病研究所心血管重塑相关疾病教育部重点实验室心血管重大疾病防治协同创新中心北京100029

高通量测序技术目前已广泛的应用于临床研究领域。与传统测序方式相比,该技术具有通量高、耗时短、成本低等特点。研究生教育中对高通量测序技术的新进展及其在疾病研究、临床诊断等方面的应用方面的介绍较少。培养医学研究生对高通量... 详细信息

高通量测序技术目前已广泛的应用于临床研究领域。与传统测序方式相比,该技术具有通量高、耗时短、成本低等特点。研究生教育中对高通量测序技术的新进展及其在疾病研究、临床诊断等方面的应用方面的介绍较少。培养医学研究生对高通量测序技术的应用能力,可以增强研究生对高通量测序技术的方法、原理、应用范围、数据分析的理解,为医学研究生应用高通量测序技术发现及解决临床问题打下一定的基础。

关键词：高通量测序医学研究生培养

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