检索结果-内蒙古大学图书馆

细胞与分子免疫学杂志 2012年第11期28卷 1194-1199页

作者：辛毅刘飒许秀芳李温斌黄益民罗毅周玉杰首都医科大学附属北京安贞医院、北京市心肺血管疾病研究所分子生物学研究室北京100029 首都医科大学附属北京安贞医院、北京市心肺血管疾病研究所实验中心北京100029 首都医科大学附属北京安贞医院心外科北京100029

目的:建立适用于成年小鼠心成纤维细胞的体外分离培养及鉴定的技术方法。方法:应用胰蛋白酶、Ⅱ型胶原酶联合消化法及组织贴块法两种方法对小鼠心成纤维细胞进行体外培养。在倒置显微镜下观察心成纤维细胞生长情况;台盼蓝法测定细胞传... 详细信息

目的:建立适用于成年小鼠心成纤维细胞的体外分离培养及鉴定的技术方法。方法:应用胰蛋白酶、Ⅱ型胶原酶联合消化法及组织贴块法两种方法对小鼠心成纤维细胞进行体外培养。在倒置显微镜下观察心成纤维细胞生长情况;台盼蓝法测定细胞传代成活率;通过绘制生长曲线法、MTT法、DNA周期检测比较两种方法获得的心成纤维细胞的增殖情况;观察不同培养基对心成纤维细胞生长的影响;苏木素-伊红(HE)染色观察细胞形态,采用免疫荧光染色观察培养细胞波形蛋白、纤维连结蛋白及盘状结构域受体2(DDR2)的表达。结果:酶联合消化法分离培养的细胞1 d后,在倒置相差显微镜下可见细胞贴壁呈长椭圆形生长,3 d后生长迅速呈长梭形;贴块法培养的细胞4 d后,可见细胞从组织块边缘长出,7 d后细胞数量逐渐增多,细胞成活率均为97%。两种方法获得的第3代细胞生长曲线近似"S"形、MTT法显示3～5 d细胞增殖较明显;酶联合消化法培养的细胞G0-G1期和S+G2+M期所占比例分别为62.61%和30.87%,组织贴块法培养的细胞G0-G1期和S+G2+M期所占比例分别为69.24%和28.05%;含100 mL/L胎牛血清的HG/DMEM培养基培养的细胞出现明显对数期。两种方法培养的第3代细胞行苏木素-伊红染色可见细胞漩涡状排列,免疫荧光检测波形蛋白、纤维连接蛋白及盘状结构域受体2表达阳性。结论:两种方法均可高效获得心成纤维细胞在体外稳定培养。与贴块法培养相比较,利用联合酶消化法能较有效的获得波形蛋白、纤维连结蛋白、DDR2高表达阳性的心成纤维细胞。

关键词：成年小鼠心成纤维细胞分离和原代培养生物学鉴定

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北京市中老年人群甘油三酯水平与颈动脉新发斑块关系的研究

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中华流行病学杂志 2012年第5期33卷 455-459页

作者：张晓婷赵冬刘静冯立群孙佳艺王淼刘军王薇首都医科大学附属北京安贞医院北京市心肺血管疾病研究所流行病学研究室 100029 首都医科大学附属北京安贞医院北京市心肺血管疾病研究所神经内科100029 延边大学医学部内科系

目的探讨甘油三酯（TG）水平与北京市中老年人群5年颈动脉新发斑块的关系，分析TG合并心血管疾病传统危险因素对颈动脉新发斑块的预测作用。方法应用队列研究方法，选取北京市两社区人群TG指标和基线复查两次颈动脉超声检测数据完整者共... 详细信息

目的探讨甘油三酯（TG）水平与北京市中老年人群5年颈动脉新发斑块的关系，分析TG合并心血管疾病传统危险因素对颈动脉新发斑块的预测作用。方法应用队列研究方法，选取北京市两社区人群TG指标和基线复查两次颈动脉超声检测数据完整者共1949人作为研究对象。将基线TG分为4组：组1（〈1．13mmol／L）、组2（1．13-1．69mmol／L）、组3（1．70-2．25mmol／L）及组4（≥2．26mmol／L），以颈动脉新发斑块作为动脉粥样硬化进展的评价指标，分析基线TG水平与颈动脉新发斑块的关系。结果不同TG水平组间新发斑块率比较，新发斑块率随着基线TG水平的上升而增加（分别为30．8％、38．8％、41．9％和44．2％，X^2=21．22，P〈0．01）。单因素分析显示：与组1相比，TG≥1．13mmol／L可增加颈动脉新发斑块风险（组2、3、4分别增加了42％、62％和78％）；调整年龄、性别及传统危险因素后，TG水平在2．26mmol／L以上人群，颈动脉新发斑块风险增加37％。结论北京市中老年人群颈动脉新发斑块率随着基线TG水平的上升而增加。高TG（≥2．26mmol／L）可增加中老年人群颈动脉新发斑块的危险。

关键词：甘油三酯颈动脉斑块血脂异常动脉粥样硬化

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器官移植患者外周血淋巴细胞分子表达

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细胞与分子免疫学杂志 2012年第10期28卷 1041-1045,1050页

作者：许秀芳辛毅张颖黄益民顾云李娜周玉杰张兆光北京市心肺血管疾病研究所细胞与分子生物学研究室首都医科大学附属北京安贞医院外科北京100029

目的:比较移植后患者外周血淋巴细胞不同基因表达时相与病理改变时相,探讨外周血淋巴细胞分子的表达与排斥反应的关系。方法:通过对9例脏器移植的观察,系统比较了移植器官的实时荧光定量PCR检测患者外周血淋巴细胞CD4、CD8、P56、P59编... 详细信息

目的:比较移植后患者外周血淋巴细胞不同基因表达时相与病理改变时相,探讨外周血淋巴细胞分子的表达与排斥反应的关系。方法:通过对9例脏器移植的观察,系统比较了移植器官的实时荧光定量PCR检测患者外周血淋巴细胞CD4、CD8、P56、P59编码基因表达时相改变、荧光差异显示技术检测差异基因表达时相及其与脏器功能、病理改变时相的关系。结果:免疫抑制剂不能完全阻断脏器移植排斥反应的发生;移植术后24 h内,9例患者荧光差异显示-PCR技术外周血淋巴细胞P59、酪氨酸磷酸酶的基因表达上调,24～48 h PKC-θ、CD4等基因表达上调;肾移植和心脏移植术后PKC-θ、MHC-Ⅱ、丝/苏氨酸激酶和酪氨酸磷酸酯酶及丝氨酸/苏氨酸激酶15、凝血因子VIII、干扰素诱导蛋白、HLA-DR-H基因较术前有3倍以上升高。P59编码基因表达水平于移植后24 h内保持基本平稳,此后持续负调表达直到第10天达低谷。P56和CD8基因于移植后72 h内表现为持续负调表达,此后正调表达并于第5天时达到移植后的第一个峰值。CD4编码基因于移植后24 h内首先表现为负调表达,此后开始正调表达并于48 h达到移植后的第一个峰值。结论:外周血淋巴细胞基因表达水平的监测可能有助于临床早期急性排斥反应的诊断和免疫抑制剂治疗效果的判断。

关键词：脏器移植外周血淋巴细胞淋巴细胞基因表达时相

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甘油三酯水平与糖尿病发病危险的队列研究

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中华内科杂志 2012年第7期51卷 516-519页

作者：王薇刘静孙佳艺王淼刘军齐玥赵冬首都医科大学附属北京安贞医院北京市心肺血管疾病研究所流行病研究室 100029

目的分析多省市人群1992--2007年空腹TG水平变化与累积糖尿病发病风险的关系。方法以1992年6省市35～64岁参加了心血管病危险因素调查者为基线数据，2007年进行了危险因素再调查；去除1992年已有糖尿病和2次调查资料不完整者，用于本研... 详细信息

目的分析多省市人群1992--2007年空腹TG水平变化与累积糖尿病发病风险的关系。方法以1992年6省市35～64岁参加了心血管病危险因素调查者为基线数据，2007年进行了危险因素再调查；去除1992年已有糖尿病和2次调查资料不完整者，用于本研究共5408例。根据TG水平分为3组：1组TG〈1．70mmol／L，2组TG1．70—2．25mmol／L，3组TG≥2．26mmol／L。结果与1992年相比，2007年该人群TC,水平增加了0．40mmol／L；高TG血症患病率从23．4％上升至39．0％。队列人群15年糖尿病累积发病率12．8％；按基线TG水平分3组，15年累积糖尿病发病率分别为10．5％、16．2％和26．6％。以基线TG1组为对照，在调整了多个危险因素后，2组和3组糖尿病发病风险RR分别为1．44（95％CI1．12—1．83）和2．40（95％CI1．90—3．03）。两时点（1992年和2007年）检测TG均以1组为对照，多因素分析显示，2次检测TG3组累计糖尿病发病风险均增加了2．39倍（RR3．39，95％C12．49—4．61）。结论多省市队列人群基线高TG水平是糖尿病发病风险独立影响因素；两时点TG的变化对糖尿病发病风险预测能提供更多的信息。

关键词：甘油三酯类糖尿病,2型随访研究流行病学

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中国心血管病：负担持续上升，预防任重道远

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中华心血管病杂志 2012年第3期40卷 177-178页

作者：赵冬刘静首都医科大学附属北京安贞医院北京市心肺血管疾病研究所流行病研究室 100029

心血管病是威胁我国人民健康和生命的首要疾病。心血管病发病率和死亡率等流行病学数据是制定心血管病防治策略、规划和完善医疗服务体系、确定心血管病防治计划的重点方向和评价防治项目实施效果的重要依据，在心血管病防治中具有重要... 详细信息

心血管病是威胁我国人民健康和生命的首要疾病。心血管病发病率和死亡率等流行病学数据是制定心血管病防治策略、规划和完善医疗服务体系、确定心血管病防治计划的重点方向和评价防治项目实施效果的重要依据，在心血管病防治中具有重要意义。

关键词：心血管病负担中国预防医疗服务体系人民健康流行病学防治

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不同手术方式行全胸腹主动脉替换的临床研究

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中华胸心血管外科杂志 2012年第2期28卷 68-71页

作者：张明孙立忠刘永民朱俊明郑军白涛程力剑邢晓燕万浩首都医科大学附属北京安贞医院北京市心肺血管疾病研究所北京市大血管疾病诊疗中心 100029 首都医科大学附属北京安贞医院流行病学研究室 100029

目的比较手术治疗的效果，探讨不同手术方式行全胸腹主动脉替换术的适应证和具体手术方法，明确常温非体外循环下全胸腹主动脉替换的可行性和安全性。方法2009年2月到2011年5月，46例Crawford Ⅱ型胸腹主动脉瘤（thoraeoabdominal aorti... 详细信息

目的比较手术治疗的效果，探讨不同手术方式行全胸腹主动脉替换术的适应证和具体手术方法，明确常温非体外循环下全胸腹主动脉替换的可行性和安全性。方法2009年2月到2011年5月，46例Crawford Ⅱ型胸腹主动脉瘤（thoraeoabdominal aortic aneurysm，TAAA）患者行全胸腹主动脉替换术（total thoracoabdominal aortic aneurysm repair，tTAAAR）。根据术式不同，分为深低温停循环tTAAAR（A）组15例和常温非体外循环tTAAAR（B）组31例。计数资料采用精确概率的一。检验和计数资料经正态性检验后采用t检验等统计学方法，比较了患者的术前、术中和术后ICU治疗情况以及围术期病死率、并发症发生率等。结果A组和B组术后早期死亡（26．67％对3．20％，P=0．033）和一过性脑功能障碍发生率（33．30％对3．30％，P=0．018）差异有统计学意义。两组手术时间（P〈0．0001）、降主动脉阻断时间（P〈0．0001），输注红细胞（P=0．013）差异亦有统计学意义。术前情况、内脏缺血时间、脊髓缺血时间、ICU治疗时间、带气管插管时间、脊髓损伤、肾功能不全等差异无统计学意义，P〉0．05。结论常温非体外循环全胸腹主动脉替换术安全、可靠。适应证为可在常温下建立降主动脉到髂动脉旁路循环的胸腹主动脉动脉瘤。．肋间动脉重建是重要的脊髓保护手段。

关键词：主动脉瘤心脏外科手术胸腹主动脉替换

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ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化早期血脂变化及主动脉超声生物显微镜成像分析

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中国超声医学杂志 2012年第4期28卷 304-307页

作者：杨娅王艳红谢谨捷李嵘娟李治安王征秦彦文首都医科大学附属北京安贞医院超声科首都医科大学附属北京友谊医院北京市朝阳区第二医院北京市心肺血管疾病研究所心血管生物研究室

目的分析ApoE基因敲除(ApoE—/—)小鼠血脂变化及主动脉动脉粥样硬化的超声生物显微镜(UBM)成像特征。方法 8周龄及16周龄雄性ApoE-/—小鼠各8只为实验组,同周龄同数量的雄性C57BL/6小鼠为对照组。应用超声生物显微镜观察小鼠主动脉根... 详细信息

目的分析ApoE基因敲除(ApoE—/—)小鼠血脂变化及主动脉动脉粥样硬化的超声生物显微镜(UBM)成像特征。方法 8周龄及16周龄雄性ApoE-/—小鼠各8只为实验组,同周龄同数量的雄性C57BL/6小鼠为对照组。应用超声生物显微镜观察小鼠主动脉根部、升主动脉和主动脉弓的形态结构,于主动脉根部短轴切面测量内-中膜厚度(IMT),并测定小鼠血脂。结果 ApoE—/—小鼠血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)及低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)水平较同周龄对照组明显升高(P<0.01);高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)水平较同周龄对照组减低(P<0.05)。16周龄ApoE-/—小鼠血脂较8周龄ApoE—/—小鼠增高更为明显,差异有统计学意义(P<0.01)。ApoE—/—小鼠的主动脉根部IMT较同周龄对照组增厚,差异有统计学意义(P<0.01);16周龄ApoE—/—小鼠IMT(0.208±0.038)mm较8周龄ApoE—/-小鼠主动脉根部IMT(0.121±0.025)mm增厚更为明显,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 ApoE-/-小鼠早期出现高脂血症,UBM成像可显示小鼠主动脉早期动脉粥样硬化的病变特征。

关键词：血脂载脂蛋白E 小鼠动脉粥样硬化超声生物显微镜

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人心肌肌球蛋白轻链基因启动子驱动的GFP和Luc报告基因在人心肌细胞系中的表达

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中国病理生理杂志 2012年第9期28卷 1722-1728页

作者：许秀芳辛毅汪劲松赵莉敏杜兰萍葛桂玲李娜张颖王世强黄益民罗毅首都医科大学附属北京安贞医院北京市心肺血管疾病研究所细胞与分子生物学研究室北京100029 首都医科大学附属北京儿童医院心外科北京100045 首都医科大学附属北京安贞医院北京市心肺血管疾病研究所实验中心北京100029 北京放射医学研究所北京100850 北京大学生命科学学院北京100871 北京中医药大学电镜室北京100029

目的:构建人肌球蛋白2v基因启动子(pMLC2v)驱动的绿色荧光蛋白(GFP)和萤光素酶(Luc)报告基因慢病毒载体并观察其在人心肌细胞系(HCM)和人肺癌细胞株A549中的整合表达特征。方法:应用去毒化的人类I型免疫缺陷病毒和pMLC2v-GFP或pMLC2v-Lu... 详细信息

目的:构建人肌球蛋白2v基因启动子(pMLC2v)驱动的绿色荧光蛋白(GFP)和萤光素酶(Luc)报告基因慢病毒载体并观察其在人心肌细胞系(HCM)和人肺癌细胞株A549中的整合表达特征。方法:应用去毒化的人类I型免疫缺陷病毒和pMLC2v-GFP或pMLC2v-Luc报告基因构建慢病毒示踪载体,转染HCM和A549细胞,激光共聚焦显微镜及生物发光检测仪观察2种报告基因在不同细胞生长进程中的表达特征。非特异性启动子驱动的GFP(GFPC)和红色荧光蛋白(RFPC)报告基因作为对照。结果:2种细胞转染GFPC和RFPC后第3 d,都表达GFP和RFP;而HCM只在转染pMLC2v-GFP和pMLC2v-Luc 21 d后表达GFP和Luc,A549细胞不表达。结论:pMLC2v主要在培养21 d后新增殖的人心肌细胞中驱动GFP和Luc报告基因表达,这为监测干细胞向心肌细胞的分化进程提供了可靠的病理及活体示踪工具。

关键词：肌球蛋白轻链绿色荧光蛋白萤光素酶心肌细胞

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氨基末端钠尿肽前体对预测直接介入治疗急性ST段抬高心肌梗死患者预后的价值

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中华老年心脑血管病杂志 2012年第9期14卷 907-910页

作者：严山刘雅刘洁琳文杰李志忠温绍君首都医科大学附属北京安贞医院北京市心肺血管疾病研究所高血压研究室 100029 江苏省淮安市第一人民医院心内科北京市心肺血管疾病研究所高血压研究室 100029 首都医科大学附属北京安贞医院15病房

目的评价氨基末端钠尿肽前体(NT-proBNP)对接受直接PCI的急性ST段抬高心肌梗死(STEMI)患者远期预后价值。方法顺序入选2008年12月～2010年6月胸痛发作729 pmol/L者(P<0.01)。多元Cox回归分析显示,NT-proBNP、LVEF、肌钙蛋白Ⅰ峰值是... 详细信息

目的评价氨基末端钠尿肽前体(NT-proBNP)对接受直接PCI的急性ST段抬高心肌梗死(STEMI)患者远期预后价值。方法顺序入选2008年12月～2010年6月胸痛发作<12 h并接受直接PCI的STEMI住院患者125例,根据随访期内有无心血管事件,分为事件组22例和非事件组103例,入院后12 h内测定NT-proBNP水平,随访1年内心血管事件的发生情况,并进行相关分析。结果与非事件组比较,事件组的NT-proBNP水平显著增高(P<0.05);在预测1年心血管事件中NT-proBNP的ROC曲线下面积为0.778。NT-proBNP阈值为729pmol/L时,Kaplan-Meier生存分析显示,NT-proBNP≤729 pmol/L患者1年无心血管事件生存率显著高于NT-proBNP>729 pmol/L者(P<0.01)。多元Cox回归分析显示,NT-proBNP、LVEF、肌钙蛋白Ⅰ峰值是患者远期发生心血管事件的独立预测因素。结论 NT-proBNP可以预测接受直接PCI急性STEMI患者的远期预后。

关键词：心肌梗死利钠肽脑急性冠状动脉综合征阿司匹林肌钙蛋白I ROC曲线预后

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小鼠主动脉血管平滑肌细胞分离培养及鉴定

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新乡医学院学报 2012年第1期29卷 5-10页

作者：辛毅张耀中林筝张颖秦彦文首都医科大学附属北京安贞医院北京市心肺血管疾病研究所实验中心北京100029 北京市心肺血管疾病研究所血管生物研究室北京100029

目的建立体外分离培养小鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)的技术方法并观察其生长特征。方法比较组织贴块法及酶联合消化法原代分离小鼠主动脉来源的VSMC,利用倒置显微镜观察细胞生长情况;苏木精-伊红(HE)染色观察细胞形态及免疫荧光染色... 详细信息

目的建立体外分离培养小鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)的技术方法并观察其生长特征。方法比较组织贴块法及酶联合消化法原代分离小鼠主动脉来源的VSMC,利用倒置显微镜观察细胞生长情况;苏木精-伊红(HE)染色观察细胞形态及免疫荧光染色法鉴定细胞;台盼蓝法、绘制生长曲线法、3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)法分别测定主动脉VSMC传代细胞的成活率、生长、增殖特征;观察不同血清含量对主动脉VSMC生长的影响。结果组织贴块法培养的细胞6 d后,细胞从组织块边缘长出,14 d后生长迅速可传代;酶联合消化法分离培养的细胞3 d后,细胞呈梭形生长,7～8 d后生长迅速可传代;第2代细胞在显微镜下观察可见呈典型"峰-谷"状生长;2种方法获得的细胞行免疫荧光染色显示胞浆内α-平滑肌肌动蛋白表达阳性,细胞成活率均为96%;细胞生长曲线近似"S"形,MTT法显示细胞生长第3～5天光密度值变化较明显;用含体积分数20%血清的杜尔伯科改良伊格尔培养基高糖培养液培养的细胞出现明显对数期。结论本研究建立了高效分离和培养主动脉VSMC的2种方法,细胞均稳定地表达α-平滑肌肌动蛋白,为血管疾病的研究提供了理想的细胞模型。

关键词：小鼠血管平滑肌细胞原代培养鉴定

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