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中医药学报 2021年第7期49卷 10-14页

作者：张宁方衡张爱华闫广利祁永华李贵森王发善王喜军黑龙江中医药大学国家中医药管理局中医方证代谢组学研究中心/国家中医药管理局中药血清药物化学重点研究室/中美中医方证代谢组学技术合作中心黑龙江哈尔滨150040 黑龙江中医药大学佳木斯学院黑龙江佳木斯154007 多多药业有限公司黑龙江佳木斯154002

目的:运用代谢组学方法探讨五加生化胶囊对早孕大鼠药物流产出血治疗作用及其机制。方法:以米非司酮配伍米索前列醇灌胃早孕Wistar大鼠制作药物流产模型,给予五加生化胶囊混悬液进行干预,观察大鼠子宫形态、子宫出血量及出血时间,以柱... 详细信息

目的:运用代谢组学方法探讨五加生化胶囊对早孕大鼠药物流产出血治疗作用及其机制。方法:以米非司酮配伍米索前列醇灌胃早孕Wistar大鼠制作药物流产模型,给予五加生化胶囊混悬液进行干预,观察大鼠子宫形态、子宫出血量及出血时间,以柱前衍生-气质联用技术检测大鼠血清代谢产物变化,运用主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)等技术对差异代谢产物进行分析,结合数据库揭示相应机制。结果:依据相对峰面积可知,与正常组比较,模型组大鼠血清中甘氨酸、丝氨酸、氨基丙二酸、L-焦谷氨酸、L-鸟氨酸、L-酪氨酸、花生四烯酸和胆固醇含量明显降低,2-丁烯二酸、磷酸甘油酯、L-赖氨酸、D-半乳糖、D-葡萄糖酸、2-单棕榈酸甘油酯和2-单硬脂酸甘油酯含量明显升高,给予五加生化胶囊混悬液后明显回调。结论:五加生化胶囊对早孕大鼠药物流产出血有一定治疗作用,其作用可能是通过调节脂肪酸代谢及氨基酸生成等途径实现的。

关键词：五加生化胶囊药物流产出血干预作用代谢组学

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六味地黄丸对大鼠生长发育过程中血液代谢的影响

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中国实验方剂学杂志 2019年第12期25卷 1-8页

作者：康舒宇张艾嘉张佳琪王萍王喜军黑龙江中医药大学国家中医药管理局中医方证代谢组学研究中心国家中医药管理局中药血清药物化学重点研究室中美中医方证代谢组学技术合作中心哈尔滨150040 中国中医科学院中药研究所北京100700

目的:以代谢组学的整体代谢轮廓和生物标记物为指标,研究六味地黄丸对大鼠生长发育过程中血液代谢的影响。方法:利用超高效液相色谱-高清质谱(UPLC-HDMS)联用技术建立血液代谢组学研究方法,表征给药前后不同时间的大鼠血液代谢轮廓;采... 详细信息

目的:以代谢组学的整体代谢轮廓和生物标记物为指标,研究六味地黄丸对大鼠生长发育过程中血液代谢的影响。方法:利用超高效液相色谱-高清质谱(UPLC-HDMS)联用技术建立血液代谢组学研究方法,表征给药前后不同时间的大鼠血液代谢轮廓;采用模式识别方法整合分析代谢轮廓,寻找与药物作用相关的差异代谢标记物,依托MetPA和京都基因与基因组百科全书(KEGG)等数据库,解析与差异标记物相关的代谢通路,研究六味地黄丸对大鼠生长发育过程中血液代谢的影响。结果:六味地黄丸通过调控苯丙氨酸、酪氨酸、亮氨酸、硫酸高香草酸、溶血性磷脂酰胆碱[16∶1(9Z)]等30个血液代谢标记物及12个相关的靶标代谢通路,显著影响大鼠生长发育过程中血液代谢轮廓,并圈定了硫酸高香草酸、苯丙氨酸、甘氨胆酸等8个代谢标记物为六味地黄丸影响大鼠生长发育的核心代谢标记物。结论:六味地黄丸能够显著调控大鼠生长发育过程中的血液代谢网络,从而影响大鼠的生长发育。

关键词：六味地黄丸生长发育血液代谢代谢标记物氨基酸代谢硫酸高香草酸甘氨胆酸

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基于中医方证代谢组学的中药质量标志物发现研究

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中草药 2018年第16期49卷 3729-3734页

作者：闫广利孙晖张爱华韩莹王喜军黑龙江中医药大学国家中医药管理局中医方证代谢组学研究中心/国家中医药管理局中药血清药物化学重点研究室/中美中医方证代谢组学技术合作中心黑龙江哈尔滨150040

中药质量是影响中医药传承和发展的重要因素,然而由于中药成分的复杂性和复方应用的特殊性,现今的中药质量标准存在难以保障临床疗效的问题。刘昌孝院士提出中药质量标志物的概念和基本属性,为中药质量标准研究指明了方向。中医方证代... 详细信息

中药质量是影响中医药传承和发展的重要因素,然而由于中药成分的复杂性和复方应用的特殊性,现今的中药质量标准存在难以保障临床疗效的问题。刘昌孝院士提出中药质量标志物的概念和基本属性,为中药质量标准研究指明了方向。中医方证代谢组学是整合了中药血清药物化学与代谢组学技术,在方证对应并显效的情况下,发现与临床疗效相关、体现方剂配伍、可追溯体内代谢和制备过程的中药药效物质基础的研究策略,是发现中药质量标志物的有效方法。利用中医方证代谢组学方法已经对茵陈蒿汤、六味地黄丸等方剂及男仕胶囊、AS1350等中药保健品质量标志物的发现研究进行了探索。

关键词：中药质量标志物中医方证代谢组学中药方剂中药复方保健品药效物质基础

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基于尿液代谢组学的六味地黄丸对大鼠生长发育的影响

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药学学报 2018年第10期53卷 1713-1720页

作者：康舒宇张佳琪张艾嘉王萍王喜军黑龙江中医药大学中医方证代谢组学研究中心国家中医药管理局中药血清药物化学重点实验室中美中医方证代谢组学技术合作中心黑龙江哈尔滨150040 中国中医科学院中药研究所北京100700

构建以传统的生理研究为基础,以尿液代谢组学的整体代谢轮廓和生物标记物为指标的六味地黄丸(LW)调控大鼠生长发育的综合药效评价体系。将27日龄SD大鼠60只随机分为对照组、六味地黄丸低、中、高剂量组, 28日龄开始连续灌胃给予不同剂... 详细信息

构建以传统的生理研究为基础,以尿液代谢组学的整体代谢轮廓和生物标记物为指标的六味地黄丸(LW)调控大鼠生长发育的综合药效评价体系。将27日龄SD大鼠60只随机分为对照组、六味地黄丸低、中、高剂量组, 28日龄开始连续灌胃给予不同剂量的六味地黄丸提取液16天。在行为学、体重、脏器指数及股骨长度的基础上,应用UPLC-HDMS联用技术建立尿液代谢组学研究方法,表征六味地黄丸干预前后的尿液代谢轮廓,分析鉴定与药物作用相关的差异代谢标记物,研究六味地黄丸对大鼠生长发育的影响。结果表明,六味地黄丸能够提升大鼠的整体行为能力,促进体重增长及脏器和骨骼生长,确定了六味地黄丸干预下的尿液差异代谢标记物36个及靶标代谢通路13个,圈定了8个代谢标记物作为六味地黄丸影响大鼠生长发育的关键标记物。研究阐明了六味地黄丸对大鼠生长发育过程中尿液代谢网络具有显著的调控作用,诠释了"滋补肾阴"对大鼠生长发育影响的科学内涵。

关键词：六味地黄丸生长发育代谢组学

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UPLC-MS/MS MRM模式同时测定参白方中人参皂苷Re、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1以及Siderin 4种成分含量

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中医药学报 2018年第1期46卷 1-4页

作者：石慧谢静宋宏伟闫广利韩莹孟祥才王喜军黑龙江中医药大学国家中医药管理局中医方证代谢组学研究中心国家中医药管理局中药血清药物化学重点研究室中美中医方证代谢组学技术合作中心黑龙江哈尔滨150040

目的:建立参白方中人参皂苷Re、人参皂苷Rg1、Siderin以及人参皂苷Rb1 UPLC-MS/MS含量测定方法。方法:采用Waters ACQUITY UPLCTM HSS T3(2.1 mm×100 mm,1.8μm)色谱柱;流动相:A为0.1%甲酸甲醇,B为0.1%甲酸水,梯度洗脱。采用电喷... 详细信息

目的:建立参白方中人参皂苷Re、人参皂苷Rg1、Siderin以及人参皂苷Rb1 UPLC-MS/MS含量测定方法。方法:采用Waters ACQUITY UPLCTM HSS T3(2.1 mm×100 mm,1.8μm)色谱柱;流动相:A为0.1%甲酸甲醇,B为0.1%甲酸水,梯度洗脱。采用电喷雾电离源(ESI),多反应离子监测(MRM)扫描模式。结果:参白方中被检测的4种成分线性关系良好;精密度,重复性,稳定性良好;加样回收率在99.86%~100.97%,RSD 0.91%~2.74%。结论:该方法简单、准确、灵敏、重复性好,可用于参白方主要成分的含量测定。

关键词： UPLC-MS/MS 参白方含量测定

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基于体内过程的关黄柏在知柏地黄丸等类方配伍环境下血中移行成分分析

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世界科学技术-中医药现代化 2016年第10期18卷 1730-1739页

作者：李先娜邹迪李冰冰闫广利王美佳刘志东张爱华孙晖黑龙江中医药大学国家中医药管理局中医方证代谢组学研究中心/国家中医药管理局中药血清药物化学重点研究室/中美中医方证代谢组学技术合作中心哈尔滨150040

目的:本研究主要探讨了关黄柏在特定配伍环境下血中移行成分与功效取向的相关性。方法:研究应用UPLC-HD-MS/MS联用技术建立关黄柏及知柏地黄丸等类方口服给药后大鼠血中移行成分分析方法。采用主成分分析(PCA)及正交偏最小二乘判别分析(... 详细信息

目的:本研究主要探讨了关黄柏在特定配伍环境下血中移行成分与功效取向的相关性。方法:研究应用UPLC-HD-MS/MS联用技术建立关黄柏及知柏地黄丸等类方口服给药后大鼠血中移行成分分析方法。采用主成分分析(PCA)及正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)阐明不同的方剂配伍环境下关黄柏体内成分表达的差异,探索与关黄柏功效显著相关的潜在药效物质基础。结果:关黄柏在知柏地黄丸等类方中出现了23个共有血中移行成分,OPLS-DA分析充分挖掘了7个与关黄柏退虚热功效显著相关的血中移行成分及6个与关黄柏清热燥湿功效显著相关的血中移行成分。结论:本研究首次建立关黄柏在知柏地黄丸等类方中体内成分分析方法,初步阐明了关黄柏在类方中的配伍规律及其发挥退虚热及清热燥湿功效的药效物质基础。

关键词：关黄柏清热燥湿退虚热血中移行成分药效物质基础中药血清药物化学

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基于中医方证代谢组学的开心散干预老年痴呆症大鼠的效应物质动态分析

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世界科学技术-中医药现代化 2016年第10期18卷 1652-1669页

作者：初航卢盛文孔玲韩莹韩金伟刘志东张爱华王喜军黑龙江中医药大学国家中医药管理局中医方证代谢组学研究中心/国家中医药管理局中药血清药物化学重点研究室/中美中医方证代谢组学技术合作中心哈尔滨150040

目的:本研究在开心散干预氯化铝联合D-半乳糖诱导老年痴呆症大鼠模型有效性的基础上,揭示开心散对老年痴呆症(AD)不同阶段干预作用的代谢物靶点,构建开心散体内成分与内源性生物标记物的网络关系,分析开心散对AD发展过程干预作用的效应... 详细信息

目的:本研究在开心散干预氯化铝联合D-半乳糖诱导老年痴呆症大鼠模型有效性的基础上,揭示开心散对老年痴呆症(AD)不同阶段干预作用的代谢物靶点,构建开心散体内成分与内源性生物标记物的网络关系,分析开心散对AD发展过程干预作用的效应物质的动态变化。方法:利用行为学指标评价模型复制进程以及开心散的干预作用;运用代谢组学技术和方法分析开心散对AD大鼠模型不同阶段干预作用的靶点;应用UPLC-MS技术和MSE质谱数据采集模式,分别对开心散体外化学成分和口服给药后的血中移行成分进行表征及鉴定;利用PCMS手段,构建复方药效物质基础与内源性生物标记物的数理模型,发掘开心散防治老年痴呆症不同阶段的效应物质。结果:给予AD大鼠开心散溶液治疗后,模型大鼠的认知功能得到改善,其病理学进程得以延缓。代谢组学研究表明,开心散对AD模型不同阶段标记物的异常表达起到恢复作用,体现了开心散干预老年痴呆症多靶点、多途径的特点。结论:基于中医方证代谢组学方法为开心散减缓AD进程研究提供了新的思路。

关键词：老年痴呆症开心散代谢组学中医方证代谢组学

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基于中医方证代谢组学的生脉散干预老年痴呆症大鼠的药效物质基础研究

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世界科学技术-中医药现代化 2016年第10期18卷 1720-1729页

作者：卢盛文孔玲初航韩莹韩金伟刘志东王喜军黑龙江中医药大学国家中医药管理局中医方证代谢组学研究中心/国家中医药管理局中药血清药物化学重点研究室/中美中医方证代谢组学技术合作中心哈尔滨150040

目的:本实验主要利用中医方证代谢组学技术评价生脉散预防老年痴呆的药效及发现其关键物质基础。方法:首先采用灌胃三氯化铝联合腹腔注射D-半乳糖连续90天建立老年痴呆大鼠模型,并利用UPLC-HDMS技术采集和分析模型大鼠尿液代谢数据,共... 详细信息

目的:本实验主要利用中医方证代谢组学技术评价生脉散预防老年痴呆的药效及发现其关键物质基础。方法:首先采用灌胃三氯化铝联合腹腔注射D-半乳糖连续90天建立老年痴呆大鼠模型,并利用UPLC-HDMS技术采集和分析模型大鼠尿液代谢数据,共确定了42个老年痴呆症的生物标记物;同时干预组在造模同时采用连续给与生脉散冻干粉溶液(5.3 g·kg-1)对模型大鼠进行治疗。结果:通过Morris水迷宫、脑组织病理学检测及Aβ免疫组化等方法评价了生脉散的干预作用,发现了生脉散具有抑制Aβ毒性、保护神经元和改善认知障碍的作用;在此基础上利用代谢组学技术评价了干预组对42个老年痴呆生物标志物的调节作用,发现生脉散主要影响了色氨酸代谢和脂质代谢的多个靶点;同时采用血清药物化学方法研究了生脉散的体内直接作用物质,找到30种成分并与生脉散明显回调的生物标志物相关联。结论:本实验发现了五味子木质素类及人参皂苷类的多种成分与色氨酸代谢和脂质代谢极度相关,为生脉散预防老年痴呆的药效物质基础。

关键词：方证代谢组学生脉散老年痴呆症色氨酸代谢脂质代谢

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基于代谢组学的茵陈蒿汤及组分配伍对大鼠酒精性肝损伤的保护作用研究

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世界科学技术-中医药现代化 2016年第10期18卷 1749-1756页

作者：闫广利周小航孙晖王扬阳王玉影王玉美张爱华王喜军黑龙江中医药大学国家中医药管理局中医方证代谢组学研究中心/国家中医药管理局中药血清药物化学重点研究室/中美中医方证代谢组学技术合作中心哈尔滨150040

目的:利用代谢组学技术,结合临床生化检测和组织病理学,评价茵陈蒿汤及其组分配伍对长期过量摄入酒精诱导肝损伤的保护作用。方法:对Wistar大鼠进行"白酒—玉米油—吡唑"混合溶液灌胃和饲喂高脂饲料12周制备酒精性肝损伤大鼠... 详细信息

目的:利用代谢组学技术,结合临床生化检测和组织病理学,评价茵陈蒿汤及其组分配伍对长期过量摄入酒精诱导肝损伤的保护作用。方法:对Wistar大鼠进行"白酒—玉米油—吡唑"混合溶液灌胃和饲喂高脂饲料12周制备酒精性肝损伤大鼠模型,茵陈蒿汤及其组分配伍组分别于造模开始每日灌胃给予茵陈蒿汤和6,7-二甲氧基香豆素、京尼平苷、大黄酸配伍组合,12周末测定血清ALT、AST、ALP、TG、T-BIL、TP、ALB、CHOL、HA、LN、PCIIINP、CIV浓度和肝脏组织HYP、γ-GT、MDA、TBA、SOD和GSH-PX含量,观察肝左叶HE和Masson染色病理组织切片,并利用UPLC-Q/TOF-MS技术采集尿液代谢轮廓数据,提取各组样品中酒精性肝损伤生物标记物信息,分析空白对照组、模型对照组、茵陈蒿汤组及茵陈蒿汤组分配伍组之间大鼠代谢轮廓及生物标记物的变化。结果:茵陈蒿汤及其组分配伍均能显著抑制酒精性肝损伤大鼠血清ALT、AST、ALP、TG、T-BIL、TP、ALB、CHOL、HA、LN、PCIIINP、CIV浓度和肝脏组织HYP、γ-GT、MDA、TBA、SOD和GSH-PX含量的变化,减少肝脏细胞炎性浸润和肝纤维化,并使肝损伤大鼠整体代谢轮廓远离模型对照组而靠近正常对照组,使10个生物标记物趋于正常水平。结论茵陈蒿汤对大鼠酒精性肝损伤具有显著的保护作用,其3个组分6,7-二甲氧基香豆素、京尼平苷和大黄酸的配伍组合能够有效表达茵陈蒿汤的生物效应,是其主要有效组分,为茵陈蒿汤防治酒精性肝损伤疾病的创新药物开发奠定了基础。

关键词：茵陈蒿汤 6,7-二甲氧基香豆素京尼平苷大黄酸酒精性肝损伤干预作用代谢组学

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基于中医方证代谢组学技术的六味地黄丸干预脑瘫大鼠模型研究

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世界科学技术-中医药现代化 2016年第10期18卷 1684-1696页

作者：李秋菊王萍王美佳康舒宇张也张爱华王喜军黑龙江中医药大学国家中医药管理局中医方证代谢组学研究中心/国家中医药管理局中药血清药物化学重点研究室/中美中医方证代谢组学技术合作中心哈尔滨150040

目的:本研究基于中医方证代谢组学理论和技术平台,研究六味地黄丸(LW)对脑瘫大鼠模型的干预作用。方法:研究采用延迟剖宫产手术方法复制缺氧缺血脑瘫(HICP)大鼠模型,利用经典行为学方法对HICP模型和LW的干预作用进行评价;最后借助中医... 详细信息

目的:本研究基于中医方证代谢组学理论和技术平台,研究六味地黄丸(LW)对脑瘫大鼠模型的干预作用。方法:研究采用延迟剖宫产手术方法复制缺氧缺血脑瘫(HICP)大鼠模型,利用经典行为学方法对HICP模型和LW的干预作用进行评价;最后借助中医方证代谢组学技术揭示了HICP模型大鼠尿液的潜在生物标记物与LW干预HICP模型体内显效成分的相关性。结果:研究表明LW通过调节HICP模型大鼠机体的糖类代谢、氨基酸代谢、核苷酸代谢和甾体激素类生物合成四大类代谢途径,进而有效改善HICP模型大鼠的运动能力,并确定LW的入血成分中6-O-甲基梓醇、莫诺苷、丹皮酚原苷、毛蕊花苷、獐牙菜苷脱水的代谢产物为干预HICP大鼠模型的潜在药效物质基础。本证实了中医方证代谢组学技术可以成为阐明中药药效物质基础的有力手段。

关键词：中医方证代谢组学缺氧缺血脑瘫六味地黄丸药效物质基础代谢物中医药中药血清药物化学代谢组学

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