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基于iTRAQ技术结合2D-LC-MS/MS研究黄连对CYP450同工酶表达的影响

中国中药杂志 2016年第4期41卷 731-736页

作者：杨欣王秋红王蒙王悦杨炳友匡海学黑龙江中医药大学教育部北药基础与应用研究重点实验室黑龙江省中药及天然药物药效物质基础研究重点实验室黑龙江哈尔滨150040

黄连是临床常用药材,在中医药中被广泛应用,具有清热燥湿、泻火解毒之功,中药成分比较复杂,细胞色素P450(cytochrome P450,CYP450)同工酶是药物的主要代谢酶,研究黄连对CYP450酶的影响具有很重要的临床意义。实验选用大鼠肝脏组织,差速... 详细信息

黄连是临床常用药材,在中医药中被广泛应用,具有清热燥湿、泻火解毒之功,中药成分比较复杂,细胞色素P450(cytochrome P450,CYP450)同工酶是药物的主要代谢酶,研究黄连对CYP450酶的影响具有很重要的临床意义。实验选用大鼠肝脏组织,差速离心法分离肝微粒体,BCA(bicinchoninic acid)蛋白定量,应用同位素标记相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantification,iTRAQ)技术结合2D-LC-MS/MS筛选差异蛋白。黄连一共鉴定出30个CYP450同工酶,7个表达上调,8个表达下调,15个没有发生变化。iTRAQ技术结合2D-LC-MS/MS可以全面研究CYP450酶,但黄连有必要进一步在体外水平对其进行评价,预防潜在的临床药物相互作用。

关键词：黄连同位素标记相对和绝对定量技术(iTRAQ) CYP45同工酶 2D-LC-MS/MS 蛋白质组学

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黄芩与黄柏协同保护黄药子致肝毒性的实验研究

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中国中药杂志 2016年第5期41卷 898-903页

作者：王秋红杨欣王蒙杨炳友匡海学黑龙江中医药大学教育部北药基础与应用研究重点实验室黑龙江省中药及天然药物药效物质基础研究重点实验室黑龙江哈尔滨150040

黄药子是临床常用中药之一,临床作用广泛,但是黄药子有毒,容易引起药源性肝损伤。观察黄芩、黄柏及其配伍与黄药子合用时,对黄药子所致肝毒性的缓解作用。该实验采用SD雌性大鼠,黄药子9 g·kg-1连续灌胃28 d造成肝毒性模型,观察各... 详细信息

黄药子是临床常用中药之一,临床作用广泛,但是黄药子有毒,容易引起药源性肝损伤。观察黄芩、黄柏及其配伍与黄药子合用时,对黄药子所致肝毒性的缓解作用。该实验采用SD雌性大鼠,黄药子9 g·kg-1连续灌胃28 d造成肝毒性模型,观察各组大鼠肝脏组织学,评估转氨酶及抗氧化酶的活性。形态学和生化指标评估表明,黄药子致大鼠肝毒性模型成功,肝细胞溶解、肿胀、脂肪变性,间隙有炎性细胞,肝组织可见局部点状、片状水肿变性,部分坏死。肝功能相关指标(ALT,AST,ALP)显著升高,具有显著差异(P<0.05或P<0.01)。黄芩、黄柏及其配伍对黄药子引起的肝毒性具有保护作用,其中黄芩配伍黄柏对黄药子引起的肝毒性产生强大的保护作用。能使血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)活性显著降低(P<0.05或P<0.01),肝组织MDA含量显著降低(P<0.001)和GSH含量显著提高(P<0.001),肝组织细胞的病变程度得到明显改善。黄芩和黄柏及其配伍是通过提高肝脏的GSH和抗氧化水平,降低血清ALT,ALP和AST水平,减轻肝组织细胞的损伤,达到保肝的效果。

关键词：黄芩黄柏黄药子肝毒性

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尖叶假龙胆中木脂素类成分的分离与鉴定

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中药材 2014年第5期37卷 800-803页

作者：王知斌翟亚东于莹宋璞原王秋红杨炳友匡海学教育部北药基础与应用研究重点实验室/黑龙江省中药及天然药物药效物质基础研究重点实验室/黑龙江中医药大学黑龙江哈尔滨150040

目的：研究尖叶假龙胆的木脂素类成分。方法：利用硅胶柱色谱、ODS柱色谱等色谱技术对尖叶假龙胆乙醇提取物进行分离纯化,根据化合物光谱数据进行结构鉴定。结果：共分离鉴定了9个木脂素类化合物,分别为：脱氢二松柏醇-4,9＇-O-β-D-葡... 详细信息

目的：研究尖叶假龙胆的木脂素类成分。方法：利用硅胶柱色谱、ODS柱色谱等色谱技术对尖叶假龙胆乙醇提取物进行分离纯化,根据化合物光谱数据进行结构鉴定。结果：共分离鉴定了9个木脂素类化合物,分别为：脱氢二松柏醇-4,9＇-O-β-D-葡萄吡喃糖苷（1）、alaschanisoside A（2）、橙皮素A（3）、橄榄树脂素-4＇-O-β-D-葡萄吡喃糖苷（4）、leptolepisol D（5）、无梗五加苷D（6）、（＋）松脂素-4-O-β-D-葡萄吡喃糖苷（7）、（＋）8-羟基-松脂素-4-O-β-D-葡萄吡喃糖苷（8）、（＋）松脂素-8-O-β-D-葡萄吡喃糖苷（9）。结论：化合物1~9均为首次从该植物中分离得到,化合物1、9为首次从假龙胆属中分离得到,化合物2、3、5~8为首次从龙胆科植物中分离得到。

关键词：尖叶假龙胆化学成分木脂素类成分

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基于炮制学理论初探知母润肠通便作用的有效成分

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中国中药杂志 2015年第7期40卷 1283-1286页

作者：雷霞张婕李媛王秋红薛娟苏晓琳王长福夏永刚匡海学教育部北药基础与应用研究重点实验室黑龙江省中药及天然药物药效物质基础研究重点实验室黑龙江中医药大学黑龙江哈尔滨150040

该实验对知母盐炙前后水煎液通便作用及化学成分进行比较研究,通过观察生、盐知母水煎液对便秘大鼠的通便作用,采用超高效液相-质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术对知母盐炙前后化学成分进行比较,苯酚硫酸法测定其总糖含量。盐知母水煎液低、中... 详细信息

该实验对知母盐炙前后水煎液通便作用及化学成分进行比较研究,通过观察生、盐知母水煎液对便秘大鼠的通便作用,采用超高效液相-质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术对知母盐炙前后化学成分进行比较,苯酚硫酸法测定其总糖含量。盐知母水煎液低、中、高剂量组使大鼠粪便粒数显著增加,与同等剂量生知母相比有显著差异(P<0.05);总离子流图比较无明显差异,但总糖含量明显高于生知母。结果表明,知母盐制品在同等剂量时通便作用明显强于生品,与其盐制后甘味的作用增强有关,是其滋阴降火作用增强的具体体现;糖类化合物可能是其滋阴降火作用的物质基础,也是知母甘味的物质基础。

关键词：知母利水盐炙知母润肠通便

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接骨木根皮促进骨折愈合作用的研究

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中草药 2013年第14期44卷 1957-1961页

作者：韩华杨炳友杨柳夏永刚王秋红匡海学黑龙江中医药大学北药基础与应用研究教育部重点实验室黑龙江省中药及天然药物药效物质基础研究重点实验室黑龙江哈尔滨150040

目的观察接骨木根皮促进骨折愈合的作用。方法制备桡骨骨折家兔模型。实验分对照组,模型组,跌打丸(0.28g/kg)阳性对照组,接骨木低、中、高(0.17、0.34、0.68 g/kg)组,药物掺入饲料,于造模后第2天连续给药36 d。观察接骨木根皮对骨折区... 详细信息

目的观察接骨木根皮促进骨折愈合的作用。方法制备桡骨骨折家兔模型。实验分对照组,模型组,跌打丸(0.28g/kg)阳性对照组,接骨木低、中、高(0.17、0.34、0.68 g/kg)组,药物掺入饲料,于造模后第2天连续给药36 d。观察接骨木根皮对骨折区骨组织形态和血清相关生化指标的影响。结果与模型组比较,给药12 d,即骨折愈合初期,接骨木高、中剂量组兔血清碱性磷酸酶(ALP)、酸性磷酸酶(ACP)水平显著升高(P<0.05、0.01);给药24 d,即骨折愈合中期,接骨木高、中剂量组兔血清骨钙素(BGP)水平显著升高(P<0.05、0.01)。X光片显示,接骨木中剂量组兔骨膜反应密度较深,骨痂增深、量增多,且其密度与骨密度相似;光镜观察显示骨膜下新生骨组织形成均质的骨小梁,新生骨组织对原骨质两端成"工"字形包裹。结论接骨木根皮通过促进成骨细胞合成、分泌ALP和BGP及破骨细胞分泌ACP,提高成骨细胞的数量、加快局部坏死骨质的吸收及骨基质的成熟和钙化,从而加快骨折愈合。

关键词：接骨木骨折愈合碱性磷酸酶酸性磷酸酶骨钙素成骨细胞

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知母各化学拆分组分的抗炎及免疫调节活性

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中药材 2015年第9期38卷 1904-1907页

作者：雷霞董文婷笔雪艳苏晓琳夏永刚王秋红匡海学教育部北药基础与应用研究重点实验室/黑龙江省中药及天然药物药效物质基础研究重点实验室/黑龙江中医药大学黑龙江哈尔滨150040

目的:研究知母及其各化学拆分组分的抗炎免疫活性及其物质基础的对应关系。方法:C57小鼠除正常对照组外均采用2,4二硝基氟苯诱发超敏反应模型,观察小鼠免疫器官指数、耳肿胀度、耳组织IL-4及IFN-γ含量,体外实验观察刀豆蛋白(Con A)诱... 详细信息

目的:研究知母及其各化学拆分组分的抗炎免疫活性及其物质基础的对应关系。方法:C57小鼠除正常对照组外均采用2,4二硝基氟苯诱发超敏反应模型,观察小鼠免疫器官指数、耳肿胀度、耳组织IL-4及IFN-γ含量,体外实验观察刀豆蛋白(Con A)诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖力、脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7炎症因子分泌量。结果:知母煎液组、皂苷组及多糖组小鼠耳肿胀度及免疫器官指数显著降低(P<0.05),免疫细胞增殖能力显著降低(P<0.01),小鼠巨噬细胞炎症因子NO、TNF-α分泌显著减少(P<0.05)。结论:知母具有显著的抗炎及免疫调节活性,其物质基础为皂苷组分和多糖组分。

关键词：知母化学拆分组分性味药理学研究 T细胞巨噬细胞

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5种植物多糖的部分酸水解特征

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中草药 2013年第9期44卷 1101-1104页

作者：梁军夏永刚杨炳友王秋红匡海学黑龙江中医药大学北药基础与应用研究省部共建教育部重点实验室黑龙江省中药及天然药物药效物质基础研究重点实验室黑龙江哈尔滨150040

目的对5种植物多糖的部分酸水解特征及其水解产物的组成进行研究。方法分别采用0.05、0.2和0.5 mol/L三氟乙酸(TFA)对5种植物多糖进行部分酸水解,并研究其水解特征;结合超高效液相色谱及多元统计的方法对其水解产物的组成进行分析。结果... 详细信息

目的对5种植物多糖的部分酸水解特征及其水解产物的组成进行研究。方法分别采用0.05、0.2和0.5 mol/L三氟乙酸(TFA)对5种植物多糖进行部分酸水解,并研究其水解特征;结合超高效液相色谱及多元统计的方法对其水解产物的组成进行分析。结果 0.05 mol/L TFA水解后截留液中葡萄糖醛酸(X1GlcUA)量、0.05 mol/L TFA水解后透过液中阿拉伯糖(X2Ara)量、0.2 mol/L和0.5 mol/L TFA水解后截留液中阿拉伯糖(Y1Ara、Z1Ara)量、0.2 mol/L TFA水解后透过液中半乳糖醛酸(Y2GalUA)量为麻黄多糖区别其他植物多糖的特征水解片段。结论部分酸水解反应结合色谱分析,超高效液相色谱联合多元统计的方法,分析单糖组成及其量的变化,可以进一步为多糖的质量控制提供有力的依据。

关键词：植物多糖部分酸水解多元统计麻黄多糖三氟乙酸

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洋金花种子的化学成分研究(Ⅰ)

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中草药 2013年第14期44卷 1877-1880页

作者：杨炳友刘艳王欣夏永刚王秋红匡海学黑龙江中医药大学北药基础与应用研究省部共建教育部重点实验室黑龙江省中药及天然药物药效物质基础研究重点实验室黑龙江哈尔滨150040

目的研究洋金花Datura metel种子的化学成分。方法采用硅胶、ODS、Sephadex LH-20及HPLC等色谱方法分离化合物,利用NMR、MS波谱学方法鉴定其结构。结果从洋金花种子95%乙醇回流提取物的醋酸乙酯部位分离得到11个化合物,分别鉴定为大麻酰... 详细信息

目的研究洋金花Datura metel种子的化学成分。方法采用硅胶、ODS、Sephadex LH-20及HPLC等色谱方法分离化合物,利用NMR、MS波谱学方法鉴定其结构。结果从洋金花种子95%乙醇回流提取物的醋酸乙酯部位分离得到11个化合物,分别鉴定为大麻酰胺D(1)、大麻酰胺E(2)、顺式-大麻酰胺E(3)、大麻酰胺F(4)、大麻酰胺L(5)、大麻酰胺G(6)、大海米菊酰胺K(7)、莨菪内半缩醛(8)、曼陀罗醇酮(9)、N-trans-feruloyl tryptamine(10)、秦皮素(11)。结论化合物2、4为首次从茄科植物中分离得到,1、3、5～7为首次从该属中分离得到,8～11位首次从该植物中分离得到。

关键词：洋金花大麻酰胺E 大麻酰胺F 曼陀罗醇酮秦皮素

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基于大鼠应激性胃溃疡寒症模型的吴茱萸各性味组分的药性研究

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中国中药杂志 2014年第3期39卷 498-502页

作者：孟永海王秋红杨炳友杨志欣王艳艳王知斌匡海学黑龙江中医药大学北药基础与应用研究省部共建教育部重点实验室黑龙江省中药及天然药物药效物质基础研究重点实验室黑龙江哈尔滨150040

目的:阐明吴茱萸性味组分的药性归属。方法:采用冷水应激方法造成大鼠寒症模型,以模型大鼠血清中多巴胺(DA)、五羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)、乙酰胆碱酯酶(AChE)及17-羟皮质类固醇(17-OHCS)等神经递质及激素含量为指标,考察吴茱萸... 详细信息

目的:阐明吴茱萸性味组分的药性归属。方法:采用冷水应激方法造成大鼠寒症模型,以模型大鼠血清中多巴胺(DA)、五羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)、乙酰胆碱酯酶(AChE)及17-羟皮质类固醇(17-OHCS)等神经递质及激素含量为指标,考察吴茱萸及吴茱萸性味组分药性归属。结果:吴茱萸及各性味组分可在不同程度上纠正或缓解水应激寒症大鼠血清中与能量代谢、物质代谢相关的中枢神经递质及激素的含量。结论:判断吴茱萸及各性味组分的药性应归属为温性。

关键词：寒症模型吴茱萸性味组分药性

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柱前衍生化-HPLC法分析麻黄多糖ESP-B1的单糖组成

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中草药 2011年第10期42卷 1985-1988页

目的建立了柱前1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生HPLC法分离检测6种中性糖、2种糖醛酸的方法,对麻黄纯多糖ESP-B1的单糖组成进行分析。方法麻黄热提总多糖经各种离子交换和凝胶柱色谱分离得到1个麻黄纯多糖ESP-B1,经H2SO4水解后,用PM... 详细信息

目的建立了柱前1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生HPLC法分离检测6种中性糖、2种糖醛酸的方法,对麻黄纯多糖ESP-B1的单糖组成进行分析。方法麻黄热提总多糖经各种离子交换和凝胶柱色谱分离得到1个麻黄纯多糖ESP-B1,经H2SO4水解后,用PMP柱前衍生,KH2PO4-NaOH缓冲液(pH 6.8)-乙腈(84∶16)等度洗脱,高效液相250 nm紫外检测。结果麻黄纯多糖ESP-B1由甘露糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖4种单糖组成,其物质的量比为3.5∶2.2∶1.0∶93.3。结论该衍生化方法以及优化的高效液相色谱法具有简单、快速、重现性好等特点,可用于麻黄多糖中单糖组成的测定。

关键词：麻黄麻黄多糖衍生化单糖 HPLC

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