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心理医生 2016年第24期22卷 73-74页

作者：周珣谷宇佳哈尔滨医科大学基础医学院免疫教研室黑龙江哈尔滨 150081 黑龙江省农垦总局疾病预防控制中心黑龙江哈尔滨 150090

目的:研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand,TRAIL)和顺铂对前列腺癌细胞的杀伤作用及其协同作用.方法:选用前列腺癌细胞株DU145,将生长良好的细胞接种于96孔培养板,培养24h后用... 详细信息

目的:研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand,TRAIL)和顺铂对前列腺癌细胞的杀伤作用及其协同作用.方法:选用前列腺癌细胞株DU145,将生长良好的细胞接种于96孔培养板,培养24h后用顺铂(1,5,10 μ g/ml)和TRAIL (10,100,1000ng/ml)分别/联合作用24h,倒置显微镜下观察细胞的形态变化,然后用MTT法测定细胞的生长抑制率.结果:(1)细胞形态变化:(100,1000ng/ml)的TRAIL组、(5,10 μ g/ml)的顺铂组、以及上述浓度的TRAIL和顺铂联合用药组部分细胞变圆,从培养皿壁脱落,核/浆比例增大,胞浆颗粒增多,胞核有皱缩变形,大小不均.上述改变的程度随着药物浓度的增加而加重.(2)细胞生长抑制率:细胞生长抑制率10ng/mLTRAIL和1μg/mL顺铂对DU145的生长抑制率和不用药组比较无显著性差异(P＞0.05);(100,1000)ng/mLTRAIL和(5,10)μ g/mL顺铂对DU145的生长抑制率显著高于阴性对照组(P＜0.05),而且随着TRAIL和顺铂浓度的升高,生长抑制率显著增高(P＜0.05);(100,1000) ng/mL的TRAIL和(5,10)μ g/mL的顺铂分别联合作用对DU145的抑制率均高于单独给药组(P＜0.05);10ng/mL的TRAIL单独用药对DU145的抑制作用虽不显著(P＞0.05),但和(5,10)μg/mL顺铂联合用药均能加强后者对DU145的抑制作用(P＜0.05).结论TRAIL和顺铂在杀伤前列腺癌细胞时存在协同作用.

关键词： TRAIL 顺铂前列腺癌细胞协同作用

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Gelsolin的生物学功能与其在疾病诊断及治疗中的作用

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国际免疫学杂志 2016年第4期39卷 364-367页

作者：孙迪李辉考文萍张凤民哈尔滨医科大学基础医学院微生物教研室伍连德研究所黑龙江省感染与免疫重点实验室黑龙江省普通高校病原生物学重点实验室150081 哈尔滨医科大学基础医学院

凝溶胶蛋白（Gelsolin）是一种激动蛋白结合蛋白,目前被认为在细胞运动、细胞吞噬中有重要的作用.近年,研究表明在许多疾病中血清Gelsolin水平下降,且其与疾病的严重程度、并发症的发生率和并发症的严重程度有关,能够预测并发症的发生... 详细信息

凝溶胶蛋白（Gelsolin）是一种激动蛋白结合蛋白,目前被认为在细胞运动、细胞吞噬中有重要的作用.近年,研究表明在许多疾病中血清Gelsolin水平下降,且其与疾病的严重程度、并发症的发生率和并发症的严重程度有关,能够预测并发症的发生和严重程度.Gelsolin还被发现有降糖和抗炎的作用,可以对疾病治疗起到一定作用.因而有必要对Gelsolin的生物学功能与其在疾病诊断及治疗中的作用进行研究.

关键词：凝溶胶蛋白诊断治疗

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时空调控miR-195敲减转基因载体的构建及验证

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国际遗传学杂志 2016年第3期39卷 123-132页

作者：班涛张玉瑶吴兆菊赵欣朱久新哈尔滨医科大学药学院药理教研室黑龙江中医药大学基础医学院解剖与组胚教研室哈尔滨市第一医院药剂科

目的构建时空调控miR-195敲减转基因载体并验证其活性。方法通过分子克隆技术构建含有神经特异性启动子、四环素诱导表达系统、miR-195海绵、绿色荧光蛋白及绝缘子等调控元件的转基因载体并测序鉴定,利用细胞转染技术将该载体瞬时转染入... 详细信息

目的构建时空调控miR-195敲减转基因载体并验证其活性。方法通过分子克隆技术构建含有神经特异性启动子、四环素诱导表达系统、miR-195海绵、绿色荧光蛋白及绝缘子等调控元件的转基因载体并测序鉴定,利用细胞转染技术将该载体瞬时转染入SHSY5Y细胞,经荧光显微镜观察其荧光表达,利用实时定量PCR技术及蛋白免疫印迹检测miR-195含量及GFP蛋白表达。结果通过将Tet-on四环素诱导系统中反义转录激活子rtTA克隆到NSE启动子下游,以及TRE-Tight的多克隆位点内引入miR-195海绵携带IRES介导的EGFP,获得双质粒Tet-on表达载体。以pcDNA3.1+质粒为骨架,3个不同区域的双拷贝cHs4绝缘子核心片段为间隔,将其调控元件(NSE-rtTA)和反应元件(TRE-miR-195 spongeIRES-EGFP)串联成单一转基因载体。该载体经测序验证序列正确,瞬时转染入SH-SY5Y细胞,经强力霉素诱导36 h后细胞内可见明显绿色荧光蛋白表达,且miR-195表达水平明显降低。结论成功构建神经系统特异性miR-195敲减转基因载体,并具有时空调控的特点,为进一步建立转基因动物模型奠定基础。

关键词： miR-195 转基因载体 Tet-on四环素诱导表达系统

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胞浆PINK1生物学功能的研究进展

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生命的化学 2016年第1期36卷 111-116页

作者：武金玉张艳芬徐亚高旭马宁哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室哈尔滨150081 哈尔滨医科大学附属第二医院实验诊断教研室哈尔滨150081 北方转化医学研究合作中心哈尔滨150081 黑龙江省医学科学院基础医学研究所哈尔滨150081

PINK1(PTEN-induced putative kinase 1)是由581个氨基酸残基组成,具有高度保守结构域的丝氨酸/苏氨酸双激酶。研究证实,PINK1的N端线粒体靶向序列引导其定位于线粒体,在帕金森病及肿瘤中发挥线粒体融合分裂、能量代谢及线粒体自噬的调... 详细信息

PINK1(PTEN-induced putative kinase 1)是由581个氨基酸残基组成,具有高度保守结构域的丝氨酸/苏氨酸双激酶。研究证实,PINK1的N端线粒体靶向序列引导其定位于线粒体,在帕金森病及肿瘤中发挥线粒体融合分裂、能量代谢及线粒体自噬的调控作用。近年来,多项研究表明其可定位于胞浆,并参与一些胞浆内蛋白的磷酸化调节。本文对PINK1的胞浆定位与生物学功能进行综述,以期丰富人们对该分子成熟、定位及功能的认识。

关键词：胞浆PINK1 线粒体自噬蛋白质定位蛋白质翻译后加工修饰

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小剂量多巴胺对氧化应激诱导大鼠心肌细胞凋亡的影响及其机制

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中国应用生理学杂志 2015年第1期31卷 67-71页

作者：蔡晓娜时飒李鸿珠王丽娜张力李弘哈尔滨医科大学基础医学院病理生理学教研室黑龙江哈尔滨150086

目的:探讨小剂量多巴胺(DA)对氧化应激诱导大鼠心肌细胞凋亡的作用及可能机制。方法:采用培养的新生大鼠心肌细胞,随机分为正常对照组(control),过氧化氢处理组(H2O2),小剂量多巴胺干预组(DA+H2O2),多巴胺受体Ⅰ型阻断剂干预组(DR1+DA+H... 详细信息

目的:探讨小剂量多巴胺(DA)对氧化应激诱导大鼠心肌细胞凋亡的作用及可能机制。方法:采用培养的新生大鼠心肌细胞,随机分为正常对照组(control),过氧化氢处理组(H2O2),小剂量多巴胺干预组(DA+H2O2),多巴胺受体Ⅰ型阻断剂干预组(DR1+DA+H2O2),多巴胺受体II型阻断剂干预组(DR2+DA+H2O2);应用流式细胞仪、MTT检测心肌细胞的凋亡率,透射电子显微镜检测细胞超微结构的变化,比色法检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)活性,Western blot检测Cytochrone c、Caspase 3、Caspase 9的蛋白表达情况。结果:与单纯H2O2组相比,小剂量多巴胺(10μmol/L)可降低LDH活性,升高SOD活性,抑制心肌细胞凋亡和凋亡相关蛋白的表达;DR1阻断剂SCH-23390干预后,能够部分逆转这种作用,而DR2阻断剂Haloperido干预后没有明显的变化。结论:小剂量多巴胺可能通过DR1抑制氧化应激诱导的心肌细胞凋亡。

关键词：凋亡多巴胺心肌细胞氧化应激大鼠

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动脉粥样硬化大鼠心肌梗死时钙敏感受体表达的变化及其作用机制

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现代生物医学进展 2016年第24期16卷 4631-4635,4679页

作者：郭津顾镜月王鲁川吕洋许洪伟孙颖徐长庆李鸿珠张士岭马冬梅佳木斯大学附属第三医院小儿神经科黑龙江佳木斯154002 佳木斯大学附属第一医院儿一科黑龙江佳木斯154003 哈尔滨医科大学基础医学院病理生理教研室黑龙江哈尔滨150086

目的:探讨动脉粥样硬化大鼠心肌梗死时钙敏感受体表达的变化及其作用机制。方法:Wistar大鼠随机分为4组:正常对照组(Control);异丙肾上腺组(ISO);动脉硬化组(AS);动脉硬化+异丙肾上腺素组(AS/ISO)。采用腹腔注射VD3和高脂饮食及大剂量... 详细信息

目的:探讨动脉粥样硬化大鼠心肌梗死时钙敏感受体表达的变化及其作用机制。方法:Wistar大鼠随机分为4组:正常对照组(Control);异丙肾上腺组(ISO);动脉硬化组(AS);动脉硬化+异丙肾上腺素组(AS/ISO)。采用腹腔注射VD3和高脂饮食及大剂量异丙肾上腺素(ISO 200 mg/kg)皮下注射复制大鼠在体动脉粥样硬化心肌梗死模型,应用RT-PCR测定心肌组织中Ca SR、Bax、Bcl-2和caspase-3 m RNA的表达变化;TUNEL染色观察心肌细胞凋亡情况;光镜观察心肌形态学变化;紫外分光法检测血清肌酸激酶(CK)、电化学免疫发光法检测肌钙蛋白T(c Tn T)水平。结果:与正常组比较,ISO组CK活性、c Tn T水平以及Ca SR、Bax和caspase-3的表达均增加,同时Bcl-2表达减少,心肌细胞损伤严重,AS/ISO的心肌损伤进一步加重。结论:Ca SR的表达增多参与了动脉硬化大鼠心肌梗死的发生,其机制可能与促进心肌细胞凋亡有关。

关键词：钙敏感受体心肌梗死细胞凋亡动脉硬化

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黄芩素对肺炎克雷伯菌的耐药基因mRNA的抑制及其与头孢噻肟的协同抗菌作用

黄芩素对肺炎克雷伯菌的耐药基因mRNA的抑制及其与头孢噻肟的协同...

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中华中医药学会免疫学分会第二次学术交流会暨中华中医药学会免疫学分会青年委员会成立大会

作者：蔡文辉付英梅张文莉陈小贝王亚贤赵吉子张凤民黑龙江中医药大学基础医学院微生物学与免疫学教研室黑龙江哈尔滨150000 哈尔滨医科大学伍连德研究所微生物学教研室黑龙江哈尔滨150000 哈尔滨医科大学伍连德研究所微生物学教研室黑龙江哈尔滨150000 哈尔滨医科大学黑龙江省感染与免疫重点实验室黑龙江哈尔滨150000 哈尔滨医科大学伍连德研究所微生物学教研室黑龙江哈尔滨150000 黑龙江中医药大学基础医学院微生物学与免疫学教研室黑龙江哈尔滨150000

目的:观察中药活性成分黄芩素与头孢噻肟联合对ESBL阳性肺炎克雷伯菌标准株的协同作用,并分析作用机制,为临床上抗生素的协同用药提供依据.方法:依据CLSI 2012的方法与判定标准,选取超广谱β-内酰胺酶阳性肺炎克雷伯菌标准株*** 700603... 详细信息

目的:观察中药活性成分黄芩素与头孢噻肟联合对ESBL阳性肺炎克雷伯菌标准株的协同作用,并分析作用机制,为临床上抗生素的协同用药提供依据.方法:依据CLSI 2012的方法与判定标准,选取超广谱β-内酰胺酶阳性肺炎克雷伯菌标准株*** 700603,并分别确定头孢噻肟、黄芩素的MIC值;应用微量棋盘稀释法,确定黄芩素与头孢噻肟联合的协同作用;采用PCR及RT-PCR方法,分析黄芩素对细菌耐药基因mRNA表达的影响.

关键词：黄芩素超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌协同抗菌作用 mRNA表达

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VEGF-C/D及受体VEGFR-3与肝癌淋巴道转移的研究进展

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大连医科大学学报 2016年第4期38卷 402-406页

作者：李易嶙武晓彤黄波大连医科大学基础医学院病理教研室辽宁大连116044 哈尔滨市胸科医院病理科黑龙江哈尔滨150056 辽宁省肿瘤医院病理科辽宁沈阳110042

VEGF家族即血管内皮生长因子家族,包括VEGF-A/B/C/D/E及PIGF(胎盘生长因子),它们在人类的各种病理及生理过程中发挥着重要的作用。其中,VEGF-C/D及其受体VEGFR-3主要在淋巴管生成中发挥作用,可以促进淋巴管的生成及淋巴管内皮细胞的生... 详细信息

VEGF家族即血管内皮生长因子家族,包括VEGF-A/B/C/D/E及PIGF(胎盘生长因子),它们在人类的各种病理及生理过程中发挥着重要的作用。其中,VEGF-C/D及其受体VEGFR-3主要在淋巴管生成中发挥作用,可以促进淋巴管的生成及淋巴管内皮细胞的生长。对其在肝癌淋巴道转移中的研究可以帮助早期发现淋巴道转移,从而及早治疗提高患者生存率。

关键词：肝癌 VEGF—C VEGF—D VEGFR-3 淋巴道转移

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苦参总黄酮对D-半乳糖致衰老小鼠的影响

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中国中药杂志 2015年第21期40卷 4240-4244页

作者：范红艳顾饶胜任旷王艳春姚祯沈楠刘师兵吉林医药学院基础医学院吉林吉林132013 哈尔滨医科大学药理教研室黑龙江哈尔滨150081

该文研究了苦参总黄酮(flavonoids from Sophora flavescens)对D-半乳糖致衰老小鼠的影响,并探讨其作用机制。将60只小鼠随机分为对照组、模型组、脑复康组(阳性对照组)、苦参总黄酮低、中、高剂量组。采用D-半乳糖(160 mg·kg-1)... 详细信息

该文研究了苦参总黄酮(flavonoids from Sophora flavescens)对D-半乳糖致衰老小鼠的影响,并探讨其作用机制。将60只小鼠随机分为对照组、模型组、脑复康组(阳性对照组)、苦参总黄酮低、中、高剂量组。采用D-半乳糖(160 mg·kg-1)颈背部皮下注射连续30 d建立亚急性衰老小鼠模型,造模同时,苦参总黄酮低、中、高剂量组分别灌胃苦参总黄酮(150,300,600mg·kg-1),连续30 d。采用跳台试验、避暗试验来检测小鼠的学习记忆能力,检测脑组织中丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子(TNF-α)含量与超氧化物歧化酶(SOD)、单胺氧化酶-B(MAO-B)、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性,检测血清中乳酸脱氢酶(LDH)的活性,并且HE染色,光镜下观察脑海马齿状回区组织结构的变化。结果发现,与模型组比较,苦参总黄酮中、高剂量组及脑复康组能明显延长避暗潜伏期、跳台潜伏期,苦参总黄酮各剂量组及脑复康组均减少避暗错误次数,苦参总黄酮高剂量组及脑复康组可减少跳台错误次数(P<0.05或P<0.01)。苦参总黄酮中、高剂量组及脑复康组能提高衰老小鼠脑组织中SOD和Na+-K+-ATP酶活性,降低脑组织中MAO-B的活性、MDA及TNF-α含量,降低衰老小鼠血清中LDH活性(P<0.05或P<0.01)。苦参总黄酮各剂量组及脑复康组脑组织中Ca2+-ATP酶活性增强,同模型组比较有统计学差异(P<0.05或P<0.01)。病理可见模型组海马齿状回细胞数目减少,细胞排列稀疏,细胞形态欠完整,胞浆稀少,胞核与胞浆界限欠清晰,细胞核深染,固缩不规则形,核仁不明显。苦参总黄酮组及脑复康组海马组织形态较模型组改善。可见,苦参总黄酮能改善D-半乳糖致衰老小鼠的学习记忆能力,其作用机制可能与通过减少TNF-α含量而增强抗氧化作用,从而稳定细胞膜、降低脑内MAO-B活性有关。

关键词：苦参总黄酮 D-半乳糖抗氧化 MAO-B TNF-α

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羟基乙酰化姜黄素诱导的声动力治疗对巨噬细胞凋亡与坏死的影响

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中国应用生理学杂志 2015年第2期31卷 102-106页

作者：杨力明梁会娟彭成海程佳丽王欢翁丽清李志韬田野哈尔滨医科大学基础医学院病生教研室黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨工业大学物理凝聚态实验室黑龙江哈尔滨150001 哈尔滨医科大学附属第四医院急诊内科黑龙江哈尔滨150001 哈尔滨医科大学附属第一医院心内科黑龙江哈尔滨150001

目的:探讨羟基乙酰化姜黄素(HAC)介导的声动力治疗对人急性单核细胞白血病细胞核(THP-1)源巨噬细胞凋亡的影响。方法:体外诱导THP-1源巨噬细胞,通过单纯药物和单纯超声对细胞存活率的影响优化出声动力治疗的最适条件。将细胞分为4组(1&#... 详细信息

目的:探讨羟基乙酰化姜黄素(HAC)介导的声动力治疗对人急性单核细胞白血病细胞核(THP-1)源巨噬细胞凋亡的影响。方法:体外诱导THP-1源巨噬细胞,通过单纯药物和单纯超声对细胞存活率的影响优化出声动力治疗的最适条件。将细胞分为4组(1×105cells/ml):对照组、单纯超声组、单纯HAC组和声动力治疗组。应用声动力体外治疗巨噬细胞,药物HAC终浓度为5μg/ml,超声强度为0.5 W/cm2,超声时间为5 min。不同治疗方法后用无血清培养液培养6 h,用CCK-8法测定细胞存活率的变化,用Annexin V/PI法测定细胞凋亡、坏死变化。结果:CCK-8法测得声动力治疗后,细胞存活率明显下降(P<0.01),Annexin V/PI法测得声动力治疗后,细胞凋亡率和坏死率均升高,凋亡/坏死比升高(P<0.01)。结论:羟基乙酰化姜黄素介导的声动力治疗对THP-1巨噬细胞的凋亡有明显的诱导效应。

关键词：羟基乙酰化姜黄素声动力治疗巨噬细胞凋亡

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