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中国老年学杂志 2013年第22期33卷 5617-5619页

作者：王迪迪葛堂栋杨玉张鹏霞佳木斯大学基础医学院生物化学教研室黑龙江佳木斯154007

目的研究磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)抑制剂Ly294002对人白血病HL-60细胞的影响。方法 MTT实验检测Ly294002对HL-60细胞增殖的抑制作用;透射电镜进行细胞形态学观察;RT-PCR检测Ly294002作用后,PI3K、Akt mRNA的表达。结果与未用药组比较Ly29... 详细信息

目的研究磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)抑制剂Ly294002对人白血病HL-60细胞的影响。方法 MTT实验检测Ly294002对HL-60细胞增殖的抑制作用;透射电镜进行细胞形态学观察;RT-PCR检测Ly294002作用后,PI3K、Akt mRNA的表达。结果与未用药组比较Ly294002对HL-60细胞增殖具有抑制作用,且在24 h内随着作用浓度的增加而增强;透射电镜观察细胞出现凋亡形态学改变;RT-PCR检测用药组PI3K、Akt mRNA表达均下调(P<0.01)。结论 PI3K抑制剂Ly294002能通过PI3K/Akt信号通路抑制HL-60细胞增殖,50μmol/L的Ly294002作用白血病HL-60细胞24 h,其增殖抑制作用效果最佳。

关键词：白血病 Ly294002 PI3K Akt HL-60

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菟丝子醇提液对衰老模型大鼠肝细胞p16和cyclinD1基因表达的影响

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中国老年学杂志 2011年第21期31卷 4208-4210页

作者：孙洁李晶欧芹魏晓东朴金花葛堂栋王迪迪佳木斯大学基础医学院生物化学教研室黑龙江佳木斯154007

目的研究菟丝子醇提液对衰老模型大鼠肝细胞p16和cyclinD1基因表达的影响,探讨菟丝子延缓衰老作用的机制。方法实验以50只Wistar大鼠为研究对象,采用D-半乳糖法制作衰老模型,采用经胃灌服法按照0.8 ***-1.d-1给药,采用半定量RT-PCR法测... 详细信息

目的研究菟丝子醇提液对衰老模型大鼠肝细胞p16和cyclinD1基因表达的影响,探讨菟丝子延缓衰老作用的机制。方法实验以50只Wistar大鼠为研究对象,采用D-半乳糖法制作衰老模型,采用经胃灌服法按照0.8 ***-1.d-1给药,采用半定量RT-PCR法测定大鼠肝组织p16和cyclinD1 mRNA的表达,免疫组化SABC法检测p16和cyclinD1蛋白的表达,并观察菟丝子醇提液对其影响。结果衰老模型大鼠p16 mR-NA及蛋白表达较青年组明显增高(P<0.01),而cyclinD1mRNA及蛋白表达降低(P<0.05)。菟丝子醇提液可降低p16基因表达(P<0.01),使cy-clinD1基因表达增强(P<0.05),并呈现时间渐进性改变。结论菟丝子醇提液通过影响细胞调控因子p16、cyclinD1表达延缓肝细胞的衰老。

关键词：菟丝子醇提液衰老模型大鼠 p16 cyclinD1 肝细胞

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血红素加氧酶2和CO在去势大鼠阴茎海绵体中的表达

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中华男科学杂志 2015年第5期21卷 396-401页

作者：王柏欣陈梅王景涛王淑秋徐辉刘蕾秦文波邱洪斌佳木斯大学基础医学院生理学教研室黑龙江佳木斯154007 佳木斯大学附属第一医院儿科黑龙江佳木斯154007 佳木斯大学基础医学院解剖学教研室黑龙江佳木斯154007 佳木斯大学基础医学院病理生理学教研室黑龙江佳木斯154007 佳木斯大学基础医学院生物化学教研室黑龙江佳木斯154007 佳木斯大学附属第二医院泌尿外科黑龙江佳木斯154007 佳木斯大学公共卫生学院流行病学教研室黑龙江佳木斯154007

目的:检测去势大鼠阴茎海绵体中血红素加氧酶2(HO-2)/CO的表达,初步探讨勃起功能障碍(ED)的发病机制。方法:雄性SD大鼠72只均分为对照组、假手术组、去势组和去势锌原卟啉(Zn PP,HO阻断剂)组,检测基础条件和阿扑吗啡(APO)刺激后的海绵... 详细信息

目的:检测去势大鼠阴茎海绵体中血红素加氧酶2(HO-2)/CO的表达,初步探讨勃起功能障碍(ED)的发病机制。方法:雄性SD大鼠72只均分为对照组、假手术组、去势组和去势锌原卟啉(Zn PP,HO阻断剂)组,检测基础条件和阿扑吗啡(APO)刺激后的海绵体内压(ICP)和勃起率;激光共聚焦显微镜检测大鼠勃起不同时期阴茎海绵体组织中HO-2蛋白的表达,分光光度计测定CO在大鼠勃起不同时期的含量。结果:基础条件和APO刺激后ICP和勃起率,去势组[(11.68±0.69)mm Hg,(54.81±3.86)mm Hg,33.3%]和去势Zn PP组[(11.20±0.71)mm Hg,(41.17±5.41)mm Hg,22.2%],与对照组[(22.83±2.66)mm Hg,(66.92±7.77)mm Hg,100%]和假手术组[(23.35±2.22)mm Hg,(70.43±7.22)mm Hg,100%]比较显著下降(P均<0.01),且APO刺激后去势Zn PP组ICP较去势组明显降低(P<0.01)。APO刺激后,勃起前和勃起中阴茎海绵体HO-2蛋白表达,去势组(445.4±23.7,847.4±35.0)和去势Zn PP组(390.1±29.7,526.0±52.5)较对照组(512.7±57.4,1 145.2±89.8)和假手术组(583.7±8.0,1 016.3±79.8)显著下降(P<0.05或P<0.01),且勃起中去势Zn PP组HO-2蛋白表达较去势组明显降低(P<0.01);勃起后各组之间的HO-2蛋白表达变化差异无显著性。勃起前、中和后阴茎海绵体CO含量,去势组[(20.59±1.01)×10-7nmol/L,(32.53±1.26)×10-7nmol/L,(18.71±1.22)×10-7nmol/L]和去势Zn PP组[(12.52±1.05)×10-7nmol/L,(21.90±1.02)×10-7nmol/L,(16.56±0.55)×10-7nmol/L]较对照组[(26.76±1.41)×10-7nmol/L,(48.25±1.01)×10-7nmol/L,(27.10±1.58)×10-7nmol/L]和假手术组[(25.41±2.09)×10-7nmol/L,(47.90±1.22)×10-7nmol/L,(25.67±1.20)×10-7nmol/L]显著下降(P<0.05或P<0.01),且勃起中去势Zn PP组CO含量较去势组明显下降(P<0.01)。结论:HO-2和CO表达下降与去势大鼠ED的发生有关。

关键词：去势勃起功能障碍阴茎海绵体血红素加氧酶2 一氧化碳锌原卟啉大鼠

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齐墩果酸通过miR-18a-5p/STK4轴抑制白血病K562细胞恶性进展

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中国生物化学与分子生物学报 2024年第5期40卷 708-720页

作者：谢波来永巍韩旭徐岩王迪迪张鹏霞佳木斯大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室黑龙江佳木斯154007

慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)是由于骨髓造血干细胞的恶性增生导致的疾病。虽然酪氨酸激酶抑制剂(Tyrosine kinase inhibitors,TKI)对慢性粒细胞性白血病的治疗取得长足进展,但耐药问题仍未解决。因此,寻找新的治疗... 详细信息

慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)是由于骨髓造血干细胞的恶性增生导致的疾病。虽然酪氨酸激酶抑制剂(Tyrosine kinase inhibitors,TKI)对慢性粒细胞性白血病的治疗取得长足进展,但耐药问题仍未解决。因此,寻找新的治疗药物和靶点十分关键。有研究表明,miRNAs与慢性粒细胞白血病在内的多种肿瘤有密切联系,齐墩果酸(oleanolic acid,OA)对白血病细胞有较好的抑制效果。通过对转录物组测序结果发现,齐墩果酸可以显著上调丝氨酸/苏氨酸蛋白质激酶4(serine/threonine-protein kinase 4,STK 4)的水平,而miR1a-5p是STK 4的靶miRNA。因此,本文旨在探究齐墩果酸是否可以通过miR-18a-5p/STK4影响K562细胞恶性进展。K562细胞经齐墩果酸处理后差异表达基因富集在凋亡相关通路上。EdU实验和CCK-8实验结果发现,齐墩果酸降低K562细胞增殖能力(P<0.05)。qRT-PCR,免疫荧光和Western印迹结果显示,齐墩果酸处理后,K562细胞中STK 4蛋白质水平表达显著上调(P<0.05),miR-18a-5p表达下调(P<0.05)。在细胞中转染miR-18a-5p mimics,能显著抑制STK 4的表达(P<0.05);转染miR-18a-5p inhibitor能显著增加STK 4的表达(P<0.05)。活性氧(reactive oxygen species、ROS)检测和线粒体膜电位检测结果显示,齐墩果酸可以促进K562细胞中ROS的增加,降低线粒体膜电位。过表达STK 4后,与Vector组相比,细胞的线粒体膜电位下降;敲降STK 4可以逆转齐墩果酸组导致的线粒体膜电位下降。流式细胞术检测显示,齐墩果酸能明显促进细胞凋亡的发生,而转染miR-18a-5p mimics后凋亡率显著下调(P<0.05);过表达STK 4可以促进细胞从早期凋亡向晚期凋亡转化,而同时转染miR-18a-5p mimics可以抑制这一现象。我们的研究结果证实,齐墩果酸可以通过维持miR-18a-5p的低表达和保持STK 4的高表达状态来促进K562细胞的凋亡。

关键词：齐墩果酸 K562 miR-18a-5p 丝氨酸/苏氨酸蛋白质激酶4 细胞凋亡

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何首乌对D-半乳糖致衰大鼠的抗衰益智作用机制的研究

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中国康复医学杂志 2005年第4期20卷 251-253页

作者：张鹏霞汤晓丽朴金花欧芹魏晓东黑龙江省佳木斯大学基础医学院生物化学教研室 154007

目的:探讨何首乌对D-半乳糖致衰大鼠海马的抗衰益智作用机制。方法:以D-半乳糖致衰大鼠为研究对象,采用Y-迷宫及一次被动回避反应,检测大鼠的学习记忆能力;用荧光标记测定海马突触体内游离钙离子浓度;用免疫组织化学结合图像分析测定海... 详细信息

目的:探讨何首乌对D-半乳糖致衰大鼠海马的抗衰益智作用机制。方法:以D-半乳糖致衰大鼠为研究对象,采用Y-迷宫及一次被动回避反应,检测大鼠的学习记忆能力;用荧光标记测定海马突触体内游离钙离子浓度;用免疫组织化学结合图像分析测定海马内突触素(synaptophsin,P38)的灰度值。同时观察了何首乌对上述各项指标的影响。结果:老年模型组突触体内钙离子浓度显著升高,P38灰度值也明显高于青年对照组;何首乌给药组与老年模型组比较,学习记忆能力明显改善,突触体内钙离子浓度显著降低,P38灰度值也明显低于老年模型组。结论:何首乌可能通过抑制突触体内钙离子超载、提高P38含量起到抗衰益智作用。

关键词： D-半乳糖作用机制何首乌学习记忆能力游离钙离子浓度被动回避反应免疫组织化学抗衰益智作用钙离子超载灰度值 P38 大鼠海马研究对象 Y-迷宫海马突触荧光标记分析测定体内突触素海马内模型老年对照组

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一组新的沙蚕蛋白酶同工酶的分离纯化与鉴定

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中国生物化学与分子生物学报 2008年第4期24卷 359-365页

作者：李奇王昭洪敏吉林大学基础医学院生物化学教研室吉林长春130021 佳木斯大学医学院生物化学教研室黑龙江佳木斯154000

分离纯化一组新的沙蚕蛋白酶同工酶，并对其性质进行鉴定．用硫酸铵盐析、凝胶过滤层析和疏水层析技术从沙蚕中分离得到了沙蚕蛋白酶，经聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）、高效液相色谱（HPLC）、等电聚焦电泳（IEF）和质谱分析（MS）鉴定... 详细信息

分离纯化一组新的沙蚕蛋白酶同工酶，并对其性质进行鉴定．用硫酸铵盐析、凝胶过滤层析和疏水层析技术从沙蚕中分离得到了沙蚕蛋白酶，经聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）、高效液相色谱（HPLC）、等电聚焦电泳（IEF）和质谱分析（MS）鉴定，发现沙蚕蛋白酶由3个组分组成，均有纤溶活性，其等电点为3．5～4．5，分子量分别为29248．75、29007．66、28954．17，肽指纹图谱分析发现，它们均为未知的新蛋白质，其中2个组分结构相似，具有较高的同源性，与另1个有不同．用抗原抗体反应鉴定其免疫原性，发现3个组分中有2个组分具有相同的免疫原性，另1个组分与2者不同．但3者具有相同的抗原决定簇，证明沙蚕蛋白酶由2个同工酶组成．以4种专一性的抑制剂对其进行抑制，检测酶的活性确定其酶学性质，发现其反应的适宜温度为40℃～50℃、适宜pH值为8～9．沙蚕蛋白酶属于丝氨酸蛋白酶．

关键词：沙蚕蛋白酶同工酶纯化鉴定

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游泳对老年大鼠自由基代谢的影响

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中国老年学杂志 2004年第6期24卷 562-563页

作者：李福祥江旭东李晶佳木斯大学体育学院黑龙江佳木斯154007 佳木斯大学基础医学院生物化学教研室

本文就游泳对衰老大鼠自由基代谢影响进行了研究,探讨游泳在延缓衰老中的作用.

关键词：老龄大鼠自由基游泳线粒体

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茜草多糖对衰老模型小鼠脑细胞凋亡影响的实验研究

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中国老年学杂志 2008年第5期28卷 442-444页

作者：欧芹李晶魏晓东王明富谢红佳木斯大学基础医学院生物化学教研室黑龙江佳木斯154007 天津武警医学院

目的探讨茜草多糖延缓衰老作用机制及其对脑细胞凋亡的影响和作用机制。方法采用D-半乳糖衰老模型小鼠作为研究对象,提取茜草多糖,观察茜草对脑细胞凋亡、Bcl-2、线粒体细胞色素C(cytC)和Ca2+含量的影响。结果D-半乳糖衰老模型小鼠脑细... 详细信息

目的探讨茜草多糖延缓衰老作用机制及其对脑细胞凋亡的影响和作用机制。方法采用D-半乳糖衰老模型小鼠作为研究对象,提取茜草多糖,观察茜草对脑细胞凋亡、Bcl-2、线粒体细胞色素C(cytC)和Ca2+含量的影响。结果D-半乳糖衰老模型小鼠脑细胞凋亡率明显增加,而Bcl-2蛋白表达降低(P<0.01),线粒体cytC和Ca2+含量明显下降(P<0.01),茜草多糖可明显降低凋亡细胞数(P<0.01),增加Bcl-2的表达(P<0.05),提高线粒体cytC水平和Ca2+含量(P<0.01)。结论茜草多糖具有延缓脑细胞衰老的作用,可通过①上调Bcl-2蛋白的表达,②保护线粒体避免cytC的释出,③提高线粒体Ca2+缓冲含量,从而发挥抑制脑细胞凋亡的作用。

关键词：茜草多糖脑细胞凋亡衰老模型Bcl-2 细胞色素C

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山茱萸多糖对衰老模型小鼠肝组织SIRT1和p53基因表达的影响

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中国老年学杂志 2015年第7期35卷 1885-1886页

作者：李晶欧芹江旭东王迪迪朴金花佳木斯大学基础医学院生物化学教研室黑龙江佳木斯154007

目的研究山茱萸多糖对衰老模型小鼠肝细胞SIRT1和p53基因表达的影响。方法采用半定量RT-PCR法测定小鼠肝组织SIRT1 mRNA和p53 mRNA的表达,并观察山茱萸多糖对其影响。结果与青年对照组相比,衰老模型组小鼠p53 mRNA表达增高,SIRT1 mRNA... 详细信息

目的研究山茱萸多糖对衰老模型小鼠肝细胞SIRT1和p53基因表达的影响。方法采用半定量RT-PCR法测定小鼠肝组织SIRT1 mRNA和p53 mRNA的表达,并观察山茱萸多糖对其影响。结果与青年对照组相比,衰老模型组小鼠p53 mRNA表达增高,SIRT1 mRNA表达降低(P<0.01)。山茱萸多糖可降低p53基因表达(P<0.05),使SIRT1基因表达增强,但与衰老模型组相比差异无统计学意义(P>0.05);山茱萸多糖大小剂量组间无明显差异(P>0.05)。结论山茱萸多糖通过影响SIRT1对p53的作用而延缓衰老。

关键词：山茱萸多糖衰老 p53 SIRT1

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D-半乳糖致衰大鼠非酶糖基化改变及菟丝子醇提液对其作用的研究

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中国老年学杂志 2009年第19期29卷 2494-2496页

作者：魏晓东刘玉萍李晶孙洁欧芹佳木斯大学基础医学院生物化学教研室黑龙江佳木斯154007 黑龙江省双鸭山市人民医院

目的研究D-半乳糖致衰大鼠非酶糖基化作用及菟丝子醇提液对其影响,探讨衰老发生的机制及菟丝子延缓衰老作用的机制。方法采用D-半乳糖制作衰老大鼠模型,观察15、30、45d时的糖化血红蛋白(GHb)、丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)活性的... 详细信息

目的研究D-半乳糖致衰大鼠非酶糖基化作用及菟丝子醇提液对其影响,探讨衰老发生的机制及菟丝子延缓衰老作用的机制。方法采用D-半乳糖制作衰老大鼠模型,观察15、30、45d时的糖化血红蛋白(GHb)、丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)活性的变化。采用半定量RT-PCR法测定大鼠胸主动脉糖化终末产物受体(RAGE)mRNA的表达,并观察菟丝子醇提液对其影响。结果D-半乳糖导致GHb、MDA和RAGE-mRNA水平升高(P<0.01),SOD活性降低(P<0.01),并呈现时间渐进性改变。菟丝子醇提液使大鼠GHb、MDA降低(P<0.01),SOD活性增加(P<0.01),RAGE-mRNA表达水平降低(P<0.01)。结论D-半乳糖诱导非酶糖基化发生,菟丝子醇提液抑制D-半乳糖致衰大鼠非酶糖基化反应,在给药30d即有显著的作用效果。

关键词：菟丝子非酶糖基化衰老 D-半乳糖大鼠

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