检索结果-内蒙古大学图书馆

中国媒介生物学及控制杂志 2023年第1期34卷 14-20页

作者：梁秋果杨茜程金芝吴家红黔南民族医学高等专科学校基础医学部病原生物学教研室/黔南州人体寄生虫病研究重点实验室贵州都匀558000 贵州医科大学基础医学院现代病原生物学特色重点实验室/人体寄生虫学教研室贵州贵阳550025

目的了解贵州省不同地理株中华按蚊种群线粒体DNA细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(mtDNA-COⅠ)基因序列的多态性,探讨其遗传多样性、遗传分化和种群扩张情况以及遗传距离与地理距离及其相关关系等种群遗传特征。方法于2017年7月-2018年8月采用灯... 详细信息

目的了解贵州省不同地理株中华按蚊种群线粒体DNA细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(mtDNA-COⅠ)基因序列的多态性,探讨其遗传多样性、遗传分化和种群扩张情况以及遗传距离与地理距离及其相关关系等种群遗传特征。方法于2017年7月-2018年8月采用灯诱法在贵州省东、西、南、北、中5个方位的12个采样点采集稻田周边的成蚊,经过形态学确认为中华按蚊后,用试剂盒法提取单只蚊虫DNA样本并对mtDNA-COⅠ基因扩增后测序,测序结果用DNAStar 5.0软件进行拼接,在美国国立生物技术信息中心经BLAST比对进行蚊种的分子鉴定,对确认为中华按蚊mtDNA-COⅠ的基因序列使用DnaSP 5.1软件分析其单倍型多样性、核苷酸多样性,并计算各种群间分化系数(Fst)和基因流(Nm)大小,进行中性检验,以明确各种群之间的分化程度和种群扩张情况。使用MEGA 7.1软件计算各种群间和种群内的遗传距离,判断种群之间的遗传变异程度;根据采样点经纬度计算种群间的地理距离,与对应的遗传距离进行相关性检验,以分析两者的相关关系。结果经分子生物学鉴定,共获得贵州省12个地理株中华按蚊mtDNA-COⅠ基因序列551条,长度为709 bp,其中,碱基(A+T)和(G+C)平均含量分别为68.57%和31.43%,709个位点中保守位点有586个,变异位点有123个,单态位点有189个,简约性信息位点有278个,无插入和缺失位点。551条序列共检出329种单倍型,单倍型多样性指数为0.992,核苷酸多样性为0.01522以上,12个种群的Fst值在0.0008~0.4207,Nm值在0.0861~75.2392,中性检验统计值均为负值,种群内遗传距离范围在0.0071~0.0529,种群间的遗传距离范围在0.0079~0.0522,织金种群和都匀种群内遗传距离较其他种群大;遗传距离和地理距离之间无相关关系,不同种群之间可能存在一定的地理隔离,但种群之间遗传距离的大小与地理距离不相关。结论贵州省不同地理株中华按蚊种群遗传多样性丰富,在历史上经历了区域性的种群扩张,可能存在一定程度的遗传分化和地理隔离,但在一定范围内种群间也有基因交流,呈现出交流与隔离并存的分布格局。

关键词：中华按蚊线粒体DNA细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ基因多态性种群遗传

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贵州白纹伊蚊感染沃尔巴克氏体以及WO噬菌体的初步调查

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中国病原生物学杂志 2020年第1期15卷 69-73,77页

作者：王政艳梁秋果杨茜陈玲玲张霞胡容程金芝吴家红贵州医科大学基础医学院现代病原生物学特色重点实验室贵州贵阳550025 贵州医科大学基础医学院寄生虫学教研室黔南民族医学高等专科学校基础医学部病原生物学教研室贵州医科大学公共与卫生学院

目的了解贵州白纹伊蚊种群中沃尔巴克氏体(Wolbachia)以及WO噬菌体的感染情况。方法于2017年在贵州省贵阳市、都匀市、铜仁市、凯里市、遵义市、兴义市、贵安新区、毕节市采用勺舀法采集白纹伊蚊幼虫标本,实验室饲养至成蚊。提取雌蚊基... 详细信息

目的了解贵州白纹伊蚊种群中沃尔巴克氏体(Wolbachia)以及WO噬菌体的感染情况。方法于2017年在贵州省贵阳市、都匀市、铜仁市、凯里市、遵义市、兴义市、贵安新区、毕节市采用勺舀法采集白纹伊蚊幼虫标本,实验室饲养至成蚊。提取雌蚊基因组DNA,PCR扩增沃尔巴克氏体表面蛋白基因(Wolbachia surface protein,wsp)和WO噬菌体衣壳蛋白的核糖体S7基因(Ribosomal S7 gene,orf7)。分别从8个地区的阳性检测标本中随机选取10个样品进行测序,使用DNAStar 7.0软件分析基因的基本特征;采用MEGA 4.0软件对所获基因序列进行分析比对,并构建系统进化树;采用SPSS 20.0软件对WO噬菌体侵染wAlbA、wAlbB株沃尔巴克氏体的检测结果进行关联性分析。结果贵州省8个地区的白纹伊蚊wAlbA和wAlbB株沃尔巴克氏体超感染率为84.30%(322/382),wAlbA株、wAlbB株沃尔巴克氏体单感染率分别为4.97%(19/382)和3.66%(14/382),WO噬菌体的感染率为76.44%(292/382)。通过测序获得沃尔巴克氏体的wsp序列,其中wAlbA株(379 bp)80条,wAlbB株(501 bp)78条;获得WO噬菌体的orf7序列(263 bp)73条。比对分析显示贵州省8个地区获得所有wAlbA株、wAlbB株的wsp序列、orf7序列的同源性均为100%。确切概率法分析WO噬菌体侵染与wAlbA和wAlbB株沃尔巴克氏体超感染有关联性(P<0.05)。结论贵州白纹伊蚊种群普遍感染WO噬菌体和沃尔巴克氏体,且以超感染wAlbA和wAlbB株沃尔巴克氏体为主。WO噬菌体主要侵染的对象是超感染wAlbA和wAlbB株的沃尔巴克氏体。

关键词：白纹伊蚊沃尔巴克氏体 WO噬菌体

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贵阳市致倦库蚊成蚊对4种常用杀虫剂抗药性调查

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中华地方病学杂志 2019年第6期38卷 476-480页

作者：梁秋果王政艳杨茜程金芝吴家红贵州医科大学基础医学院寄生虫学教研室贵州医科大学现代病原生物学特色重点实验室贵阳550025 黔南民族医学高等专科学校基础医学部病原生物学与免疫学教研室贵州都匀558000 贵州医科大学微生物与生化药学工程中心贵阳550025 贵州医科大学环境污染与疾病监控教育部重点实验室贵阳550025

目的了解贵阳市致倦库蚊成蚊对4种常用杀虫剂的抗药性水平。方法2015年8 - 9月,用幼虫勺捕法采集贵阳市8个地区的野外致倦库蚊幼虫,在实验室饲养至成蚊。采用接触筒法测定成蚊对4种常用杀虫剂的抗药性,计算1 h击倒率和恢复24 h死亡率。... 详细信息

目的了解贵阳市致倦库蚊成蚊对4种常用杀虫剂的抗药性水平。方法2015年8 - 9月,用幼虫勺捕法采集贵阳市8个地区的野外致倦库蚊幼虫,在实验室饲养至成蚊。采用接触筒法测定成蚊对4种常用杀虫剂的抗药性,计算1 h击倒率和恢复24 h死亡率。根据死亡率判断抗药性水平:< 90%为抗性群体(R);90%~< 98%为可能抗性群体(M);≥98%为敏感群体(S)。结果将致倦库蚊成蚊分别暴露于7.70 g/L敌敌畏、3.30 g/L残杀威、0.25 g/L高效氯氰菊酯和0.20 g/L溴氰菊酯,1 h击倒率范围分别为57.78%(52/90)~91.11%(82/90)、86.67%(78/90)~100.00%(90/90)、23.33%(21/90)~77.78%(70/90)和27.78%(25/90)~88.89%(80/90);恢复24 h死亡率范围分别为61.11%(55/90)~94.44%(85/90)、90.00%(81/90)~97.78%(88/90)、23.33%(21/90)~73.33%(66/90)和21.11%(19/90)~72.22%(65/90)。结论贵阳市致倦库蚊成蚊对4种常用杀虫剂均产生了一定程度的抗药性,其中对高效氯氰菊酯、溴氰菊酯等拟除虫菊酯类杀虫剂的抗药性较高。

关键词：库蚊属杀虫药抗药性敌敌畏除虫菊酯类

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抗菌肽在家蝇胚胎细胞中的表达及活性测定

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遵义医学院学报 2017年第1期40卷 53-58页

作者：王灵军王鑫贺莉芳马元芬生燕刘晖遵义医学院基础医学院寄生虫学教研室贵州遵义563099 眉山市彭山区人民医院普外科四川眉山620860 黔南民族医学高等专科学校基础医学部病原生物学教研室贵州都匀558000 遵义医学院基础医学院形态学实验室贵州遵义563099

目的在原核表达家蝇抗菌肽Attacin基因的研究基础上,为进一步提高抗菌肽的活性,利用重组杆状病毒Bacmid-pFastBac^(TM)-Attacin表达系统转染家蝇胚胎细胞系MDEC-07114,对其活性进行探索研究。方法构建pFastBac^(TM) HTA质粒,将重组质粒... 详细信息

目的在原核表达家蝇抗菌肽Attacin基因的研究基础上,为进一步提高抗菌肽的活性,利用重组杆状病毒Bacmid-pFastBac^(TM)-Attacin表达系统转染家蝇胚胎细胞系MDEC-07114,对其活性进行探索研究。方法构建pFastBac^(TM) HTA质粒,将重组质粒转化Escherichia coli(***)DH10细胞,通过蓝白斑筛选,挑取阳性克隆。构建抗菌肽Attacin的家蝇胚胎细胞真核表达系统。构建Bacmid-pFastBac^(TM)-Attacin表达系统并转染家蝇胚胎细胞,提取培养上清和细胞裂解物粗蛋白,纯化,SDS-PAGE和Western-Blot对蛋白表达情况进行检测、鉴定。结果重组杆状病毒Bacmid DNA成功转染家蝇胚胎细胞,细胞出现分离、停止生长、直径变大等现象;培养上清和细胞裂解物蛋白经SDS-PAGE检测,在22 KD出现了1条特异性条带;通过Western-Blot实验检测目的蛋白在家蝇胚胎细胞中成功表达;通过细菌实验测得其产物有较好的抑菌活性。结论与*** BL21(DE3)原核表达系统相比,家蝇胚胎细胞系灵敏度较好,但仍有较大提升空间。

关键词：抗菌肽家蝇胚胎细胞杆状病毒表达载体真核表达

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