检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2008年第7期29卷 741-743页

作者：张迁常文军朱诗应阮芳铭曹广文第二军医大学长海医院感染科上海200433 第二军医大学卫生勤务学系流行病学教研室上海200433 第二军医大学基础部微生物学教研室上海200433 第二军医大学海军医学系军队卫生教研室上海200433

目的:调查汶川映秀镇抗震救灾部队官兵皮肤病的发病情况,分析其影响因素,并对营区内杀虫措施效果进行评价。方法:2008年6月15日至6月20日,以映秀镇的两支抗震救灾部队为研究对象,回顾性调查部队官兵在震后1个月内的皮肤病发病情况、帐... 详细信息

目的:调查汶川映秀镇抗震救灾部队官兵皮肤病的发病情况,分析其影响因素,并对营区内杀虫措施效果进行评价。方法:2008年6月15日至6月20日,以映秀镇的两支抗震救灾部队为研究对象,回顾性调查部队官兵在震后1个月内的皮肤病发病情况、帐篷卫生条件和杀虫措施实施情况等内容,采用χ2检验确定差异显著性。结果:映秀镇抗震救灾部队官兵在震后1个月的皮肤病发病率为42.20%,其中虫咬性皮炎和毛囊炎的构成比分别为82.05%和15.38%;震后1、2、4周的皮肤病发病率水平明显高于震前水平(P<0.05),震后4周发病率的升高与在山上过夜相关;采用2.5%溴氰菊酯等杀虫剂对帐篷内外环境进行杀虫,皮肤病发病率由震后2周的26.61%降低至震后3周的0.92%(P<0.05)。结论:抗震救灾部队官兵在震后皮肤病的发病率明显升高,震后恶劣的卫生环境、蚊虫叮咬是官兵皮肤病的主要因素,定期杀虫能有效降低皮肤病的发病率。

关键词：地震皮肤疾病发病率虫咬和虫螫

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原发性肝癌患者肝组织中HCV　RNA和HCV抗原的定位

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第二军医大学学报 1995年第2期16卷 123-126页

作者：崔晓红戚中田宋艳斌潘卫王一丛文铭张秀忠李淋郝连杰吴孟超第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长海医院肝胆外科同济医科大学同济医院临床免疫室

分别用原位杂交（ＩＳＨ）和过氧化物酶与抗过氧化物酶复合物（ＰＡＰ）法检测了７３例肝细胞癌（ＨＣＣ）患者肝组织切片中的丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ和ＨＣＶ抗原（ＨＣＶＡｇ）以及乙型肝炎病毒的表面抗原（ＨＢｓＡｇ）和核心... 详细信息

分别用原位杂交（ＩＳＨ）和过氧化物酶与抗过氧化物酶复合物（ＰＡＰ）法检测了７３例肝细胞癌（ＨＣＣ）患者肝组织切片中的丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ和ＨＣＶ抗原（ＨＣＶＡｇ）以及乙型肝炎病毒的表面抗原（ＨＢｓＡｇ）和核心抗原（ＨＢｃＡｇ）。结果显示：ＨＣＶＲＮＡ，ＨＣＶＡｇ，ＨＢｓＡｇ和ＨＢｃＡｇ的检出率分别为２６．０％，２８．８％，７５．３％和２６．。％；ＨＣＶ阳性的肝细胞多呈散在型分布，可见有水肿变性并伴周围炎细胞浸润，ＨＣＶ染色颗粒既可见于肝细胞浆也可见于细胞核；ＨＣＶ标志物（ＨＣＶＭ）的检出与ＨＢＶ的感染状况无显著相关。提示：ＨＣＶ可在ＨＣＣ患者的肝细胞浆和核中存在并表达，ＨＣＶ感染可能在我国ＨＣＣ的发生中起一定的病原学作用。

关键词：肝肿瘤丙型肝炎病毒原位杂交免疫酶技术 RNA

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核糖核酸干扰抑制生存素表达诱导小鼠结肠癌细胞凋亡

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中华实验外科杂志 2006年第7期23卷 792-794页

作者：李喆赵平王建军盛援廖小玲戚中田第二军医大学长海医院普通外科上海200433 第二军医大学长海医院基础部微生物学教研室上海200433 华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科

目的筛选强效抑制生存素Survivin基因表达的小干扰核糖核酸(siRNA),探讨Sur- vivin基因抑制对小鼠结肠癌细胞凋亡的影响。方法根据siRNA的设计规则和Survivin序列,设计3段侯选siRNA,聚合酶链反应(PCR)法制备表达框；将siRNA表达框与Surv... 详细信息

目的筛选强效抑制生存素Survivin基因表达的小干扰核糖核酸(siRNA),探讨Sur- vivin基因抑制对小鼠结肠癌细胞凋亡的影响。方法根据siRNA的设计规则和Survivin序列,设计3段侯选siRNA,聚合酶链反应(PCR)法制备表达框；将siRNA表达框与Survivin-绿色荧光蛋白(EGFP)融合基因表达质粒(pSurvivin-EGFP)共转染293T细胞,24～48 h后根据荧光强度筛选强效siRNA；再制备其表达质粒转染小鼠结肠癌CT26细胞,应用实时荧光定量(FQ)-聚合酶链反应和蛋白印迹(Western blot)法分析Survivin基因的表达；DNA末端标记(TUNEL)法和流式细胞仪(FCM)Annexin V/丙化碘锭(PI)双染色法检测细胞凋亡。结果筛选出1段高效抑制Survivin表达的siRNA,可使CT26细胞内Survivin mRNA拷贝数明显减少,抑制率为86．9%；蛋白表达水平亦显著降低；TUNEL检测显示转染48 h后RNA干扰组和对照组凋亡细胞数分别为(60．13±5．71)个和(5．47±0．63)个,两组差异有统计学意义(P＜0．01)；FCM检测转染后1、2、3、4 d凋亡细胞比率分别为2．1%、4．9%、11．7%和32．6%,对照组4个时间点凋亡率均低于1．5%,两组差异有统计学意义(P＜0．01)。结论siRNA能有效抑制小鼠结肠癌CT26细胞内Survivin基因表达并诱导结肠癌细胞凋亡。

关键词： Survivin RNA干扰结肠癌脱噬作用

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外参照PCR及其产物酶联杂交定量检测HBV DNA

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第二军医大学学报 2000年第2期21卷 120-123页

作者：缪晓辉戚中田孔宪涛第二军医大学长征医院感染科上海200003 第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200003 长征医院实验诊断科

目的 :建立一种敏感、特异和精确的乙型肝炎病毒 (HBV )基因 PCR及其产物的酶联杂交定量分析技术。方法 :(1)常规 PCR法扩增 HBV DNA质粒和血清 HBV DNA,引物 (SP1 ,SP2 )为一对 HBV DNA S区基因特异引物 ,扩增片段长 319bp,SP2 的 5′... 详细信息

目的 :建立一种敏感、特异和精确的乙型肝炎病毒 (HBV )基因 PCR及其产物的酶联杂交定量分析技术。方法 :(1)常规 PCR法扩增 HBV DNA质粒和血清 HBV DNA,引物 (SP1 ,SP2 )为一对 HBV DNA S区基因特异引物 ,扩增片段长 319bp,SP2 的 5′端用生物素修饰。扩增条件经过严格优化组合 ,以最大限度减少非特异片段 ,包括引物二聚体的产生。设定 5个不同梯度的 HBV DNA外参照管 ,制作标准曲线。 (2 )酶联杂交分析 :PCR产物经 10 0℃解链并稀释后 ,与捕获探针 (长 2 0 nt,3′端用氨基修饰 ,借氨基与 DNA- BINDTM反应板结合 )杂交 ;用亲和素 -碱性磷酸酶及相应显色系统检测杂交信号。结果 :目的片段含量较低的 PCR产物 ,在琼脂糖凝胶电泳时未见光带 ,但可被后续的酶联杂交检出 ,故灵敏度可超过普通 PCR定性法。结论 :本定量方法操作相对简单 ,结果数据化 ,不受主观因素干扰 ,灵敏度很高 ,而且省时、省材。

关键词：聚合酶链反应乙型肝炎 HBV DNA

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含CpG免疫刺激序列的质粒增强HBsAg诱导的免疫应答

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第二军医大学学报 2012年第2期33卷 145-149页

作者：解冰唐紫薇劳文光李建军王岩朱诗应陶清源戚中田赵平陈志辉第二军医大学基础部微生物学教研室上海200433 中国人民解放军总政治部机关门诊部北京100120 第二军医大学长海医院感染科上海200433

目的探讨以含有多拷贝CpG寡脱氧核苷酸(CpG ODN)的质粒作为治疗性乙肝疫苗佐剂的可行性。方法构建含有6个拷贝D型CpG ODN的质粒pKO-CG6,将该质粒以及载体pKO分别刺激健康人及HBV感染者的外周血单核细胞(PBMC),检测PBMC的增殖及分泌的细... 详细信息

目的探讨以含有多拷贝CpG寡脱氧核苷酸(CpG ODN)的质粒作为治疗性乙肝疫苗佐剂的可行性。方法构建含有6个拷贝D型CpG ODN的质粒pKO-CG6,将该质粒以及载体pKO分别刺激健康人及HBV感染者的外周血单核细胞(PBMC),检测PBMC的增殖及分泌的细胞因子IFN-γ、IL-12,进一步将重组HBsAg分别联合这两种质粒免疫小鼠,检测小鼠的细胞和体液免疫应答。结果质粒pKO-CG6与载体pKO在体外均能有效激活健康人及HBV感染者PBMC增殖反应,并促进IFN-γ、IL-12的产生,其中pKO-CG6的免疫刺激活性强于载体pKO。小鼠体内试验表明,虽然载体pKO也具有免疫佐剂作用,但pKO-CG6更能显著增强HBsAg诱导的免疫应答,尤其是细胞免疫应答。结论含有多拷贝D型CpG ODN的质粒能有效激活HBV感染者的PBMC,并增强HBsAg在小鼠体内的免疫原性。

关键词：乙型肝炎病毒 CpG寡脱氧核苷酸质粒免疫佐剂

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白细胞干扰素喷雾治疗慢性宫颈炎的初步研究

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第二军医大学学报 1990年第5期11卷 433-436页

作者：范中善杜平潘海萍胡玉林刘璧如钱静华邢春香汤淑萍第二军医大学微生物学教研室上海市杨浦区妇幼保健院长海医院妇产科

作者应用小剂量人脐血白细胞干扰素以随机双盲对照法对宫颈表面直接喷雾试治慢性宫颈糜烂215例,总有效率达93.02％,显效率以上达49.77％,与对照组相比有非常明显差异。根据作者的研究结果表明,宫颈糜烂的程度和类型与疗效有关。糜烂程... 详细信息

作者应用小剂量人脐血白细胞干扰素以随机双盲对照法对宫颈表面直接喷雾试治慢性宫颈糜烂215例,总有效率达93.02％,显效率以上达49.77％,与对照组相比有非常明显差异。根据作者的研究结果表明,宫颈糜烂的程度和类型与疗效有关。糜烂程度轻则治愈率高;三种类型的宫颈炎,以单纯型较易治,其显效率以上可达67.57％,其次是颗粒型(51.25％),最难治的是乳头型(26.23％)。此外,本文还讨论了干扰素治疗慢性宫颈炎的机制问题。

关键词：干扰素宫颈炎白细胞喷雾治疗

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几种从凝胶中回收YAC DNA的方法及其效果的比较

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第二军医大学学报 1997年第5期18卷 483-484页

作者：朱冠山缪为民周炜姚玉河焦炳华柴建华第二军医大学长海医院感染科第二军医大学基础医学部微生物学教研室复旦大学遗传所人类基因组实验室

几种从凝胶中回收ＹＡＣＤＮＡ的方法及其效果的比较＊朱冠山缪为民△周炜▲姚玉河▲焦炳华△柴建华▲自１９８７年首次构建了人类基因组酵母人工染色体（ＹＡＣ）分子克隆库［１］，目前ＹＡＣ的克隆容量已达８００～１０００ｋｂ，由... 详细信息

几种从凝胶中回收ＹＡＣＤＮＡ的方法及其效果的比较＊朱冠山缪为民△周炜▲姚玉河▲焦炳华△柴建华▲自１９８７年首次构建了人类基因组酵母人工染色体（ＹＡＣ）分子克隆库［１］，目前ＹＡＣ的克隆容量已达８００～１０００ｋｂ，由此而成为基因组作图和测序的一个最重...

关键词：染色体 YAC 凝胶 PFGE 回收 DNA 分离

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人胚胎生殖系细胞分离与体外培养的初步研究

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第二军医大学学报 2003年第9期24卷 941-943页

作者：刘善荣刘厚奇汤淑萍惠宁冀凯宏熊俊蒋正戚中田第二军医大学基础医学部组织胚胎学教研室上海200433 长海医院妇产科基础医学部微生物学教研室

目的:初步探讨人胚胎生殖系细胞的分离与体外培养.方法:体外分离人胚胎生殖嵴和肠系膜组织,按单纯机械分离、酶消化分离、二者结合法及是否有饲养层将组织分为5种不同的方式培养后,用碱性磷酸酶标记,计数阳性克隆并进行比较.结果:酶消... 详细信息

目的:初步探讨人胚胎生殖系细胞的分离与体外培养.方法:体外分离人胚胎生殖嵴和肠系膜组织,按单纯机械分离、酶消化分离、二者结合法及是否有饲养层将组织分为5种不同的方式培养后,用碱性磷酸酶标记,计数阳性克隆并进行比较.结果:酶消化法培养所获得的克隆较单纯机械分离方法多,原代培养时种植到饲养层上效果较好.将分离到的组织用0.25%胰酶消化3 min,种植到丝裂霉素C处理过的小鼠胚胎成纤维细胞上培养3 d,挑取克隆传代,在第10天形成30.7 个阳性克隆,显著高于其他方法获得的阳性克隆数.用碱性磷酸酶标记的细胞(克隆)具有多样性,细胞胞体为圆形,分为有突起和无突起两种;阳性细胞克隆呈圆球形、条带形和块形,与周围细胞分界清楚.结论:人胚胎体内的微环境限制生殖系细胞的体外扩增培养,原代培养需要在饲养层上进行且宜用酶消化法尽早传代.

关键词：胚胎生殖系细胞细胞分离体外培养碱性磷酸酶

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新型甲型H1N1流感病毒HA基因DNA疫苗诱导小鼠产生中和抗体

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中华微生物学和免疫学杂志 2010年第12期30卷 1114-1117页

作者：邵圣文周洪昌徐伯赢刘小青方静王岳陈志辉湖州师范学院医学院微生物学教研室 313000 第二军医大学微生物学教研室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所、分子病毒与遗传工程国家重点实验室第二军医大学长海医院感染科上海200433

目的探讨新型甲型流感病毒（2009H1N1）血凝素（HA）DNA疫苗诱导小鼠产生中和抗体特性.方法构建2009H1N1或1918甲型流感病毒（1918H1N1）HA蛋白表达质粒2009HA和1918HA,采用25μg或200μg剂量2009HA质粒免疫小鼠,以2009HA或1918HA蛋... 详细信息

目的探讨新型甲型流感病毒（2009H1N1）血凝素（HA）DNA疫苗诱导小鼠产生中和抗体特性.方法构建2009H1N1或1918甲型流感病毒（1918H1N1）HA蛋白表达质粒2009HA和1918HA,采用25μg或200μg剂量2009HA质粒免疫小鼠,以2009HA或1918HA蛋白为包被抗原,测定小鼠血清中2009HA抗体总量或交叉反应抗体含量,分别用2009H1N1和1918H1N1两种假病毒（pp）测定抗体中和活性.结果 25 μg或200μg的2009HA质粒加强免疫小鼠后,4～16周内两组小鼠血清中2009HA总抗体水平以及对2009H1N1pp的中和抗体滴度相似（P〉0.05）,都含有与1918HA蛋白交叉反应抗体,对1918H1N1pp的交叉中和抗体滴度相似（P〉0.05）.结论小剂量2009HA质粒DNA疫苗能够诱导小鼠产生持久的高水平中和抗体,对于预防新现流感病毒具有潜在应用价值.

关键词：新型甲型流感病毒血凝素 DNA疫苗中和抗体假病毒

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献血者HCV RNA实时荧光定量PCR方法的建立

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中国输血杂志 2012年第4期25卷 351-355页

作者：王文博许刚查占山孙博钱宝华任浩戚中田第二军医大学微生物学教研室上海市医学生物防护重点实验室上海200433 长海医院血站

目的建立快速检测献血者中丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)感染的方法。方法利用体外转录制备的HCV RNA转录体进行病毒RNA抽提方法及抽提效率的比较;将RNA转录体与正常血清进行不同数目的混合,对最佳混合标本数进行了摸索;建立HCV... 详细信息

目的建立快速检测献血者中丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)感染的方法。方法利用体外转录制备的HCV RNA转录体进行病毒RNA抽提方法及抽提效率的比较;将RNA转录体与正常血清进行不同数目的混合,对最佳混合标本数进行了摸索;建立HCV荧光定量PCR方法(fluorescence quantitative PCR,FQ-PCR),并对献血者进行混合标本HCV核酸检测。结果确定了比较理想的病毒RNA抽提方法;用于HCV核酸检测的混合标本数为24例;建立的荧光定量PCR方法能最低检测出10个copies/ml;采取24例混合血标本方法,FQ-PCR检测HCV RNA,576例ELISA检测HCV阴性的献血者未检测出HCV RNA。结论初步建立了献血者HCV感染的混合标本荧光定量PCR检测方法。

关键词：荧光定量PCR 献血者 HCV 输血安全混合血液

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