检索结果-内蒙古大学图书馆

中华微生物学和免疫学杂志 2009年第8期29卷 714-715页

作者：乐爱平陈志辉童一民邵圣文南昌大学第一附属医院输血科 330006 第二军医大学长海医院感染科第二军医大学微生物学教研室湖州师范学院医学院创新实验室

丙型肝炎病毒（HCV）感染是肝硬化、肝癌的高危险因素，目前尚无HCV疫苗上市。HCV包膜E2蛋白能诱导机体产生中和抗体，是重要的候选疫苗成分。E2蛋白氨基末端由27个氨基酸残基组成的高变区1（hypervariable region1，HVR1）含有多个线... 详细信息

丙型肝炎病毒（HCV）感染是肝硬化、肝癌的高危险因素，目前尚无HCV疫苗上市。HCV包膜E2蛋白能诱导机体产生中和抗体，是重要的候选疫苗成分。E2蛋白氨基末端由27个氨基酸残基组成的高变区1（hypervariable region1，HVR1）含有多个线性中和抗体表位，变异频率极高，增加了HCV疫苗研制的难度。近年发现，除了HVR1含有中和抗体表位外，E2蛋白还存在其他的保守空间构象和线性中和抗体表位心。本研究构建了羧基端截短的含有HVR1和缺失HVR1的E2蛋白真核表达质粒，以之免疫小鼠，分析HVR1在E2蛋白诱导的小鼠体液免疫应答中的作用。

关键词：体液免疫应答丙型肝炎病毒 E2蛋白 HVR1 HCV疫苗氨基酸残基抗体表位真核表达质粒

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肿瘤坏死因子对柯萨基B3病毒感染大鼠心肌细胞的保护作用

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中华实验和临床病毒学杂志 1993年第4期7卷 393-396页

作者：沈茜汪美先第二军医大学附属长海医院临床实验诊断科，上海 200433 第四军医大学微生物学教研室，西安 710032

研究了肿瘤坏死因子（TNF） α对柯萨基B3病毒感染大鼠心肌细胞的保护作用。结果表明，TNF在高浓度（25～60ng／孔）对正常心肌细胞有一定程度的毒性效应，并可加重受感染细胞的裂解。TNF在5.2ng～40pg／孔浓度范围内产生明显的抗... 详细信息

研究了肿瘤坏死因子（TNF） α对柯萨基B3病毒感染大鼠心肌细胞的保护作用。结果表明，TNF在高浓度（25～60ng／孔）对正常心肌细胞有一定程度的毒性效应，并可加重受感染细胞的裂解。TNF在5.2ng～40pg／孔浓度范围内产生明显的抗病毒活性，使受感染的心肌细胞 3H-TdR掺入，LDH释放量及培养液中病毒滴度等评价指标均显著好于未加TNF的病毒感染组。病毒感染后2小时加入TNF组的抗病毒保护作用明显地较感染后8小时加入组增强。

关键词：肿瘤坏死因子柯萨基B3病毒大鼠心肌细胞

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血液透析患者中TT病毒感染的检测及序列分析

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第二军医大学学报 2001年第4期22卷 331-333页

作者：倪武任浩缪晓辉戚中田叶朝阳第二军医大学长征医院感染病科上海200003 基础医学部微生物学教研室 3. 长征医院肾内科长征医院肾内科

目的 :研究血液透析患者中 TT病毒 (TTV)的感染状况及其致病性。方法 :针对病毒基因保守区设计引物 ,采用套式 PCR方法对 6 9例血液透析患者血清标本进行 TTV DNA检测及序列分析 ,并同时检测患者血清丙氨酸转氨酶 (AL T)及丙型肝炎病... 详细信息

目的 :研究血液透析患者中 TT病毒 (TTV)的感染状况及其致病性。方法 :针对病毒基因保守区设计引物 ,采用套式 PCR方法对 6 9例血液透析患者血清标本进行 TTV DNA检测及序列分析 ,并同时检测患者血清丙氨酸转氨酶 (AL T)及丙型肝炎病毒抗体 (抗 - HCV)。结果 :患者血清 TTV DNA总阳性率为 2 7.5 %。对其中 1例 PCR扩增产物测序 ,结果与其他TVV分离株如 GH1、TA2 78、TTVCHN1和 TTVCHN2的核苷酸序列同源性为 89%～ 10 0 % ,推测的氨基酸序列同源性为87%～ 10 0 %。抗 - HCV阳性与阴性患者的 TTV DNA阳性率无明显差异。所有患者均未见 AL T明显升高。结论 :血液透析患者存在较严重的 TTV感染 ,TTV感染与 HCV感染无明显相关性 ,未发现 TTV感染导致 AL T明显升高的证据。

关键词： TT病毒血液透析基因分析序列分析

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四环素调控系统对白喉毒素-血管内皮细胞生长因子融合基因表达的影响

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外科理论与实践 2001年第3期6卷 174-175页

作者：柯重伟潘欣闻兆章曹贵松潘卫曹广文戚中田第二军医大学长海医院普外科 200433 第二军医大学长海医院微生物学教研室 200433

目的：研究四环素调控系统对ＤＴ３９０－ＶＥＧＦ１６５融合基因在人胃癌细胞中表达的影响。方法：构建四环素调控的ＤＴ３９０－ＶＥＧＦ１６５融合基因真核表达载体，用脂质体介导转染胃癌细胞ＳＧＣ７９０１，在四环素有或无的情况... 详细信息

目的：研究四环素调控系统对ＤＴ３９０－ＶＥＧＦ１６５融合基因在人胃癌细胞中表达的影响。方法：构建四环素调控的ＤＴ３９０－ＶＥＧＦ１６５融合基因真核表达载体，用脂质体介导转染胃癌细胞ＳＧＣ７９０１，在四环素有或无的情况下检测胃癌细胞的存活率。结果：４μｇ构建物转染５×１０５个胃癌细胞／孔（２４孔板）９６ｈ后发现，无四环素时转毒素融合基因的细胞的存活率为２０％；四环素存在时转毒素融合基因的细胞的存活率为６６％；转染细胞在四环素有或无的情况下经白喉抗毒素－ＦＩＴＣ免疫荧光抗体染色均呈现黄绿色荧光，表明融合基因在细胞中得到了表达，且四环素调控系统存在基础量的漏表达。结论：四环素调控系统基本上可以控制毒素基因在人胃癌细胞中的表达。

关键词： DT390-VEGF165融合基因四环素调控系统胃肿瘤基因治疗

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用胰胨水增菌作SPA协同凝集试验快速检定痢疾粪便标本

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临床检验杂志 1984年第4期 39-32页

作者：谢正旸谢民蔡燕刚吴挹芳黄月仙张永生第二军医大学长海医院检验科第二军医大学微生物学教研室

前文报道,用胰胨水增菌作SPA 协同凝集试验(COA),检测痢疾杆菌,基本可以消除粪便中杂质的非特异性协同凝集反应。现将我们应用此法检验粪便标本的结果报告于下。

关键词：粪便标本 SPA 常规分离培养协同凝集试验临床标本痢疾病痢疾杆菌增菌

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用优球蛋白作免疫原制备抗人C1q抗体

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上海免疫学杂志 1982年第2期 15-19页

作者：曹文飞蒲菲菲胡萍韩凤玉徐志功杨嗣坤刘镭第二军医大学长海医院免疫室第二军医大学微生物学教研室第二军医大学微生物学教研室沈阳军区总医院来的进修生

本文介绍一种不用纯的C1q抗原制备抗人补体C1q抗体的简便方法。作为免疫原的富含C1q的优球蛋白组分是通过0.026 M EGTA 缓冲液透析血清,尔后在0.6％琼脂糖凝胶(pH8.6)中电泳等二步分离方法而获得。此免疫原产生的抗血清中的杂抗体,用已... 详细信息

本文介绍一种不用纯的C1q抗原制备抗人补体C1q抗体的简便方法。作为免疫原的富含C1q的优球蛋白组分是通过0.026 M EGTA 缓冲液透析血清,尔后在0.6％琼脂糖凝胶(pH8.6)中电泳等二步分离方法而获得。此免疫原产生的抗血清中的杂抗体,用已去掉C1q的血清经戊二醛交联而制成的免疫吸附剂除去。通过此法制得的特异性抗C1q抗体,用免疫电泳(IEP)方法测试,它与人全血清或纯的C1q反应仅在慢γ-区出现一条沉淀线,用双向免疫扩散(DID)法试验,它与纯C1q反应形成一条沉淀线且与标准抗C1q抗体的沉淀线呈现完全融合的反应,此外它能够凝集EAC1q细胞而不凝集EA细胞。这些结果表明此最终产品是抗人C1q的单价特异性抗体制品。

关键词：抗体抗血清 C1q 免疫原全抗原

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不同发育阶段人胚胎原始生殖细胞的定位及体外培养

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第二军医大学学报 2003年第9期24卷 944-946页

作者：刘善荣刘厚奇汤淑萍惠宁冀凯宏蒋正戚中田冯根生第二军医大学基础医学部组织胚胎学教研室上海200433 长海医院妇产科基础医学部微生物学教研室 Burham InstituteSanDiegoCA92037USA

目的:对不同发育阶段的人胚胎原始生殖细胞(PGC)进行定位并比较其体外培养的差异.方法:取4～7周发育阶段的人胚胎,应用组织化学法检测PGC内碱性磷酸酶(AP)以对其定位.体外分离人胚胎生殖嵴和肠系膜组织进行培养,第1次传代后,用AP标记,... 详细信息

目的:对不同发育阶段的人胚胎原始生殖细胞(PGC)进行定位并比较其体外培养的差异.方法:取4～7周发育阶段的人胚胎,应用组织化学法检测PGC内碱性磷酸酶(AP)以对其定位.体外分离人胚胎生殖嵴和肠系膜组织进行培养,第1次传代后,用AP标记,计数不同发育阶段AP阳性的PGC和体外培养的阳性克隆并进行比较.结果:在卵黄囊、原肠、背侧肠系膜和生殖嵴处有AP强阳性细胞,阳性信号位于胞质内.阳性细胞散在分布,在生殖嵴处聚集成团.不同发育阶段的胚胎组织培养均有阳性克隆出现.统计学分析结果表明,4～7周人胚胎内AP阳性的PGC数目及细胞内信号强度无明显差异(P>0.05);由胚胎组织培养获得的AP阳性克隆数也无显著差异.结论:人PGC位于卵黄囊、原肠、背侧肠系膜和生殖嵴处.4～7周发育阶段,胚胎内PGC数目和体外培养的克隆数无明显变化.

关键词：胚胎原始生殖细胞体外培养定位碱性磷酸酶

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内皮抑素-血管内皮细胞抑制因子重组腺病毒对新生血管的抑制效应

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生物技术通讯 2003年第5期14卷 439-443页

作者：潘欣王泳张珉赵平潘卫戚中田第二军医大学微生物学教研室第二军医大学附属长海医院眼科上海200433

内皮抑素与血管内皮细胞抑制因子均为内源性新生血管抑制分子。为了探讨两分子融合后的生物学功能,以重组腺病毒为载体介导融合基因在体内外表达。体外实验表明重组腺病毒Ad-hENDO-VEGI151能够在ECV304、HepG2、L929等细胞中表达41000... 详细信息

内皮抑素与血管内皮细胞抑制因子均为内源性新生血管抑制分子。为了探讨两分子融合后的生物学功能,以重组腺病毒为载体介导融合基因在体内外表达。体外实验表明重组腺病毒Ad-hENDO-VEGI151能够在ECV304、HepG2、L929等细胞中表达41000大小的融合蛋白,对血管内皮细胞增殖有明显的特异性抑制作用,对HepG2和L929细胞无抑制作用(F=13112.13,P=0.0001)。体内实验表明Ad-hENDO-VEGI151重组腺病毒表达的融合蛋白可以显著抑制鸡胚绒毛尿囊膜血管的生成;与AdLacZ对照组相比,Ad-hENDO-VEGI151对兔炎症性角膜新生血管的抑制明显(F=1413.11P=0.0001),免疫组化结果显示,融合蛋白主要在角膜上皮层表达;治疗荷肝癌裸鼠,注射Ad-hENDO-VEGI151的肿瘤体积(487.7±241.2mm3)与AdLacZ对照组(4075.9±1849.9mm3)差异显著(F=14.80P=0.0085),抑瘤率达到88.03%,免疫组化结果显示,胞膜染色阳性,Ad-hENDO-VEGI151组肿瘤的微血管密度30.75±3.31%与AdLacZ组50.25±8.65%差异明显F=17.72P=0.0056抑制率为39%。结果提示:重组腺病毒Ad-hENDO-VEGI151能够表达有生物学活性的融合蛋白,并发挥特异性的新生血管抑制作用。

关键词：内皮抑素-血管内皮细胞抑制因子重组腺病毒新生血管抑制效应生物活性

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pcDNA3-EGFP基因转染骨髓间充质干细胞的实验研究

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徐州医学院学报 2001年第6期21卷 468-470页

作者：荆鑫赵剑祝云利潘欣周维江吴海山第二军医大学长征医院骨科上海200003 第二军医大学微生物学教研室上海200433

目的　探讨外源性pcDNA3-EGFP基因转染修饰兔骨髓间充质干细胞的可行性。方法　用增荧光绿色蛋白 (enhancedgreenfluorescentprotein ,EGFP)cDNA作为报告基因 ,采用重组真核表达载体系统 (pcDNA3-EGFP)以脂质体法转染原代骨髓间充质干细... 详细信息

目的　探讨外源性pcDNA3-EGFP基因转染修饰兔骨髓间充质干细胞的可行性。方法　用增荧光绿色蛋白 (enhancedgreenfluorescentprotein ,EGFP)cDNA作为报告基因 ,采用重组真核表达载体系统 (pcDNA3-EGFP)以脂质体法转染原代骨髓间充质干细胞 ,观察转染结果、表达情况及对靶细胞活力的影响。结果　经荧光显微镜下观察证实 :成功地对骨髓间充质干细胞实现了基因转染 ,持续表达时间超过 8周 ;没有发现明显的细胞毒作用及对细胞活力的显著影响。结论　采用真核转染技术可以介导外源基因转染骨髓间充质干细胞 ,为今后采用基因增强组织工程方法治疗肌肉、骨骼系统疾病提供了实验基础。

关键词：基因转染骨髓间充质干细胞 pcDNA3-EGFP 动物实验肌肉组织缺损骨骼组织缺损修复基因治疗

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DT/VEGF系统对胃癌细胞的杀伤效应

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世界华人消化杂志 2000年第4期8卷 393-396页

作者：潘欣柯重伟潘卫贺祥曹广文戚中田中国人民解放军第二军医大学微生物学教研室上海市200433 中国人民解放军第二军医大学附属长海医院普外科上海市200433

目的研究ＤＴ３９０基因与ＶＥＧＦ人外显子７基因晤后对胃癌细胞的杀伤作用，探索毒素晤基因治疗胃癌的有效途径，方法构建携带ＤＴ９０－ＶＥＧＦ１６５或ＤＴ３９０－ＶＥＧＦｅｘｏｎ７融合基因的真核表达载体，用脂质体介导转... 详细信息

目的研究ＤＴ３９０基因与ＶＥＧＦ人外显子７基因晤后对胃癌细胞的杀伤作用，探索毒素晤基因治疗胃癌的有效途径，方法构建携带ＤＴ９０－ＶＥＧＦ１６５或ＤＴ３９０－ＶＥＧＦｅｘｏｎ７融合基因的真核表达载体，用脂质体介导转染胃癌细胞ＳＧＣ７９０１，观察胃癌细胞的形态变化，结果５μｇ趑核表达构的转染５×１０＾５个胃癌细胞／孔（２４孔板）９６ｈ后发现，转素融合基因的细胞９０％死亡，而对照细胞形态正常。

关键词：真核表达载体胃肿瘤基因治疗 VEGF

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