检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生物化学与分子生物学报 2019年第5期35卷 509-516页

作者：耿瑞赵美美王嘉东北京大学基础医学院放射医学教研室北京100191

着色性干皮病F蛋白(xeroderma pigmentosum group F,XPF)和切除修复交叉互补组1蛋白(excision repair cross complementing group 1,ERCC1)组成一种结构特异性的核酸内切酶(XPFERCC1)复合物,参与DNA链间交联(interstrand crosslink,ICL)损伤修复。其中,XPF蛋白的去泛素化修饰对DNA损伤修复的影响尚未见报道。本工作主要研究泛素特异性蛋白酶15 (ubiquitinspecific protease 15,USP15)对XPF的稳定性及ICL修复的影响。本研究通过蛋白质质谱和Western印迹法分析发现,XPF蛋白与USP15存在相互作用,进而使XPF蛋白去泛素化修饰;采用CRISPR-Cas9技术构建USP15基因敲除的He La细胞株(USP15 KO)并进行Western印迹分析,结果显示,敲除组XPF蛋白水平低于对照组(P<0. 001)。克隆形成试验显示,在ICL诱导剂顺铂(cisplatin,DDP)和丝裂霉素C (mitomycin,MMC)的作用下,USP15基因敲除的HeLa细胞增殖能力显著降低(P<0. 01)。本研究表明,去泛素化酶USP15是一种重要的DNA修复调节因子,该酶通过稳定XPF蛋白促进由XPF-ERCC1介导的ICL修复。本研究为改善ICL诱导剂类抗癌药物的耐药性提供了理论依据,并为肿瘤的治疗提供了潜在的新靶点。

关键词：泛素特异性蛋白酶USP15 核酸内切酶XPF-ERCC1 去泛素化修饰链间交联损伤

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算法差异在Compass调强计划验证中的作用

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中国医学物理学杂志 2017年第4期34卷 330-334页

作者：贾飞张艺宝王美娇李莎吴昊李国文郑州大学基础医学院放射医学教研室河南郑州450052 郑州大学第一附属医院放射治疗部河南郑州450052 北京大学肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所放疗科恶性肿瘤发病机制及转化研究教育部重点实验室北京100142 中国疾病预防控制中心辐射防护与核安全医学所北京100088

目的:用IBA Compass系统对Varian Eclipse计划系统各向异性解析算法(AAA)计算的肺癌和直肠癌计划进行验证,研究差异原因并进行分类分析。方法:分别选取肺癌和直肠癌术前放疗患者各10例,用Compass系统在加速器实测验证,将Eclipse AAA计算... 详细信息

目的:用IBA Compass系统对Varian Eclipse计划系统各向异性解析算法(AAA)计算的肺癌和直肠癌计划进行验证,研究差异原因并进行分类分析。方法:分别选取肺癌和直肠癌术前放疗患者各10例,用Compass系统在加速器实测验证,将Eclipse AAA计算的TPS Dose、Compass卷积/超分割算法(CCC)再计算的Compute Dose以及Compass通过实测并基于CCC算法重建的Reconstructed Dose进行两两对比(AAA/CR、CC/CR、AAA/CC),比较分析计划最大点剂量的10%生成的区域的Gamma结果和剂量体积直方图(DVH)结果。结果:在3 mm/3%/Global标准下,直肠癌术前计划:AAA/CRγ通过率为(97.37±2.41)%,CC/CRγ通过率为(97.88±2.21)%,AAA/CCγ通过率为(99.69±0.15)%,AAA/CRγ通过率与CC/CRγ通过率的差异无统计学意义(P=0.598)。肺癌计划:AAA/CRγ通过率为(92.09±2.79)%,CC/CRγ通过率为(96.17±2.78)%,AAA/CCγ通过率为(98.96±1.06)%,AAA/CRγ通过率与CC/CRγ通过率的差异具有显著统计学意义(P=0.005)。结论:用Compass验证AAA算法计划,在肺癌病例中AAA与CCC算法的差异是影响计划通过率的主要原因,在直肠癌计划中AAA与CCC算法的差异影响相对较低,通过率更多受到MLC到位精度、机架旋转精度、剂量准确度等执行不确定性影响。

关键词： IBA Compass 各向异性解析算法卷积/超分割算法计划验证

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瓦里安千伏级锥形束CT系统间剂量学一致性研究

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中国医学物理学杂志 2017年第6期34卷 546-549页

作者：王美娇张艺宝李莎贾飞吴昊丁艳秋郭文中国疾病预防控制中心辐射防护与核安全医学所北京100088 北京大学肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所放疗科恶性肿瘤发病机制及转化研究教育部重点实验室北京100142 郑州大学第一附属医院放射治疗部河南郑州450052 郑州大学基础医学院放射医学教研室河南郑州450052

目的:以两台相同型号、不同机龄的瓦里安锥形束CT(CBCT)为平台,选取球管电压值kVp与加权CT剂量指数CTDI_w,分别测量验证6套标准扫描参数的系统间剂量学一致性。方法:(1)选取德国PTW管电压表验证标称电压稳定性;(2)选取德国PTWCT电离室,... 详细信息

目的:以两台相同型号、不同机龄的瓦里安锥形束CT(CBCT)为平台,选取球管电压值kVp与加权CT剂量指数CTDI_w,分别测量验证6套标准扫描参数的系统间剂量学一致性。方法:(1)选取德国PTW管电压表验证标称电压稳定性;(2)选取德国PTWCT电离室,分别在Full-fan和Half-fan模式下测量直径为16 cm头部和32 cm体部一体式CTDI模体中心和外周4点剂量以计算CTDI_w;(3)利用SPSS 21.0版软件对数据进行检验,P<0.05为统计学有显著意义。结果:实测管电压均高于标称值,新旧CBCT的6个扫描参数平均偏高(2.5±0.7)k Vp和(2.9±0.8)kVp,相对偏差范围1.30%~3.12%;旧CBCT各参数的CTDI_w值均高于新CBCT,偏差幅度4.90%~11.46%,平均偏高8.73%±2.95%。结论:瓦里安CBCT的剂量学稳定性较好,但球管电压的偏差有随着使用年限增加的趋势,相同型号、相同扫描参数的机器间CTDI_w值也不尽相同。CBCT的剂量学一致性应该作为常规质量控制和工作保证的一部分进行监测。

关键词：瓦里安锥形束CT 加权CT剂量指数剂量学扫描参数放射防护

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8-氯-腺苷诱导的肺癌细胞A549 DNA双链断裂激活ATM-p53信号通路并减轻DNA损伤

8-氯-腺苷诱导的肺癌细胞A549 DNA双链断裂激活ATM-p53信号通路并...

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第四届吴宪吴瑞国际学术研讨会、第九届全国医学生物化学与分子生物学、第六届全国临床应用生物化学与分子生物学联合学术讨论会

作者：杨生永李淑艳倪菊花安国顺贾弘褆重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室渝中区医学院路1号重庆400016 北京大学基础医学院生物化学与分子生物学系海淀区学院路38号北京100191

8-氯-腺苷,一种腺苷类似物,在细胞内代谢转变为8-氯-ATP,进而耗竭细胞ATP池和抑制RNA的生物合成而发挥它的细胞毒性作用.我们的前期研究表明8-氯-腺苷通过抑制拓扑异构酶Ⅱ活性诱发人类粒细胞白血病细胞K562 DNA双链断裂(DNA Double Str...

8-氯-腺苷,一种腺苷类似物,在细胞内代谢转变为8-氯-ATP,进而耗竭细胞ATP池和抑制RNA的生物合成而发挥它的细胞毒性作用.我们的前期研究表明8-氯-腺苷通过抑制拓扑异构酶Ⅱ活性诱发人类粒细胞白血病细胞K562 DNA双链断裂(DNA Double Stranded Breaks,DNA DSBs).但肿瘤细胞应对8-氯-腺苷引起的DNA损伤的信号通路还是不很清楚.本研究首先用彗星电泳方法发现8-氯-腺苷持续作用于人肺癌细胞A549和H1299后诱发DNA DSB.共聚焦实验证明8-氯-腺苷引起癌细胞γ-H2AX foci形成增加.Western blotting结果表明8-氯-腺苷激活ATM-CHK1/CHK2-p53信号通路.最后用RNAi干扰ATM,p53基因的表达,或用咖啡因抑制ATM后,极大地增加了γ-H2AX foci的形成,这意味着ATM-p53信号通路在8-氯-腺苷引起的DNA损伤中发挥着重要的作用.

关键词：

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双靶点分子探针^(68)Ga-RGD-BBN用于乳腺癌的microPET显像

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生物物理学报 2011年第4期27卷 335-344页

作者：赵慧云刘妍贾兵王凡刘昭飞北京大学医学同位素研究中心北京100191 北京大学基础医学院放射医学教研室北京100191

精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(Arg-Gly-Asp,RGD)和蛙皮素(bombesin,BBN)多肽分别能够特异性识别整合素αvβ3和胃泌素释放肽受体(gastrin releasing peptide receptor,GRPR)。我们用谷氨酸将RGD和BBN连接制备成RGD-BBN异源二聚体多肽,用双功能连接剂NOTA偶联RGD-BBN后进行68Ga放射性标记,在MDA-MB-435(GRPR-/整合素αvβ3+)和T47D(GRPR+/整合素αvβ3↓)肿瘤细胞及荷瘤裸鼠模型中,测定68Ga-RGD-BBN的体外细胞摄取和体内肿瘤microPET显像特性,并且与其对应单体68Ga-RGD和68Ga-BBN进行比较分析。结果显示,68Ga-RGD-BBN可以灵敏地对整合素αvβ3和GRPR任何一个受体高表达的肿瘤进行显像,并且较其单体具有更高的肿瘤摄取。说明68Ga-RGD-BBN有望成为一种广谱的用于GRPR-/整合素αvβ3+和GRPR+/整合素αvβ3↓肿瘤诊断的显像剂。

关键词： RGD-BBN 整合素αvβ3 GRPR 乳腺癌 microPET显像

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Absolute quantification of induced mRNA expression of CYP3A1 and CYP3A2 in rat liver using quantitative real time PCR assay

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Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences 2011年第6期20卷 597-603页

作者：李良李载权李汉青毕姗姗许娇娇李博周田彦卢炜北京大学医学部药学院药剂学系北京100191 北京大学医学部基础医学院放射医学教研室北京100191 北京大学医学部天然药物及仿生药物国家重点实验室北京100191

Clinical drug-drug interactions（DDIs） induced by CYP3A may reduce the exposure and pharmacological activity of CYP3A ***-regulation of CYP3A mRNA is often used to evaluate inductive effect of test compounds on CYP3A. A quantitative real time PCR assay was developed and validated for the absolute quantification of CYP3A1 and CYP3A2 *** primers of CYP3A1,CYP3A2 and GAPDH（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,as a house-keeping gene） were well *** relationship between threshold cycle（Ct） and logarithm of the concentrations of CYP3A1, CYP3A2 and GAPDH was linear ranged from 1 attomol/μL to 1×10~6 attomol/uL with great inter- and intra-assay reproducibility. This method was successfully applied to investigate the time courses of CYP3A1 and CYP3A2 mRNA induction in rat liver after 100 mg/kg dexamethasone（DEX） administration by intraperitoneal（i.p.） *** baseline levels of CYP3A1 and CYP3A2 mRNAs were 37.78 attomol/ug（total RNA） and 252.31 attomol/ug（total RNA）,***3A1 and CYP3A2 mRNA values increased gradually to their peak levels（19- and 8- fold ***） within 24 h and 42 h,respectively,and then returned to their baseline 60 h after DEX administration.

关键词： Real time PCR CYP3A1 CYP3A2 mRNA Dexamethasone Induction

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双歧杆菌介导的肿瘤基因-放射治疗基础研究:双歧杆菌的转化研究

双歧杆菌介导的肿瘤基因-放射治疗基础研究:双歧杆菌的转化研究

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首届全球华人辐射研究大会

作者：杨业鹏石屹李载权周梅李会娟张志豹李五岭北京大学基础医学院放射医学教研室北京100191

目的双歧杆菌是专性厌氧的人体益生菌,可选择性地在实体肿瘤的乏氧组织中滞留并增殖,是肿瘤基因-放射治疗中较理想的治疗基因递送载体.但目前双歧杆菌的转化是一个技术难题,与大肠杆菌等宿主菌的高转化效率不同,采用普通的原核质粒无法... 详细信息

目的双歧杆菌是专性厌氧的人体益生菌,可选择性地在实体肿瘤的乏氧组织中滞留并增殖,是肿瘤基因-放射治疗中较理想的治疗基因递送载体.但目前双歧杆菌的转化是一个技术难题,与大肠杆菌等宿主菌的高转化效率不同,采用普通的原核质粒无法转化双歧杆菌.为此,本文提出双歧杆菌转化对质粒复制子具有"种属特异性"要求,并通过构建含有双歧杆菌特异复制子的新型大肠杆菌-双歧杆菌穿梭质粒,解决这一难题,为深入开展以双歧杆菌为基因递送栽体的肿瘤基因-放射治疗研究奠定基础.方法首先从GenBank获取长双歧杆菌隐性质粒pMB1的序列信息,采用Overlap-PCR方法获得其全长DNA,作为拟构建质粒的复制子;继而采用重组技术,将其与大肠杆菌质粒pMK4片段(含复制子pUC和抗氯霉素基因Cat)重组,构建大肠杆菌-双歧杆菌穿梭质粒;用电穿孔法将重组质粒转化双歧杆菌,通过观察不同电转参数下的转化效率,选择双歧杆菌转化的最佳条件.结果成功获得全长1 899 bp的pMB1复制子并构建成功含有pMB1和pUC双复制子的原核重组质粒,经酶切和测序鉴定正确,命名为pCMB1.以重组质粒成功转化了长双歧杆菌NCC2705和NQ 1501,而其它三种野生型双歧杆菌(包括一株长双歧杆菌)未能转化成功.使用pCMB1质粒转化长双歧杆菌NCC2705,在电场强度8.5 ～ 12.5kV/cm范围内,其转化效率的对数值与电场强度呈近似正相关;在质粒用量0.1 ～0.6 μ.g范围内,转化效率的对数值与质粒用量呈正相关,质粒用量＞0.6 μg时,转化效率反而下降;转化效率的对数值与转化时所用质粒的大小呈近似负相关.结论质粒中含有双歧杆菌种属特异的复制子是实现双歧杆菌转化的必要条件;即使是含有特异复制子的质粒在转化双歧杆菌时也具有种型甚至种株的局限性;选择最佳电转化条件能显著提高转化效率.

关键词：双歧杆菌电转化穿梭质粒基因递送载体肿瘤基因-放射治疗

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TRAIL基因用于肿瘤基因-放射治疗的研究进展

TRAIL基因用于肿瘤基因-放射治疗的研究进展

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首届全球华人辐射研究大会

作者：滕峰杨业鹏北京大学基础医学院放射医学教研室北京 100191

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(Tumor necrosis factor TNF-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)是肿瘤坏死因子TNF超家族的成员之一,人TRAIL(hTRAIL)由281个氨基酸组成Ⅱ型跨膜蛋白,基因定位于染色体3q26.目前已发现三类(共5个)与TRAIL特异结合的受体：死亡受体(death receptor,DR)、诱骗受体(decoy receptor,DcR)和可溶性受体.TRAIL能够通过死亡受体介导的凋亡通路和NF-κB调控的凋亡通路选择性地诱导肿瘤细胞凋亡,而正常细胞可以通过多种机制逃逸TRAIL诱导的细胞凋亡作用,使得TRAIL对于肿瘤细胞的诱导凋亡具有高度选择性.

关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL) 放射治疗肿瘤基因-放射治疗

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一种含双歧杆菌种属特异性复制子的新型大肠杆菌-双歧杆菌穿梭质粒的构建

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中国生物化学与分子生物学报 2010年第9期26卷 871-877页

作者：石屹杨业鹏李载权周梅李会娟张志豹李五岭北京大学基础医学院放射医学教研室北京100191

目前,双歧杆菌的转化是一个技术难题,与大肠杆菌等宿主菌的高转化效率不同,采用普通的原核质粒无法转化双歧杆菌.为此,本文提出双歧杆菌转化对质粒复制子具有"种属特异性"要求,并通过构建含有双歧杆菌特异复制子的新型穿梭质... 详细信息

目前,双歧杆菌的转化是一个技术难题,与大肠杆菌等宿主菌的高转化效率不同,采用普通的原核质粒无法转化双歧杆菌.为此,本文提出双歧杆菌转化对质粒复制子具有"种属特异性"要求,并通过构建含有双歧杆菌特异复制子的新型穿梭质粒,以求解决这一难题.首先从GenBank获取长双歧杆菌隐性质粒pMB1的序列信息,采用Overlap-PCR方法获得其全长DNA,作为拟构建质粒的复制子;继而采用重组技术,将其与pMK4质粒片段(含大肠杆菌复制子pUC和抗氯霉素基因Cat)重组,构建大肠杆菌-双歧杆菌穿梭质粒;用电穿孔法将重组质粒转化双歧杆菌,通过观察不同电转参数下的转化效率,选择双歧杆菌转化的最佳条件.结果,成功获得全长1899bp的pMB1复制子并构建成功含有pMB1和pUC双复制子的原核重组质粒,经酶切和测序鉴定正确,命名为pCMB1.以重组质粒成功转化了长双歧杆菌NCC2705和NQ1501,而其它3种野生型双歧杆菌(包括1株长双歧杆菌)未能转化成功.结论:质粒中含有双歧杆菌种属特异的复制子是实现双歧杆菌转化的必要条件;即使是含有特异复制子的质粒也只能转化有限数量种型甚至有限数量种株的双歧杆菌;选择最佳电转化条件能显著提高转化效率.

关键词：双歧杆菌复制子穿梭质粒转化

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^(125)I/^(111)In标记的抗EGFR单克隆抗体Panitumumab的制备及其在正常鼠体内的生物分布

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核化学与放射化学 2010年第6期32卷 362-368页

作者：刘妍靳存敬杨素娟贾兵王凡刘昭飞北京大学医学同位素研究中心北京100191 北京大学基础医学院放射医学教研室北京100191

用125I和111In标记人源化抗EGFR单克隆抗体Panitumumab,在体外用EGFR阳性细胞UM-SCC-22B测定125I-Panitumumab和111In-DOTA-Panitumumab的放射免疫活性分数,并在正常小白鼠体内进行生物分布研究。研究结果表明,Panitumumab的125I和111In标记均具有较高的标记率,经PD-10纯化后放化纯均高于98%1。25I和111In标记的Panitumumab具有较高的体外免疫活性。生物分布实验数据显示,实验中所有的时间点,111In-DOTA-Panitumumab在肝脏和脾脏中的摄取均显著高于125I标记物,说明不同核素标记对生物分子的体内外性质具有一定的影响。

关键词：表皮生长因子(EGFR) Panitumumab 111In 肿瘤生物分布

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