检索结果-内蒙古大学图书馆

北京大学学报（医学版） 2010年第2期42卷 188-191页

作者：和清源韩鸿宾许方婧伟闫军浩曾津津李小刚傅瑜彭芸陈翯侯超徐晓娟北京大学第三医院放射科北京100191 北京大学基础医学院解剖学教研室北京儿童医院放射科北京大学第三医院神经科

目的:观察钆喷酸葡胺(Gd-DTPA)在脑细胞外间隙(brain extracellular space,ECS)中扩散的磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)表现与规律,探讨应用MRI示踪法对ECS进行定量分析的可行性。方法:将8只雄性SD大鼠(280 g～320 g)麻醉后,参考脑立体定位图谱,选取冠状位苍白球为中心层面,以尾状核为靶点进行穿刺定位,导入Gd-DTPA2μL。于导入后1、3、6、9、12 h分别进行MRI扫描,观察MRI表现,测量示踪剂导入侧所在脑区与对侧相应脑区MR信号强度随时间的变化规律。于12 h MRI扫描结束后,对大鼠进行行为学评分。结果:MRI图像证实6只大鼠Gd-DTPA导入点位于尾状核区,2只位于外囊区。Gd-DTPA在尾状核区导入后呈均匀扩散,3 h扩散到达同侧大脑皮层,扩散后主要分布在大脑中动脉供血区的脑组织。随着扩散范围的增大,尾状核区的MRI信号强度逐渐下降,3 h后各个时间点相对MRI信号强度ΔS与1 h时ΔS间差异存在统计学意义(t=95.63,P<0.01),3 h后的各组ΔS间差异无统计学意义(P>0.05)。ΔS的衰减规律呈指数形式[y=1.7886x-0.1776(R2=0.94)]。导入外囊区的Gd-DTPA在1 h的MRI上呈弧形沿白质纤维扩散,表现为各向异性。在3 h后呈扇形向相邻脑区扩散,6 h时扩散到达同侧皮层区。结论:应用MRI示踪法可动态观察Gd-DTPA在细胞外间隙的扩散与清除衰减规律,是在活体对ECS解剖与生理学参数进行定量研究的可行方法。

关键词：磁共振成像细胞外隙钆喷酸葡胺

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硝基还原酶/CB1954自杀基因系统对宫颈癌Hela细胞杀伤效应的实验研究

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现代肿瘤医学 2009年第8期17卷 1403-1406页

作者：滕隔玲杨业鹏李载权周梅李五岭北京大学基础医学院放射医学教研室北京100191

目的:体外观察大肠杆菌硝基还原酶/[5-(1-氮丙啶)-2,4-二硝基苯甲酰胺](以下简称NTR/CB1954)自杀基因系统对宫颈癌Hela细胞的杀伤效应,探索一种新的宫颈癌基因治疗方法。方法:利用PCR技术从Escherichia coli K12的基因组中扩增出编码NT... 详细信息

目的:体外观察大肠杆菌硝基还原酶/[5-(1-氮丙啶)-2,4-二硝基苯甲酰胺](以下简称NTR/CB1954)自杀基因系统对宫颈癌Hela细胞的杀伤效应,探索一种新的宫颈癌基因治疗方法。方法:利用PCR技术从Escherichia coli K12的基因组中扩增出编码NTR的基因nfsB,酶切后,连接到真核表达载体pcDNA3上,获得重组载体pcDNA3-nfsB,lipofectamineTM2000脂质体转染法将pcDNA3-nfsB转染Hela细胞,筛选稳定表达细胞株,应用RT-PCR以及SDS-PAGE检测NTR在Hela细胞中的表达,MTT法检测NTR/CB1954对Hela细胞活力的影响,流式细胞术检测亚二倍体细胞率改变,PI/Hoechest33258双染荧光显微镜下观察Hela细胞凋亡率。结果:成功构建了真核表达载体pcDNA3-nfsB,获得稳定表达NTR的Hela细胞株,在mRNA水平以及蛋白水平检测到NTR在Hela细胞中的表达,NTR/CB1954自杀基因系统明显影响Hela细胞的活力,增加了Hela细胞的凋亡率。结论:NTR/CB1954自杀基因系统对Hela细胞在体外通过凋亡产生明显的杀伤效应。

关键词： nfsB基因硝基还原酶 CB1954 自杀基因凋亡

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HPV18E6基因沉默对宫颈癌Hela细胞生长和凋亡的影响

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现代肿瘤医学 2008年第10期16卷 1653-1656页

作者：上官文学杨业鹏周梅李五岭北京大学基础医学院放射医学教研室北京100083

目的:观察RNA干扰法沉默HPV18E6基因表达对宫颈癌Hela细胞生长和凋亡的影响,探索宫颈癌基因治疗的新途径。方法:针对HPV18E6 mRNA序列合成一对60bp的编码siRNA的DNA模板和一对60bp的非特异性对照DNA模板,构建pSUPER-siRNA和pSUPER-con... 详细信息

目的:观察RNA干扰法沉默HPV18E6基因表达对宫颈癌Hela细胞生长和凋亡的影响,探索宫颈癌基因治疗的新途径。方法:针对HPV18E6 mRNA序列合成一对60bp的编码siRNA的DNA模板和一对60bp的非特异性对照DNA模板,构建pSUPER-siRNA和pSUPER-con重组质粒,瞬时转染Hela细胞;采用RT-PCR法检测质粒转染后细胞HPV18E6基因表达的变化,用蛋白免疫印迹法检测转染后Hela细胞p53、p21、Bcl-2和Bax蛋白表达变化,以细胞计数法检测细胞生长情况,Hoechest/PI双荧光活细胞染色法检测细胞凋亡。结果:pSUPER-siRNA质粒转染能有效降低HPV18E6在mRNA水平的表达,转染后48小时,抑制效率达70%以上;转染后细胞p53、p21和Bax蛋白表达显著增加,Bcl-2蛋白表达减少。RNA干扰法沉默HPV18E6基因表达后,Hela细胞增殖受到明显抑制,细胞凋亡率明显增加。结论:pSUPER-siRNA质粒转染可有效抑制HPV18E6在人宫颈癌Hela细胞中的表达,抑制Hela细胞生长并促进其凋亡。以HPV18E6为靶点的RNA干扰技术可望成为宫颈癌基因治疗的新途径。

关键词：宫颈癌 RNA干扰 HPV18E6 凋亡

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RNAi沉默HPV18E6基因提高Hela宫颈癌细胞放射敏感性的研究

RNAi沉默HPV18E6基因提高Hela宫颈癌细胞放射敏感性的研究

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中国毒理学会放射毒理专业委员会第七次、中国毒理学会免疫毒理专业委员会第五次、中国环境诱变剂学会致突专业委员会第二次、中国环境诱变剂学会致畸专业委员会第二次、中国环境诱变剂学会致癌专业委员会第二次全国学术会议

作者：杨业鹏上官文学周梅李五岭北京大学基础医学院放射医学教研室

目的:人乳头瘤病毒(human papillomaviruses,HPV))感染是诱发子宫颈癌的主要原因。HPV18诱发宫颈癌与病毒致瘤蛋白 E6和细胞抑癌基因 P53结合并抑制其活性密切相关。本研究运用 RNA 干扰(RNAi)方法沉默 HPV18E6基因表达,观察其对 Hela ... 详细信息

目的:人乳头瘤病毒(human papillomaviruses,HPV))感染是诱发子宫颈癌的主要原因。HPV18诱发宫颈癌与病毒致瘤蛋白 E6和细胞抑癌基因 P53结合并抑制其活性密切相关。本研究运用 RNA 干扰(RNAi)方法沉默 HPV18E6基因表达,观察其对 Hela 宫颈癌细胞 P53基因表达和放射敏感件的影响。探索宫颈痛临床治疗的新途径。

关键词：宫颈癌细胞放射敏感性 HPV18E6

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SV-tk基因-放射治疗抗肿瘤动物实验研究

SV-tk基因-放射治疗抗肿瘤动物实验研究

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中华预防医学会放射卫生专业委员会第四届全国学术会议

作者：杨业鹏陈治国周梅沈嵌剑沈磊李五岭北京大学基础医学院放射医学教研室北京，100083

放射治疗是临床治疗恶性肿瘤的重要手段之一。但由于放疗同时造成正常组织损伤以及肿瘤细胞存在辐射抗性等问题的困扰，其疗效尚不尽人意。肿瘤基因治疗是医学重大进步的表现，并已取得了一些令人振奋的成果，但在其临床应用之前仍有许... 详细信息

放射治疗是临床治疗恶性肿瘤的重要手段之一。但由于放疗同时造成正常组织损伤以及肿瘤细胞存在辐射抗性等问题的困扰，其疗效尚不尽人意。肿瘤基因治疗是医学重大进步的表现，并已取得了一些令人振奋的成果，但在其临床应用之前仍有许多问题需要解决。近年来将放射治疗与基因治疗相结合，以发挥其优势——增强疗效，弥补其缺陷——降低副作用，成为肿瘤治疗研究的重要发展方向。为研究整体条件下γ射线与HSV-tk/GCV基因治疗系统联合应用对肿瘤的治疗作用，笔者利用阳离子脂质体介导瘤内注射法将HSV-tk基因导入荷瘤小鼠的瘤体内，腹腔注射GCV合并局部移植瘤γ射线照射，观察了两因素单独及联合治疗对荷瘤小鼠局部肿瘤生长变化和肺转移瘤结节形成的影响，并就联合治疗对抗肿瘤免疫反应的影响进行了进一步的探讨。

关键词：恶性肿瘤 SV-tk基因放射治疗抗肿瘤实验 γ射线照射临床治疗

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辐射损伤对HRAD17基因转染不同类型细胞的影响

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中华放射医学与防护杂志 2006年第1期26卷 3-5页

作者：钱鑫韩云孙艳杨业鹏朱应葆北京大学第三医院中心实验室细胞与分子生物学室 100083 北京大学第三医院基础医学院放射医学教研室

目的探讨HRAD17在DNA辐射损伤修复及辐射诱导的凋亡中的作用。方法利用基因转染技术,对小鼠成纤维细胞NIH3T3和人宫颈癌HeLa细胞均分别转染pDOR-neo载体,pDOR-HRAD17s(正义)和pDOR-HRAD17a(反义)质粒,G418筛选获得阳性克隆。转染后各组... 详细信息

目的探讨HRAD17在DNA辐射损伤修复及辐射诱导的凋亡中的作用。方法利用基因转染技术,对小鼠成纤维细胞NIH3T3和人宫颈癌HeLa细胞均分别转染pDOR-neo载体,pDOR-HRAD17s(正义)和pDOR-HRAD17a(反义)质粒,G418筛选获得阳性克隆。转染后各组细胞去血清培养48 h同步化后给予60Coγ射线10 Gy照射,吸收剂量率为2.54 Gy/min,加入完全培养基继续培养,并于0、61、2、14、36和48 h收集固定细胞,碘化丙啶(PI)避光染色后,流式细胞仪检测细胞DNA量。结果在辐射损伤后,转染正义HRAD17的成纤维细胞主要发生G1/S期阻滞,转染正义HRAD17的肿瘤细胞主要发生G2/M期阻滞;转染正义HRAD17的细胞凋亡比例降低,转染反义HRAD17的细胞凋亡比例升高。结论HRAD17同时参与细胞周期G1/S和G2/M期阻滞,并抑制辐射损伤诱导的细胞凋亡。

关键词： HRAD17 辐射损伤细胞周期凋亡基因转染类型

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γ射线联合HSV-tk/GCV基因治疗系统抗肿瘤体外实验研究

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中华放射医学与防护杂志 2005年第6期25卷 509-513页

作者：陈治国杨业鹏周梅占晓海沈剑沈磊李五岭王新娟北京大学基础医学院放射医学教研室 100083 北京大学生物化学与分子生物学系 100083

目的研究γ射线与人单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-tk)/丙氧鸟苷(GCV)基因治疗系统联合应用对Lewis肺癌细胞的杀伤作用及其可能机制。方法以脂质体介导法将含HSV-tk基因的真核表达质粒体外转染小鼠Lewis肺癌细胞,建立稳定表达的细胞株;RT-PC... 详细信息

目的研究γ射线与人单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-tk)/丙氧鸟苷(GCV)基因治疗系统联合应用对Lewis肺癌细胞的杀伤作用及其可能机制。方法以脂质体介导法将含HSV-tk基因的真核表达质粒体外转染小鼠Lewis肺癌细胞,建立稳定表达的细胞株;RT-PCR检测细胞tk基因表达;Hoechst33258/PI荧光活染、流式细胞术检测γ射线与HSV-tk/GCV系统单独及联合作用下的细胞凋亡;集落形成法检测细胞存活曲线,反映放射敏感性变化;同时检测旁观者效应及γ射线对该效应的影响。结果HSV-tk/GCV系统对转染基因的Lewis细胞(Lewis-Hytk细胞)具有选择性杀伤作用。γ射线与HSV-tk/GCV系统联合应用可使Lewis-Hytk细胞的凋亡和坏死率显著高于二者单独作用之和。0.1μg/ml GCV可使Lewis-Hytk细胞的放射敏感性明显增高(SER=1.47)。γ射线可增强HSV-tk/GCV系统的旁观者效应,二者联合作用后的Lewis-Hytk细胞的培养液对未处理过的Lewis细胞具有杀伤作用。结论γ射线与HSV-tk/GCV系统联合应用对Lewis肺癌细胞具有协同杀伤效应。γ射线增强HSV-tk/GCV系统的旁观者效应可能是其协同效应产生的机制之一。

关键词： γ射线人单纯疱疹病毒胸苷激酶基因治疗 Lewis肺癌细胞旁观者效应

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儿童青少年双生子胰岛素敏感性的遗传度估计及影响因素分析

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北京大学学报（医学版） 2005年第1期37卷 90-93页

作者：陈天娇季成叶逄增昌杨业鹏王伟李红娟胡永华北京大学儿童青少年卫生研究所北京100083 山东省青岛市疾病控制中心北京大学基础医学院放射医学教研室北京大学公共卫生学院流行病与卫生统计学系

目的 :分析影响儿童青少年的胰岛素敏感性的遗传和环境因素 ,并探讨其中体质指数 (bodymassindex ,BMI)、年龄和性别的作用。方法 :选择 5～ 18岁同性别双生子 2 96对 ,平均年龄 (12 4± 3 5 )岁 ,其中同卵双生子(MZ) 2 2 3对 ,异... 详细信息

目的 :分析影响儿童青少年的胰岛素敏感性的遗传和环境因素 ,并探讨其中体质指数 (bodymassindex ,BMI)、年龄和性别的作用。方法 :选择 5～ 18岁同性别双生子 2 96对 ,平均年龄 (12 4± 3 5 )岁 ,其中同卵双生子(MZ) 2 2 3对 ,异卵双生子 (DZ) 73对。在DNA卵性鉴定基础上 ,应用Mx软件模型拟合分别计算BMI调整前后稳态模型胰岛素抵抗指数 (homeostasismodelassessmentinsulinresistanceindex ,HOMAIR)和 β细胞功能指数 (HOMAβ cellfunctionindex ,HBCI)的遗传度 ,并检验年龄和性别对于模型的作用。结果 :HOMAIR与年龄、性别和BMI相关 ,HBCI与年龄相关 ,遗传分析HOMAIR、HBCI的模型为ACE ,BMI调整前后HOMAIR男女生遗传度不同 ,HB CI无明显变化。调整后HOMAIR、HBCI遗传度分别为 0 .2 5、0 .2 4。结论 :儿童青少年人群中HOMAIR、HBCI受遗传和环境因素共同作用 ,环境因素的影响似乎更大 ;BMI是影响机体胰岛素敏感性的重要因素 ;年龄和性别对遗传度的影响可能不大。

关键词：胰岛素人体质量指数双生研究儿童青少年

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肿瘤乏氧与放射基因治疗

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中华放射医学与防护杂志 2004年第2期24卷 167-170页

作者：赵慧云杨姝雅李五岭北京大学医学部基础医学院放射医学教研室 100083

氧效应决定了乏氧细胞的辐射抗性,人的实体肿瘤都有不同程度的乏氧现象,从而成为影响放疗效果的重要因素之一[1].为改善肿瘤放疗效果,放射增敏剂成为放射生物学的重要研究课题之一.但半个世纪以来,所研发的有效制剂,多止步于或处于临床... 详细信息

氧效应决定了乏氧细胞的辐射抗性,人的实体肿瘤都有不同程度的乏氧现象,从而成为影响放疗效果的重要因素之一[1].为改善肿瘤放疗效果,放射增敏剂成为放射生物学的重要研究课题之一.但半个世纪以来,所研发的有效制剂,多止步于或处于临床试验阶段,尚无一药物应用于临床.在此历程中,放射增敏研究在哲学思考和研究策略上也发生变化,取得了进步.在观念上,产生了从"拟氧克服乏氧"增敏到"利用乏氧"增敏的转变,开拓出生物还原药和乏氧介导基因治疗的新思路,由放、化疗与乏氧细胞毒剂联合互补模式,演化出放疗与基因治疗相联合的新策略,笔者以此为线索,就放射增敏研究进展作一简单的回顾和讨论。

关键词：肿瘤乏氧放射基因治疗放射增敏剂细胞毒剂

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辐射诱发细胞凋亡4种定量检测方法的比较

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中华放射医学与防护杂志 2004年第6期24卷 497-499页

作者：杨业鹏朱应葆陈冠英周梅沈嵚剑沈磊北京大学基础医学院放射医学教研室 100083 北京大学第三医院中心实验室

目的　通过检测结果的比较和原理分析 ,提示 4种凋亡检测方法鉴别凋亡和坏死的能力及优缺点。方法　采用PI染色流式细胞测量 (P F)法、TUNEL标记流式细胞测量 (T F)法、Annex inV FITC/PI活染流式细胞测量 (A F)法和Hoechst/PI活染 ... 详细信息

目的　通过检测结果的比较和原理分析 ,提示 4种凋亡检测方法鉴别凋亡和坏死的能力及优缺点。方法　采用PI染色流式细胞测量 (P F)法、TUNEL标记流式细胞测量 (T F)法、Annex inV FITC/PI活染流式细胞测量 (A F)法和Hoechst/PI活染荧光显微镜观察 (H O)法对γ射线诱发的人乳腺癌MCF 7细胞凋亡和坏死进行检测 ,以羟基喜树碱和叠氮钠分别为诱发凋亡和坏死的阳性对照物。结果　 4种方法对γ射线、羟基喜树碱诱发的细胞凋亡显示良好的时间剂量依赖性响应。P F法所得凋亡率较低 ,曲线斜率最小 ;T F法反之 ;A F法和H O法可获得凋亡和坏死两套数据 ,且两种方法的数值相近。A F法和H O法可识别叠氮钠所致的细胞坏死 ;而P F法和T F法不能反映其致坏死为主的真实情况。结论　P F法和T F法不能区别凋亡和坏死 ,A F法和H O法可以区别。P F法较T F法灵敏度低但简便经济。A F法快速可靠 ,H O法经济实用并可同时观察细胞形态学变化。

关键词：坏死细胞凋亡流式细胞辐射诱发羟基喜树碱定量检测观察荧光显微镜 γ射线叠氮钠

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