检索结果-内蒙古大学图书馆

氧化苦参碱对氧糖剥夺/复糖复氧损伤星形胶质细胞AMPK/mTOR途径及自噬的影响

中国药理学通报 2023年第12期39卷 2331-2338页

作者：崔明宇卢金莹于露王宇彤边疆王高杨新霞杨菁锦州医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室辽宁锦州121001

目的探讨AMPK/mTOR通路调节的自噬在氧化苦参碱(oxymatrine,OMT)抑制氧糖剥夺/复糖复氧(oxygen-glucose deprivation and reperfusion injury,OGD/R)对星形胶质细胞(astrocyte,AS)损伤中的作用。方法将分离纯化AS随机分为对照组(CON组)、模型组(OGD/R组)和OGD/R+OMT组(0.1、0.2、0.4 mmol·L^(-1))。MTT法检测细胞存活率;Hoechst 33342和Annexin V-FITC法检测细胞凋亡;流式细胞仪检测细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量;Western blot法检测p-AMPK、AMPK、p-mTOR、mTOR、Beclin 1、LC3B、p62和β-actin的表达。同时通过加入自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)探究自噬在OMT药效中作用。结果与CON组相比,OGD/R组细胞存活率明显降低(P<0.01),细胞凋亡率及细胞内ROS生成明显增加(P<0.01),p-AMPK/AMPK和LC3BⅡ/Ⅰ的比值及Beclin 1含量升高(P<0.01),p-mTOR/mTOR比值及p62含量降低(P<0.01)。与OGD/R组相比,OGD/R+OMT组细胞存活率明显升高(P<0.01),细胞凋亡率减少(P<0.01),细胞内ROS生成明显减低(P<0.01),p-AMPK/AMPK和LC3BⅡ/Ⅰ的比值降低(P<0.01),p-mTOR/mTOR比值及p62含量升高(P<0.01)。与OGD/R组相比,OGD/R+3-MA组细胞存活率明显提高(P<0.01),同时OGD/R+3-MA组存活率与OGD/R+OMT及OGD/R+OMT+3-MA组相比均有明显差异(P<0.01)。结论OMT对OGD/R诱导的AS具有保护作用,其中作用与抑制AMPK/mTOR信号通路及改善自噬有关。

关键词：氧化苦参碱氧糖剥夺/复糖复氧星形胶质细胞自噬氧化应激 AMPK/mTOR途径

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基于负集加权迭代修正最小二乘拟合原理的快速自适应拉曼光谱基线校正算法

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光谱学与光谱分析 2025年第2期45卷 344-350页

作者：徐嘉阳蒙思宇张志伟陈弘毅马玉婷王策齐向东胡慧杰宋一之浙江大学医学院基础医学系浙江杭州310011 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所医学检验研究室江苏苏州215163

拉曼光谱是无损光谱分析技术,通过分析散射光的频率变化获取物质的分子结构信息。基线校正是提升光谱数据质量的关键步骤,可以去除背景信号和不相关噪声,凸显并纯化目标信号。传统的拉曼光谱技术对基线校正的时效性要求不高,但随着流式... 详细信息

拉曼光谱是无损光谱分析技术,通过分析散射光的频率变化获取物质的分子结构信息。基线校正是提升光谱数据质量的关键步骤,可以去除背景信号和不相关噪声,凸显并纯化目标信号。传统的拉曼光谱技术对基线校正的时效性要求不高,但随着流式拉曼和内窥拉曼等需要实时处理光谱数据的应用场景增多,基线校正在速度和准确性要求也随之提高。传统的迭代多项式拟合和小波变换方法在时间、精度或自适应能力上存在不足。本研究开发了一种基于负集加权迭代修正最小二乘原理的快速自适应基线校正算法(MWIALS)。主要原理是提取负数集并赋予更高权重,在迭代过程中不断修正基线,并通过设置参数阈值以跳出循环,实现快速准确的基线校正。提出两种参数选择策略:固定参数(FMWIALS)适用于批量同类型光谱的快速处理,自适应(AMWIALS)适用于差异化光谱的自适应处理。该算法应用于颗粒物的流式拉曼光谱分析。结果表明,与其他主流算法相比,MWIALS在实际光谱处理上显著高效(平均处理时长47 ms·谱^(-1)),具有较高的准确性和自适应性。该算法能够满足流式拉曼和内窥拉曼等生物样本检测中实时光谱处理的需求,为拉曼光谱技术的进一步应用提供了强有力的支持。

关键词：拉曼光谱基线校正流式拉曼快速自适应负集加权迭代修正最小二乘算法(MWIALS)

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下丘脑腹内侧核神经元调节代谢机制的研究进展

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神经解剖学杂志 2024年第2期40卷 257-261页

作者：时素娟张颖宁毛娥陈玉玲王兮周一航寇珍珍王璐延安大学基础医学院延安716000 空军军医大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学教研室西安710032 包头医学院基础医学与法医学院包头014040 空军军医大学基础医学院学员一大队西安710032 空军军医大学基础医学院学员五大队西安710032

下丘脑是调控自主神经系统功能的整合中枢,其中下丘脑腹内侧核(VMH)在代谢调控中扮演着关键的角色。因此,深入理解其生理功能有助于揭示糖尿病、肥胖等代谢性疾病的发病机制,为疾病的预防和治疗提供新的研究方向。本文综述了近年来关于... 详细信息

下丘脑是调控自主神经系统功能的整合中枢,其中下丘脑腹内侧核(VMH)在代谢调控中扮演着关键的角色。因此,深入理解其生理功能有助于揭示糖尿病、肥胖等代谢性疾病的发病机制,为疾病的预防和治疗提供新的研究方向。本文综述了近年来关于VMH在调节代谢机制方面的研究进展,深入探讨了其在能量平衡、葡萄糖稳态、脂质代谢等方面的作用,为进一步理解和治疗代谢性疾病提供了基础。

关键词：下丘脑腹内侧核糖尿病肥胖糖代谢脂代谢葡萄糖稳态

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髓系细胞缺失ATG5对疟原虫特异性CD4+T细胞免疫记忆形成的影响

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免疫学杂志 2023年第9期39卷 777-782,796页

作者：李秀秀高源利范永玲刘太平郭帅方佳芩徐文岳陆军军医大学基础医学院病原生物学教研室重庆400038

目的研究髓系细胞缺失ATG5对疟原虫特异性CD4^(+)T细胞免疫记忆形成的影响。方法构建髓系细胞特异缺失ATG5的条件敲除小鼠,在其感染约氏疟原虫Plasmodium yoelii(***)17XNL自愈后1个月、3个月和6个月分别再次感染该虫株,观察其原虫率变... 详细信息

目的研究髓系细胞缺失ATG5对疟原虫特异性CD4^(+)T细胞免疫记忆形成的影响。方法构建髓系细胞特异缺失ATG5的条件敲除小鼠,在其感染约氏疟原虫Plasmodium yoelii(***)17XNL自愈后1个月、3个月和6个月分别再次感染该虫株,观察其原虫率变化。同时采用流式细胞术检测髓系细胞ATG5条件缺失感染自愈小鼠疟原虫特异性免疫记忆CD4^(+)T细胞频率和数量的变化。结果成功构建髓系细胞ATG5条件缺失实验小鼠(ATG5^(f/f)-LysM cre^(+))。与对照组(ATG5^(f/f)-LysM cre^(-))相比,初次感染P.y 17XNL的实验组小鼠(ATG5^(f/f)-LysM cre^(+))原虫血症明显低于对照组小鼠(ATG5^(f/f)-LysM cre^(-))。在上述感染小鼠自愈后1个月、3个月和6个月再次感染P.y 17XNL,结果发现感染小鼠原虫血症与初次感染相比,均显著降低,且所有感染小鼠在攻击后6~8 d内完全清除体内疟原虫。流式检测后发现,ATG5^(f/f)-LysM cre^(+)与ATGf/f-LysM cre^(-)小鼠感染自愈后3个月或6个月,其脾脏疟原虫特异性免疫记忆CD4^(+)T细胞频率和数量均无统计学差异。结论P.y 17XNL感染自愈小鼠可以有效诱导宿主免疫记忆,但髓系细胞缺失ATG5不影响疟原虫特异性CD4^(+)T细胞免疫记忆形成。

关键词：约氏疟原虫17XNL 髓系细胞 ATG5 疟原虫特异性CD4+T细胞免疫记忆

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小鼠抗寨卡病毒包膜蛋白胞外区(Eecto)单克隆抗体的制备

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细胞与分子免疫学杂志 2024年第5期40卷 447-454页

作者：薛潘董阳超武福星陈洋张剑元航武苏闪袁若栋李宝莉雷迎峰延安大学医学院陕西延安716000 空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室陕西西安710032

目的制备小鼠抗寨卡病毒(ZIKV)包膜蛋白胞外区(Eecto)单克隆抗体。方法首先构建ZIKV Eecto的原核表达质粒pET28a-ZIKV-Eecto,将其转化至大肠杆菌感受态BL21后,利用异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。重组Eecto蛋白以包涵体形式表... 详细信息

目的制备小鼠抗寨卡病毒(ZIKV)包膜蛋白胞外区(Eecto)单克隆抗体。方法首先构建ZIKV Eecto的原核表达质粒pET28a-ZIKV-Eecto,将其转化至大肠杆菌感受态BL21后,利用异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。重组Eecto蛋白以包涵体形式表达,经过变性、复性和超滤获得纯化的蛋白。将Eecto蛋白3次免疫后,获得多克隆抗体血清,进行效价测定,并利用ZIKV prME真核表达质粒转染的HEK293T细胞进行Western blot法和免疫荧光法分析。取效价较高的小鼠脾脏制备脾细胞,与SP2/0骨髓瘤细胞融合,通过有限稀释法获取分泌抗体的杂交瘤细胞,并进一步制备腹水。对腹水进行抗体效价测定、亚类分析。以ZIKV同属病毒日本脑炎病毒(JEV)、黄热病病毒(YFV)、登革病毒1-4(DENV1-4)、蜱传脑炎病毒(TBEV)的Eecto为包被抗原,利用ELISA分析ZIKV单克隆抗体的交叉反应性,进一步对效价高、特异性强的抗体进行特异性分析。结果成功构建了原核表达质粒pET28a-ZIKV-Eecto,并获得纯化的Eecto蛋白,该蛋白具有良好的免疫原性;制备筛选得到1D6、4F11、4H7、4F8四株单克隆抗体,其中三株(1D6、4H7、4F8)为IgGκ型抗体,一株(4F11)为IgMκ,1D6腹水效价大于1∶108;其中1D6和4H7为ZIKV特异性抗体,与其他黄病毒无交叉反应。结论成功制备了小鼠抗ZIKV Eecto单克隆抗体,为后续建立ZIKV检测方法及致病机制研究提供了实验材料。

关键词：寨卡病毒(ZIKV) 包膜蛋白胞外区(Eecto) 原核表达单克隆抗体

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“教科思三位一体”全方位模式提升医学生科研综合能力的探索与实践

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中国生物化学与分子生物学报 2025年

作者：杨晓红黄春洪罗达亚朱伟锋应牡英姜祎郭璟翀廖浩棠汤晓丽南昌大学江西医学院基础医学院生物化学与分子生物学教研室南昌大学眼视光学院眼视光医学系南昌大学第一临床医学院临床医学系南昌大学第二临床医学院临床医学系

科教融合是推动社会进步和科技发展的重要策略，是实现创新人才培养的现代化高等教育形式。开展医学本科生科研训练是培养高校医学本科生创新能力和综合素质的重要途径之一。本团队将分子生物学实验教学与开展医学本科生科研训练有机融... 详细信息

科教融合是推动社会进步和科技发展的重要策略，是实现创新人才培养的现代化高等教育形式。开展医学本科生科研训练是培养高校医学本科生创新能力和综合素质的重要途径之一。本团队将分子生物学实验教学与开展医学本科生科研训练有机融合，以课程思政作为价值引领，提出了“教科思三位一体”的教学模式，旨在全方位培养学生科研综合能力。本次教学活动以基因多态性实验为例，全年级选拔出具有科研潜力的学生，分成4个项目组，分别由4名老师指导，从科研选题、项目书撰写、实验设计、科研伦理申请及项目总结等全过程进行科研训练。在整个教学过程中，本团队一直秉承着以学生为中心的教育理念，激发学生的内在动机，学生是项目的设计者和执行者，教师只是学习的引导者和促进者。经过本次训练，学生不但熟悉了科学研究项目书的撰写和实施的全过程，而且在文献阅读、实验设计、实验技能及解决问题的能力等方面都得到了一定程度的提升，尤为重要的是，本次教学活动也培养了学生的科研伦理意识和学术道德规范。

关键词：课程思政科教融合科研训练科研综合能力科研伦理

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小胶质细胞固有免疫记忆的表观遗传调节与神经系统疾病

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生理学报 2022年第6期74卷 1031-1038页

作者：周锦涛俞仲望曹莉海军军医大学基础医学院神经生物学教研室

小胶质细胞具有介导固有免疫记忆的能力，可由初级刺激引起小胶质细胞重编程，从而增强或抑制小胶质细胞对次级刺激的免疫反应。炎症刺激是小胶质细胞产生固有免疫记忆的重要因素，单一或重复的炎症刺激是小胶质细胞形成不同细胞表型的... 详细信息

小胶质细胞具有介导固有免疫记忆的能力，可由初级刺激引起小胶质细胞重编程，从而增强或抑制小胶质细胞对次级刺激的免疫反应。炎症刺激是小胶质细胞产生固有免疫记忆的重要因素，单一或重复的炎症刺激是小胶质细胞形成不同细胞表型的诱因。小胶质细胞介导固有免疫反应过程中涉及许多免疫记忆调控。免疫记忆调控是多方面综合作用的结果。增强子修饰是小胶质细胞表观遗传调控的关键途径，H3K27ac增强子标记与免疫训练形成密切相关。细胞因子TGF-β1介导IL-10和IL-1β之间的相互作用，从而影响小胶质细胞表型。小胶质细胞糖酵解活性在免疫训练形成后增强，而氧化磷酸化与免疫耐受形成有关。固有免疫记忆与神经退行性疾病、脑肿瘤、脑损伤和精神疾病密切相关。深入研究小胶质细胞介导固有免疫反应的机制有助于加强对中枢神经系统疾病发生和发展的进一步认识，也有助于为治疗中枢神经系统疾病提供新思路。

关键词：小胶质细胞固有免疫记忆表观遗传修饰细胞因子代谢通路中枢神经系统疾病

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过表达微小RNA-130a-3P对LPS诱导心肌细胞损伤的干预作用及其机制

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中国应用生理学杂志 2022年第4期38卷 335-340页

作者：苗莹莹袁欢欢黄敏杰付升旗新乡医学院三全学院人体解剖学教研室河南新乡453003 新乡医学院基础医学院人体解剖与组织胚胎学系河南新乡453003

目的:探讨miRNA-130a-3p对脂多糖(LPS)诱导的心肌细胞自噬与凋亡的影响及分子机制。方法:H9C2心肌细胞随机分为5组,即正常对照组,LPS模型组,miRNA阴性对照组(miRNA-negative control组),miRNA-130a-3p mimics组(过表达miRNA-130a-3p),miRNA-130a-3p mimics+LY294002组(过表达miRNA-130a-3p+PI3K抑制)。LPS模型组即终浓度为10μg/ml的LPS诱导24 h,miRNA阴性对照组与miRNA-130a-3p mimics组是利用lipo3000将阴性对照miRNA及miRNA-130a-3p mimics转染至H9C2细胞,培养24 h后,再将LPS加入培养基中培养24 h。miRNA-130a-3p mimics+LY294002组是利用lipo3000将miRNA-130a-3p mimics转染至H9C2细胞,同时在培养基中加入10μmol/L(终浓度)的LY294002,培养24 h后,再将浓度为10μg/ml的LPS加入培养基中培养24 h。所有实验均重复5次以上。利用RT-qPCR检测细胞中miRNA-130a-3p mRNA的表达水平,利用CCK-8实验检测细胞活性,利用ELISA实验检测细胞培养液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6),白细胞介素-1β(IL-1β)的含量,利用比色法检测细胞培养液中超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)的含量;利用Western blot检测细胞中p-PI3K蛋白,p-AKT蛋白,Bax蛋白,Bcl-2蛋白,cleaved-caspase-3蛋白,LC3蛋白,p62蛋白的表达水平。结果:结果显示,与正常组相比较,LPS模型细胞中miRNA-130a-3p mRNA水平,p-PI3K蛋白与p-AKT蛋白的水平显著低于正常对照组(P<0.01);与LPS组相比较,miRNA-130a-3p mimics组细胞中p-PI3K,p-AKT蛋白的表达显著升高(P<0.01,P<0.05);与正常对照组相比较,LPS组细胞活性显著降低,细胞培养液中TNF-α,IL-6,IL-1β及LDH的含量显著升高(P<0.01),SOD的含量显著降低(P<0.01),细胞中Bax蛋白,cleaved caspase-3蛋白,p62蛋白的表达显著升高(P<0.01),Bcl-2蛋白的表达和LC3II/I的比率显著降低(P<0.01);与LPS组相比较,miRNA-130a-3p mimics可提高细胞活性,降低细胞培养液中TNF-α,IL-6,IL-1β及LDH的含量(P<0.01,P<0.05),提高SOD的含量(P<0.05),降低细胞中Bax蛋白,cleaved caspase-3蛋白,p62蛋白的表达(P<0.01),促进Bcl-2蛋白的表达(P<0.01),提高LC3II/I的比率(P<0.05);与miRNA-130a-3p mimics组相比较,miRNA-130a-3p mimics+LY294002组,可部分逆转miRNA-130a-3p mimics对细胞的作用。结论:过表达miRNA-130a-3p可部分通过激活PI3K/AKT信号通路促进细胞的自噬与抑制细胞凋亡,减轻LPS诱导的心肌细胞损伤。

关键词：微小RNA-130a-3p PI3K/AKT信号通路自噬细胞凋亡细胞损伤

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巨噬细胞迁移抑制因子调节登革病毒2型感染诱导人脐静脉内皮细胞自噬的研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2022年第3期42卷 185-193页

作者：苟小琴吴宁左丽贵州医科大学基础医学院免疫学教研室贵阳550000

目的:研究原代人脐静脉内皮细胞(primary human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)被登革病毒2型(dengue virus type 2,DENV2)感染后,巨噬细胞迁移抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)对腺苷酸激活蛋白激酶(adenosine 5′-monophosphate-activated protein kinase,AMPK)/细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)/雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)自噬信号途径的影响。方法:TCID 50检测DENV2对C6/36细胞的毒力,RT-PCR检测DENV2感染后HUVEC内病毒NS1基因部分片段;透射电子显微镜观察自噬体结构,Western blot检测不同剂量病毒感染HUVEC后对微管关联蛋白Ⅱ(microtubule-associated proteinsⅡ,LC3-Ⅱ)表达的影响和不同时间MIF的蛋白质水平变化,分析MIF与自噬相关蛋白LC3-Ⅱ的相关性;MIF抑制剂和通路抑制剂分别预处理DENV2感染的HUVEC,Western blot检测MIF、AMPK、ERK、mTOR和LC3-Ⅱ蛋白变化,分析MIF与AMPK自噬通路的关联。结果:实验用毒株对C6/36细胞的TCID 50为10-9.09/ml,被感染的HUVEC内可检测病毒NS1基因部分片段序列。不同剂量病毒感染后,在HUVEC内可形成自噬小体或自噬溶酶体,自噬水平有差异。DENV2感染HUVEC引起MIF和LC3-ⅡmRNA水平的变化呈正相关,MIF抑制剂的处理影响通路蛋白AMPK、ERK和LC3-Ⅱ的表达,但几乎不影响MIF的蛋白质水平。结论:DENV2感染HUVEC引起的MIF变化可影响自噬水平,MIF通过调控AMPK/ERK/mTOR途径影响自噬。

关键词：登革病毒2型巨噬细胞迁移抑制因子自噬腺苷酸激活蛋白激酶原代人脐静脉内皮细胞

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P3肽抑制RAW264.7巨噬细胞泡沫化的分子机制

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中国药理学通报 2023年第9期39卷 1711-1717页

作者：李佳慧蒋宇恒王承瑾江林邓艳张礼林许庆忠李红梅贵州医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室贵州贵阳550025

目的观察P3肽对RAW264.7巨噬细胞脂质沉积的影响,并探讨其作用机制。方法采用MTT法筛选P3肽及氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)的作用浓度,并用80 mg·L^(-1)的ox-LDL诱导RAW264.7细胞形成泡沫细胞;分别... 详细信息

目的观察P3肽对RAW264.7巨噬细胞脂质沉积的影响,并探讨其作用机制。方法采用MTT法筛选P3肽及氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)的作用浓度,并用80 mg·L^(-1)的ox-LDL诱导RAW264.7细胞形成泡沫细胞;分别采用油红O染色和总胆固醇含量测定试剂盒,检测细胞内脂质沉积及总胆固醇含量;实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)及Western blot检测三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1)、三磷酸腺苷结合盒转运体G1(ATP-binding cassette transporter G1,ABCG1)的mRNA和蛋白表达变化;分别应用肝X受体(liver X receptor,LXR)的激动剂T0901317、GW3965,以及LXR抑制剂GSK2033进一步验证P3肽调控ABCA1、ABCG1表达的作用机制。结果P3肽明显减少RAW264.7细胞内脂质沉积,降低细胞内总胆固醇含量,上调ABCA1、ABCG1mRNA和蛋白表达;P3肽上调ABCA1、ABCG1的作用与LXR激动剂T0901317、GW3965相似;加入抑制LXR基因转录的抑制剂GSK2033后,P3肽对ABCA1、ABCG1的基因表达无上调作用。结论P3肽可减少RAW264.7巨噬细胞内脂质积聚,抑制泡沫细胞的形成,其作用机制可能与激活LXR-ABCA1/ABCG1通路有关。

关键词： P3肽 RAW264.7细胞脂质沉积泡沫细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1 三磷酸腺苷结合盒转运体G1 肝X受体

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