重组人IL-6/IL-2融合蛋白的高密度发酵和纯化

作     者：李董 袁文肃 马小彤 蔡辉国 明宇 李静 赵春华 

作者机构：中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020 

出 版 物：《高技术通讯》 (Chinese High Technology Letters)

年 卷 期：2003年第13卷第11期

页      面：27-30页

核心收录：

学科分类：081703[工学-生物化工] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 0836[工学-生物工程] 082203[工学-发酵工程] 0822[工学-轻工技术与工程] 

基　　金：863计划(2001AA215301) 973规划(001CB5099)资助项目 

主　　题：白细胞介素 纯度 离子交换层析 凝胶过滤层析 大肠杆菌 

摘      要：克隆的IL-6/IL-2融合蛋白编码基因插入pBV220载体,转化BL21(DE3)菌株中表达。发酵过程中,30℃扩增生长6小时,42℃诱导培养4小时,控制溶解氧在30％～50％。发酵液中最终菌体密度(OD600)达29.17(相当于每升发酵液含55克湿菌体),表达的融合蛋白呈包涵体形式。表达蛋白占菌体总蛋白的30％左右。菌体经过超声破碎后反复洗涤包涵体,融合蛋白纯度达到70％,进一步用离子交换层析和凝胶过滤层析纯化使其纯度达95％以上。IL-6/2融合蛋白中的IL-6和IL-2活性分别为1×107和2×105 U/mg。重组人IL-6,/IL-2融合蛋白在大肠杆菌中达到了中试水平的高表达。