重组工程菌pET32a-CR1-SCR15-18/BL21(DE3)高密度发酵工艺研究

作     者：何莉 鲜尽红 刘高科 杨永涛 汪正清 He Li;Xian Jinhong;Liu Gaoke;Yang Yongtao;Wang Zhengqing

作者机构：第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆400038 沈阳军区总医院检验科沈阳100016 重庆医药高等专科学校微生物学教研室重庆400030 

出 版 物：《第三军医大学学报》 (Journal of Third Military Medical University)

年 卷 期：2011年第33卷第9期

页      面：896-899页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 081703[工学-生物化工] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 071007[理学-遗传学] 0836[工学-生物工程] 082203[工学-发酵工程] 0822[工学-轻工技术与工程] 

基　　金：国家自然科学基金(30471723) 重庆市自然科学基金(CSTC2007BB5011) 

主　　题：补体1型受体SCR15-18 高密度发酵 大肠杆菌 

摘      要：目的建立重组工程菌pET32a-CR1-SCR15-18/BL21(DE3)的高密度发酵工艺。方法以摇瓶发酵结果为基础,扩大至发酵罐发酵,对影响工程菌生长及目的蛋白表达的因素如发酵培养基、培养温度、pH值、活化时间、诱导时间及分批补加营养物质等条件进行优化。结果采用改良M9-CA培养基、37℃活化4 h后以0.2 mmol/L IPTG诱导表达4 h,以甘油为碳源,在生长期和诱导期分别以40 ml/h和70 ml/h的速率连续流加补料,全程滴加氨水保持培养基pH值保持在7.5,调节转速控制溶解氧在40%左右。最终菌体产量提高至40 g/L以上,CR1-SCR15-18蛋白表达率达28%以上。结论高密度发酵工艺显著提高了工程菌的产量和CR1-SCR15-18蛋白的表达水平。