克雷伯杆菌1，3-丙二醇氧化还原酶的分离纯化及其酶学性质

作     者：陈宏文 聂金峰 方柏山 陈国华(英文审校) CHEN Hong-wen;NIE Jin-feng;FANG Bai-shan

作者机构：华侨大学工业生物技术福建省高等学校重点实验室福建泉州362021 不详 

出 版 物：《华侨大学学报（自然科学版）》 (Journal of Huaqiao University(Natural Science))

年 卷 期：2009年第30卷第1期

页      面：62-66页

学科分类：0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 081703[工学-生物化工] 081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 0836[工学-生物工程] 082203[工学-发酵工程] 0822[工学-轻工技术与工程] 

基　　金：国家重点基础研究发展(973)计划项目(2007CB707804) 国家高技术研究发展(863)计划项目(2006AA-020103) 国家自然科学基金资助项目(20676048) 福建省自然科学基金计划资助项目(E0510018) 

主　　题：1,3-丙二醇氧化还原酶 克雷伯杆菌 甘油脱氢酶 酶学性质 纯化 

摘      要：在有氧条件下，利用DEAE Sepharose Fast Flow弱阴离子离子交换层析和Blue Sepharose CL-6B亲和层析，同时分离并提纯克雷伯杆菌胞内的1，3-丙二醇氧化还原酶和甘油脱氢酶．研究表明，1，3-丙二醇氧化还原酶的纯化倍数为35．86倍，回收率为5．17％，该酶最适表观反应温度为57℃，最适反应pH值为9．5．在30℃及pH-8．0～10．0时，该酶具有良好的稳定性．在45℃和pH-9．5条件下，该酶以1，3-丙二醇和NAD^＋为底物，其米氏常数K。分别为15．8，0．2mmol·L_。．1，3一丙二醇氧化还原酶对生理反应底物3-羟基丙醛活性最大，对其他醇类也有氧化能力．Mn^2＋对酶有显著激活作用，巯基保护剂能明显提高酶的活力．