检索结果-内蒙古大学图书馆

基于YAP1/SIRT5信号轴探讨下瘀血汤调控琥珀酸代谢-琥珀酰化抑制肝癌细胞的机制

中国实验方剂学杂志 2025年

作者：卢林竹郭倩倩田雪飞陈斌谭年花湖南中医药大学中西医结合学院湖南中医药大学方证转化湖南省重点实验室湖南省中医药防治肿瘤机理重点实验室湖南中医药大学第一附属医院肝病研究中心

目的：探讨下瘀血汤（XYXT）调控琥珀酸代谢、琥珀酰化修饰抑制肝癌细胞及其作用机制。方法：制备下瘀血汤含药血清；采用细胞增殖活性检测（CCK-8）观察不同浓度的琥珀酸对HepG2、MHCC97H细胞增殖的影响并确定后续实验浓度；进一步采用... 详细信息

目的：探讨下瘀血汤（XYXT）调控琥珀酸代谢、琥珀酰化修饰抑制肝癌细胞及其作用机制。方法：制备下瘀血汤含药血清；采用细胞增殖活性检测（CCK-8）观察不同浓度的琥珀酸对HepG2、MHCC97H细胞增殖的影响并确定后续实验浓度；进一步采用CCK-8法检测不同浓度（5%、10%、15%）下瘀血汤含药血清对HepG2、MHCC97H细胞增殖的影响；流式细胞术、细胞划痕实验及Transwell实验检测10%下瘀血汤含药血清对HepG2、MHCC97H周期、迁移、侵袭及凋亡的影响；通过琥珀酸含量测定、琥珀酸脱氢酶（SDH）活性检测及蛋白免疫印迹法（Western blot）检测琥珀酸代谢及琥珀酰化修饰的变化；实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）、Western blot检测Yes关联蛋白1（YAP1）与沉默信息调节因子5（SIRT5）表达；应用分子对接验证下瘀血汤主要成分与靶点蛋白的结合。结果：与0 mmol·L-1组比较，1～2 mmol·L-1琥珀酸可显著促进HepG2、MHCC97H细胞增殖（P < 0.01）；与空白血清组相比，下瘀血汤含药血清（5%、10%、15%）显著抑制HepG2、MHCC97H细胞的增殖（P < 0.05，P < 0.01）；与空白血清组相比，10%下瘀血汤含药血清能够将细胞周期阻滞在DNA合成前期(G0/G1)（P < 0.01），同时显著抑制HepG2、MHCC97H细胞的迁移（P < 0.01）与侵袭（P < 0.05，P < 0.01），促进HepG2、MHCC97H细胞凋亡（P < 0.01）；此外，与下瘀血汤组相比，下瘀血汤与琥珀酸共处理组的HepG2、MHCC97H细胞增殖率（P < 0.05，P < 0.01）、迁移及侵袭能力（P < 0.05，P < 0.01）均有显著回升，G0/G1期细胞比例降低（P < 0.01），细胞凋亡率也有所降低（P < 0.01）。在琥珀酸代谢方面，与空白血清组相比，10%下瘀血汤含药血清降低了HepG2、MHCC97H细胞的琥珀酸水平（P < 0.05，P < 0.01），提高了SDH活性（P < 0.01），并显著下调琥珀酰化修饰水平。在YAP1/SIRT5通路方面，与空白血清组相比，10%下瘀血汤含药血清干预后HepG2、MHCC97H细胞YAP1的mRNA和蛋白表达显著下调（P < 0.05，P < 0.01），SIRT5的mRNA和蛋白表达则显著上调（P < 0.05，P < 0.01）。分子对接结果表明YAP1与SIRT5之间、下瘀血汤主要活性成分与YAP1、SIRT5均具有良好结合能力。结论：下瘀血汤通过调控YAP1/SIRT5信号轴干预琥珀酸代谢-琥珀酰化修饰，实现对肝癌细胞的抑制作用。

关键词：肝癌下瘀血汤琥珀酸琥珀酰化 Yes关联蛋白1(YAP1) 沉默信息调节因子5(SIRT5)

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

引用

中国中药杂志 2025年

作者：卢林竹黄振郭倩倩谭年花吕长军易纯田雪飞湖南中医药大学中西医结合学院方证转化湖南省重点实验室湖南省中医药防治肿瘤机理重点实验室湖南中医药高等专科学校中医学院湖南中医药大学第一附属医院湖南中医药大学医学院

探讨附子多糖联合仑伐替尼在调控肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）极化从而增强抗肝细胞癌疗效中的作用。采用CCK-8筛选附子多糖和仑伐替尼对RAW264.7细胞的无毒浓度；构建RAW264.7细胞与Hepa1-6肝癌细胞共培养体系，流式细胞术检测巨噬细胞M1... 详细信息

探讨附子多糖联合仑伐替尼在调控肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）极化从而增强抗肝细胞癌疗效中的作用。采用CCK-8筛选附子多糖和仑伐替尼对RAW264.7细胞的无毒浓度；构建RAW264.7细胞与Hepa1-6肝癌细胞共培养体系，流式细胞术检测巨噬细胞M1、M2表型变化；实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）检测M1型相关因子诱导型一氧化氮合酶（iNos）、白细胞介素-12b（Il-12b）及M2型相关因子精氨酸酶1（Arg-1）、白细胞介素-10（Il-10）的mRNA表达水平；EdU染色、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验及Annexin V/PI双染流式细胞术评估附子多糖联合仑伐替尼处理后的巨噬细胞对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响；建立C57BL/6小鼠肝癌皮下移植瘤模型，观察各组瘤体生长、体质量、脾脏指数、肿瘤浸润巨噬细胞极化状态。CCK-8结果表明50～200 mg·L-1附子多糖、1～5 μmol·L-1仑伐替尼对RAW264.7巨噬细胞无抑制作用；流式细胞术及qRT-PCR结果显示，200 mg·L-1附子多糖+仑伐替尼显著提高M1型巨噬细胞比例（P<0.01）及M1/M2比值（P<0.01），上调M1相关基因iNos、Il-12b表达（P<0.01），降低M2型巨噬细胞比例（P<0.01），并抑制M2相关基因Arg-1、Il-10表达（P<0.01）；功能实验结果表明附子多糖+仑伐替尼组巨噬细胞可抑制Hepa1-6细胞增殖（P<0.01）、促进凋亡（P<0.01），并降低迁移和侵袭能力（P<0.01）。在体内实验中，与仑伐替尼单药组相比，附子多糖+仑伐替尼组瘤体体积显著减小（P<0.05），脾脏指数显著升高（P<0.05），且未引起体质量下降，瘤内M1型巨噬细胞比例及M1/M2比值显著升高（P<0.01）。综上，附子多糖联合仑伐替尼可通过促进肿瘤相关巨噬细胞M1极化增强抗肝细胞癌效应。

关键词：附子多糖仑伐替尼巨噬细胞肝细胞癌

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

健脾消癌方诱导人结肠癌HCT116细胞焦亡的作用机制研究

健脾消癌方诱导人结肠癌HCT116细胞焦亡的作用机制研究

引用

作者：卢林竹湖南中医药大学

学位级别：硕士

目的:研究健脾消癌方含药血清对人结肠癌HCT116细胞焦亡的诱导作用,并探讨可能的作用机制。方法:1.10%、15%、20%空白鼠血清及10%、15%、20%含药鼠血清处理HCT116细胞,进行细胞毒性实验(CCK-8)观察健脾消癌方含药血清对HCT116细胞的抑... 详细信息

目的:研究健脾消癌方含药血清对人结肠癌HCT116细胞焦亡的诱导作用,并探讨可能的作用机制。方法:1.10%、15%、20%空白鼠血清及10%、15%、20%含药鼠血清处理HCT116细胞,进行细胞毒性实验(CCK-8)观察健脾消癌方含药血清对HCT116细胞的抑制作用;2.透射电镜下观察细胞焦亡的形态变化;3.乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测细胞上清LDH含量;4.酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清中白介素1β(IL-1β)、白介素18(IL-18)释放量;5.蛋白免疫印迹法(Western blot)检测GSDMD、GSDM E、Caspase-3、Caspase-3剪切体、GSDME-N蛋白表达量。结果:1.健脾消癌方含药血清能够抑制HCT116细胞体外增殖;2.与空白鼠血清组及正常血清组比较,在透射电镜下可观察到含药血清组出现明显的细胞焦亡现象;3.与空白鼠血清组及正常血清组比较,含药血清干预HCT116细胞后细胞上清中的LDH均有不同程度的上升(P<0.05);4.与空白鼠血清组及正常血清组比较,含药血清干预HCT116细胞后细胞上清中的IL-1β、IL-18均有不同程度的上升(P<0.05);5.10%、15%、20%含药血清组的GSDME蛋白表达下调(P<0.05),其中20%浓度较为明显;10%、20%含药血清组的GSDMD蛋白表达下调(P<0.05);10%、15%、20%含药血清组的Caspase-3全长的蛋白表达下调(P<0.05);20%含药血清组检测到了Caspase-3的剪切体的表达(Cleaved CASP-3)(P<0.05);并且在15%、20%浓度组检测到了被剪切了的GSDME的N端蛋白片段(P<0.05)。结论:健脾消癌方含药血清可诱导结肠癌HCT116细胞发生焦亡,其机制可能与GSDMD、GSDME蛋白的剪切有关,并主要以Caspase-3/GSDME通路为主。

关键词：健脾消癌方结肠癌细胞焦亡 GSDMD GSDME Caspase-3

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

鼠妇miRNA-2863调控Bcl-2/Bax/Caspase-3信号通路抑制肝癌细胞增殖、迁移和侵袭

引用

中草药 2024年第24期55卷 8445-8456页

作者：郭倩倩王若宇卢林竹谭年花易纯田雪飞湖南中医药大学中西医结合学院湖南中医药大学方证转化湖南省重点实验室湖南省中医药防治肿瘤机理重点实验室湖南长沙410208 湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410007 湖南中医药大学医学院湖南长沙410208

目的探讨鼠妇Armadillidium vulgare miRNA-2863(avu-miR-2863)对肝癌HepG2细胞和MHCC97H细胞增殖、迁移、侵袭的影响及相关机制。方法基于small RNA测序筛选鼠妇的miRNA,将HepG2细胞和MHCC97H细胞分为对照组和avu-miR-2863组,采用CCK-8法、划痕实验和Transwell侵袭实验检测肝癌细胞增殖、迁移和侵袭能力;3D肿瘤球模拟体内肿瘤微环境研究肿瘤细胞的增殖;Western blotting法检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、细胞性骨髓细胞瘤原癌基因(cellular myelocytomatosis oncogene,C-Myc)、E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-Ca)、N-Ca、波形蛋白(vimentin,Vim)和基质金属蛋白酶14(matrix metalloproteinase 14,MMP14)的表达;利用生信分析预测avu-miR-2863的靶基因,京都基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析和基因本体论(gene ontology,GO)功能富集分析探讨avu-miR-2863的作用机制,Western blotting法检测活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cleaved cysteine-aspartic protease-3,cleaved Caspase-3)、B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)和Bcl-2关联X蛋白单克隆抗体(monoclonal antibody to Bcl-2 associated X protein,Bax)蛋白的表达;流式细胞术检测细胞凋亡情况;Mito-Tracker Red、Hoechst染色和2,7二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)分别进行线粒体荧光和细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)检测;qRT-PCR检测avu-miR-2863在小鼠血液中的表达情况。结果通过高通量测序技术从鼠妇中挖掘并筛选鉴定出avu-miR-2863;与对照组比较,avu-miR-2863可抑制HepG2和MHCC97H细胞的增殖、迁移和侵袭(P<0.01),抑制3D肿瘤球体积的增大(P<0.01);可显著降低Cyclin D1、C-Myc、N-ca、Vim、MMP14蛋白的表达(P<0.05、0.01)并显著升高E-ca蛋白的表达(P<0.01)。生信分析预测avu-miR-2863可能通过调控Bcl-2家族蛋白介导的凋亡通路发挥抗肝癌的作用;与对照组比较,avu-miR-2863可显著升高cleaved Caspase-3、Bax蛋白的表达(P<0.05、0.01)并降低Bcl-2蛋白的表达(P<0.01);进一步的实验结果显示,与对照组比较,转染avu-miR-2863后,细胞凋亡率增加(P<0.01),线粒体荧光强度减弱(P<0.01),细胞ROS升高(P<0.05、0.01);qRT-PCR检测显示,avu-miR-2863可通过胃肠道吸收进入小鼠血液(P<0.01)。结论avu-miR-2863可能通过调控Bcl-2/Bax/Caspase-3信号通路抑制肝癌细胞HepG2和MHCC97H的增殖、迁移和侵袭,从而发挥抗肝癌的作用。

关键词：鼠妇 microRNA 肝癌增殖迁移凋亡

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

蒋益兰基于“肝体阴而用阳”论治巨块型肝癌经验

引用

中医药导报 2022年第2期28卷 180-183页

作者：卢林竹唐迎港杨洁李颖英陈旭亮张晓维易天霞王其美蒋益兰湖南中医药大学湖南长沙410208 湖南省中医药研究院附属医院湖南长沙410006

总结蒋益兰教授基于“肝体阴而用阳”论治巨块型肝癌的经验。蒋益兰认为巨块型肝癌的病理过程主要表现为“以肝体不足为本,肝用失常为标”,论治巨块型肝癌应以固本为主,治标为辅,补肝脾肾以治本,行气活血攻毒利水以治标。附1则典型验案。

关键词：巨块型肝癌体阴而用阳中医药治疗蒋益兰名医经验

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

健脾消癌方对人结肠癌HCT116细胞焦亡的影响

引用

时珍国医国药 2022年第11期33卷 2597-2600页

作者：卢林竹王容容王其美蒋益兰柏正平田雪飞罗吉湖南中医药大学湖南长沙410208 湖南省中医药研究院附属医院湖南长沙410006

目的观察健脾消癌方含药血清对人结肠癌HCT116细胞焦亡的影响,探讨其可能作用机制。方法 10%、15%、20%健脾消癌方含药血清处理HCT116细胞;细胞毒性实验(CCK-8)检测健脾消癌方含药血清对HCT116细胞的抑制作用;乳酸脱氢酶(LDH)释放实验... 详细信息

目的观察健脾消癌方含药血清对人结肠癌HCT116细胞焦亡的影响,探讨其可能作用机制。方法 10%、15%、20%健脾消癌方含药血清处理HCT116细胞;细胞毒性实验(CCK-8)检测健脾消癌方含药血清对HCT116细胞的抑制作用;乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测细胞上清LDH含量;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清中白介素1β(IL-1β)、白介素18(IL-18)释放量;荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白免疫印迹法(Western blot)检测GSDMD、GSDME基因和蛋白表达。结果健脾消癌方含药血清能够抑制HCT116细胞体外增殖(P<0.05);与空白鼠血清组比较,健脾消癌方含药血清干预HCT116细胞后细胞上清中的LDH、IL-1β、IL-18均有不同程度的上升(P<0.05);10%、15%、20%含药血清组的GSDME、GSDMD mRNA表达上调(P<0.05);10%、15%、20%含药血清组的GSDME蛋白表达下调(P<0.05),其中20%浓度较为明显,10%、20%含药血清组的GSDMD蛋白表达下调(P<0.01)。结论健脾消癌方可诱导结肠癌HCT116细胞发生焦亡,其机制可能与GSDMD、GSDME蛋白的剪切有关。

关键词：健脾消癌方结直肠癌细胞焦亡 Caspase GSDMD GSDME

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

蒋益兰教授基于“轻复气机”思想治疗恶性肿瘤

引用

湖南中医药大学学报 2022年第4期42卷 671-675页

作者：陈旭亮卢林竹唐迎港杨洁李颖英蒋益兰湖南中医药大学研究生院湖南长沙410208 湖南省中医药研究院附属医院肿瘤科湖南长沙410006

国家级名中医蒋益兰认为恶性肿瘤病机演变、发展过程以气化失常为主要矛盾,治疗上应强调审察气机,提倡精简用药,选用清平柔和之品,注意剂量、配伍,用药顺应四时,使气机轻复,辨证准确则收效亦佳。并举恶性肿瘤医案2则,以资佐证。

关键词：气机理论恶性肿瘤甲状腺癌肝癌蒋益兰医案

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

基于Python语言构建名中医医案数据挖掘平台

引用

世界科学技术-中医药现代化 2021年第9期23卷 3188-3194页

作者：卢林竹王智浩蒋益兰何兰曹如柔蒋盛昶湖南中医药大学研究生院长沙410208 湖南省中医药研究院附属医院长沙410006

Python语言简洁易学、灵活开放、开源免费,在中医药数据挖掘中有着不可替代的优势。目前国内外尚未有基于Python构建名中医医案数据挖掘平台的报道,本文运用Python语言开发医案数据挖掘应用平台,以蒋益兰教授医案为例阐述Python语言在... 详细信息

Python语言简洁易学、灵活开放、开源免费,在中医药数据挖掘中有着不可替代的优势。目前国内外尚未有基于Python构建名中医医案数据挖掘平台的报道,本文运用Python语言开发医案数据挖掘应用平台,以蒋益兰教授医案为例阐述Python语言在名中医医案数据收集与清洗、药物剂量整理以及数据分析方面的应用优势,以期为名中医经验传承作出贡献。

关键词： Python 数据挖掘平台名中医数据可视化

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

健脾消癌方的HPLC-Q-TOF/mF指纹图谱分析及多指标含量测定

引用

中南药学 2022年第7期20卷 1533-1539页

作者：王容容柏正平杨静王其美陈林卢林竹蒋益兰湖南省中医药研究院附属医院长沙410006 湖南省中医药研究院中药研究所长沙410031 湖南中医药大学长沙410028

目的建立健脾消癌方的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱和多组分含量测定方法,采用飞行时间质谱对其主要化学成分进行结构鉴定。方法制备10批健脾消癌方冻干粉,采用指纹图谱相似分析软件,对10批次样品指纹图谱的共有峰进行处理,评价不同批次... 详细信息

目的建立健脾消癌方的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱和多组分含量测定方法,采用飞行时间质谱对其主要化学成分进行结构鉴定。方法制备10批健脾消癌方冻干粉,采用指纹图谱相似分析软件,对10批次样品指纹图谱的共有峰进行处理,评价不同批次样品间的质量差异;并采用高效液相色谱法串联飞行时间质谱对其主要化学成分进行结构鉴定,筛选出34种功效成分;最后对芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、野黄芩苷、新橙皮苷、甘草酸铵6种指标性成分进行定量分析。结果健脾消癌方的HPLC指纹图谱有10个共有峰。10批健脾消癌方的HPLC指纹图谱与对照指纹图谱的相似度均≥0.900,说明指纹图谱重复性好,制备工艺较为稳定。定量分析结果表明10批健脾消癌方中芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、野黄芩苷、新橙皮苷、甘草酸铵的质量分数范围分别为1.80~2.55、12.90~17.86、3.49~5.28、1.26~1.82、6.93~9.47、1.05~1.51 mg·g^(-1)。结论建立的健脾消癌方指纹图谱和含量测定方法分离度好、准确度高,可为该经验方制剂的研发及质量控制提供参考。

关键词：健脾消癌方指纹图谱高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱质量控制研究

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

健脾消癌方的HPLC-Q-TOF/MS 指纹图谱分析及多指标含量测定

引用

中南药学 2022年第7期20卷 1533-1539页

作者：王容容柏正平杨静王其美陈林卢林竹蒋益兰湖南省中医药研究院附属医院湖南省中医药研究院中药研究所湖南中医药大学

目的建立健脾消癌方的高效液相色谱（HPLC）指纹图谱和多组分含量测定方法，采用飞行时间质谱对其主要化学成分进行结构鉴定。方法制备10批健脾消癌方冻干粉，采用指纹图谱相似分析软件，对10批次样品指纹图谱的共有峰进行处理，评价... 详细信息

目的建立健脾消癌方的高效液相色谱（HPLC）指纹图谱和多组分含量测定方法，采用飞行时间质谱对其主要化学成分进行结构鉴定。方法制备10批健脾消癌方冻干粉，采用指纹图谱相似分析软件，对10批次样品指纹图谱的共有峰进行处理，评价不同批次样品间的质量差异；并采用高效液相色谱法串联飞行时间质谱对其主要化学成分进行结构鉴定，筛选出34种功效成分；最后对芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、野黄芩苷、新橙皮苷、甘草酸铵6种指标性成分进行定量分析。结果健脾消癌方的HPLC指纹图谱有10个共有峰。10批健脾消癌方的HPLC指纹图谱与对照指纹图谱的相似度均≥0.900，说明指纹图谱重复性好，制备工艺较为稳定。定量分析结果表明10批健脾消癌方中芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、野黄芩苷、新橙皮苷、甘草酸铵的质量分数范围分别为1.80～2.55、12.90～17.86、3.49～5.28、1.26～1.82、6.93～9.47、1.05～1.51 mg·g-1。结论建立的健脾消癌方指纹图谱和含量测定方法分离度好、准确度高，可为该经验方制剂的研发及质量控制提供参考。

关键词：健脾消癌方指纹图谱高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱质量控制研究

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：