检索结果-内蒙古大学图书馆

中华微生物学和免疫学杂志 2025年第2期45卷 149-155页

作者：耿彦生赵晨燕河北大学公共卫生学院保定071000 中国食品药品检定研究院艾滋病性病病毒疫苗室北京102629

戊型肝炎病毒(HEV)的基因组含有3个开放编码框(ORF1~3),其中ORF2编码的ORF2蛋白构成病毒衣壳。一直认为ORF2蛋白是HEV病毒体的结构蛋白,只构成病毒衣壳。最近发现,HEV复制过程中,ORF2除编码产生病毒衣壳蛋白外,还产生大量糖基化蛋白,以... 详细信息

戊型肝炎病毒(HEV)的基因组含有3个开放编码框(ORF1~3),其中ORF2编码的ORF2蛋白构成病毒衣壳。一直认为ORF2蛋白是HEV病毒体的结构蛋白,只构成病毒衣壳。最近发现,HEV复制过程中,ORF2除编码产生病毒衣壳蛋白外,还产生大量糖基化蛋白,以可溶性蛋白质的形式分泌到宿主细胞外,称为ORF2分泌型蛋白(ORF2S)。ORF2S不参与感染性病毒粒子的组装,但在HEV感染和致病过程中可能发挥重要作用。本文对有关HEV ORF2S的研究进展进行综述。

关键词：戊型肝炎病毒衣壳蛋白非结构蛋白 ORF2分泌型蛋白糖基化ORF2蛋白

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产前超声诊断胎儿左心发育不良综合征伴左心室增大1例报告

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复旦学报(医学版) 2025年第1期52卷 143-146页

作者：朱晨赵凡桂严英榴雷彩霞俞婷赵晨燕林如任芸芸复旦大学附属妇产科医院超声科上海200011 复旦大学附属妇产科医院产前诊断中心上海200011 复旦大学附属妇产科医院病理科上海200011 上海集爱遗传与不育诊疗中心上海200011

孕妇30岁,孕2产0。本次单胎妊娠,22周行孕中期超声畸形筛查提示为胎儿主动脉瓣闭锁,主动脉狭窄伴反流,二尖瓣闭锁,左心室明显增大,考虑左心发育不良综合征(hypoplastic left heart syndrome,HLHS)。引产后胎儿基因检测结果为NOTCH1基因... 详细信息

孕妇30岁,孕2产0。本次单胎妊娠,22周行孕中期超声畸形筛查提示为胎儿主动脉瓣闭锁,主动脉狭窄伴反流,二尖瓣闭锁,左心室明显增大,考虑左心发育不良综合征(hypoplastic left heart syndrome,HLHS)。引产后胎儿基因检测结果为NOTCH1基因杂合变异,可致主动脉瓣病1型。胎儿尸解结果为主动脉瓣闭锁,二尖瓣增宽增厚,左心室增大伴心肌梗死。本文重点介绍该例HLHS伴左心室增大的超声表现及其血流动力学变化,以提高临床医师对HLHS疾病表型进行性改变的认识。

关键词：左心发育不良综合征(HLHS) 左心室增大主动脉瓣闭锁主动脉狭窄胎儿产前超声

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microRNA-192在胰腺癌中表达的意义和功能的初步研究

microRNA-192在胰腺癌中表达的意义和功能的初步研究

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作者：赵晨燕第二军医大学

学位级别：博士

研究背景：胰腺癌是发生在胰腺外分泌腺体的消化系统恶性肿瘤，占全身恶性肿瘤的1％～4％，其中90％以上为胰腺导管腺癌。胰腺癌1年生存率为8％，5年生存率小于5％，中位生存时间仅4-6个月，死亡率居恶性肿瘤第8 位。近年来胰腺癌发病...

研究背景：胰腺癌是发生在胰腺外分泌腺体的消化系统恶性肿瘤，占全身恶性肿瘤的1％～4％，其中90％以上为胰腺导管腺癌。胰腺癌1年生存率为8％，5年生存率小于5％，中位生存时间仅4-6个月，死亡率居恶性肿瘤第8 位。近年来胰腺癌发病率呈上升趋势，如能找到一种存在于体液中并能够监测胰腺癌生物学进程的诊断标志物，将为胰腺癌的诊断和治疗提供新的方向。 　　 MicroRNA(miRNA)自被发现以来，近几年迅速成为生命科学研究领域的热点。 　　目前在Sanger miRBase 数据库中注册的已发现的人类miRNA 共有1048种，预测可能调节人类30％以上基因的表达。miRNA与肿瘤的发生发展密切相关，可能同时具有癌基因与抑癌基因的双重作用。从现有的研究可以证明外周血中miRNA 具备作为肿瘤诊断标志物的多种特点：①在正常人外周血中稳定存在：研究发现正常人外周血中的miRNA表达稳定，无显著的个体差异，也没有明显的性别差异。②体外各种环境下稳定：实验证实血清或血浆中抽提的miRNA在反复冻融、过酸、过碱、甚至煮沸条件下仍具有完整性。③miRNA表达水平与恶性肿瘤的病理过程密切相关。④有研究推测血清中miRNA 来自肿瘤细胞并具有一定功能。鉴于此，血清中miRNA的异常表达可作为肿瘤细胞存在的直接证据，并具有作为潜在生物学标志物的可能。 　　 miRNA的生物学功能研究涉及多种肿瘤。miRNA在胰腺癌的功能研究主要涉及肿瘤细胞的增殖、凋亡、转移和耐药等方面，研究显示miRNA 主要是通过对靶基因转录后水平的调控，从而影响肿瘤的生物学行为。对microRNA-192(miR-192)的表达和功能的研究集中在近几年，在肾脏纤维化中的研究结果比较一致，显示其具有促进纤维化进程的功能。尽管对miR-192在肿瘤中表达情况的研究已有报道，但研究结果不尽相同，尚未见在胰腺癌中的研究报道。 　　目的：确定胰腺癌中异常表达的miRNAs 并进行验证，进一步探讨miR-192作为胰腺癌血清学标志物的可能性，并初步研究miR-192对胰腺癌细胞生物学行为的影响。 　　方法：①miRNA 芯片分析胰腺癌组织和正常胰腺癌组织中miRNA的差异表达，并对异常表达的miRNA 进行生物信息学分析；②实时荧光定量PCR 检测胰腺癌组织、血清、细胞及其上清中miR-192表达情况；③核酸原位杂交检测组织中miR-192的表达情况和定位；④构建miR-192 慢病毒载体，并感染胰腺癌细胞株；⑤细胞生长曲线测定、平板克隆形成实验、Annexin V 凋亡检测、细胞划痕实验观察感染miR-192后胰腺癌细胞生物学行为改变；⑥裸鼠胰腺原位成瘤，观察感染miR-192后胰腺癌细胞成瘤情况的改变；⑦检测miR-192靶基因蛋白水平的表达。 　　结果：①通过miRNA 芯片检测在9例胰腺癌组织和3例正常胰腺组织中miRNAs的表达情况。以胰腺癌组均值与正常胰腺癌组均值的比值不小于1.15倍为标准，筛选出在两组中差异表达的miRNAs 共16个。其中在胰腺癌组织中高表达8个，低表达8个。通过对miR-192和miR-192*进行的生物信息学和其靶基因gene ontology分析，预测miR-192和miR-192*的靶基因中，绝大部分参与蛋白质之间结合。②通过对31对胰腺癌和癌旁胰腺组织实时荧光定量PCR 检测，结果显示miR-192和miR-192*在胰腺癌和癌旁胰腺组织的表达均存在差异，miR-192和miR-192*在胰腺癌中表达均高于其在癌旁胰腺组织中的表达，分别为癌旁组织的28.44和5.09倍。③在对5例人胰腺癌和5例荷人胰腺癌SCID 鼠的检测中发现，miR-192 仅表达于肿瘤组织中，而且定位于肿瘤细胞的细胞质，肿瘤的间质未见表达。同时在人胰腺癌旁的胰腺组织和SCID 鼠的胰腺中均未见表达。④在分析不同胰腺癌细胞株间miRNA表达差异时发现，miR-192在Aspc-1中表达最高，分别是sw1990、Bxpc-3、Miacapa-2、PANC-1、capan-1的9.78、174.05、1026.37、466.80、7.21倍。miR-192在Aspc-1培养液上清中的表达量也为最高，分别是sw1990、Bxpc-3、Miacapa-2、PANC、capan-1上清的1.98、21.41、175.26、6.59、1.20倍。经统计分析发现miR-192在细胞内和在其培养上清中的表达具有高度一致性。⑤miR-192在胰腺癌患者血清中表达量与对照组健康人血清中和十二指肠癌患者血清中的表达量均有差异, 但在对照组健康人血清中与十二指肠癌患者血清中

关键词：

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上海大众营销竞争战略

上海大众营销竞争战略

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作者：赵晨燕上海交通大学

学位级别：硕士

该文首先简要介绍了上海大多和国内轿车市场的概况,然后较全面地分析了上海大多所处的内外部环境和自身的优劣势,结合公司实际情况,制定了扩张型总体战略和以差别化战略为主、兼顾总成本的竞争战略,并着重分析了选择此战略的理由以及具... 详细信息

该文首先简要介绍了上海大多和国内轿车市场的概况,然后较全面地分析了上海大多所处的内外部环境和自身的优劣势,结合公司实际情况,制定了扩张型总体战略和以差别化战略为主、兼顾总成本的竞争战略,并着重分析了选择此战略的理由以及具体实施措施.文章不详细分析了市场容量的发展趋势和与进口轿车的竞争比较,提出上海大多在入世后积极应对进口车入侵的措施.最后,文章重点探析了上海大多的市场营销战略,针对细分市场的市场营销组合策略.通过营销组合战略的运用,使上海大众产品更具竞争力.上海大众的案例经过竞争战略理论和市场营销理论深入分析后,得出一些有益的启示.希望该文不仅对中国的轿车生产企业有所启示,而且对那些有信心在入世后与国外企业竞争的企业集团有所借鉴.

关键词：上海大众轿车营销策略竞争战略

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论私分国有资产罪

论私分国有资产罪

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作者：赵晨燕华东政法大学

学位级别：硕士

改革开放以来,我国的综合实力不断提高,国有资产总量也在不断攀升,但经济的增长点势必是犯罪的热点,私分国有资产的行为也是屡见不鲜。针对这一情况,为切实贯彻罪刑法定原则,切实加强对国有资产的保护力度,我国在修订1997年刑法的时候... 详细信息

改革开放以来,我国的综合实力不断提高,国有资产总量也在不断攀升,但经济的增长点势必是犯罪的热点,私分国有资产的行为也是屡见不鲜。针对这一情况,为切实贯彻罪刑法定原则,切实加强对国有资产的保护力度,我国在修订1997年刑法的时候增加了私分国有资产罪这一罪名。该罪名设立十余年来,对遏制私分国有资产的行为起到了积极的作用。作为一名奋战在侦查前沿的检察院反贪部门干警,笔者欣喜的看到很多私分国有资产的罪犯被绳之以法,但欣喜之余我也感到忧虑和困惑,笔者从事反贪侦查工作多年,曾查办过多起私分国有资产案件,承办的有关单位私分国有资产的举报线索更是不胜枚举,但在初查、侦查过程中,笔者仍是经常会发生法律适用困惑,经常会因主体身份、国资认定等问题让一些本可以成案的线索止步于初查阶段,虽然我们的技侦手段越来越先进,但对此却无能为力,这让笔者感到非常遗憾,这也促使笔者毅然选取私分国有资产罪作为论文课题,希望通过法理研究来理清思路,找准问题症结所在。为此,笔者阅读了大量的资料,通过中国知网查阅了70余篇有关私分国有资产的文章,翻阅了十余本刑法专著中有关私分国有资产罪的阐述,这些理论知识的积累加上笔者的实务经验让我深切地体会到,在私分国有资产案件查处过程中遇到的问题,究其原因,是因为私分国有资产罪存在立法缺陷这一先天问题造成的。笔者结合司法实践中触及的疑难问题对私分国有资产罪的概念及构成要件进行了深层次的实务研究,从中发现私分国有资产罪中有关主体规定、犯罪对象界定、同类罪名设立、刑罚适用等问题有待立法完善,并根据侦查需要提出犯罪主体应认定为自然人、明确国资鉴定机构、增设单位侵占国有资产罪等操作性较强的立法完善建议,充分体现了理论研究结合业务实践的特点,这是本文的亮点所在。本文共分五个部分,第一部分为私分国有资产罪的立法沿革以及该罪的犯罪成因。指出私分国有资产罪是97刑法的新罪名,是顺应保护国有资产的社会主义经济需要而设立的,具有重要的现实意义,为下文展开论述奠定基础;第二部分是针对私分国有资产罪的概念及犯罪构成进行阐述,一是认为该罪的客体是复合客体,是国家对国有资产的所有权和国家廉政建设制度,同时对该罪的犯罪对象(国有资产)的范围和认定进行了全面分析。二是对该罪的客观方面进行探讨。三是对该罪的主体方面进行研究,认为依照法律规定,私分国有资产罪是纯正的单位犯罪。四是对本罪的主观方面进行研究。认为主观方面仅表现为直接故意,体现了单位的整体意志性;第三部分结合本罪在学术界的理论争议和司法实务界适用中所遇到的典型问题,对在司法实践中经常涉及到的罪与非罪、此罪与彼罪的区别进行了探讨;第四部分结合司法实践适用该罪名遇到的难点,提出该罪主体规定、犯罪对象界定、同类罪名设立、刑罚适用等问题有待立法完善,并提出初步构想。

关键词：私分国有资产罪构成要件司法认定立法完善

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戊型肝炎病毒（HEV）实时荧光RT-PCR检测方法的建立及其初步应用

戊型肝炎病毒（HEV）实时荧光RT-PCR检测方法的建立及其初步应用

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作者：赵晨燕中国药品生物制品检定所

学位级别：硕士

戊型肝炎病毒（HEV）是通过粪-口途径传播的无包膜、正链RNA病毒。它能引起大规模爆发性流行，也可引起急性散发性肝炎。目前戊肝的诊断主要是通过ELISA（酶联免疫法）检测抗HEV抗体，但因为HEV感染窗口期或患者自身免疫体制以及EIA试... 详细信息

戊型肝炎病毒（HEV）是通过粪-口途径传播的无包膜、正链RNA病毒。它能引起大规模爆发性流行，也可引起急性散发性肝炎。目前戊肝的诊断主要是通过ELISA（酶联免疫法）检测抗HEV抗体，但因为HEV感染窗口期或患者自身免疫体制以及EIA试剂本身的原因等都会给戊肝的诊断带来难度；HEV RNA检测是判断HEV病毒是否存在的标准之一，但常规RT-PCR方法操作繁琐、容易污染、敏感性低，鉴于此本课题建立了一种快速、敏感、特异性强的实时荧光RT-PCR方法来检测戊型肝炎病毒。本研究在建立实时荧光RT-PCR方法时，首先根据ORF3保守区域（5487—5613nt）设计了26条引物和4条探针，通过对引物和探针的筛选，确定了最佳的引物（401U／402R）和探针（301F）组合，并通过对引物、探针用量的优化确定40μl体系上下游引物用量分别为4pmol和8pmol，探针用量为8pmol；其次，通过对反应体系和条件进行优化，确定了Taq酶用量为4U、AMV逆转录酶的用量为2U、逆转录温度为50℃、PCR扩增采用三步法等；最后，通过对HEV RNA抽提试剂进行比较，选择使用QIAamp Viral RNA Mini Kit抽提HEV RNA。用建立的荧光PCR方法对9个不同浓度的假病毒稀释物进行了检测，结果显示，本套试剂的检测范围为5.6×10～3～5.6×1010copies，最低可检测5.6×10～3copies的假病毒分子，标准曲线的线性相关系数也较好，其为0.9968。用该方法对149份临床急性肝炎患者血清进行检测，结果有65例为HEV

关键词：戊型肝炎病毒实时荧光RT-PCR 套式RT-PCR

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食管胃交界腺癌发生情况及与远端胃癌的对比研究

食管胃交界腺癌发生情况及与远端胃癌的对比研究

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作者：赵晨燕河北医科大学

学位级别：硕士

近几十年来欧美国家上消化道恶性肿瘤类型和发生部位发生了明显变化:一是组织学类型上,食管鳞状细胞癌的发生率下降而食管腺癌的发生率上升;二是从肿瘤发生部位上,胃远端（胃窦部）胃癌发生率明显下降,而食管与胃交界处腺癌的发生率出... 详细信息

近几十年来欧美国家上消化道恶性肿瘤类型和发生部位发生了明显变化:一是组织学类型上,食管鳞状细胞癌的发生率下降而食管腺癌的发生率上升;二是从肿瘤发生部位上,胃远端（胃窦部）胃癌发生率明显下降,而食管与胃交界处腺癌的发生率出现惊人的上升趋势,有关食管胃交界腺癌的问题已经引起了欧美学者较广泛的重视。从上世纪80年代开始国外医学界对食管胃交界腺癌病因、分类、治疗等方面开展了大量的研究。我国居民Barrett食管发生率较西方国家明显为少,因而食管腺癌发生率非常低,而发生于胃和食管交界处的腺癌一般笼统地称作贲门癌。国内肿瘤界对食管胃交界腺癌的研究甚少,在肿瘤登记中没有对贲门癌单独分类。同时国内肿瘤界对贲门癌的研究也远没有对食管癌和胃癌的研究充分。对食管胃交界腺癌的一些基本问题,如国人胃癌发生部位的变化、食管胃交界腺癌的发生情况、临床病理特征等尚缺乏系统的研究。有鉴于此,本研究第一部分拟通过对河北省胃癌高发区（赞皇县）和食管癌高发区（磁县）十四年胃癌的发病部位、年龄及性别构成等情况进行回顾性调查分析,揭示我国食管癌胃癌高发区居民胃癌发生规律。在转录水平对基因表达的调节一直是研究肿瘤发生发展过程的热点。研究表明,KLF4、SP1和Cyclin D1均是与细胞增殖和恶性转化密切相关的重要因素。 KLF4（Krüppel like factor 4）是一种锌指蛋白转录因子,与富含GC的序列结合。是KLF家族成员之一,在胃肠道和上皮组织表达丰富。通过激活或者抑制目的基因的转录来调控基因表达,其改变导致胃和结直肠上皮的异常增殖和分化。诸多研究显示KLF4可能具有抑癌作用。在胃癌、结直肠癌、膀胱癌、肺癌和T细胞淋巴瘤中均可发现KLF4表达减少。SP1（transcription factor Sp1）也是一种锌指蛋白转录因子,通过与富含GC的启动子结合调节某些关键基因的转录。SP1自发现以来一直被认为是基本转录因子,最近发现其参与多种生物学功能的调节。有研究显示SP1的过表达与胃癌的血管生成和不良预后密切相关。细胞周期素D1（Cyclin D1）是一种原癌基因, Cyclin D1表达失控时将引起细胞增殖周期失调,细胞失控性生长形成肿瘤。最近有文献研究KLF4、SP1和Cyclin D1在胃癌中的表达及意义。但有关KLF4、SP1和Cyclin D1在食管胃交界腺癌中以及三者在食管胃交界腺癌和远端胃癌中的对比研究尚未见报道。在上述第一部分工作的基础上,为探讨国人食管胃交界腺癌的生物学特性,分析食管胃交界腺癌和远端胃癌在肿瘤发病机制方面的可能差异,本研究采用免疫组织化学染色方法,对比研究KLF4、SP1和Cyclin D1在食管胃交界腺癌和远端胃癌中的表达情况,探讨了其在不同部位肿瘤中的病理临床意义。本研究共分两部分第一部分:河北省食管癌和胃癌高发区居民胃癌发生部位变化的分析目的:探讨河北省食管癌和胃癌高发区居民近十四年来胃癌发生部位的变化,为胃癌的合理防治提供依据。方法:回顾分析河北食管癌高发区磁县和胃癌高发区赞皇县1993-2006年间全部首诊胃癌病例,共4334例。在对病人居住地区、性别、年龄及一般临床病理资料进行统计分析的基础上,对肿瘤发生部位按贲门、胃体、胃窦进行分组,对比分析不同地区不同年份胃癌发生部位的构成情况及变化规律。结果:1993-2006年间河北省食管癌高发区磁县和胃癌高发区赞皇县全部首诊胃癌病例中发生于贲门部位者占68.0%,明显高于胃体和胃窦。贲门癌在胃癌中所占比例随时间改变呈增多趋势。贲门癌的平均发病年龄高于胃体癌和胃窦癌（61.60±9.07 vs 59.87±10.20,P<0.01; 61.60±9.07 vs 60.18±10.56,P<0.01）。食管癌高发区磁县贲门癌占所有胃癌病例的71.2%,比胃癌高发区赞皇县贲门癌占所有胃癌病例的51.2%更高。磁县居民贲门癌逐渐增多的同时,胃体癌发生比例呈逐年减少的趋势;赞皇县胃癌构成比的变化主要体现在胃窦癌的比例随时间改变呈减少趋势。第二部分:食管胃交界腺癌和远端胃癌KLF4、SP1和Cyclin D1表达的对比研究目的:为探讨国人食管胃交界腺癌的生物学特性,分析食管胃交界腺癌和远端胃癌在肿瘤发病机制方面的可能差异,应用免疫组化方法对比研究食管胃交界腺癌和远端胃癌病例中KLF4、SP1和Cyclin D1的表达情况。方法: 1选取2004-2006年河北医科大学第二医院病理科和磁县县医院病理科存档蜡块,所有病理资料完整。对全部病例的所有蜡块重新切片,行HE染色,由两位高年资病理医师进行复查。按照肿瘤发生部位分为Siewert II型食管胃交

关键词： KLF4 SP1 Cyclin D1 构成比胃癌食管胃交界腺癌远端胃癌免疫组织化学染色

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戊型肝炎病毒抗原检测研究进展

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中华微生物学和免疫学杂志 2020年第4期40卷 320-324页

作者：徐颖耿彦生赵晨燕河北大学公共卫生学院保定071000 中国食品药品检定研究院艾滋病性病病毒疫苗研究室北京102629

目前戊型肝炎病毒(HEV)感染的实验室诊断方法是检测HEV抗体(HEV IgM/IgG)或HEV核酸(HEV RNA)。近年来,基于对HEV病毒体蛋白结构及免疫性的研究,发展了HEV抗原(HEV Ag)检测方法。本文就HEV Ag检测方法的建立、HEV Ag检测的意义及在HEV感... 详细信息

目前戊型肝炎病毒(HEV)感染的实验室诊断方法是检测HEV抗体(HEV IgM/IgG)或HEV核酸(HEV RNA)。近年来,基于对HEV病毒体蛋白结构及免疫性的研究,发展了HEV抗原(HEV Ag)检测方法。本文就HEV Ag检测方法的建立、HEV Ag检测的意义及在HEV感染诊断中的应用进行综述。

关键词：戊型肝炎戊型肝炎病毒抗原检测酶联免疫吸附试验

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体液中microRNA的研究进展

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中华病理学杂志 2010年第6期39卷 424-427页

作者：赵晨燕朱明华第二军医大学附属长海医院病理科上海200433

Lee等[1]和Wightman等[2]1993年发现在线虫体内存在一种RNA（lin-4）,其不编码蛋白但可以生成一对小的RNA转录本,每一个转录本能在翻译水平通过抑制一种核蛋白lin-14的表达而调节了线虫的幼虫发育进程.

关键词： microRNA 体液编码蛋白翻译水平转录本虫体内核蛋白

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DNA疫苗的不同构象在体内外表达差异研究

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药物分析杂志 2013年第8期33卷 1275-1279页

作者：赵晨燕黄维金刘强王佑春中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050 吉林大学生命科学学院长春130012

目的:研究DNA疫苗构象对体内和体外表达的影响。方法:分别构建绿色荧光蛋白表达质粒(pcDNA3.1-EGFP)和萤火虫荧光素酶表达质粒(pDRVISV1.0-Fluc),对其存在的3种拓扑形式(包括超螺旋、线性、闭环切刻等)和反复冻融状态对表达效率的影响... 详细信息

目的:研究DNA疫苗构象对体内和体外表达的影响。方法:分别构建绿色荧光蛋白表达质粒(pcDNA3.1-EGFP)和萤火虫荧光素酶表达质粒(pDRVISV1.0-Fluc),对其存在的3种拓扑形式(包括超螺旋、线性、闭环切刻等)和反复冻融状态对表达效率的影响进行分析,前者用脂质体介导转染293FT细胞,用流式细胞仪检测EGFP的表达情况;后者通过接种BALB/c小鼠,用活体成像技术监测荧光素酶的表达情况。结果:对pcDNA3.1-EGFP质粒,流式细胞仪检测其转染293FT细胞48 h后显示,4种处理组的质粒表达EGFP的效率和荧光强度有所差异,依次为新鲜制备质粒(89.76%,2682.68)>反复冻融处理质粒(76.35%,2313.48)>闭环切刻质粒(68.45%,1245.95)>线性质粒(38.28%,929.5)。对pDRVISV1.0-Fluc质粒,采用小鼠活体成像技术持续观察接种后28 d的体内荧光素酶的荧光信号强度情况,结果显示:接种后0.2 d观察到荧光,之后强度持续开始增强,至第5 d达到平台期,维持至18 d。质粒各处理组的荧光强度组间有显著差异,依次为新鲜制备质粒(108.6)>反复冻融处理质粒(108.4)>线性质粒(108.3)>切刻质粒(108.0)。2种质粒不同构象的体内体外表达中,均是新鲜制备质粒的表达量最高,因其中超螺旋为其主要构象。结论:质粒中超螺旋比例高时其转染效率及表达量最高,提高超螺旋比例是DNA疫苗质量控制的关键。

关键词：拓扑形式构象超螺旋荧光素酶活体成像技术疫苗质量控制

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