检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：邢礼军刘春阁张爱武喻少帆王卫红刘新香闫明明杨海涛芦丽红 100097 北京市海淀区曙光花园中路9号北京市农林科学院玉米研究中心

本发明涉及一种高效获取蛹虫草有效接种体的菌种分离方法，其特征在于，采用热激法处理子实体。与传统分离平板相比，本发明分离平板气生菌丝减少，菌丝致密，生长快。暗培养结束后，光照培养转色快，颜色深。菌丝易发生扭结，在平板上... 详细信息

标准号: CN103548559B

本发明涉及一种高效获取蛹虫草有效接种体的菌种分离方法，其特征在于，采用热激法处理子实体。与传统分离平板相比，本发明分离平板气生菌丝减少，菌丝致密，生长快。暗培养结束后，光照培养转色快，颜色深。菌丝易发生扭结，在平板上易形成原基。栽培试验表明，与传统分离菌种相比，本发明分离菌种在栽培瓶中子实体原基出现早，子实体形态与亲本一致，生长整齐，变异程度低。本发明操作简单易行，分离效果好，平板菌落有效接种物部分易识别。分离菌种稳定性强，变异少。传代次数比传统方法增加。

关键词：菌种菌丝子实体原基致密变异程度传代次数分离效果光照培养菌种分离气生菌丝稳定性强栽培试验扭结生长暗培养接种体接种物热激法易识别蛹虫草栽培瓶菌落亲本一种转色中子整齐有效获取操作涉及一致表明减少结束处理

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一种增强hUCMSCs增殖能力的方法及其应用

一种增强hUCMSCs增殖能力的方法及其应用

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作者：张燕徐辰刘厚奇王越严冰浩张浩顾道兰 200433 上海市杨浦区翔殷路800号

本发明涉及生物技术领域，具体是snoRA7A的新用途，以及一种在体外培养条件下增强hUCMSCs增殖能力的方法。本发明成功构建snoRA7A的表达质粒，将该质粒转染hUCMSCs，获得snoRA7A高表达的hUCMSCs，较hUCMSCs具有更高的增殖能力，且多能... 详细信息

标准号: CN105463019A

本发明涉及生物技术领域，具体是snoRA7A的新用途，以及一种在体外培养条件下增强hUCMSCs增殖能力的方法。本发明成功构建snoRA7A的表达质粒，将该质粒转染hUCMSCs，获得snoRA7A高表达的hUCMSCs，较hUCMSCs具有更高的增殖能力，且多能性更好；可在体外培养条件下，获取大量功能状态较好的细胞，解决了hUCMSCs在体外培养过程中随着传代次数增加，增殖能力等生物活性降低的问题；本发明为hUCMSCs体外培养传代过程中细胞增殖能力的维持以及增强提供了新思路，为hUCMSCs的临床应用提供了更广阔的前景。

关键词：增殖能力在体培养条件传代表达质粒传代次数功能状态临床应用培养过程生物活性体外培养细胞增殖质粒转染多能性高表达构建一种生物技术细胞增强获取维持前景涉及成功解决

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人脐带间充质干细胞向心肌样细胞分化的方法

人脐带间充质干细胞向心肌样细胞分化的方法

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作者：王泰华 250101 山东省济南市高新区颖秀路2766号科研生产楼5楼510房间

本发明的人脐带间充质干细胞向心肌样细胞分化的方法，通过人脐带华尔通氏胶来源的间充质干细胞，与人胚胎干细胞、骨髓间充质干细胞相比，人脐带间充质干细胞具有明显的优势：①成本较低，来源丰富，不涉及伦理问题，②与骨髓间充质相... 详细信息

标准号: CN105176920A

本发明的人脐带间充质干细胞向心肌样细胞分化的方法，通过人脐带华尔通氏胶来源的间充质干细胞，与人胚胎干细胞、骨髓间充质干细胞相比，人脐带间充质干细胞具有明显的优势：①成本较低，来源丰富，不涉及伦理问题，②与骨髓间充质相比，不会随着传代次数增加和机体年龄增长导致增殖能力和分化能力降低。这样用5-Aza诱导的人脐带间充质干细胞转化心肌样细胞，尚为不成熟阶段，仍具有增殖能力，而且能继续增殖形成足够数量的心肌细胞，对于将来在临床应用其进行细胞移植治疗提供了可能性。

关键词：人脐带间充质干细胞心肌样细胞增殖能力骨髓间充质干细胞间充质干细胞人胚胎干细胞细胞移植治疗成熟阶段传代次数分化能力临床应用年龄增长心肌细胞间充质人脐带增殖骨髓诱导分化转化导致涉及丰富明显继续进行

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种子液传代次数对纳豆芽孢杆菌固体发酵的影响

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中国奶牛 2008年第3期 10-12页

作者：陈强王加启邓露芳姜艳美卜登攀魏宏阳周凌云刘光磊王金枝刘卉中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物营养学国家重点实验室北京100094 新疆农业大学动物科学学院

通过采用连续传代的纳豆芽孢杆菌种子液接种豆粕进行固体发酵,测定发酵产物中的细菌总数及活菌数,发现种子液传代次数对纳豆芽孢杆菌固体发酵的产量有很大的影响,同时菌种在多次连续传代后、会产生菌种退化现象。本试验研究表明,Na和N1... 详细信息

通过采用连续传代的纳豆芽孢杆菌种子液接种豆粕进行固体发酵,测定发酵产物中的细菌总数及活菌数,发现种子液传代次数对纳豆芽孢杆菌固体发酵的产量有很大的影响,同时菌种在多次连续传代后、会产生菌种退化现象。本试验研究表明,Na和N1型纳豆芽孢杆菌菌株自斜面培养基接种后进行4次传代,是比较合适的。

关键词：纳豆芽孢杆菌细菌总数传代次数退化固体发酵

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体细胞共培养对猪附植前胚胎发育的影响

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江苏农业学报 2011年第4期27卷 906-908页

作者：于建宁王公金徐晓波周小龙范必勤江苏省农业科学院畜牧研究所江苏南京210014

目前，动物胚胎体外生产技术已经相对成熟，包括卵母细胞的体外成熟（IVM）、体外受精（IVF）及早期胚胎的体外培养（IVC）等。因此，可以有效地利用屠宰场废弃的卵巢，大量、廉价地进行实验室生产胚胎，为早期胚胎发育机理、胚胎干细... 详细信息

目前，动物胚胎体外生产技术已经相对成熟，包括卵母细胞的体外成熟（IVM）、体外受精（IVF）及早期胚胎的体外培养（IVC）等。因此，可以有效地利用屠宰场废弃的卵巢，大量、廉价地进行实验室生产胚胎，为早期胚胎发育机理、胚胎干细胞等的研究提供丰富的试验材料。然而，猪的早期胚胎体外培养仍存在囊胚发育率低、囊胚细胞数少、囊胚质量不高等问题，如何提高猪体外胚胎的囊胚发育率和囊胚质量是解决猪胚胎体外生产的关键因素。

关键词：共培养猪附植前胚胎体细胞类型传代次数

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培养时间和传代次数对山羊输卵管上皮细胞周期和凋亡的影响

培养时间和传代次数对山羊输卵管上皮细胞周期和凋亡的影响

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中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十四届学术研讨会

作者：谭秀文刘晓牧宋恩亮万发春游伟吴乃科山东省农业科学院畜牧兽医研究所山东省畜禽疾病防治与繁育重点实验室济南 250100

本试验首先建立山羊输卵管上皮细胞(oviductal epnhelialcells，OECs)的体外培养体系，然后分别将半数贴壁、刚贴满(贴壁1d)、贴满3d和贴满5d，以及原代、Ⅲ代和Ⅴ代细胞分别进行细胞周期和凋亡检测，探讨体外培养时间和传代次数对细胞... 详细信息

本试验首先建立山羊输卵管上皮细胞(oviductal epnhelialcells，OECs)的体外培养体系，然后分别将半数贴壁、刚贴满(贴壁1d)、贴满3d和贴满5d，以及原代、Ⅲ代和Ⅴ代细胞分别进行细胞周期和凋亡检测，探讨体外培养时间和传代次数对细胞生长的影响。结果表明，细胞贴满3d和传至Ⅲ代以内时，细胞凋亡比率较低，处于静止期(G0/G1)细胞明显降低，极性线粒体受损明显降低;培养时间延长和传代次数增加后，凋亡比率显著升高，处于增殖期(S，G2/M)的比率显著降低，极性线粒体受损明显升高。说明采用OECs培养胚胎时，细胞应控制在Ⅲ代以内，且贴满时间不超过3d。

关键词：培养时间细胞周期体外培养细胞凋亡山羊输卵管上皮细胞传代次数

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不同传代次数的钩端螺旋体表达谱的差异

不同传代次数的钩端螺旋体表达谱的差异

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2008年中国微生物学会学术年会

作者：秦金红张志明何平郭晓奎上海交通大学医学院病原生物学教研室

为了能够在全基因组水平上研究体外培养过程中引起钩端螺旋体发生变化的分子机制,本试验利用本实验室自行构建的钩端螺旋体的cDNA芯片研究了钩端螺旋体在体外培养第一代与第五代、第十代及第二十代表达谱的差异。从芯片的结果来看,中赖... 详细信息

为了能够在全基因组水平上研究体外培养过程中引起钩端螺旋体发生变化的分子机制,本试验利用本实验室自行构建的钩端螺旋体的cDNA芯片研究了钩端螺旋体在体外培养第一代与第五代、第十代及第二十代表达谱的差异。从芯片的结果来看,中赖第一代和第五代及第一代和第十代相比差异表达基因分别为57个和80个,而第一代和第二十代相比差异表达的基因为270个。这一结果证实了钩端螺旋体在体外传代少于10次时,钩端螺旋体未发生

关键词：钩端螺旋体传代次数体外传代

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细菌内毒素脂多糖对人蜕膜基质细胞单核细胞趋化蛋白-1表达影响的研究

细菌内毒素脂多糖对人蜕膜基质细胞单核细胞趋化蛋白-1表达影响的...

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作者：徐小飞山东大学

学位级别：硕士

从免疫学角度讲,妊娠相当于成功的半同种异体移植,妊娠建立与维持取决于胚胎植入及发育过程中母体蜕膜局部乃至全身免疫系统的状态。母体与胎儿之间维持着精妙的免疫平衡,一方面耐受胎儿使其得以植入并在宫内正常发育,另一方面适度活化... 详细信息

从免疫学角度讲,妊娠相当于成功的半同种异体移植,妊娠建立与维持取决于胚胎植入及发育过程中母体蜕膜局部乃至全身免疫系统的状态。母体与胎儿之间维持着精妙的免疫平衡,一方面耐受胎儿使其得以植入并在宫内正常发育,另一方面适度活化抵抗病原体侵袭,以免感染后蜕膜局部免疫系统发生变化,打破母胎间的免疫平衡,使母体排斥胎儿,进而引起流产、胎儿畸形、胎儿宫内生长受限、子痫前期子痫等病理妊娠的发生。母胎之间的免疫平衡有赖于多种免疫细胞和细胞因子的协调作用,研究发现单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)具有抗感染及介导耐受的双向作用,妊娠早期蜕膜基质细胞高表达MCP-1及其受体CCR2,多种炎性因子可刺激蜕膜基质细胞(DSC)分泌MCP-1,提示其在感染过程中蜕膜局部免疫平衡的维持方面具有重要作用,因此推测感染可影响其在DSC的表达。目前尚无DSC培养的公认方法,为建立一种科学的DSC体外培证明本实验结果的可靠性,本实验同时进行了DSC体外培养的方法学探讨。目的：观察体外模拟早孕微环境(雌激素、孕激素)条件下革兰氏阴性细菌内毒素脂多糖(LPS)对人蜕膜基质细胞MCP-1表达的影响,同时探讨蜕膜基质细胞体外培养时传代纯化法对该表达的影响。方法：选取正常妊娠妇女人工流产蜕膜组织(6-8周),按常规方法分离蜕膜基质细胞,在含有或不含有雌激素、孕激素培养基中传代培养,普通光镜下分别观察第一代(P1)与第三代细胞(P3)的形态；采用免疫细胞化学法(细胞角蛋白7和波形蛋白)分别鉴定两代细胞的纯度,采用流式细胞技术检测两代细胞表面Toll样受体-4(TLR4)、CCR2分子的表达水平；当细胞铺板率为80%时,将第一代细胞和第三代细胞分别分为空白对照组、LPS (1μg/mL)刺激组。另外,细胞分别在含与不含雌激素+孕激素的培养基中培养传代三次后各分为空白对照组、LPS刺激组。37℃、5%CO2培养24h后收集上清,Trizol裂解后按常规方法提取总RNA,用RT-PCR与实时定量PCR技术检测MCP-1转录水平的表达,ELISA法检测上清中MCP-1的表达。结果： 1、DSC体外培养的方法学探讨： ①与传代一次的细胞相比,传代三次的细胞形态变规则,细胞突起减少,胞浆内颗粒明显减少,透明度增加,极性减弱或者消失。 ②免疫细胞化学染色显示,传代三次细胞较传代一次细胞DSC纯度增加(P<0.05)。 ③流式细胞仪检测结果显示,与传代一次细胞相比,传代三次细胞表面TLR4、CCR2分子表达下调(P<0.05)。 2、LPS对DSC MCP-1表达水平的影响： ①RT-PCR、ELISA显示,,传代一次细胞LPS刺激前即高表达MCP-1,刺激后变化无统计学差异(P□0.05)；与传代一次细胞空白对照组相比,传代三次细胞空白对照组MCP-1表达水平显著降低(P<0.05),但经LPS刺激后,其LPS刺激组较对照组显著上调(P<0.05)；传代三次细胞LPS刺激组MCP-1表达水平与传代一次细胞LPS刺激组无明显差异(P□0.05)。 ②RT-PCR、实时定量PCR、ELISA显示,与空白对照组相比,传代三次细胞LPS刺激组、雌激素+孕激素处理组、雌激素+孕激素+LPS处理组在转录水平与分泌水平上MCP-1的表达显著上调(P<0.05)；与雌激素+孕激素处理组和单纯LPS刺激组相比,雌激素+孕激素+LPS处理组MCP-1表达水平显著上调(P<0.05)。结论： 1、传代可纯化分离培养的DSC,但也使其胞膜表面分子TLR4、CCR2表达水平下降。 2、LPS通过与DSC表面TLR4作用,直接或间接地在转录水平与分泌水平上调DSC的MCP-1表达,影响蜕膜局部免疫状态。 3、雌、孕激素联合作用可上调早孕期DSC MCP-1的表达,提示MCP-1可能对于正常妊娠的发生和维持具有不可忽视的作用。 4、雌、孕激素联合作用还可增强LPS对MCP-1的上调作用,说明MCP-1在妊娠早期蜕膜抗感染方面有重要意义。创新点： 1、取材新：目前国内外研究妊娠蜕膜微环境的实验室及相关文献报道较少。 2、本实验首次发现LPS可上调蜕膜基质细胞MCP-1表达水平。 3、本实验首次对传代培养DSC的方法进行了较完善的研究,发现传代可下调DSC表面TLR4表达水平,但不影响本实验过程中TLR4的活性。

关键词：蜕膜基质细胞传代次数性激素 LPS MCP-1

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影响制备小鼠胎儿成纤维细胞饲养层的因素

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云南畜牧兽医 2010年第2期 6-8页

作者：崔雯熊浩王杏龙扬州大学动物科学与技术学院江苏扬州225009

为了建立活力稳定高效的小鼠胎儿成纤维细胞饲养层，实验以13．5—14．5d的IcR小鼠胚胎为实验材料，以MTr法测定细胞活力，探讨了用丝裂霉素c处理MEF后，含有不同浓度胎牛血清的培养基对MEF活力的影响，以及不同传代次数的MEF对其活力... 详细信息

为了建立活力稳定高效的小鼠胎儿成纤维细胞饲养层，实验以13．5—14．5d的IcR小鼠胚胎为实验材料，以MTr法测定细胞活力，探讨了用丝裂霉素c处理MEF后，含有不同浓度胎牛血清的培养基对MEF活力的影响，以及不同传代次数的MEF对其活力的影响。结果表明：用含10％的胎牛血清培养液培养丝裂霉素c处理后的MEF，其活力比含2％、5％、20％的FBS培养液稳定。对不同传代次数的MEF进行处理后，第1、3代的MEF活力比第5、7代的MEF活力稳定。结论：用丝裂霉素c处理第1到第3代的MEF，以10％的胎牛血清培养液培养能得到活力稳定高效的小鼠胎儿成纤维细胞饲养层。

关键词：胎儿成纤维细胞饲养层胎牛血清传代次数小鼠

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白喉棒状杆菌异染颗粒重现的实验探讨

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赣南医学院学报 2010年第1期30卷 123-123页

作者：张瑞其徐仙赟李小花谢琼珺滕敏昌孙湘婷江西省赣南医学院显微实验室江西赣州341000

喉棒状杆菌(***)是白喉的病原菌。其菌体细长微弯,一端或两端膨大呈棒状。革兰染色阳性,用美兰短时间染色,菌体着色不均匀,出现有染色较深的颗粒。用Neisser或Albert等染色,这些颗粒与菌体着染颜色不同,称为异染颗粒。在微生物实验教学... 详细信息

喉棒状杆菌(***)是白喉的病原菌。其菌体细长微弯,一端或两端膨大呈棒状。革兰染色阳性,用美兰短时间染色,菌体着色不均匀,出现有染色较深的颗粒。用Neisser或Albert等染色,这些颗粒与菌体着染颜色不同,称为异染颗粒。在微生物实验教学中,白喉棒状杆菌异染颗粒是白喉棒状杆菌在形态上的主要特征,是实验教学的重要内容,由于该菌异染颗粒随传代次数增加,异染颗粒会逐渐消失或不明显。导致实验教学中常看不到异染颗粒而影响实验教学的效果。[第一段]

关键词：微生物实验教学白喉棒状杆菌异染颗粒革兰染色传代次数病原菌菌体

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