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上海医学 2004年第4期27卷 253-256页

作者：胡可斌戴艳刘志红黎磊石上海市第一人民医院肾内科 200080 南京军区总医院肾病研究所

目的　观察体外培养的内皮细胞表达和分泌血管内皮细胞生长因子 (VEGF)的情况。方法　以脐静脉内皮细胞系ECV 30 4为研究对象 ,采用RT PCR、流式细胞仪、ELISA法分别观察佛波脂 (PMA)对ECV 30 4合成与分泌VEGF的作用。结果　 10 0ng/ml... 详细信息

目的　观察体外培养的内皮细胞表达和分泌血管内皮细胞生长因子 (VEGF)的情况。方法　以脐静脉内皮细胞系ECV 30 4为研究对象 ,采用RT PCR、流式细胞仪、ELISA法分别观察佛波脂 (PMA)对ECV 30 4合成与分泌VEGF的作用。结果　 10 0ng/mlPMA能明显上调VEGFmRNA的表达、VEGF蛋白的合成及分泌。其对VEGFmRNA表达及细胞内VEGF合成的作用在 12h最为明显 ;而分泌至上清液中的VEGF量则在 18h达到高峰。PMA的上述作用能够被放线菌素D所抑制。结论　PMA能够诱导内皮细胞ECV 30 4表达、合成及分泌VEGF ,该作用呈剂量和时间依赖性。其对VEGFmRNA的作用涉及核苷酸的从头合成途径。

关键词：内皮细胞表达血管内皮细胞生长因子 RT-PCR 流式细胞仪 ELISA法

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急性髓性白血病细胞对内皮细胞表达细胞间黏附分子-1的影响

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中华内科杂志 2005年第10期44卷 776-777页

作者：张伟华乔振华张秀莲范星火李殿青山西医科大学第一医院血液科太原030001 山西医科大学第二医院血液科

急性髓细胞性白血病（AML）患者可因白细胞过高或白细胞淤滞导致多脏器衰竭，与白血病细胞黏附有关。研究显示白血病细胞表面黏附分子表达异常。目前认为细胞间黏附分子（ICAM-1）在正常白细胞外渗过程中起主要作用，IL-1β，TNFα和IF... 详细信息

急性髓细胞性白血病（AML）患者可因白细胞过高或白细胞淤滞导致多脏器衰竭，与白血病细胞黏附有关。研究显示白血病细胞表面黏附分子表达异常。目前认为细胞间黏附分子（ICAM-1）在正常白细胞外渗过程中起主要作用，IL-1β，TNFα和IFNγ等细胞因子直接介导内皮细胞ICAM-1的合成。而在AML中，影响内皮细胞ICAM-1表达因素的体外实验研究较少。因此，我们观察AML白血病细胞培养上清对内皮细胞表达ICAM-1的作用，旨在研究AML白血病细胞对内皮细胞的影响。

关键词：急性髓性白血病细胞细胞间黏附分子-1 内皮细胞表达 ICAM-1表达急性髓细胞性白血病细胞表面黏附分子白细胞淤滞体外实验研究多脏器衰竭 IL-1β

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同型半胱氨酸促进内皮细胞表达巨噬细胞炎性蛋白1α

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中华病理学杂志 2005年第7期34卷 425-426页

作者：王淑秀邹飞雁邓仲端瞿智玲倪娟阮秋蓉华中科技大学同济医学院病理学系中南大学肿瘤研究所

单核细胞迁入动脉内皮下间隙是动脉粥样硬化(AS)发生的早期事件[1].巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α)对单核细胞有趋化作用.高同型半胱氨酸血症是AS的一个独立危险因子[2].我们观察同型半胱氨酸(HCY)是否诱导培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC... 详细信息

单核细胞迁入动脉内皮下间隙是动脉粥样硬化(AS)发生的早期事件[1].巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α)对单核细胞有趋化作用.高同型半胱氨酸血症是AS的一个独立危险因子[2].我们观察同型半胱氨酸(HCY)是否诱导培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)表达MIP-1α,探讨HCY在AS形成中的作用。

关键词：巨噬细胞炎性蛋白1α 内皮细胞表达动脉粥样硬化(AS) 高同型半胱氨酸血症人脐静脉内皮细胞 MIP-1α 独立危险因子单核细胞趋化作用诱导培养动脉内 HCY

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单核细胞黏附对内皮细胞表达组织因子的影响及其相关因素

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广东医学 2005年第4期26卷 463-465页

作者：张园邱健广州军区广州总医院心血管内科广州510010

目的　研究人外周血单核细胞黏附对人脐静脉内皮细胞表达组织因子的影响及其相关机制。方法　采用淋巴细胞分离液和Percoll分离法分离人外周血中的单核细胞与酶消化法培养的脐静脉内皮细胞共同培养,在不同的时间(1,2 ,6 ,12和18h)采用... 详细信息

目的　研究人外周血单核细胞黏附对人脐静脉内皮细胞表达组织因子的影响及其相关机制。方法　采用淋巴细胞分离液和Percoll分离法分离人外周血中的单核细胞与酶消化法培养的脐静脉内皮细胞共同培养,在不同的时间(1,2 ,6 ,12和18h)采用一期血浆复钙时间法测定TF促凝活性,用RT -PCR法检测TFmRNA表达,免疫组织化学法检测细胞间黏附分子(ICAM - 1)和TF蛋白的表达。结果　单核细胞黏附脐静脉内皮细胞,2h后内皮细胞上组织因子促凝活性和mRNA表达开始升高,6h后促凝活性达到高峰,呈时间依赖性(P <0 0 5 ) ;I CAM - 1在单核细胞黏附脐静脉内皮细胞后的1h ,表达即显著升高(P <0 0 1) ;组织因子在6h后表达增多(P <0 0 1) ,差异有显著性,两者呈正相关(r=0 72 3,P <0 0 5 )。结论　单核细胞黏附脐静脉内皮细胞是TF促凝活性和表达升高的原因之一,其黏附作用与ICAM - 1的表达相关。

关键词：单核细胞黏附内皮细胞表达组织因子影响因素

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姜黄素干预TNF-α诱导人脐静脉内皮细胞表达FKN的实验研究

姜黄素干预TNF-α诱导人脐静脉内皮细胞表达FKN的实验研究

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作者：朱佃香浙江中医药大学

学位级别：硕士

目的：研究肿瘤坏死因子-α（TNF-α）对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）表达不规则趋化因子（FKN）的影响，以及姜黄素对其干预作用，以期进一步了解FKN在动脉粥样硬化（AS）形成中的炎症机制、信号转导机制和研究姜黄素在保护血管内皮细胞... 详细信息

目的：研究肿瘤坏死因子-α（TNF-α）对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）表达不规则趋化因子（FKN）的影响，以及姜黄素对其干预作用，以期进一步了解FKN在动脉粥样硬化（AS）形成中的炎症机制、信号转导机制和研究姜黄素在保护血管内皮细胞机制中的抗炎作用。\n 方法：\n 1.体外培养HUVEC。\n ***法检测姜黄素的半数抑制浓度(IC50值)。通过MTT法，从0μmol/L、0.1μmol/L、0.5μmol/L、1μmol/L、2μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L八个浓度中筛选出HUVEC对姜黄素的最大耐受药物浓度。\n 3.实时荧光定量PCR检测不同TNF-α药物浓度和作用时间刺激HUVEC引起FKN的基因表达水平。分别检测空白对照、TNF-α0.1ng/ml、TNF-α0.5ng/ml、TNF-α1.0ng/ml对HUVEC的FKNmRNA上调程度，实时荧光定量PCR检测培养16小时（h）后上述FKNmRNA表达水平，依据结果选择TNF-α0.5ng/ml进行后续研究。用TNF-α0.5ng/ml的药物浓度作用于HUVEC，分别比较药物作用2h、4h、8h、12h、16h、24h后以及空白对照组相互之间FKNmRNA的不同表达程度。\n ***-Blot和实时荧光定量PCR检测不同的姜黄素药物浓度干预FKN基因和蛋白的表达效果。比较空白对照组、TNF-α0.5ng/ml+姜黄素0μmol/L组、TNF-α0.5ng/ml+姜黄素2μmol/L组、TNF-α0.5ng/ml+姜黄素5μmol/L组、TNF-α0.5ng/ml+姜黄素10μmol/L组共5组刺激HUVEC，作用16h后使用荧光定量PCR法对HUVEC的FKNmRNA的不同表达程度进行检测；比较空白对照组、TNF-α0.5ng/ml+姜黄素0μmol/L组、TNF-α0.5ng/ml+姜黄素2μmol/L组、TNF-α0.5ng/ml+姜黄素5μmol/L组共4组刺激HUVEC，作用16h后，使用Western-blot法比较各组间FKN的蛋白表达水平。\n 结果：\n 1.实验过程中HUVEC生长状态良好，呈现典型的铺路石状排列，生物学性状稳定。\n ***法筛选出药物姜黄素对HUVEC的抑制率约为5%时的药物浓度为2～5μmol/L，是最佳药物浓度。\n ***-α0.5ng/ml和1.0ng/ml均比Blank组能明显地提高FKN的mRNA表达量的变化倍数；TNF-α0.5ng/ml比TNF-α0.1ng/ml组能明显地提高FKN的mRNA表达量的变化倍数。不同时间段（2h、4h、8h、12h、16h、24h）TNF-α0.5ng/ml刺激HUVEC，与Blank组比较，16h时FKN的mRNA表达量变化倍数显著增加。\n 4. TNF-α0.5ng/ml+姜黄素0μmol/L组作用细胞16h后， FKNmRNA表达量变化倍数比Blank组明显增多；与TNF-α0.5ng/ml+姜黄素0μmol/L组比较，TNF-α0.5ng m/L+姜黄素2μmol/L组、TNF-α0.5ng/mL+姜黄素5μmol/L组、TNF-α0.5ng/mL+姜黄素10μmol/L组刺激HUVEC后其FKNmRNA表达量变化倍数均明显下降；TNF-α0.5ng/mL+姜黄素2μmol/L组、TNF-α0.5ng/mL+姜黄素5μmol/L组、TNF-α0.5ng/mL+姜黄素10μmol/L组，刺激HUVEC后其FKNmRNA表达量变化倍数无显著性差异。Blank组、0.5ng/mL TNF-α+0μmol/L姜黄素组、0.5ng/mLTNF-α+2μmol/L姜黄素组、0.5ng/mL TNF-α+5μmol/L姜黄素组刺激HUVEC16h后，Western-Blot检测FKN蛋白表达的变化：0.5ng/mL TNF-α+0μmol/L姜黄素组显影最深，而Blank组、0.5ng/mL TNF-α+2μmol/L姜黄素组、0.5ng/mL TNF-α+5μmol/L姜黄素组均显色较淡。\n 结论：0.5ng/ml的TNF-α作用于HUVEC16小时能显著提高HUVEC的FKNmRNA的表达，2～5μmol/L的姜黄素药物浓度是下调TNF-α诱导HUVEC表达的FKNmRNA及蛋白的最有效的药物浓度，16小时是姜黄素的最佳作用时间。本研究说明一定浓度的姜黄素可以通过抗炎机制有效地保护血管内皮细胞，在减缓动脉粥样硬化的发生发展过程中发挥重要的作用。

关键词：动脉粥样硬化姜黄素干预脐静脉内皮细胞表达趋化因子血管保护

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失血性休克血清对内皮细胞表达t-PA和PAI-1mRNA的影响

失血性休克血清对内皮细胞表达t-PA和PAI-1mRNA的影响

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第二届中青年医师急危重症论坛

作者：潘景业陈洁马继红王晓蓉张艳杰王卫王明山温州医学院附属第一医院ICU 325000

目的：探讨失血性休克大鼠血清对大鼠主动脉内皮细胞(SV40-transformed aortic rat endothelialcells，SVAREC)表达组织型纤溶酶原激活剂(tissueplasminogen activator，t-PA)和纤溶酶原激活剂抑制物-1(plasminogen activator inhibitor type 1，PAI-1)的影响。方法：建立失血性休克大鼠模型，取假休克组、休克组血清，并将胎牛血清作为正常对照组，无菌处理后加入到培养基，分别与内皮细胞分别培养6h、12h和18h。用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测t-PA和PAI-1mRNA的表达。结果：与正常对照组相比，休克组血清刺激SVAREC 6h、18h后t-PA mRNA均升高。与正常对照组及假休克组相比，休克组血清刺激SVAREC 12h后，PAI-1 mRNA升高(P<0.05);培养18h后，与正常对照组比，PAI-1 mRNA升高(P<0.01)。结论：失血性休克血清上调内皮细胞t-PA和PAI-1 mRNA表达，提示休克血清对内皮细胞有损伤作用，休克中应注意保护内皮细胞。

关键词：失血性休克内皮细胞表达 t-PA PAI-1mRNA 聚合酶链反应

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脂质过氧化诱导培养的内皮细胞表达单核细胞趋化蛋白1

脂质过氧化诱导培养的内皮细胞表达单核细胞趋化蛋白1

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第五届全国脂蛋白和动脉粥样硬化学术研讨会

作者：夏春林邓仲端医科大学病理教研室

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失血性休克血清对内皮细胞表达t-PA和PAI-1 mRNA的影响

失血性休克血清对内皮细胞表达t-PA和PAI-1 mRNA的影响

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2007年浙江省医学会危重病学术年会

作者：陈洁潘景业王晓蓉王卫王明山温州医学院附属第一医院ICU(325000)

目的：探讨失血性休克大鼠血清对大鼠主动脉内皮细胞(SV40一transformed aortic ratendothelial cells，SVAREC)表达组织型纤溶酶原激活剂(tissue plasminogen activator,t-PA)和纤溶酶原激活剂抑制物-1(plasminogen activator inhibitor typel，PAI—1)的影响。方法：建立失血性休克大鼠模型，取假休克组、休克组血清，并将胎牛血清作为正常对照组，无菌处理后加入到培养基，分别与内皮细胞分别培养6小时、12小时和18小时，用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测t-PA和PAl-ImRNA的表达。结果：与正常对照组相比，休克组血清刺激SVAREC6小时、18小时后t-PAmRNA均升高．与正常对照组及假休克组相比，休克组血清刺激SVARECl2小时后，PAl-l mRNA升高(P<0.05);培养18小时后，与正常对照组比，PAl-1 mRNA升高(P<0.01)．结论：失血性休克血清上调内皮细胞t-PA和PAl-1 mRNA表达，提示休克血清对内皮细胞有损伤作用，休克中应注意保护内皮细胞。

关键词：失血性休克内皮细胞表达 t-PA PAI-1 纤溶酶原激活剂纤溶酶原激活剂抑制物 mRNA表达

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电磁场对移植异体血管内皮细胞表达血管内皮生长因子的影响

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中华实验外科杂志 2014年第4期31卷 712-712页

作者：林琛李宝林杨松林孟庆刚李卫曲志伟毕佳琦成勇哈尔滨医科大学附属第四临床医学院 150001 哈尔滨市第一医院 150001

本实验旨在观察微血管移植后血管内皮生长因子（VEGF）水平的变化，探讨电磁场对异体血管内皮细胞的影响，现报道如下。一、材料与方法1．材料：清洁级Wister大鼠，购于哈尔滨医科大学动物中心；多聚甲醛、VEGF检测试剂盒购自宁波瑞源... 详细信息

本实验旨在观察微血管移植后血管内皮生长因子（VEGF）水平的变化，探讨电磁场对异体血管内皮细胞的影响，现报道如下。一、材料与方法1．材料：清洁级Wister大鼠，购于哈尔滨医科大学动物中心；多聚甲醛、VEGF检测试剂盒购自宁波瑞源生物科技有限公司。可调式电磁场发生系统由哈尔滨工业大学研制（专利申请号：201110426247．6）。

关键词：血管内皮生长因子内皮细胞表达电磁场移植后异体血管哈尔滨医科大学血管内皮细胞 Wister

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外源性抗原诱导内皮细胞增殖及其MICA分子的表达

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中华泌尿外科杂志 2010年第3期31卷 211-212页

作者：王云炎侯建全何军袁晓妮邱桥成温端改苏州大学附属第一医院泌尿外科 215006 江苏省血液研究所

MHC—I类相关链A（MICA）位于人类第6号染色体，属于非经典HLA—I类基因家族。抗MICA抗体与肾移植排斥反应相关及影响移植肾长期存活的观点已得到学者的广泛认同。MICA分子在移植物血管内皮细胞表达，特别是在内皮细胞膜蛋白的表达，增... 详细信息

MHC—I类相关链A（MICA）位于人类第6号染色体，属于非经典HLA—I类基因家族。抗MICA抗体与肾移植排斥反应相关及影响移植肾长期存活的观点已得到学者的广泛认同。MICA分子在移植物血管内皮细胞表达，特别是在内皮细胞膜蛋白的表达，增加了MICA抗原在移植受者体内成为抗移植物靶目标的可能性。

关键词：内皮细胞增殖 MICA 抗原诱导分子外源性第6号染色体移植排斥反应内皮细胞表达

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