本发明涉及生物技术领域,特别涉及一种动物转基因标签的可视化检测方法。本发明设计、筛选出转基因猪标记基因(Neo)LAMP特异性引物,并优化LAMP反应体系中Mg2+、Betaine、dNTPs、Bst DNA polymerase的浓度以及外引物内引物浓度比,确定...
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标准号:
CN105087563B
本发明涉及生物技术领域,特别涉及一种动物转基因标签的可视化检测方法。本发明设计、筛选出转基因猪标记基因(Neo)LAMP特异性引物,并优化LAMP反应体系中Mg2+、Betaine、dNTPs、Bst DNA polymerase的浓度以及外引物内引物浓度比,确定了LAMP反应的最适反应条件。建立了可视化LAMP检测方法,可在65℃恒温条件下对不同浓度的转基因猪基因组进行检测,LAMP法检测的灵敏度为2pg/μl,而PCR法仅能检测至2ng/μl。LAMP法检测转基因猪样本准确性达98%。
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