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微生物学报 2025年

作者：刘郁匆杨立锋任耿佳桑琴嘉宋厚辉孙静江玲丽程昌勇陈绵绵浙江农林大学动物医学院浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室动物健康互联网检测技术浙江省工程研究中心浙江省动物医学与健康管理国际科技合作基地同一健康和食品安全“一带一路”国际联合实验室中澳动物健康大数据分析联合实验室宁波卫生职业技术学院

【目的】利用单核增生李斯特氏菌野生株、脂蛋白基因pplA缺失株和回补株探究PplA在单核增生李斯特氏菌感染功能中的作用。【方法】比较野生株、缺失株和回补株在细胞溶血能力、细胞黏附与侵袭、胞内增殖能力、胞间迁移能力、小鼠脏器定... 详细信息

【目的】利用单核增生李斯特氏菌野生株、脂蛋白基因pplA缺失株和回补株探究PplA在单核增生李斯特氏菌感染功能中的作用。【方法】比较野生株、缺失株和回补株在细胞溶血能力、细胞黏附与侵袭、胞内增殖能力、胞间迁移能力、小鼠脏器定殖能力、小鼠脏器内的细菌毒力因子转录水平和群体感应相关基因转录水平等方面的差异，从而解析PplA在单核增生李斯特氏菌感染宿主中的作用。【结果】缺失pplA基因后，单核增生李斯特氏菌的胞内增殖能力和胞间迁移能力无显著差异，但溶血能力，细胞黏附和侵袭能力、小鼠脏器定殖能力和小鼠脏器内的细菌毒力因子inlB、plcA、plcB、hly和prfA转录水平降低，此外，群体感应相关基因agrA、agrB、agrC和luxS的转录水平发生了变化。【结论】研究表明单核增生李斯特氏菌脂蛋白PplA参与细菌毒力调控过程，影响细菌的致病力。

关键词：单核增生李斯特氏菌脂蛋白PplA 细胞感染毒力调控

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平板计数法检测肉制品中单核增生李斯特氏菌的不确定度分析与评定

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现代食品 2021年第10期6卷 182-185页

作者：刘胤璇王剑飞杨蕊银何磊白秀珍红河州质量技术监督综合检测中心云南蒙自661199

建立平板计数法测定单核增生李斯特氏菌的不确定度评定方法,在具体检测中提高科学性和准确性。实验分析得出,检测过程中引入的不确定度分量来源分别为样品称量、稀释、加样、重复实验,利用统计学方法计算各不确定度分量、合成不确定度... 详细信息

建立平板计数法测定单核增生李斯特氏菌的不确定度评定方法,在具体检测中提高科学性和准确性。实验分析得出,检测过程中引入的不确定度分量来源分别为样品称量、稀释、加样、重复实验,利用统计学方法计算各不确定度分量、合成不确定度及拓展不确定度。在95%置信水平下,单增李斯特氏菌含量对数的扩展不确定度为0.115 0,重复试验对不确定度结果贡献较大。

关键词：平板计数法单核增生李斯特氏菌不确定度评定

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基于智能恒温扩增技术检测单核增生李斯特氏菌的引物组、试剂盒及方法

基于智能恒温扩增技术检测单核增生李斯特氏菌的引物组、试剂盒及...

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作者：叶蕾石磊闫鹤陈洵常彦磊 510632 广东省广州市天河区黄埔大道西601号

一种基于智能恒温扩增技术检测单核增生李斯特氏菌的引物组、试剂盒和方法。检测引物组包括TP引物、FP引物、BP引物、OP1引物和OP2引物；检测试剂盒包括引物液、反应液、Bst DNA聚合酶、错配结合蛋白、显色剂和对照。其检测方法是通过... 详细信息

标准号: CN109402272A

一种基于智能恒温扩增技术检测单核增生李斯特氏菌的引物组、试剂盒和方法。检测引物组包括TP引物、FP引物、BP引物、OP1引物和OP2引物；检测试剂盒包括引物液、反应液、Bst DNA聚合酶、错配结合蛋白、显色剂和对照。其检测方法是通过提取待检DNA，利用具有链置换活性的DNA聚合酶活性，采用四条特异性引物及一种错配结合蛋白，在60～65℃对样品DNA模板进行扩增，可检测到DNA的pg级，其鉴定方式是采用在反应体系中加入Green I并在ESE‑tube scanner仪器检测判断扩增与否，确定待检样品是否含有单核增生李斯特氏菌DNA。本发明具有快速高效、操作简便、高特异性、高灵敏度、鉴定简便、适合现场检测等优点，适于推广应用。

关键词：引物扩增单核增生李斯特氏菌结合蛋白错配链置换活性特异性引物待检样品高灵敏度技术检测检测试剂检测引物现场检测仪器检测智能恒温样品DNA 可检测试剂盒显色剂引物液引物组检测

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一种富集肉与肉制品中单核增生李斯特氏菌的方法

一种富集肉与肉制品中单核增生李斯特氏菌的方法

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作者：朱海华王法云王永周莉谭静平洋王慧王晓瑞李鹏冲张亚勋高海东 450002 河南省郑州市金水区文化路87号

一种富集肉与肉制品中单核增生李斯特氏菌的方法，首先对肉与肉制品样品进行均质，经低温静置预处理和低温高速离心相结合，去除样品中富含的脂肪和蛋白等大分子组分干扰物，采用微孔滤膜过滤法，将样品中的目标菌富集于微孔滤膜上，提... 详细信息

标准号: CN109679878A

一种富集肉与肉制品中单核增生李斯特氏菌的方法，首先对肉与肉制品样品进行均质，经低温静置预处理和低温高速离心相结合，去除样品中富含的脂肪和蛋白等大分子组分干扰物，采用微孔滤膜过滤法，将样品中的目标菌富集于微孔滤膜上，提高了肉与肉制品中单增李斯特菌的检出限，解决了肉与肉制品低水平的单增李斯特菌的检测问题。使用有利于单增李斯特菌生长和保护的洗脱液洗脱滤膜和滤膜孔径中的目标菌，利用单增李斯特菌免疫磁珠与菌悬液中单增李斯特菌的特异性结合，达到富集肉与肉制品中单增李斯特菌的目的，增加单增李斯特菌检出率。

关键词：李斯特菌肉制品富集目标菌单核增生李斯特氏菌微孔滤膜过滤法低温高速离心预处理特异性结合低温静置检测问题滤膜孔径免疫磁珠微孔滤膜低水平干扰物检出率检出限菌悬液洗脱液富含均质滤膜去除洗脱脂肪蛋白生长

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冷却肉中单核增生李斯特氏菌的抑菌研究

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中国食品学报 2014年第5期14卷 98-105页

作者：韩军于宏伟陈灿任远顾媛媛贾英民河北农业大学食品科技学院河北保定071001 河北科技大学生物科学与工程学院石家庄050018

紫外线对于单核增生李斯特氏菌悬液有较好的杀菌效果,照射5 min即可将全部菌体杀死。柠檬酸、乳酸抑菌效果好,其含量达到2 mL/L,可抑制李斯特氏菌的生长。有机酸钠盐的抑菌效果较差。丁香、肉桂、大蒜、生姜精油对于李斯特氏菌有较好的... 详细信息

紫外线对于单核增生李斯特氏菌悬液有较好的杀菌效果,照射5 min即可将全部菌体杀死。柠檬酸、乳酸抑菌效果好,其含量达到2 mL/L,可抑制李斯特氏菌的生长。有机酸钠盐的抑菌效果较差。丁香、肉桂、大蒜、生姜精油对于李斯特氏菌有较好的抑菌作用,这4种精油复配后存在协同抑菌作用。

关键词：冷鲜肉单核增生李斯特氏菌抑菌作用

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基于磁性纳米酶生物传感器快速检测单核增生李斯特菌的研究

基于磁性纳米酶生物传感器快速检测单核增生李斯特菌的研究

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作者：史东灵西南大学

学位级别：硕士

单核增生李斯特菌（Listeria monocytogenes）是一种人畜共患病的病原菌,广泛存在食物链中。它能引起人畜的李氏菌病,感染后主要表现为败血症、脑膜炎和单核细胞增多。检测技术是制约单增李斯特菌安全监管的重要瓶颈。为保障食品的安全... 详细信息

单核增生李斯特菌（Listeria monocytogenes）是一种人畜共患病的病原菌,广泛存在食物链中。它能引起人畜的李氏菌病,感染后主要表现为败血症、脑膜炎和单核细胞增多。检测技术是制约单增李斯特菌安全监管的重要瓶颈。为保障食品的安全,对单增李斯特菌快速检测的需求更加迫切。但是目前,传统的活菌培养鉴定检测周期长、特异性不高。普通分子生物学检测技术存在无法区别死活菌、灵敏度不高、仪器依赖等问题。基于金纳米颗粒的侧流层析传感器已用于致病菌的检测,但是该技术无法实现活菌精准检测,由于金纳米颗粒作为信号元件的局限性,检测灵敏度也需要进一步提升。因此针对单增李斯特菌开发高灵敏度、免仪器依赖、可视化、快速的活菌侧流层析检测技术,对保障人类健康与食品安全、实现食品安全高效监管都具有重要科学意义。我们选取单增李斯特菌作为研究对象,构建了两种简单、灵敏、快速的基于磁性纳米酶的侧流层析生物传感器的检测方法。 1、环介导等温扩增结合磁性纳米酶双重信号增强的单增李斯特菌活菌检测技术研究:建立了基于叠氮碘化丙啶核酸染料-环介导等温扩增反应（PMA-LAMP）和磁性纳米酶试纸条可视化和定量检测单增李斯特菌活菌和生物被膜。在PMA-LAMP反应中,使用荧光素（FITC）和生物素（BIO）修饰的LAMP引物检测单增李斯特菌内标基因（hlyA）。应用PMA处理结合LAMP区分单增李斯特菌的存活和死亡状态。优化后的四氧化三铁磁性纳米颗粒（Fe3O4 NPs）具有尺寸小、分散性好的特点。将Fe3O4 NPs与生物素抗体结合形成纳米酶探针。该探针与单增李斯特菌的PMA-LAMP产物结合后可被固定在纳米酶试纸条检测线上的抗FITC抗体捕获并在检测区域上形成检测信号。通过目视检测和利用Image J图像处理软件对试纸条条带上的结果判读和定量。该条带具有稳定性、特异性和可视化等特点,并可以定量检测单增李斯特菌,最低检出限为10 CFU/mL。此外,纳米酶试纸条还能定量检测单增李斯特菌在不锈钢和生菜表面形成的生物被膜,最低检测浓度分别为1.164×10～1 CFU/mL和1.021×10～1 CFU/mL。试纸条定性检测结果与传统培养法检测结果基本一致（p>0.05）,而且在速度和灵敏度展现更大的优势。此外,纳米酶条带在检测其他活的微生物的特定基因方面也有很大的潜力。 2、万古霉素-磁性纳米酶结合噬菌体尾丝蛋白（tail fiber protein,TFP）特异性检测单增李斯特菌的研究:本研究开发了一种基于万古霉素羧基化的磁性纳米酶颗粒（Van-BSA-SFe3O4 NPs）与噬菌体TFP联用的方法用于特异性和可视化检测单增李斯特菌。Van-BSA-SFe3O4 NPs作为探针用于捕获单增李斯特菌。牛血清蛋白（BSA）表面的氨基能与羧基化纳米酶颗粒通过化学键结合,且BSA表面含有许多的氨基基团,Van也通过羧基与BSA的氨基相连,使得BSA表面能够负载多个Van,有助于加快Van与单增李斯特菌表面的D-Ala-D-Ala分子的结合速度。为了克服万古霉素结合特异性差的问题,表达了噬菌体的TFP,将其用作单增李斯特菌特异性识别元件并固定于试纸条的检测线上。由于TFP的理想特异性,该方法能够排除其他菌的干扰。增敏原理是基于重氮氨基苯（DAB）/H2O2与SFe3O4 NPs之间反应所产生的特异性棕色非溶解性产物沉积于检测线之上,从而提升检测线信号强度和提高检测灵敏度。在最适条件下,本研究构建的Van-BSA-SFe3O4 NPs在PBS溶液中对单增李斯特菌的捕获效率为96.6%,在牛奶样品和生菜汁样品中对单增李斯特菌的捕获率为82.1%和77.7%。利用试纸条对结果进行可视化,可定量检测单增李斯特菌,最低检出限为10 CFU/mL。该方法特异性强、操作简便、免仪器依赖,为单增李斯特菌快速检测提供了新的思路。

关键词：单核增生李斯特氏菌磁性纳米酶 PMA-LAMP 噬菌体尾丝蛋白侧流层析试纸条

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同时检测四种致病菌的方法、引物组合物和试剂盒

同时检测四种致病菌的方法、引物组合物和试剂盒

引用

作者：山珊刘道峰童晓钰王双龙黄艳梅李芮 330000 江西省南昌市高新技术开发区紫阳大道99号

本发明涉及食品安全检测技术领域，具体涉及同时检测四种致病菌的方法、引物组合物和试剂盒。本发明设计了如SEQ ID No.1~8所示的引物，用于同时检测水产品中单核增生李斯特氏菌、沙门氏菌、副溶血性弧菌、金黄色葡萄球菌，简化了检测... 详细信息

标准号: CN117385072A

本发明涉及食品安全检测技术领域，具体涉及同时检测四种致病菌的方法、引物组合物和试剂盒。本发明设计了如SEQ ID No.1~8所示的引物，用于同时检测水产品中单核增生李斯特氏菌、沙门氏菌、副溶血性弧菌、金黄色葡萄球菌，简化了检测步骤，缩短了检测时间，降低了检测成本，提高了检测精度。

关键词：检测沙门氏菌单核增生李斯特氏菌金黄色葡萄球菌副溶血性弧菌食品安全检测致病菌引物组合物试剂盒引物水产品

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一种植物乳植杆菌FMBL L23036 CNN、酸奶发酵剂、酸奶及其应用

一种植物乳植杆菌FMBL L23036 CNN、酸奶发酵剂、酸奶及其应用

引用

作者：倪永清罗宝龙孙海龙陈宁宁张慧敏黄丽丽 832099 新疆维吾尔自治区石河子市北四路221号

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种植物乳植杆菌FMBL L23036CNN，酸奶发酵剂，酸奶及其应用，所述的植物乳植杆菌FMBL L23036CNN于2023年06月26日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 20231101；不仅对肠道致病性... 详细信息

标准号: CN117683670A

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种植物乳植杆菌FMBL L23036CNN，酸奶发酵剂，酸奶及其应用，所述的植物乳植杆菌FMBL L23036CNN于2023年06月26日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 20231101；不仅对肠道致病性大肠埃希氏菌、产肠毒素大肠埃希氏菌、肠沙门氏菌肠亚种鼠伤寒血清型、肠道出血性大肠埃希氏菌、单核增生李斯特氏菌、肠沙门氏菌肠亚种等的均具有良好的抑菌效果，还具有耐酸、胆盐活性，在胃液和肠液中具有较高的存活率，且具有良好的自凝集性和疏水性以及利用碳水化合物的能力；可以用于制备抑制致病菌的药物或食品添加剂，具有广阔的应用前景。

关键词：保藏肠沙门氏菌肠道杆菌亚种碳水化合物出血性大肠埃希氏菌单核增生李斯特氏菌致病性大肠埃希氏菌中国典型培养物耐酸生物技术领域致病菌食品添加剂酸奶发酵剂产肠毒素存活率凝集性疏水性血清型植物乳种植物酸奶伤寒肠液大肠胆盐胃液抑菌制备应用

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一种鼠李糖乳酪杆菌FMBL L23004 CNN、酸奶发酵剂、酸奶及其应用

一种鼠李糖乳酪杆菌FMBL L23004 CNN、酸奶发酵剂、酸奶及其应用

引用

作者：倪永清孙海龙罗宝龙剡文莉张慧敏陈宁宁 832099 新疆维吾尔自治区石河子市北四路221号

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种鼠李糖乳酪杆菌FMBL L23004CNN及其应用，所述的鼠李糖乳酪杆菌FMBL L23004CNN于2023年06月26日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 20231099；不仅对肠道致病性大肠埃希氏菌、... 详细信息

标准号: CN117660253A

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种鼠李糖乳酪杆菌FMBL L23004CNN及其应用，所述的鼠李糖乳酪杆菌FMBL L23004CNN于2023年06月26日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 20231099；不仅对肠道致病性大肠埃希氏菌、产肠毒素大肠埃希氏菌、肠沙门氏菌肠亚种鼠伤寒血清型、肠道出血性大肠埃希氏菌、单核增生李斯特氏菌、肠沙门氏菌肠亚种等均具有良好的抑菌效果，还具有耐酸、胆盐活性，在胃液和肠液中具有较高的存活率，且具有良好的自凝集性和疏水性以及利用碳水化合物的能力；可以用于制备抑制致病菌的药物或食品添加剂，具有广阔的应用前景。

关键词：保藏肠沙门氏菌乳酪杆菌鼠李糖肠道亚种碳水化合物出血性大肠埃希氏菌单核增生李斯特氏菌致病性大肠埃希氏菌中国典型培养物耐酸生物技术领域致病菌食品添加剂产肠毒素存活率凝集性疏水性血清型伤寒肠液大肠胆盐胃液抑菌制备应用

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杂交鲈鱼抗菌肽wb-moronecidin在抗水产动物致病菌中的应用

杂交鲈鱼抗菌肽wb-moronecidin在抗水产动物致病菌中的应用

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作者：沈李元朱新鹏卢立涂翰卿钱晓明 226600 江苏省南通市海安市老坝港滨海新区(角斜镇)川港路68号

本发明涉及杂交鲈鱼抗菌肽wb‑moronecidin在抗水产动物致病菌中的应用，属于生物医药技术领域。杂交鲈鱼抗菌肽wb‑moronecidin分子量为3366.89Da，等电点为11.17，其氨基酸序列为FFHHIFRGIVHVGKTIHKLVTGHHHHHH。本发明的效果在于：杂交... 详细信息

标准号: CN115974996A

本发明涉及杂交鲈鱼抗菌肽wb‑moronecidin在抗水产动物致病菌中的应用，属于生物医药技术领域。杂交鲈鱼抗菌肽wb‑moronecidin分子量为3366.89Da，等电点为11.17，其氨基酸序列为FFHHIFRGIVHVGKTIHKLVTGHHHHHH。本发明的效果在于：杂交鲈鱼抗菌肽wb‑moronecidin在抗水产动物致病菌中的应用，能对维氏气单胞菌（Aeromonas veronii）、单核增生李斯特氏菌（Listeria monocytogenes）等多种菌种有明显抑菌效果。

关键词：抗菌肽水产动物致病菌杂交单核增生李斯特氏菌生物医药技术氨基酸序气单胞菌等电点抑菌菌种应用

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