研究目的:观察四逆汤治疗老年阳虚型功能性便秘(functional constipation,FC)的临床疗效,通过网络药理学及分子对接方法预测分析,探讨四逆汤治疗老年功能性便秘的作用机制。本研究为临床应用四逆汤治疗老年阳虚型FC提供一定的理论依据。研究方法:1.临床随机对照研究:2020年12月-2022年11月期间,选取江西中医药大学附属医院肛肠科门诊符合纳入标准的老年功能性便秘(阳虚型)患者84名,按随机数字表法分为四逆汤组和乳果糖组,每组42名。四逆汤组煎服四逆汤,每日1剂,分两次温服,四逆汤组成:黑附片15g(先煎)、干姜5g、炙甘草6g。乳果糖组服用乳果糖口服液,每日1次,临睡前服,疗程均为14d,余治疗相同。治疗前后及治疗结束后3月,观察两组的有效率、中医证候评分、便秘患者生活质量量表(PAC-QOL)评分,所得数据经统计学分析,评价四逆汤治疗老年功能性便秘(阳虚型)的临床疗效。2.网络药理学研究及分子对接验证:从TCMSP数据库中筛选出四逆汤的主要活性成分,满足OB≥30%且DL≥0.18,并找出其对应靶点;挖掘Gene Cards、OMIM、TTD、Dis Ge NET、Drugbank、Pharm GKB等数据库筛选出FC的相关靶点。通过靶点映射获得四逆汤治疗FC的靶点,运用STRING数据库筛选出四逆汤发挥治疗作用的核心靶点进行分析,构建蛋白-蛋白相互作用网络。使用Metascape数据库对核心靶点进行基因本体论(Gene Ontology,GO)功能,京都基因及基因组百科全书(Kyto Encyclopedia of Gene and Genomes,KEGG)信号通路富集分析,预测四逆汤治疗功能性便秘的作用机制,并运用四逆汤“药物成分-核心靶点对接”进行验证。结果:1.临床随机对照研究:治疗14d后,四逆汤组的总有效率、中等程度功能性便秘的有效率,中医证候总积分,排便费力、排便时间、畏寒肢冷、腰酸膝冷、小便清长、面色?白等中医证候单项积分、PAC-QOL积分的改善均优于乳果糖组,具有统计学上的差异(P<0.05);治疗14d后,四逆汤组的中医证候总积分、中医各项证候评分、PAC-QOL积分较治疗前均有改善(P<0.05)。乳果糖组的中医主要证候积分,焦虑、身体不适、治疗满意度三项PAC-QOL评分均较治疗前有改善(P<0.05)。3月后随访,四逆汤组与乳果糖组复发率比较无统计学意义(P>0.05)。2.网络药理学及分子对接验证:从四逆汤的草药成分中共提取221个潜在化合物,经疾病基因挖掘、筛选去重后,共获得1484个FC相关靶点。所得靶点映射后获得四逆汤治疗FC的作用靶点130个,利用网络拓扑分析最终筛选出关键靶点,生物过程(biological process,BP)主要参与对激素的应答、对无机物质的反应、对脂多糖的反应、对肽的反应、对细菌来源分子的反应、细胞对氮化合物的反应,细胞组分(cellular component,CC)中主要富集于膜筏、膜微区、小窝、质膜筏、囊泡腔、质膜蛋白复合物,分子功能(molecular function,MF)中主要与DNA结合转录因子结合、转录因子结合、RNA聚合酶II特异性DNA结合转录因子结合、激酶结合、核受体活性、配体活化转录因子活性的活动有关。KEGG信号通路主要富集在癌症通路、癌症中的蛋白聚糖、IL-17信号通路、PI3K-AKT信号通路、TNF信号通路、MAPK信号通路中。分子对接结果表明,四逆汤中的主要活性成分槲皮素、山奈酚、甘草宁G与疾病核心靶点AKT1、IL-6、TNF有较为稳定的结合活性。结论:1.四逆汤较乳果糖可明显改善老年阳虚型功能性便秘患者的各项中医证候及生活质量,复发率更低,无明显不良反应,表明四逆汤在治疗老年阳虚型功能性便秘方面具有潜在优势,远期疗效更明显,可为中医药治疗老年阳虚型FC临床实践提供一定用药参考。2.网络药理学及分子对接验证,四逆汤核心中药成分治疗FC主要通过多成分、多靶点、多通路达到治疗老年阳虚型FC的效果,且四逆汤主要活性成分与FC核心靶点结合稳定。
暂无评论