检索结果-内蒙古大学图书馆

中国科学：生命科学 2012年第5期42卷 390-397页

作者：杨二霞赵恒张莹刘建生廖芸王丽春崔萍芳杨丽仙刘龙丁董承红董少忠邵聪文姜莉孙乐李琦涵中国医学科学院&北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118 江苏康淮生物科技有限公司泰州225300

CA16病毒作为手足口病主要病原之一,其病原学性状与感染引起的病理过程具有可能的相关意义.对分离自一名重症手足口病(HFMD)患者咽拭子的两株呈现不同蚀斑形态的CA16毒株所做的生物学分析表明,它们在增殖动力学、免疫原性等生物学性状... 详细信息

CA16病毒作为手足口病主要病原之一,其病原学性状与感染引起的病理过程具有可能的相关意义.对分离自一名重症手足口病(HFMD)患者咽拭子的两株呈现不同蚀斑形态的CA16毒株所做的生物学分析表明,它们在增殖动力学、免疫原性等生物学性状上的差异与其对乳鼠致病能力的差异具有相关性,而这些共同的差异与病毒基因非编码区5′端序列及结构区的VP1区域中的序列之间存在着可能的对应关系,所有这些结果提示了CA16病毒生物学及遗传学性状与其致病能力的相关性.

关键词： CA16毒株增殖动力学免疫原性致病能力

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区域性缺血对裸小鼠胰腺移植癌抑制作用的研究

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第三军医大学学报 1999年第7期21卷 507-509页

作者：郑树国何振平段恒春第三军医大学附属西南医院肝胆外科中心重庆400038

目的：为缺血疗法在胰腺癌的临床应用提供基础研究资料。方法：在建立人胰腺癌细胞株裸小鼠胰腺原位移植瘤模型的基础上，结扎荷瘤棵鼠胃十二指肠动脉、胰十二指肠下动脉及背胰动脉诱导胰腺右叶区域性缺血，观察缺血对裸小鼠胰腺移植癌... 详细信息

目的：为缺血疗法在胰腺癌的临床应用提供基础研究资料。方法：在建立人胰腺癌细胞株裸小鼠胰腺原位移植瘤模型的基础上，结扎荷瘤棵鼠胃十二指肠动脉、胰十二指肠下动脉及背胰动脉诱导胰腺右叶区域性缺血，观察缺血对裸小鼠胰腺移植癌群体增殖动力学及细胞周期动力学的影响。结果：缺血组移植癌生长缓慢，倍增时间延长，移植瘤体积、癌细胞增殖指数及蛋白质含量术后3、7、14d均显著低于对照组（P＜0．01）。结论：区域性缺血能有效地抑制裸小鼠胰腺移植癌的生长，并抑制癌细胞DNA及蛋白质的合成。

关键词：缺血疗法胰腺肿瘤增殖动力学裸小鼠

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噬藻体研究进展

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生物技术 2009年第6期19卷 89-92页

作者：王淼星向安魏大巧夏雪山刘丽昆明理工大学生命科学与技术学院云南昆明650224

噬藻体(Cyanophage)是以蓝藻为寄主的浮游病毒类群,因其能特异性地感染蓝藻而具有重要的生态地位,是蓝藻"水华"潜在的控制因子。噬藻体的生物学、生态学特征是了解噬藻体的一扇窗,分子生物学研究仍将是主要的研究方向之一。同... 详细信息

噬藻体(Cyanophage)是以蓝藻为寄主的浮游病毒类群,因其能特异性地感染蓝藻而具有重要的生态地位,是蓝藻"水华"潜在的控制因子。噬藻体的生物学、生态学特征是了解噬藻体的一扇窗,分子生物学研究仍将是主要的研究方向之一。同时,噬藻体研究手段也在不断更新。该文从这几个方面综述了噬藻体相关研究进展。

关键词：蓝藻噬藻体增殖动力学生态功能

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微小残留白血病监测的实验研究——白血病相关融合基因荧光定量PCR检测方法的建立

微小残留白血病监测的实验研究——白血病相关融合基因荧光定量PC...

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作者：林丽丹广州医学院

学位级别：硕士

研究背景：随着对白血病认识的不断深入,白血病的诊断、治疗和预后等水平也不断提高。儿童及成人急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)的5年无病生存(disease-free survival,DFS)率分别达75％及35％甚至更高,急... 详细信息

研究背景：随着对白血病认识的不断深入,白血病的诊断、治疗和预后等水平也不断提高。儿童及成人急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)的5年无病生存(disease-free survival,DFS)率分别达75％及35％甚至更高,急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML,)的完全缓解(complete remission,CR)率和5年DFS率分别为60％～70％和30％,其中急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocyticleukemia,APL)的CR率达85％。但是,目前仍有部分经治疗后获得完全缓解的患者在数年之内复发。白血病初诊时,患者体内的白血病细胞数量约为1012,经化疗取得临床及血液学完全缓解后,体内仍存在106～108个残留白血病细胞,这些存在于体内的形态上不能检测到的白血病细胞称为微小残留白血病(minimal residual disease,MRD),是引起白血病复发的主要原因。在白血病治疗过程中准确测定MRD并分析其意义,对临床追踪病情、判断预后、制定治疗方案等,具有重要意义。MKD检测的意义在于：①根据体内白血病细胞的负荷决定是继续治疗还是停止治疗：②更早地发现化疗药物的耐药性；③更早地预测白血病复发；④评价骨髓移植的预处理效果；⑤为体内残留白血病细胞分布和增殖动力学的研究提供可能性。目前用于检测MRD的方法主要有核型分析、荧光原位杂交(fluorescence insitu hybridization,FISH)、流式细胞术(flow cytometry,FCM)和聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)等,不同方法各有利弊。核型分析、FISH和FCM等的敏感性分别为10-1～10-2、10-2～10-3和10-3～10-4,难以满足对MRD诊断的需要,且都存在操作费时,或费用较高,或对样本要求较高等不足之处。FQ-PCR(fluorescent quantitative PCR,FQ-PCR)是在PCR基础上发展的核酸分子定量技术,该技术在普通PCR反应体系中加入荧光探针,利用荧光信号的变化,实时检测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化,通过循环阈值(cycle threshold,Ct)和标准曲线的分析对起始模板进行定量分析,具有敏感度高、准确定量、简便快速,污染较少等优点,是目前最为理想的MRD定量检测方法。融合基因是由于染色体结构改变导致的分子水平的异常,目前已发现超过50种与白血病有关的融合基因异常,这些异常已成为不同类型白血病的分子生物学特异性标志,可作为临床上对白血病进行分型、预后判断和残留病追踪的依据。白血病MRD检测方法的标准化,是白血病疗效评价和MRD监测的基础。目前我围尚未建立起统一的、标准化的FQ-PCR检测白血病MRD的方法,更缺乏多中心、大样本、长期追踪观察的循证医学评价结果。鉴于上述,我们拟建立以白血病相关融合基因为靶目标的FQ-PCR检测MRD的方法。期望以此为基础,通过后续的进一步的实验研究,建立FQ-PCR检测白血病MRD的标准体系,并应用于临床,为临床从分子水平评价白血病疗效、判断预后、制定治疗方案提供更准确的实验依据。研究目的： 1.构建含BCR-ABL M-bcr、BCR-ABL,m-bcr、BCR-ABL μ-bcr、PML-RARα、AML1-ETO、TEL-AML1、CBFβ-MYH11、E2A-PBX1和MLL-AF4等9种白血病相关融合基因的重组质粒,作为FO-PCR检测的标准品。 2.通过对重组质粒标准品进行FQ-PCR检测,建立标准曲线、标准方程,评价该方法的敏感度、重复性,为下一步实验和临床研究奠定方法学基础。研究内容： 1.构建含BCR-ABL M-bcr、BCR-ABL m-bcr、BCR-ABL μ-bcr、PML-RARα、AML1-ETO、TEL-AML1、CBFβ-MYH11、E2A-PBX1和MLL-AF4等9种白血病相关融合基因的重组质粒。 2.建立FQ-PCR检测白血病融合基因的标准曲线和标准方程。 3.分析FQ-PCR检测方法的可行性。研究方法： 1.培养含PML-RARα融合基因的NB4细胞系、含TEL-AML1融合基因的REH细胞系、含AML1-ETO融合基因的KASUMI-1细胞系,收集含CBFβ-MYH11、E2A-PBX1和MLL-AF4融合基因的白血病患者骨髓标本。 2.提取上述细胞系或骨髓标本RNA,行RT-PCR后,测序验证PCR产物与目

关键词：微小残留白血病融合基因增殖动力学荧光原位杂交流式细胞术聚合酶链反应

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羊口疮病毒感染宿主细胞的蛋白质组变化及功能分析

羊口疮病毒感染宿主细胞的蛋白质组变化及功能分析

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作者：孔汉金华中农业大学

学位级别：硕士

羊传染性脓疱(contagious ecthyma)俗称“羊口疮”,是由痘病毒科,副痘病毒属羊口疮病毒(orf virus, ORFV)引起的一种急性、高度接触性人兽共患传染病。该病主要侵害绵羊和山羊。临床上患病动物以口唇周围和乳房部位皮肤形成丘疹、水疱... 详细信息

羊传染性脓疱(contagious ecthyma)俗称“羊口疮”,是由痘病毒科,副痘病毒属羊口疮病毒(orf virus, ORFV)引起的一种急性、高度接触性人兽共患传染病。该病主要侵害绵羊和山羊。临床上患病动物以口唇周围和乳房部位皮肤形成丘疹、水疱、脓疱和疣状痂皮为特征。该病发病率高,病死率低。羊传染性脓疱的暴发和流行不但严重危害肉羊产业的健康发展,而且威胁人们的身体健康。随着基因组测序技术的发展,多株羊口疮病毒的全基因组序列被测定,这为羊口疮病毒致病的分子机制研究提供了参考,但是基因组学技术研究只针对病原体自身,而不能反映病原体与宿主间的相互作用。目前利用蛋白质组学技术对ORFV和宿主细胞相互作用的研究未见相关报道。本研究以ORFV和山羊皮肤成纤维细胞(goat skin fibroblasts, GSFs)为研究对象,应用同位素标记相对和绝对定量联合二维液相色谱串联质谱技术(two-dimensional liquid chromatography-tandem mass spectrometry coupled with isobaric tags for relative and absolute quantification, iTRAQ-2D-LC-MS/MS)对ORFV感染GSFs后的蛋白组学变化,进行了探索研究和功能分析,期望能为人们了解羊口疮病毒与宿主细胞的相互作用研究提供参考信息,具体研究内容如下： 1.羊口疮病毒囊膜蛋白(B2L)单克隆抗体(Monoclonal Antibodies, McAb)的制备参照GenBank上公布的ORFV B2L基因序列(GU320351)设计引物,应用PCR方法获得ORFV B2L基因全长,并将其定向连接到原核表达载体pET-30a上,在此基础上进行蛋白表达和纯化。以纯化后的融合蛋白免疫BALB/c小鼠,并利用杂交瘤技术将免疫脾细胞和SP2/0细胞进行细胞融合,经过4次筛选和克隆,获得4株稳定分泌抗ORFV B2L蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株,命名为D1-B3, E4-C6,3-A11-2,B1-F3-A3。单抗亚类鉴定结果表明4株单抗的亚类均为IgG1, Western-blot和间接免疫荧光试验结果表明4株单抗均能与羊口疮病毒发生特异性反应。 2.羊口疮病毒在GSFs上的适应性和增殖特性研究将从患病羊痂皮病料中分离出的ORFV在GSFs上进行适应性培养,以探讨病毒在该细胞上的增殖特性。对GSFs首次接种ORFV后进行细胞病变观察和间接免疫荧光检测(indirect immunofluorescent assay, IFA)。结果显示ORFV首次感染GSFs24h后开始有少量细胞出现肿胀和变圆,60h细胞开始脱落,72h病变完全。IFA结果显示接种ORFV的GSFs有特异性绿色荧光,表明ORFV能在GSFs内复制增殖。收集ORFV首次感染GSFs后不同时间点的病毒液进行病毒基因组拷贝数的Real-time PCR检测和TCID50测定,Real-time PCR检测结果显示感染后9h即可检测到病毒DNA,随感染时间延长病毒基因组拷贝数快速上升,72h达到最大(5.52×106copy/uL)。TCID50测定结果与病毒基因组拷贝数的增长趋势基本一致。在此基础上,将ORFV在GSFs上连续传至15代使其适应该细胞。结果显示随着传代次数的增多,细胞开始出现病变时间逐渐缩短,至10代后病变稳定。以第15代GSFs适应毒(CHINA Luoyang2013)感染GSFs,感染后不同时间分别收集感染细胞和培养上清,利用Real-time PCR对不同样品的病毒DNA进行定量分析,绘制ORFV在GSFs上的一步法生长曲线。结果显示：感染后3h-35h,细胞内病毒DNA含量随感染时间延长而增加,之后因细胞裂解病毒DNA含量逐渐降低；细胞外病毒DNA含量呈“S型”曲线增长,感染后0h-11h为潜伏期,病毒含量维持在较低水平,第11h-43h为突破期,病毒DNA含量迅速增加,感染后43h-51h增长速度减慢,逐步进入稳定期。 3.羊口疮病毒的遗传进化分析和ORF125蛋白的亚细胞定位利用DNA star和MEGA4.0对ORFV GSFs适应毒株CHINA Luoyang2013进行基于B2L基因的遗传进化分析,结果表明CHINA Luoyang2013与2012中国疫苗株(JQ904789)同源性最高,处于同一进化分支。利用DNA star和在线ExPASy工具对ORFV ORF125蛋白与Bcl-2蛋白家族成员的氨基酸序列和二级结构进行比较分析,结果发现ORF125与Bcl-2家族蛋白一级结构同源性很低,但两者二

关键词：羊口疮病毒单克隆抗体增殖动力学亚细胞定位蛋白组学

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～（125）IUDR介导俄歇电子释放对大鼠C6胶质瘤DNA靶点放疗的研究

～（125）IUDR介导俄歇电子释放对大鼠C6胶质瘤DNA靶点放疗的研究

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作者：司马秀田昆明医学院

学位级别：硕士

目的:在建立C6/SD大鼠脑胶质瘤模型的基础上,研究125IUdR介导俄歇电子释放对大鼠C6胶质瘤DNA靶点放疗的作用及其机制。方法:建立C6/SD大鼠胶质瘤模型后,应用流式细胞仪检测、免疫组化、HE染色三种方法,研究C6胶质瘤细胞的增殖动力... 详细信息

目的:在建立C6/SD大鼠脑胶质瘤模型的基础上,研究125IUdR介导俄歇电子释放对大鼠C6胶质瘤DNA靶点放疗的作用及其机制。方法:建立C6/SD大鼠胶质瘤模型后,应用流式细胞仪检测、免疫组化、HE染色三种方法,研究C6胶质瘤细胞的增殖动力学指标。在此动物模型基础上,将SD大鼠（体重为250～300克）分为实验组（20只）、对照组（20只）和空白组（10只）三组,前两组再分为5日处死和生存分析两个亚组。实验组在肿瘤增殖高峰期于肿瘤接种原位分三次注入125IUdR（0.2mCi/101μl/次/8h）,总剂量为0.6mCi/rat;对照组同法注入等摩尔浓度的127IUdR（5.6uM/10μl/次/8h）,总剂量为16.8uM/rat;空白组同法注入等量生理盐水,10μl/次。行流式细胞仪检测、免疫组化及HE染色检查和生存分析,了解125IUdR和127IUdR治疗后C6胶质瘤细胞的增殖动力学改变和三组动物的生存情况。结果:1.肿瘤细胞接种2周后,建立肿瘤模型,HE染色见肿瘤细胞增殖活跃,各项增殖指标显示该肿瘤增殖活性很强。 2.大体病理改变:治疗5天后,实验组大鼠肿瘤直径和重量均明显小于对照组和空白组（P<0.05）。 ***染色:对照组和空白组坏死区增大,其他区域变化不明显。实验组C6肿瘤细胞的核分裂像计数减少,细胞坏死区增大较对照组更明显,肿瘤细胞的凋亡现象也更为多见。 4.流式细胞仪检测:实验组肿瘤细胞的s期百分比与对照组和空白组相比降低（P<0.001）,G2+M期的细胞也随之减少,肿瘤细胞停滞在G0/G1期。实验组增

关键词： 125IUdR C6胶质瘤细胞增殖动力学俄歇电子

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鼻咽癌细胞DNA倍体性分析在放疗综合化疗中的意义

鼻咽癌细胞DNA倍体性分析在放疗综合化疗中的意义

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作者：韩非中山医科大学中山大学

学位级别：硕士

目前制定鼻咽癌治疗方案大多根据临床分期来选择,但是临床治疗观察的结果有时令人困惑,T、N分期早者也会发生转移和/或复发,导致治疗失败;T、N分期晚期者部分病例经过单纯放疗也能够得到成功根治;同一病理类型、同一分期的病人接受相同... 详细信息

目前制定鼻咽癌治疗方案大多根据临床分期来选择,但是临床治疗观察的结果有时令人困惑,T、N分期早者也会发生转移和/或复发,导致治疗失败;T、N分期晚期者部分病例经过单纯放疗也能够得到成功根治;同一病理类型、同一分期的病人接受相同的治疗方法,结果却大相径庭.因此,寻找新的生物学指标来弥补临床分期的不足,指导治疗设计是非常有意义的.

关键词：鼻咽癌 DNA倍体性流式细胞术肿瘤细胞增殖动力学同期放化疗

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<'125>IUdR介导俄歇电子释放对大鼠C<,6>胶质瘤DNA靶点放疗的研究

<'125>IUdR介导俄歇电子释放对大鼠C<,6>胶质瘤DNA靶点放疗的研究

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作者：刘晓东四川大学

学位级别：硕士

目的：在建立C6/Wistar胶质瘤大鼠模型的基础上,研究<'125>IUdR介导俄歇电子释放对大鼠C6胶质瘤DNA靶点放疗的作用及其机制.结论：1.流式细胞仪检测和免疫组化染色及核仁组织区银染三种检测方法具有良好相关性,... 详细信息

目的：在建立C6/Wistar胶质瘤大鼠模型的基础上,研究<'125>IUdR介导俄歇电子释放对大鼠C6胶质瘤DNA靶点放疗的作用及其机制.结论：1.流式细胞仪检测和免疫组化染色及核仁组织区银染三种检测方法具有良好相关性,可从不同角度反映肿瘤的增殖状况.2.<'125>IUdR能够选择性的杀伤S期的肿瘤细胞,显著抑制脑胶质瘤细胞的增殖,延长Wistar脑肿瘤大鼠的生存期.3.按细胞增殖特征指导给药,使药物浓度高峰与肿瘤细胞的增殖高峰相重叠,可达到对肿瘤细胞DNA靶点的精确放疗;4.<'125>IUdR的作用机制是通过<'125>I衰变直接破坏DNA双链结构及放射诱导促进肿瘤细胞凋亡而发挥作用,其中通过电离作用导致G1期细胞增殖阻滞及DNA断裂、诱导肿瘤细胞凋亡是该实验的新发现;5.<'125>IUdR是一种细胞周期依赖药物,仅可被分裂期肿瘤细胞选择性摄取,而正常情况下中枢神经系统中大多数细胞是非分裂细胞,所以有进一步临床应用的前景和价值.

关键词： IUdR C6胶质瘤细胞增殖动力学俄歇电子

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登革病毒在人胚肺二倍体细胞KMB17中的适应性及生物学特性研究

登革病毒在人胚肺二倍体细胞KMB17中的适应性及生物学特性研究

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作者：赵玉娇北京协和医学院

学位级别：硕士

登革病毒(dengue virus,DEN)属于黄病毒科黄病毒属中的一个血清型亚群,主要通过埃及伊蚊和白纹伊蚊等媒介昆虫传播,引起登革热(dengue fever,DF)以及发病率和死亡率很高的登革出血热(dengue hemorrhagic fever,DHF)和登革休克综合征(den... 详细信息

登革病毒(dengue virus,DEN)属于黄病毒科黄病毒属中的一个血清型亚群,主要通过埃及伊蚊和白纹伊蚊等媒介昆虫传播,引起登革热(dengue fever,DF)以及发病率和死亡率很高的登革出血热(dengue hemorrhagic fever,DHF)和登革休克综合征(dengue shock syndrome,DSS)。尤其近年来,由于全球气候变暖、人口流动频繁等因素,登革热在全世界的发病率提高了近30倍。在过去两年中全球登革热感染人群的数量持续增长,在东南亚中部和南部地区、美国以及南太平洋地区,每年约8000万人感染登革病毒,估计24000人死亡,超过100个国家的30亿人受到威胁,已成为世界性的公共卫生问题。迄今为止全球仍没有获准上市的登革病毒疫苗,因此登革疫苗研发迫在眉睫。目前最有潜力的传统减毒活疫苗候选株是由泰国沃特瑞德研究所(WRAIR)研发的以犬肾细胞和恒河猴胚肺细胞为基质的疫苗[3],Vero细胞也被认为是疫苗开发的候选基质,以人源性细胞制备的登革疫苗候选株还未见报道。因此研究登革病毒在人源性细胞上的适应性对于登革病毒疫苗的研发具有重要意义。人二倍体细胞系KMB17取自人胚胎肺组织,为医学生物学研究所自建并经卫生部批准用于甲型肝炎疫苗的大规模生产的细胞株.其安全性和细胞稳定性都得到了广泛验证。本研究对中缅边境采集的100份登革热病人血清样本进行编号和基本信息登记后,通过登革病毒IgM. IgG抗体检测试剂盒对血清样本进行抗体检测。经过统计和分析,在这些样本中,Ig M/Ig G阴性的样本仅占总样本数的5%,Ig M阳性/Ig G阴性的样本占总样本数的26%,而Ig G阳性的样本所占比例高达69%。样本接种C6/36细胞扩增后经血凝效价测定,无能够使新鲜鹅血红细胞凝集的样本。由于IgM/Ig G阳性样本所占比例高达95%,要从中分离活病毒并进行基因分析十分困难。通过与广东省CDC合作,获得了Ⅰ-Ⅳ型登革病毒8个中国株,将其分别在C6/36细胞上进行毒种扩增和滴度测定后,以卫生部公布的登革病毒通用引物及Ⅰ～Ⅳ型登革病毒型特异性引物通过RT-PCR法进行型别鉴定。经鉴定的毒株以4.0MOI在人胚肺二倍体细胞KMB17上反复传代,直至登革病毒能在KMB17细胞中引起显著病变,然后进行培养条件优化,确定其最佳感染条件。将病变毒株在KMB17细胞中连续传代10代,选育出良好的细胞适应株,并经过三轮噬斑纯化。微量滴定法检测1-10代病毒的感染性滴度,免疫荧光法检测病毒纯化株的抗原性,实时荧光定量法进行增殖动力学研究。病毒培养液经蔗糖梯度离心和超速离心纯化后,电镜检测病毒颗粒形态。结果显示,将Ⅰ～Ⅳ型登革病毒中国株提取RNA进行RT-PCR,能分别扩增出511bp的登革病毒特异性基因和482bp、119bp、290bp和392bp的型特异性基因；毒株接种C6/36细胞收获扩增的病毒液,将此病毒液感染KMB17细胞并经过反复传代后,可使KMB17产生明显的细胞病变(CPE)；将病毒适应株在KMB17细胞上进行10代连续传代培养,细胞病变速度逐渐增快,至第10代达到增殖高峰。分别经三轮噬斑纯化后筛选出四型纯化毒株,免疫荧光法检测感染KMB17细胞的纯化株病毒的抗原性,结果均呈阳性,病毒经纯化后电镜下显示形态正常增殖动力学研究显示,登革病毒适应株在KMB17细胞中接种后第3天已经开始增殖,在第5-6天增殖最为迅速,在第7天病毒增殖达到最高峰。本研究选育出了能在KMB17细胞中稳定增殖且病毒滴度较高的细胞适应株,为下一步研究登革病毒灭活疫苗和减毒活疫苗奠定基础。

关键词：登革病毒人胚肺二倍体细胞适应性增殖动力学

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<'125>IUdR介导俄歇电子释放对大鼠C6胶质瘤DNA靶点放疗的实验研究

<'125>IUdR介导俄歇电子释放对大鼠C6胶质瘤DNA靶点放疗的实验研究

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作者：期俊辉昆明医学院

学位级别：硕士

[目的]：在建立C6/SD胶质瘤大鼠模型的基础上，研究<'125>IUdR 介导俄歇电子释放对C6胶质瘤DNA靶点放疗的作用及机制。 [方法]：建立C6/SD胶质瘤大鼠模型后，应用流式细胞仪检测、PCNA免疫组化染色和核仁组... 详细信息

[目的]：在建立C6/SD胶质瘤大鼠模型的基础上，研究<'125>IUdR 介导俄歇电子释放对C6胶质瘤DNA靶点放疗的作用及机制。 [方法]：建立C6/SD胶质瘤大鼠模型后，应用流式细胞仪检测、PCNA免疫组化染色和核仁组织区银染三种方法，研究C6胶质细胞瘤的增殖动力学指标，并进行相关性分析。在此动物模型的基础上，将SD大鼠分为实验组(20只)、对照组(20只)和空白组(20只)三组，每组再分为5日处死组和生存分析两个亚组。实验组在肿瘤增殖高峰期于肿瘤接种原位分次注入<'125>IUdR，0.2mCi/10 u l/次；对照组同法注入等摩尔浓度的<'127>IUdR，5.6 u M/10 u l/次；空白组同法注入等量生理盐水，10u l/次。行流式细胞仪检测、免疫组化染色及核仁组织区银染检查及分析，了解<'125>IUdR和<'127>IUdR治疗后C6胶质瘤细胞的增殖动力学改变和三种动物的生存情况。 [结果]： 1.肿瘤细胞接种2周后，肿瘤模型建立，HE染色见肿瘤细胞增殖活跃，各项增值指标显示该肿瘤增殖性较强。 ***面积、AgNOR 计数与S期百分比和PCNA指数具有良好的相关性,AgNOR面积(p<0.01)比AgNOR计数(P<0.05)相关性更强。 3.大体病理改变：治疗5天后，试验组大鼠肿瘤直径和重量均明显小于对照组(p<0.01)。 ***染色：对照组坏死区增大，其它变化不明显。实验组C6肿瘤细胞的核分裂像计数减少，细胞坏死区增大较对照组更明显，肿瘤细胞的凋亡现象也更为多见。 ***染色：实验组AgNOR计数和面积均明显低于对照组(p<0.01)。 6.免疫组化染色：实验组PCNA阳性表达低于对照组(p<0.01)。 7.流式细胞仪检测：实验组肿瘤细胞的S期百分比与对照组相比显著降低(p<0.01)，G2+M期的细胞也随之减少，肿瘤细胞大量停滞在G0/G1期。实验组增殖指数明显低于对照组(p<0.01)，而凋亡指数则明显增加(p<0.01)。 8.生存分析：在50天的观察期内，实验组有两只生存下来，实验组中期生存时间比空白组和对照组延长了一倍多(p<0.01)。 [结论]： 1.流式细胞仪检测和免疫组化染色及核仁组织区银染三种方法具有良好的相关性，可从不同的角度反映肿瘤的增殖状况。 2.<'125>IUdR能够选择性的杀伤S期的肿瘤细胞，显著抑制脑胶质瘤细胞的增殖，延长SD脑肿瘤大鼠的生存期。 3.按细胞增殖特征指导给药，使药物浓度高峰与肿瘤细胞的增殖高峰相重叠，可达到对肿瘤细胞DNA靶点的精确放疗； 4.<'125>IUdR.的作用机制是通过<'125>I衰变直接破坏DNA双链结构及放射诱导促进肿瘤细胞凋亡而发挥作用，其中通过电离作用导致G1期细胞增殖阻滞及断裂、诱导肿瘤细胞凋亡是本试验的新发现； 5.<'125>I是一种细胞周期依赖药物，仅可被分裂期肿瘤细胞选择性摄取，而正常情况下中枢神经系统中大多数细胞是非分裂细胞，所以有进一步临床应用的情景和价值。

关键词：放射疗法胶质细胞瘤增殖动力学俄歇电子

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