检索结果-内蒙古大学图书馆

中国血吸虫病防治杂志 2012年第3期24卷 298-302页

作者：顾亚萍周华云曹俊朱国鼎陶志勇刘耀宝朱韩武江苏省血吸虫病防治研究所、卫生部寄生虫病预防与控制技术重点实验室无锡214064 蚌埠医学院病原生物学教研室湖南省郴州市疾病预防控制中心

目的探讨复式pcr方法在疟疾诊断中的现场应用价值。方法根据疟原虫18 S rRNA基因序列,合成疟原虫属特异性上游引物和间日疟原虫、恶性疟原虫种特异性下游引物,优化pcr反应体系,建立在同一pcr反应体系中同时检测间日疟原虫、恶性疟原虫... 详细信息

目的探讨复式pcr方法在疟疾诊断中的现场应用价值。方法根据疟原虫18 S rRNA基因序列,合成疟原虫属特异性上游引物和间日疟原虫、恶性疟原虫种特异性下游引物,优化pcr反应体系,建立在同一pcr反应体系中同时检测间日疟原虫、恶性疟原虫基因组特异性DNA片段的疟疾诊断方法,并评价其现场应用价值。结果间日疟原虫和恶性疟原虫基因组DNA经过复式pcr后,分别扩增出1 451 bp和833 bp的特异性条带,而伯氏疟原虫、食蟹猴疟原虫及健康人血样均无扩增带出现,用该反应体系可检出原虫血症为1.1×10-6和5.6×10-7的间日疟原虫和恶性疟原虫感染。与镜检法相比,复式pcr检测119份现场样本,112份与镜检结果相同,阳性率为54%,漏诊率为0.8%,误诊率为0,而镜检法依次分别为53%、1.7%和3.4%。结论复式pcr方法检测疟原虫具有简便、快速、特异、敏感等优点,在疑似病例的鉴别诊断和分子流行病学调查中具有良好的应用价值。

关键词：恶性疟原虫间日疟原虫复式pcr 现场应用

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先天性智力低下儿童脆性X综合征的分子流行病学调查

引用

中国优生与遗传杂志 2009年第1期17卷 39-40,42页

作者：叶志纯蔡建光祝兴元贺新玉赵蕊李梨平殷照初倪斌湖南省儿童医院儿科医学研究所 410007 湖南省计划生育研究所优生技术湖南省重点实验室

目的根据脆性X综合征的两个分子生物学标志,建立在先天性智力低下患儿中快速分析脆性X综合征智力低下基因1(Fragile X mental retardation gene 1,FMR1)突变的方法,对先天性智力低下儿童进行脆性X综合征的大面积筛查和诊断,调查智力低... 详细信息

目的根据脆性X综合征的两个分子生物学标志,建立在先天性智力低下患儿中快速分析脆性X综合征智力低下基因1(Fragile X mental retardation gene 1,FMR1)突变的方法,对先天性智力低下儿童进行脆性X综合征的大面积筛查和诊断,调查智力低下儿童中脆性X综合征的发病率。方法应用复式pcr方法检测FMR1基因的(CGG)n重复区CGG重复序列的大小,判断FMR1基因状态(正常、前突变、全突变),快速筛查脆性X综合征可疑患儿。用甲基化特异性pcr方法,检测FMR1基因启动子区CpG岛的异常甲基化情况,进一步诊断脆性X综合征患者,并用Southern印迹技术进行验证。结果1248例先天性智力低下患儿中,筛查出149名不明原因的智低儿童进行了FMR1基因分析,检出脆性X综合征携带者(FMR1基因前突变者)32例(10男22女),脆性X综合征患者(FMR1基因全突变者)12例(9男3女),脆性X综合征检出率为8.05%。结论复式pcr法灵敏、快速、简便,适应于临床和基层开展脆性X综合征筛查。脆性X综合征在先天性智力低下儿童中的发病率高,应对先天性智力低下儿童进行脆性X综合征FMR1基因的分析。

关键词：复式pcr 甲基化特异性pcr FMR1基因脆性X综合征

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复式pcr检测恶性疟原虫和间日疟原虫系统

复式PCR检测恶性疟原虫和间日疟原虫系统

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本课题由江苏省卫生厅资助,编号H9733及中国核工业总公司赞助。疟疾仍是全球最重要的公共卫生问题之一,我国虽已控制了大面积暴发流行但造成疟疾流行的基本因素和点状暴发流行依然存在,疟疾诊断仍沿用一百多年来的血涂片显微镜检查,已... 详细信息

标准号: 0501490299

本课题由江苏省卫生厅资助,编号H9733及中国核工业总公司赞助。疟疾仍是全球最重要的公共卫生问题之一,我国虽已控制了大面积暴发流行但造成疟疾流行的基本因素和点状暴发流行依然存在,疟疾诊断仍沿用一百多年来的血涂片显微镜检查,已不能适应当前的需要,聚合酶链反应(pcr)是一种体外模拟自然DNA复制过程的核酸扩增技术,经酶促反应快速将靶DNA序列扩增数百万倍,具有高度的敏感性和特异性等优点,本复式pcr是首次将恶性疟原虫(p.f)中度重复基因序列PBRK1-14与间日疟原虫(p.v)线粒体细胞色素C氧化酶基因组合而成,能将p.f扩增出206bp及p.v扩增出370bp条带; 本复式pcr有多项创新,为将p.f基因PBRK1-14和p.v基因CDⅢ组合成复式pcr创用生理盐水溶血煮沸法处理滤低干血滴样本制备疟原虫DNA模板,探索最佳反应体系进行有效扩增,提高敏感性,采用固相试剂保存法,可在4℃-8℃中保存一年,解决了检测试剂盒贮运等一系列问题,本技术已经成熟适用于疟疾流行病学调查疫情监测,抗疟效果配核,献血筛选和疟原虫虫种鉴定等。

关键词：实验室诊断基因诊断疟疾诊断聚合酶链反应复式pcr

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复式pcr用于闽南疟疾监测的效果评价

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中国人兽共患病杂志 2001年第2期17卷 72-74页

作者：张山鹰陆惠民许龙善李莉莎李清山刘德发刘庆生福建省寄生虫病防治研究所苏州大学医学院病原生物学教研室苏州215007 安溪县卫生防疫站厦门市卫生防疫站

目的　评价复式pcr在闽南疟疾监测中的应用效果。方法　采集流行区发热病人及疫点居民血样用复式pcr一次扩增同时检测恶性疟原虫 (P f)和间日疟原虫 (P .v)。结果　 2 49例发热病人pcr测阳性率为 8 0 2 % ,敏感性为10 0 % ,特异性 99 5 ... 详细信息

目的　评价复式pcr在闽南疟疾监测中的应用效果。方法　采集流行区发热病人及疫点居民血样用复式pcr一次扩增同时检测恶性疟原虫 (P f)和间日疟原虫 (P .v)。结果　 2 49例发热病人pcr测阳性率为 8 0 2 % ,敏感性为10 0 % ,特异性 99 5 6 %符合率 99 5 9% ,镜检阳性率为 7 6 3% ,抽查疫点居民 70 1人检测疟原虫 ,未发现阳性样本 ,复式pcr检测大批样本平均费用不高于传统镜检方法。结论　该复式pcr检测系统用于闽南现场疟疾监测具有敏感、特异、快速等特点 ,可用于分子流行病学调查。

关键词：复式pcr 疟疾监测评价闽南地区

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复式pcr检测疟原虫的应用研究

引用

海峡预防医学杂志 2001年第1期7卷 7-10页

作者：张山鹰陆惠民陈姝许龙善李莉莎黄伟达福建省寄生虫病防治研究所苏州大学医学院病原生物学室江苏215007 复旦大学生命科学学院生化系上海200433

[目的 ]建立适合于疟疾流行区现场应用的复式 pcr检测系统。 [方法 ]采用生理盐水处理样本 ,设计针对恶性疟原虫 (P.f) p BPK1- 14基因和间日疟原虫 (P.v)线粒体细胞色素 C氧化酶基因 CO 合成引物 ,混合一次扩增检测P.f 和 P.v。[结果 ]... 详细信息

[目的 ]建立适合于疟疾流行区现场应用的复式 pcr检测系统。 [方法 ]采用生理盐水处理样本 ,设计针对恶性疟原虫 (P.f) p BPK1- 14基因和间日疟原虫 (P.v)线粒体细胞色素 C氧化酶基因 CO 合成引物 ,混合一次扩增检测P.f 和 P.v。[结果 ]P.f 及 P.v模板分别被扩增出一条 2 10 bp和 370 bp的片段 ,与食蟹猴疟原虫 (P.c)、鼠伯氏疟原虫(P.b)及正常人白细胞无交叉 ,且可检测不同地理株的 P.f 和 P.v,P.f 和 P.v的敏感度分别为 5 .5× 10 - 7和 1.5×10 - 6 ,检测 146份疟区发热病人 ,与镜检结果相比 ,其敏感性和特异性 P.f为 97.9%和 98.7% ,P.v为 10 0 %和 98.7%。[结论 ]该复式 pcr检测系统适应于现场疟疾流行病学监测 ,防治效果考核 ,疑似疟疾病人的诊断及虫种鉴定。

关键词：复式pcr 疟原虫检测应用疟疾诊断

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