检索结果-内蒙古大学图书馆

中华核医学与分子影像杂志 2014年第4期34卷 308-311页

作者：朱宝谢国强肖华龙黄飚邵科晶许亚丰张艺南京医科大学附属无锡人民医院核医学科 214023 南京医科大学附属无锡人民医院医学检验科 214023 卫生部核医学重点实验室

目的建立测定乙酰肝素酶（HPA）的生物素-链亲和素系统（BSA） TRFIA并进行初步应用.方法采用部分基因重组的鼠抗人HPA单克隆抗体包被微孔板条,加入HPA标准品和生物素标记的HPA,两者竞争性结合HPA单克隆抗体,再利用铕标记链亲和素（E... 详细信息

目的建立测定乙酰肝素酶（HPA）的生物素-链亲和素系统（BSA） TRFIA并进行初步应用.方法采用部分基因重组的鼠抗人HPA单克隆抗体包被微孔板条,加入HPA标准品和生物素标记的HPA,两者竞争性结合HPA单克隆抗体,再利用铕标记链亲和素（Eu^3＋-SA）作为示踪物,建立竞争法BSA-TRFIA.利用该方法检测健康人血清样本（n=32）和肿瘤患者血清样本（n=54）HPA水平,并比较TRFIA结果与ELISA结果的相关性.数据分析采用两样本t检验或t′检验、直线相关分析.结果该法测定HPA的灵敏度为0.33 μg/L,批内和批间CV分别为5.29%和7.54%,平均回收率为105.5%,标准曲线范围为O-1 000 μg/L.健康人血清样本测定结果为（2.03±1.47）μg/L,患者血清样本为（22.13 ±7.38） μg/L（t′=19.388.P〈O．01）。该法测定值与ELISA结果相关（r=0．979，P〈0．01）。结论应用BSA-TRFIA建立的HPA测定法是一种灵敏度高，可测范围广，稳定，高效的定量检测方法。

关键词：荧光免疫测定生物素抗生蛋白链菌素乙酰肝素酶

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HCV免疫学诊断抗原与链亲和素融合蛋白的制备及应用研究

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中华实验和临床病毒学杂志 2011年第3期25卷 230-232页

作者：张庭瑛鲁健赵敏赵国霞邓瑶毕胜利高基民谭文杰温州医学院医学病毒学研究所浙江325000 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所病毒基因工程国家重点实验室

目的制备带有链亲和素（SA）标签的丙型肝炎病毒（HCV）融合蛋白,并初步探讨其在抗-HCV ELISA检测中的应用.方法构建了HCV诊断抗原与链亲和素融合蛋白重组表达质粒pET-11d-C44P-SA,在大肠埃希菌BL21（DE3）中表达,并用Western Blot进... 详细信息

目的制备带有链亲和素（SA）标签的丙型肝炎病毒（HCV）融合蛋白,并初步探讨其在抗-HCV ELISA检测中的应用.方法构建了HCV诊断抗原与链亲和素融合蛋白重组表达质粒pET-11d-C44P-SA,在大肠埃希菌BL21（DE3）中表达,并用Western Blot进行鉴定,表达的融合蛋白经镍金属螯合（Ni-NTA）层析柱进行纯化,透析复性后分别包被生物素化以及普通酶联板,进行人血清抗-HCV检测.结果成功构建了带有SA标签的重组表达质粒,其在大肠埃希菌BL21（DE3）中实现高效表达,制备的融合蛋白纯度可达90%以上.建立ELISA法进行人血清抗-HCV检测显示：融合蛋白包被生物素化酶联板检测灵敏度与特异性明显高于普通酶联板.结论构建的融合蛋白作为包被抗原,结合利用SA标签与生物素化酶联板,明显提高了抗-HCV检出的灵敏度与特异性,该策略为进一步提高抗-HCV检测试剂的质量打下了基础.

关键词：肝炎病毒属抗原抗生蛋白链菌素病毒融合蛋白质素

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鼻咽癌血清学检测方法的改进

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中华实验和临床病毒学杂志 2009年第1期23卷 65-67页

作者：詹少兵钟建明麦稚平叶树清周玲曾毅廖建中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所肿瘤病毒室、传染病预防控制国家重点实验室北京100052 广西壮族自治区苍梧县鼻咽癌防治所

目的改进现有鼻咽癌血清学早期诊断方法，提高检测灵敏度。方法用链霉亲和素一生物素放大免疫酶法与既有常规免疫酶法对鼻咽癌防治示范基地所取294份普查血清IgA／VCA，IgMEA抗体进行血清学检测，并用SPSS统计软件对检测结果进行χ^2检... 详细信息

目的改进现有鼻咽癌血清学早期诊断方法，提高检测灵敏度。方法用链霉亲和素一生物素放大免疫酶法与既有常规免疫酶法对鼻咽癌防治示范基地所取294份普查血清IgA／VCA，IgMEA抗体进行血清学检测，并用SPSS统计软件对检测结果进行χ^2检验和t检验。结果共检测30岁以上294份普查人群血清，其中鼻咽癌患者血清106份，健康人血清188份。改进的链霉亲和素．生物素放大免疫酶法与既往已有的免疫酶法相比，血清IgMVCA、IgMEA抗体的检测阳性率增加；检测血清抗体的几何平均数明显提高。结论改进方法可以提高血清学检测的灵敏度，同时保证了检测结果的特异性，提高了鼻咽癌的检出率，可以应用于鼻咽癌早期筛查工作。

关键词：疱疹病毒4型鼻咽肿瘤抗生蛋白链菌素生物素

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柠檬酸-微波-LSAB法综合技术在癌基因蛋白免疫组化染色中的应用

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中国保健营养（临床医学学刊） 2009年第6期18卷 114-115页

作者：赵鲁笳刘天卿邢广莹王关华大连市友谊医院病理科 116000

应用柠檬酸-微波-LSAB法免疫组织化学染色综合技术，检测胃癌中P53蛋白、P21蛋白。将微波辐射理论应用于组织切片的抗原修复及LSAB法的免疫组化染色。结果表明，本方法染色时间短，阳性率高，背景清晰，结果稳定，重复性好。其原因为：... 详细信息

应用柠檬酸-微波-LSAB法免疫组织化学染色综合技术，检测胃癌中P53蛋白、P21蛋白。将微波辐射理论应用于组织切片的抗原修复及LSAB法的免疫组化染色。结果表明，本方法染色时间短，阳性率高，背景清晰，结果稳定，重复性好。其原因为：①加热柠檬酸缓冲液对组织进行抗原修复后能暴露抗原，恢复抗原活性物质，阳性率增高；②微波辐射的能量使分子产生高速振动、穿透及热效应，促进抗原抗体结合，反应速度加快；③抗生蛋白链菌素结合位点多，不含碳糖成分，可保持中性等电点，非特异性吸附少，因此敏感性高，背景更加清晰。

关键词：癌基因抗原修复微波抗生蛋白链菌素免疫组织化学

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Relationship between the expression of matrix metalloproteinase-9 and angiogenesis in glioma and its clinical significance

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Journal of Pharmaceutical Analysis 2008年第2期20卷 113-118页

作者：杨小立刘淼王茂德刘守勋王拓王鸿雁 MedicalCenterofRehabilitation DepartmentofNeurosurgery DepartmentofPathology theFirstAffiliatedHospitalMedicalSchoolofXi'anJiaotongUniversityXi'an710061China

Objective To explore the role and significance of matrix metalloproteinase-9(MMP-9)in angiogenesis through observing the relationship between the expression of MMP-9 and microvessel density(MVD)in *** The expressions of MMP-9 and CD34 in 10 cases of normal brain tissues and 58 cases of glioma(14 cases of grade Ⅰ,20 cases of grade Ⅱ,15 cases of grade Ⅲ,and 9 cases of grade Ⅳ)were detected by immunohistochemical streptavidin-peroxidase *** positive cells of MMP-9 and the positive microves...

关键词：过氧化物酶基因抗生蛋白链菌素抗原 CD34 基质金属蛋白酶9 脑内皮细胞神经胶质瘤

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激光治疗酒渣鼻:病理病因学研究

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世界核心医学期刊文摘（皮肤病学分册） 2005年第3期1卷 38-38页

作者： Lonne-Rahm S. Nordlind K. Edstrm D.W. 牛新武 Unit of Dermatology and Venereology Department of Medicine Karolinska Hospital S- 171 76 Stockholm Sweden Dr.

Objective: To study the effect of laser treatment on rosacea, a common facial skin disease with symptoms of blushing, redness, telangiectasis, papules, pustu les, and diffuse swelling of the skin, we focused on the stinging sensation and performed immunohistochemical evaluation of nerve density and neuropeptide expre ssion. Design: Clinical investigation as well as the lactic acid (stinger) test was performed before and 3 months after the treatment with flashlamp pulsed dye laser, when skin biopsy specimens were also taken. Setting: University hospital. Patients: Thirty-two patients with rosacea, all with positive results from th e lactic acid “ stinger” test, were treated by flashlamp pulsed dye laser. Ma in Outcome Measures: The biopsy specimens were taken from the stinger-positive areas in the nasolabial folds, fixed in Lanas fixative (10% formalin and 0.4 % picric acid), and analyzed for the expression of protein gene product 9.5 (g eneral nerve marker), substance P, calcitonin gene-related peptide, and vasoac tive intestinal polypeptide, using a biotinylated streptavidin technique. Result s: Thirtyone patients who were stinger positive before treatment showed decrease d scores after treatment, and 1 patient had the same stinger test score before a nd after treatment. The number of protein gene product 9.5-positive fibers in the epidermis (P < .05) as well as the papillary dermis (P< .01) was decreased. This was also the case for substance P in the papillary dermis (P< .001),whereas no evident differencewas noted for vasoactive intestinal polypeptide and calcit onin gene-related peptide. No difference was found for contact between nerves and vessels (factor VIII positive). Conclusions: Laser treatment of rosacea that destroys small vessels has a good medical relevance because it reduces the unpl easant symptoms of the sensitive skin. A neurogenic etiology of stinging may be possible.

关键词：病因学研究抗生蛋白链菌素真皮乳头毛细血管扩张降钙素基因免疫组化法神经肽舒血管肠肽颜面潮红针刺感

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Development of a polyvalent assay system for lead identification

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BIOORGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY LETTERS 2004年第20期14卷 5081-5083页

作者： Lovering, F Angell, Y Zhang, YL Bridges, K Wyeth Ayerst Res Dept Chem & Screening Sci Cambridge MA 02140 USA Wyeth Ayerst Res Dept Cardiovasc & Metab Dis Cambridge MA 02140 USA

In an effort to identify new approaches to lead discovery a polyvalent assay was developed to allow identification of weak inhibitors. This approach involves the polyvalent display of a protein binder off a Tenta-gel((R)) scaffold and the generation of a polyvalent display of protein by biotinylation followed by complexation with fluorescently labeled streptavidin. Subsequent exposure of the streptavidin complexed protein to Tenta-gel((R)) beads with active protein binders results in fluorescent beads, which are easily viewed under a fluorescent microscope. (C) 2004 Elsevier Ltd. All rights reserved.

关键词： Proteins assay Lead Streptavidin 蛋白质类铅抗生蛋白链菌素 Biotinylation Complexation lead identification Binders fluorescent microscope Protein Streptavidin

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Supramolecular DNA-streptavidin nanocircles with a covalently attached oligonucleotide moiety

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JOURNAL OF BIOMOLECULAR STRUCTURE & DYNAMICS 2002年第2期20卷 223-230页

作者： Niemeyer, CM Adler, M Gao, S Chi, LF Univ Dortmund Fachbereich Chem D-44227 Dortmund Germany Chimera Biotec GmbH D-44227 Dortmund Germany Univ Munster Inst Phys D-48149 Munster Germany

Covalent hybrid conjugates consisting of streptavidin (STV) and a 24-mer single-stranded DNA oligonucleotide have been used as a starting material for the synthesis of supramolecular nanocircles. For this, the covalent hybrid conjugates were oligomerized by cross-linking with 5',5'-bis-biotinylated double-stranded DNA (dsDNA) fragments of various length. Heat denaturation of the resulting oligomeric conjugates and subsequent rapid cooling led to the formation of the nanocircles, in which the oligonucleotide-containing STV molecule is coupled with both ends of the circular bis-biotinylated dsDNA fragment. The circular structure of the bioconjugates was established by electrophoretic studies including Ferguson plot analysis as well as by scanning force microscopy (SFM) inspection. The formation process and the stability against degradation by ligand exchange with free D-biotin was compared for the nanocircles obtained from covalent oligonucleotide-STV hybrids and native STV. The former nanocircles revealed a decreased stability with respect to ring opening than the circles obtained from native STV. This suggested that the affinity of the covalent oligonucleotide-STV hybrid for binding biotinylated DNA is significantly decreased. Nevertheless, the single-stranded oligonucleotide moiety of the hybrid nanocircles can be used as a molecular handle for further functionalization. For instance, it was used for the selective DNA-directed immobilization at a surface, previously functionalized with complementary capture oligonucleotides. Moreover, we demonstrate that a pair of nanocircles, containing complementary oligonucleotide moieties, can be hybridized to form specific dimers, thereby generating a novel type of supramolecular DNA-protein nanostructures.

关键词： Oligonucleotides DNA Hybrids Streptavidin Assault by stabbing 寡核苷酸类抗生蛋白链菌素 Oligonucleotides DNA supramolecular Covalent Interaction ligands stab Streptavidin

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蛋白质二维晶体高分辨电子显微像图像处理方法研究

蛋白质二维晶体高分辨电子显微像图像处理方法研究

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作者：阳世新中国科学院物理研究所

学位级别：博士

该论文是在李方华院士和范海福院士等提出的一系列关于非生物高分辨电子显微像图像处理方法的基础上,致力于发展蛋白电子晶体学中的图像处理方法.论文的主要内容如下:(1)修改了最大熵图像解卷方法,使之适用于蛋白质电子晶体学中的图像处... 详细信息

该论文是在李方华院士和范海福院士等提出的一系列关于非生物高分辨电子显微像图像处理方法的基础上,致力于发展蛋白电子晶体学中的图像处理方法.论文的主要内容如下:(1)修改了最大熵图像解卷方法,使之适用于蛋白质电子晶体学中的图像处理.(2)编写了直接法图像解卷程序,适用于蛋白质二维晶体高分辨电子显微像的图像解卷.(3)在直接法图像解卷方法的基础上,提出了用两张像作解卷处理的方法.(4)对SAPI程序作了小的改动 ,使之可适用于蛋白质二维晶体图像分辨率的提高.(5)蛋白质streptavidin图像分辨率的提高.(6)兔膀胱中AUM膜蛋白负染样品电子显微像的图像处理.

关键词：高分辨电子显微学蛋白质电子晶体学蛋白质二维晶体图像处理直接法最大熵方法抗生蛋白链菌素不对称单位膜蛋白

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Specific adhesion of vesicles monitored by scanning force microscopy and quartz crystal microbalance

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BIOPHYSICAL JOURNAL 2000年第1期78卷 487-498页

作者： Pignataro, B Steinem, C Galla, HJ Fuchs, H Janshoff, A Univ Munster Inst Phys D-48149 Munster Germany Univ Munster Inst Biochem D-48149 Munster Germany

The specific adhesion of unilamellar vesicles with an average diameter of 100 nm on functionalized surfaces mediated by molecular recognition was investigated in detail. Two complementary techniques, scanning force microscopy (SFM) and quartz crystal microbalance (QCM) were used to study adhesion of liposomes consisting of 1,2-dipalmitoyl-snglycero-3-phosphocholine and varying concentrations of N-((6-biotinoyl)amino)hexanoyl)-1,2-dihexadecanoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine (biotin-X-DHPE), Monitoring the adhesion of the receptor-doped vesicles to avidin-coated gold surfaces by QCM (f(o) = 5 MHz) revealed an increased shift in resonance frequency with increasing biotin concentration up to 10 mol% biotin-X-DHPE. To address the question of how the morphology of the liposomes changes upon adhesion and how that contributes to the resonator's frequency response, we performed a detailed analysis of the liposome morphology by SFM, We found that, with increasing biotin-concentration, the height of the liposomes decreases considerably up to the point where vesicle rupture occurs. Thus, we conclude that the unexpected high frequency shifts of the quartz crystal (>500 Hz) can be attributed to a firm attachment of the spread bilayers, in which the number of contacts is responsible for the signal. These findings are compared with one of our recent studies on cell adhesion monitored by QCM.

关键词： 1 2-二棕榈酰磷脂胆碱/化学 3-巯基丙酸硅酸铝类生物素/类似物和衍生物生物素/化学生物素化作用动力学脂质体/超微结构显微镜检查原子力/方法磷脂酰乙醇胺类/化学抗生蛋白链菌素热力学

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