检索结果-内蒙古大学图书馆

西北农业学报 2017年第3期26卷 463-470页

作者：范万泽薛应钰张树武徐秉良甘肃农业大学植物保护学院/甘肃省农作物病虫害生物防治工程实验室兰州730070

为探究拮抗放线菌ZZ-9(Streptomyces rochei)菌株发酵液的抑菌谱,并明确传代培养、温度、光照、pH及紫外线等理化因素对发酵液稳定性的影响。以15种植物病原真菌为供试菌,采用菌丝生长速率法测定发酵液的抑菌谱,并以苹果树腐烂病菌(Cyto... 详细信息

为探究拮抗放线菌ZZ-9(Streptomyces rochei)菌株发酵液的抑菌谱,并明确传代培养、温度、光照、pH及紫外线等理化因素对发酵液稳定性的影响。以15种植物病原真菌为供试菌,采用菌丝生长速率法测定发酵液的抑菌谱,并以苹果树腐烂病菌(Cytosporasp.)为指示菌,测定不同条件下发酵液的稳定性。抑菌谱结果表明:ZZ-9菌株发酵液对供试的15种病原真菌均具有不同程度的抑制作用,其中对苹果树腐烂病菌和立枯丝核菌抑制效果最好,生长抑制率可达96%以上,且效果持久;而对苹果轮纹病菌、蚕豆褐斑病菌、月季叶霉病菌等抑制效果较差,抑制率在27%以下。稳定性试验结果表明:菌株传接6代时,活性稳定,从第7代开始菌株活性下降显著;发酵液耐高温,对强酸强碱处理、可见光及紫外线照射均有较好的稳定性;且在4℃及室温(20~25℃)下可贮藏至少30d而保持其抑菌活性几乎不变。因此,拮抗放线菌ZZ-9菌株次生代谢产物具有较广谱的抑菌活性和较强的稳定性,具有开发成微生物农药的潜力。

关键词：拮抗放线菌发酵液抑菌谱稳定性

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展青霉素产生菌拮抗放线菌的分离、筛选与初步鉴定

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农业机械学报 2008年第3期39卷 86-89页

作者：朱从会师俊玲杨保伟令贞民王瑞西北农林科技大学食品科学与工程学院

毒素产生菌在苹果贮藏期间容易产生展青霉素,为此,从苹果园、猕猴桃园、菜园的土壤中分离出154株放线菌,从中筛选出对3株展青霉素产生菌有拮抗作用的放线菌4株,复筛选得到抑菌效果最好的1株(C16),对展青霉的抑菌直径达2.33cm。通过形态... 详细信息

毒素产生菌在苹果贮藏期间容易产生展青霉素,为此,从苹果园、猕猴桃园、菜园的土壤中分离出154株放线菌,从中筛选出对3株展青霉素产生菌有拮抗作用的放线菌4株,复筛选得到抑菌效果最好的1株(C16),对展青霉的抑菌直径达2.33cm。通过形态观察、生理生化特征等方面的检测,初步鉴定该菌株属于放线菌目(Actinomycetales)第Ⅷ科小单胞菌科(Micromonosporaceae)第Ⅵ属小多胞菌属(Micropolyspora)。

关键词：苹果展青霉素拮抗放线菌筛选鉴定

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拮抗放线菌KLBMP06061的鉴定及其对苹果轮纹病菌的抑菌作用

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江苏农业科学 2015年第12期43卷 138-143页

作者：周小琪曹成亮丁盼薛羚伟刘贵友蒋继宏江苏师范大学/江苏省药用植物生物技术重点实验室江苏徐州221116 江苏第二师范学院生命科学与化学化工学院江苏南京210013

对分离自新疆荒漠土壤的拮抗放线菌KLBMP06061进行菌种鉴定,并评估其对苹果轮纹病原真菌的生防潜力。结合培养形态特征、生理生化特性、16S r DNA序列比对分析确定菌种分类地位;采用平板对峙法进行拮抗活性筛选;采用孢子萌发法和生长速... 详细信息

对分离自新疆荒漠土壤的拮抗放线菌KLBMP06061进行菌种鉴定,并评估其对苹果轮纹病原真菌的生防潜力。结合培养形态特征、生理生化特性、16S r DNA序列比对分析确定菌种分类地位;采用平板对峙法进行拮抗活性筛选;采用孢子萌发法和生长速率法进一步分析菌株KLBMP06061发酵滤液的抑菌作用及抑菌活性稳定性。根据多相分类鉴定结果确定,菌株KLBMP06061为Streptomyces pratensis。拮抗活性筛选结果显示,该菌株具有较好的抑菌广谱性,尤其对苹果轮纹病原菌的菌丝生长、孢子萌发都有很强的抑制作用,抑菌率分别达到85.2%、94.0%,与50%多菌灵可湿性粉剂(100μg/m L)活性相当;抑菌活性稳定性研究表明,菌株KLBMP06061发酵滤液抑菌活性对热处理和紫外照射具有很好的稳定性,对蛋白酶处理不敏感,最适p H值范围为4~10。研究结果表明,菌株KLBMP06061具有活性高、抑菌谱广、抑菌活性稳定的特点,在生物防治中具有潜在的利用价值。

关键词：苹果轮纹病拮抗放线菌抑菌作用鉴定生物防治

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拮抗放线菌06-6的筛选鉴定及其发酵条件优化

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江苏农业科学 2014年第6期42卷 107-109页

作者：郝永丽宗兆锋高博胡海波曲宝茹内蒙古自治区赤峰市农牧科学研究院内蒙古赤峰024031 西北农林科技大学植保学院/陕西省农业分子生物学重点实验室陕西咸阳712100

从采集的土样中分离出拮抗放线菌,并筛选出对4种靶标菌均具有明显拮抗效果的菌株06-6,对该菌株进行发酵条件优化及生理生化鉴定,从而确定该菌株的最佳发酵技术参数,通过鉴定初步将其归类为灰红紫类群(Griseorubroviolaceus)。

关键词：拮抗放线菌筛选鉴定发酵条件优化

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一株农用拮抗放线菌的分离与鉴定

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中国烟草学报 2018年第6期24卷 138-143页

作者：陈倩倩边传红康业斌赵世民李淑君河南科技大学林学院洛阳471023 河南省烟草公司洛阳市公司洛阳471023 河南省农科院许昌烟草研究所许昌461000

为烟草土传病害生物防治研究提供菌株资源,采用稀释平板法分离洛阳地区烟草根际土壤样品中的优势拮抗放线菌,平板对峙培养法与抑制菌丝生长速率法测定放线菌菌株的拮抗作用,16S rDNA分析鉴定菌株种类。结果表明:从烟草根际土壤中共分离... 详细信息

为烟草土传病害生物防治研究提供菌株资源,采用稀释平板法分离洛阳地区烟草根际土壤样品中的优势拮抗放线菌,平板对峙培养法与抑制菌丝生长速率法测定放线菌菌株的拮抗作用,16S rDNA分析鉴定菌株种类。结果表明:从烟草根际土壤中共分离、纯化获得108个放线菌单菌落,其中22株对瓜果腐霉、烟草疫霉、尖孢镰刀菌的至少一种有拮抗作用,菌株SA74对3种病原真菌的抑菌率均大于50%。根据形态特征、生理生化特性及16S rDNA序列分析,该菌株被鉴定为金黄垂直链霉菌(Streptomyces aureoverticillatus)。

关键词：烟草土传病原真菌拮抗放线菌金黄垂直链霉菌

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拮抗放线菌LJ50和MJ52的分离与初步鉴定

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湖南农业大学学报（自然科学版） 2005年第3期31卷 310-313页

作者：李毅王国平张克诚湖南农业大学生物安全科技学院湖南长沙410128 中国农业科学院植物保护研究所北京100094

采用常规方法从3种蔬菜地土壤中筛选出2株对棉花黄萎病菌具有拮抗作用的放线菌LJ50和MJ52,通过传统的形态特征和部分生理生化测定,这2株拮抗放线菌属链霉菌属的白孢类群.离体条件下这2株拮抗放线菌的发酵液对棉花黄萎病菌、苹果轮纹病... 详细信息

采用常规方法从3种蔬菜地土壤中筛选出2株对棉花黄萎病菌具有拮抗作用的放线菌LJ50和MJ52,通过传统的形态特征和部分生理生化测定,这2株拮抗放线菌属链霉菌属的白孢类群.离体条件下这2株拮抗放线菌的发酵液对棉花黄萎病菌、苹果轮纹病菌、黄瓜炭疽病菌、棉花立枯病菌、番茄灰霉病菌、小麦赤霉病菌、黄瓜枯萎病菌、西瓜枯萎病菌等8种病原真菌均具有抑制作用.

关键词：拮抗放线菌分离鉴定

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拮抗放线菌S-091菌株的发酵条件

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沈阳农业大学学报 2014年第2期45卷 209-212页

作者：朱茂山张泽华吕振环沈阳农业大学沈阳110161 辽宁省农业科学院植物保护研究所沈阳110161 中国农业科学院植物保护研究所北京100193

为提高拮抗放线菌S-091菌株发酵液的抑菌活性,对其发酵培养的营养及环境条件进行研究。用番茄灰霉病菌作为抑菌活性测定的靶标菌,分别测定该菌株发酵培养基营养成分中不同种类的碳源、氮源、微量元素等物质以及发酵温度、培养基初始pH... 详细信息

为提高拮抗放线菌S-091菌株发酵液的抑菌活性,对其发酵培养的营养及环境条件进行研究。用番茄灰霉病菌作为抑菌活性测定的靶标菌,分别测定该菌株发酵培养基营养成分中不同种类的碳源、氮源、微量元素等物质以及发酵温度、培养基初始pH值、装液量、摇床转速等不同的发酵条件下菌株发酵液对靶标菌抑制作用的大小,以筛选出最适宜S-091菌株发酵培养的营养组成和环境条件。结果表明:在营养条件方面,可溶性淀粉和花生饼粉是菌株产抗生素的较优碳源和氮源营养;多种微量元素中KCl对菌株抗生素产生有明显的促进作用;在发酵环境条件方面,S-091菌株抗生素产生的较优培养温度为32℃,pH值为7,摇床转数为140r·min-1,适宜的装液量为250mL三角瓶装液100mL,最适宜的发酵时间为7d。

关键词：拮抗放线菌发酵条件拮抗活性

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拮抗放线菌的筛选及其生物有机肥对番茄青枯病的防控效果

拮抗放线菌的筛选及其生物有机肥对番茄青枯病的防控效果

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作者：李美芸南京农业大学

学位级别：硕士

番茄青枯病作为一种世界范围内的毁灭性土传病害,对我国番茄生产造成了巨大的损失,因此,迫切需要探索有效防控番茄青枯病的措施。生物防控作为控制植物病害的有效措施,近年来受到人们的高度重视。放线菌作为活性天然物质和药物的主要微... 详细信息

番茄青枯病作为一种世界范围内的毁灭性土传病害,对我国番茄生产造成了巨大的损失,因此,迫切需要探索有效防控番茄青枯病的措施。生物防控作为控制植物病害的有效措施,近年来受到人们的高度重视。放线菌作为活性天然物质和药物的主要微生物来源,是人们最早研究并应用到生产实践中的生防微生物。许多研究表明,拮抗微生物和有机肥料结合制备的生物有机肥比单一的拮抗微生物菌剂能更有效地防控植物土传病害。本研究从多年连作的番茄根际土壤中分离筛选得到一株对番茄青枯菌(*** ZJ3721)(简称青枯菌)具有显著抑制作用的放线菌菌株,对其进行鉴定,优化发酵条件,并制备放线菌生物有机肥,验证其对番茄青枯病的实际防控效果。主要研究结果如下:1.采取江苏省南京市麒麟镇的番茄连作土壤样品,以本实验室保存的番茄青枯菌*** ZJ3721为指示菌,初筛分离纯化得到6株对番茄青枯病菌有较好拮抗效果的放线菌菌株,分别编号为F5、F6、F14、F18、F27、F41,其中菌株F6、F18表现出最强的抑菌作用。通过比较各菌株发酵滤液对番茄青枯菌的抑菌作用进行复筛,选择菌株F18作为实验菌株。菌株F18除对番茄青枯菌具有抑制作用之外,还对大丽轮枝菌,烟草根腐病病原菌,黄瓜、棉花、香蕉枯萎病菌均具有较强的抑制作用。2.通过对放线菌F18的形态及培养特征观察、生理生化特性测定,以及16SrRNA基因序列分析,菌株F18属于链霉菌属Streptomyces。3.通过对菌株F18液体发酵培养基成分和发酵条件进行优化发现,最适培养基成分为:可溶性淀粉 1%,大豆蛋白胨 0.4%,K2HPO4 0.05%,MgS04 0.05%,NaCl 0.05%,FeS040.01‰。使用有机氮源的发酵液比使用无机氮源表现出更强的抑菌活性。最适发酵条件为:pH8;培养温度28℃;装液量65mL/250mL;接种量6%;摇床转速180rpm;发酵时间132h。发酵条件优化后培养得到的发酵滤液对番茄青枯菌的抑菌能力进一步提高。菌株F18产生的抑菌活性物质主要为胞外代谢产物,水溶性强,可溶于甲醇和乙醇,难溶于其他有机溶剂。4.本试验研究发现加入体积质量比为10%的氨基酸酸解液的有机肥有利于菌株F18的生长繁殖和抑菌活性物质的产生,在堆肥中加入氨基酸酸解液5天后接入F18菌悬液,菌株F18的生长状况最好。盆栽和田间试验结果表明,氨基酸有机肥有利于菌株F18在土壤中的定殖,含有菌株F18的生物有机肥对青枯菌具有一定的抑制作用,并对植物生长具有一定的促进作用,对番茄青枯病表现出较好的防控效果,且防控效果优于单纯向土壤里灌施F18菌悬液。

关键词：番茄青枯病拮抗放线菌生物有机肥抑菌活性物质发酵条件

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拮抗放线菌筛选、鉴定及发酵条件研究

拮抗放线菌筛选、鉴定及发酵条件研究

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作者：李辉华南农业大学

学位级别：硕士

本研究从广东省湛江、广州和肇庆等地区水果园和蔬菜地采集土壤43份并分离获得放线菌212株。以荔枝霜疫霉病菌(Peronophypthora litchii)和香蕉炭疽病菌(Colletotrichum musae)为靶标菌,采用平板对峙法和生长速率法相结合对其进行初步... 详细信息

本研究从广东省湛江、广州和肇庆等地区水果园和蔬菜地采集土壤43份并分离获得放线菌212株。以荔枝霜疫霉病菌(Peronophypthora litchii)和香蕉炭疽病菌(Colletotrichum musae)为靶标菌,采用平板对峙法和生长速率法相结合对其进行初步筛选和再次筛选,筛选获得6株具有拮抗活性的放线菌,其中放线菌MY-5拮抗活性最强,抑菌带分别宽达13.75 mm和11.00mm,菌丝生长抑制率为52.17%和48.22%。\n 对拮抗放线菌MY-5进行了形态学特征、培养特征、生理生化特征和分子生物学鉴定。形态学特征观察结果分析,该菌气生菌丝多分枝,孢子椭圆形,表面光滑,表明该菌株属于链霉菌属。分子鉴定结果表明,在以16SrDNA序列为基础构建的系统发育树中,拮抗放线菌MY-5与密旋链霉菌(Streptomyces pactum)和冰城链霉菌(Streptomyces bingchengensis)聚成一支,亲缘关系较近。培养特征结果表明,拮抗放线菌MY-5具有明显的\"吸水\"现象,但在基内菌丝颜色方面与密旋链霉菌不同。生理生化特征方面,拮抗放线菌MY-5与冰城链霉菌在木糖和鼠李糖利用方面存在明显差异。综合分析,初步鉴定拮抗放线菌MY-5为链霉菌属吸水类群(Streptomyceshygroscopicus)。\n 拮抗放线菌MY-5抗菌物质粗提液经热、酸、碱、紫外线、蛋白酶K和氯仿处理,其抗菌作用稳定性结果表明,加热、酸碱处理、紫外线照射、蛋白酶K和氯仿都会影响拮抗放线菌MY-5抗菌物质粗提液的抑菌活性,经100℃保温处理60 min,抗菌物质粗提液的抑菌活性完全丧失;抗菌物质粗提液的抑菌活性在发酵液原始pH(6)下最稳定,偏碱性条件的稳定性稍高于偏酸性条件;抗菌物质粗提液对紫外照射和蛋白酶K处理稳定,而对氯仿处理较敏感。\n 以拮抗放线菌MY-5无菌发酵液抑菌活性为主要指标,研究了发酵培养基中不同碳源、氮源、C/N、无机盐等营养因子,以及接种量、装液量、初始pH、发酵时间等非营养因子对拮抗放线菌MY-5无菌发酵液抑菌活性的影响。对香蕉炭疽病菌和荔枝霜疫霉病菌的抑菌测定结果表明,发酵培养基最佳碳源为葡萄糖,氮源为黄豆粉,适宜C/N为4.13:1,添加无机盐的种类为碳酸钙和氯化钠时,拮抗放线菌MY-5无菌发酵液抑菌活性较高。正交试验结果表明,发酵培养基各组分的最佳配比(质量分数)为:葡萄糖1%,黄豆粉1%,碳酸钙0.06%,氯化钠0.1%。拮抗放线菌MY-5发酵的优化条件为:初始pH6.0～7.0,发酵培养时间96 h(发酵液pH8.5),接种量(体积分数)6%～10%,装液量60mL～80mL/250 mL,摇床转速180r/min。\n 测定拮抗放线菌MY-5的孢子悬浮液、上清液、孢子液、抗菌物质粗提液和300μg/mL抑霉唑以及清水对照对采后柑橘接种绿霉病(Penicillium digitatum)、番茄接种灰霉病(Botrytis cinerea)和香蕉炭疽病(Colletotrichum musae)的抑制效果。其中,抑霉唑抑制效果最好,拮抗放线菌MY-5孢子悬浮液和无菌发酵液的抑制效果次之。清水对照对柑橘的发病率为96.89%,病斑直径为25.62mm;而经抑霉唑处理的柑橘发病率为10%,病斑直径为4mm;经孢子悬浮液和无菌滤液处理的柑橘的发病率分别为16.74%和18.73%,病斑直径分别为6.03mm和6.86mm。孢子液和上清液与清水对照相比亦有显著的防病效果,但防效差于孢子悬浮液和无菌发酵液。

关键词：拮抗放线菌稳定性发酵条件抑制作用培养特征亲缘关系

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拮抗放线菌W7的筛选、鉴定及次生代谢产物的研究

拮抗放线菌W7的筛选、鉴定及次生代谢产物的研究

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作者：王守彬曲阜师范大学

学位级别：硕士

放线菌是具有巨大实用价值的一类微生物，利用其产生抗生素制备的新型农药，具有无污染、无残留、可再生等特点，有效地避免了化学农药带来的诸多环境问题，是未来开发农药的方向。但就其数量、质量和品种而言，仍然不能满足生产发展的... 详细信息

放线菌是具有巨大实用价值的一类微生物，利用其产生抗生素制备的新型农药，具有无污染、无残留、可再生等特点，有效地避免了化学农药带来的诸多环境问题，是未来开发农药的方向。但就其数量、质量和品种而言，仍然不能满足生产发展的需求，因此寻找新型菌种已成为放线菌领域的研究重点。青海生态条件复杂而独特，决定了放线菌资源的独特性，为分离筛选新型菌种提供了可能。本研究从青海高原枸杞根际土壤中进行拮抗放线菌的分离、纯化，最终获得一株对多种细菌具有抑菌活性的放线菌，对其进行鉴定，并对其发酵条件、活性物质进行初步研究，主要研究结果如下： 1.共获得90株形态、颜色各异的菌株，采用琼脂块法与杯碟法相结合进行初筛和复筛，最终获得一株抑菌活性较好的菌株，将其命名为W7。该菌株对短小芽孢杆菌、产气杆菌、金黄色葡萄球菌、地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、绿脓杆菌均具有抑菌活性，其中对金黄色葡萄球菌的抑菌活性最强，抑菌圈直径达到20mm以上，对真菌效果不明显。以青霉素为标准品，通过二剂量法测得该菌株发酵液的效价为2.452u/ml。 2.通过点滴法与叶片夹毒法发现菌株W7发酵产物对试虫具有较好的触杀活性和胃毒活性，且触杀活性好于胃毒活性。 3.综合形态学特征、生理生化特征及16SrDNA序列分析对放线菌W7进行分类鉴定，将其初步鉴定为Streptomyces aurantiacus的一个变种。 4.通过单因素和正交试验相结合对菌株W7的发酵培养条件进行优化，结果表明最优发酵工艺条件为：初始pH为8，装液量为75ml/300ml，发酵温度为28℃，接种量为4ml，转速为140-180r/min，发酵时间为168h。最优培养基为玉米粉2%，酵母粉0.6%，磷酸氢二钾0.075%，氯化钠0.025%，硫酸镁0.05%，硫酸亚铁0.002%。 5.对菌株W7发酵液中活性物质的稳定性进行了研究。经121℃高压处理20min后，发酵液的抑菌圈直径为16.8mm，经紫外照射6h后，发酵液的抑菌圈直径仍然达到17mm，在pH4～10的酸碱处理下，发酵液的抑菌活性无明显下降，但pH为2时，抑菌圈大小为15.7mm,pH为14时抑菌圈直径为12.6mm，经8周时间的室温保存，发酵液的活性没有出现明显下降。以上结果说明发酵液具有良好的酸碱、紫外照射、储藏及热稳定性，但在强酸强碱条件下不稳定。 6.采用有机溶剂对发酵液萃取发现，活性物质可以被正丁醇、乙酸乙酯、氯仿萃取，且极性越强，有机相分配率越高，而石油醚、苯不能，该物质可能是一种中高度极性抗生素；pH层析结果显示随着pH的增大，活性物质的Rf值呈递减趋势，与酸性抗生素的层析图谱相符，说明该活性物质为酸性；发酵液粗提物经紫外全波段扫描在295nm处有最大吸收峰，薄层层析并生物显影后有一个椭圆的抑菌圈，说明该活性物质可能为单一成分。

关键词：拮抗放线菌分离鉴定发酵条件优化抑菌活性物质

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