检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病理生理杂志 2025年第1期41卷 173-180页

作者：张莹莹王楚雯钱国清宁波大学医学部浙江宁波315211 宁波大学附属第一医院浙江宁波315211

规律成簇间隔短回文重复序列(CRISPR)/CRISPR相关蛋白9(Cas9)技术操作简易、高效,适用性强,在探究呼吸道潜在机制中具有独特优势。支气管上皮细胞是肺部防御的物理屏障,其损伤或功能缺失是慢性气道疾病的发病基础。近年来,慢性气道疾病... 详细信息

规律成簇间隔短回文重复序列(CRISPR)/CRISPR相关蛋白9(Cas9)技术操作简易、高效,适用性强,在探究呼吸道潜在机制中具有独特优势。支气管上皮细胞是肺部防御的物理屏障,其损伤或功能缺失是慢性气道疾病的发病基础。近年来,慢性气道疾病发病率升高,但治疗进展相对缓慢,亟需找到治疗的突破口。CRISPR/Cas9系统可以进行精准基因编辑,为慢性气道疾病提供新策略。本文从CRISPR/Cas9的多种递送方式和作用机制出发,对其在原代、永生化支气管上皮细胞和动物体内的应用与进展进行概述,探讨了其发展前景和面临的挑战,以期为未来应用该技术进行气道疾病治疗提供参考。

关键词： CRISPR/Cas9系统支气管上皮细胞基因编辑

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大黄素通过NF-κB信号通路改善香烟烟雾提取物诱导的人支气管上皮细胞损伤

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临床肺科杂志 2025年第3期30卷 383-389页

作者：王欢张暮盈西安市中医医院肺病科陕西西安710021 陕西中医药大学附属医院呼吸与危重症医学科陕西咸阳712000

目的探讨大黄素对香烟烟雾提取物(CSE)诱导的人支气管上皮细胞损伤的作用及机制。方法培养人支气管上皮细胞16HBE,使用CSE和不同剂量的大黄素处理细胞,分成对照组、模型组(使用CSE进行诱导)、大黄素低剂量组(CSE诱导+20μg/mL大黄素)、... 详细信息

目的探讨大黄素对香烟烟雾提取物(CSE)诱导的人支气管上皮细胞损伤的作用及机制。方法培养人支气管上皮细胞16HBE,使用CSE和不同剂量的大黄素处理细胞,分成对照组、模型组(使用CSE进行诱导)、大黄素低剂量组(CSE诱导+20μg/mL大黄素)、大黄素中剂量组(CSE诱导+40μg/mL大黄素)、大黄素高剂量组(CSE诱导+80μg/mL大黄素);CCK8实验检测细胞活力;ELISA试剂盒检测SOD、MDA、TNF-α、IL-6水平;流式细胞术检测细胞凋亡情况;铁离子试剂盒检测细胞铁离子水平;Western Blot检测铁死亡相关蛋白GPX4以及NF-κB信号通路相关蛋白P65和p-P65蛋白表达。结果与对照组比较,模型组细胞活力显著下降(P<0.001),细胞培养液上清中MDA、IL-6、TNF-α以及细胞中细胞凋亡率及铁离子水平明显升高(P<0.001),细胞中GPX4蛋白水平降低(P<0.001),p-P65蛋白表达升高(P<0.001);与模型组比较,大黄素低、中、高剂量组均可增加细胞活力(P<0.05或P<0.001),降低细胞培养液上清中MDA、IL-6、TNF-α及细胞中细胞凋亡率和铁离子水平(P<0.01或P<0.001),促进GPX4蛋白表达(P<0.05或P<0.001),抑制p-P65蛋白表达(P<0.001),以上作用呈剂量依赖性。结论大黄素可能通过抑制NF-κB信号通路抑制CSE诱导的16HBE氧化应激、炎症反应、凋亡和铁死亡,提高细胞活力,进而改善CSE诱导的慢阻肺。

关键词：大黄素慢性阻塞性肺疾病 NF-κB信号通路支气管上皮细胞

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苏子-半夏对支气管上皮细胞气道黏液高分泌的影响

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山西中医 2025年第2期41卷 58-60,68页

作者：章澳彭朗萍谭卫刘雨谭光波湖南中医药大学长沙410208 湖南省中西医结合医院

目的:探讨苏子-半夏调控支气管上皮细胞黏液高分泌的机制。方法:制备15%苏子-半夏含药血清、甲泼尼龙溶液,采用10%CSE和20 ng/mL脂多糖溶液构建人支气管上皮细胞黏液高分泌模型。按照药物干预分为正常组、模型组、苏子-半夏组、甲泼尼龙... 详细信息

目的:探讨苏子-半夏调控支气管上皮细胞黏液高分泌的机制。方法:制备15%苏子-半夏含药血清、甲泼尼龙溶液,采用10%CSE和20 ng/mL脂多糖溶液构建人支气管上皮细胞黏液高分泌模型。按照药物干预分为正常组、模型组、苏子-半夏组、甲泼尼龙组,电子显微镜下观察细胞形态,采用CCK-8法检测支气管上细胞细胞活性,WB法检测网络药理学预测的表皮生长因子受体(EGFR)、肿瘤坏死因子(TNF-α)的蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组细胞活性降低(P﹤0.05),与模型组比较,苏子-半夏组中细胞活性升高(P﹤0.05)。与正常组比较,模型组中EGFR、TNF-α的蛋白表达明显增多(P﹤0.05),提示支气管上皮细胞粘液高分泌模型造模成功。与模型组比较,苏子-半夏组、甲泼尼龙组EGFR、TNF-α蛋白表达明显降低(P﹤0.05)。结论:苏子-半夏可以明显降低EGFR、TNF-α的蛋白表达,其调控支气管上皮细胞黏液高分泌机制可能与EGFR、TNF-α蛋白有关。

关键词：气道黏液高分泌苏子-半夏支气管上皮细胞实验研究

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牛蒡子苷元对铜绿假单胞菌感染的支气管上皮细胞损伤的影响

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中国临床药理学杂志 2025年第06期 772-776页

作者：徐燕王凯沈萍江南大学附属儿童医院检验科江南大学附属儿童医院呼吸内科

目的探讨牛蒡子苷元对铜绿假单胞菌（PA）感染的支气管上皮细胞损伤的影响及其机制。方法将BEAS-2B细胞随机分为对照组（常规培养）、PA组(1.50×10～8CFU·mL-1的PA菌液感染)、PA+低剂量组(PA菌液联合10.00 mmol·L-1的... 详细信息

目的探讨牛蒡子苷元对铜绿假单胞菌（PA）感染的支气管上皮细胞损伤的影响及其机制。方法将BEAS-2B细胞随机分为对照组（常规培养）、PA组(1.50×10～8CFU·mL-1的PA菌液感染)、PA+低剂量组(PA菌液联合10.00 mmol·L-1的牛蒡子苷元)、PA+高剂量组(PA菌液联合20.00 mmol·L-1的牛蒡子苷元)。用试剂盒法检测细胞炎性因子及谷胱甘肽（GSH）表达，用蛋白质印迹法检测谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）蛋白表达情况，用免疫荧光法检测脂质过氧化水平。结果对照组、PA组、PA+低剂量组、PA+高剂量组的白细胞介素（IL）-6含量分别为（20.43±2.82）、（106.28±8.07）、（76.66±5.73）和（50.57±3.98）pg·mL-1,GSH含量分别为（25.95±1.46）、（10.59±0.60）、（13.98±0.74）和（21.52±2.36）ng·mL-1,GPX4蛋白相对表达水平分别为0.76±0.06、0.33±0.05、0.46±0.05和0.62±0.06,脂质过氧化水平分别为（100.00±4.29）%、（470.91±36.33）%、（331.16±27.04）%和（160.16±18.65）%;PA组的上述指标分别与对照组比较，在统计学上差异均有统计学意义（均P<0.01）,PA+低剂量组、PA+高剂量组的上述指标分别与PA组比较，在统计学上差异均有统计学意义（均P<0.01）。结论牛蒡子苷元可以通过抑制GPX4相关铁死亡途径减轻PA感染的BEAS-2B细胞炎症反应。

关键词：牛蒡子苷元铜绿假单胞菌支气管上皮细胞铁死亡谷胱甘肽过氧化物酶4

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熊去氧胆酸改善甲苯二异氰酸酯诱导的支气管上皮细胞损伤的作用

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中国临床药理学杂志 2025年第5期 654-659页

作者：倪衍平苏健斌泉州市第一医院药剂科

目的探讨熊去氧胆酸改善甲苯二异氰酸酯（TDI）诱导的支气管上皮细胞损伤的作用及机制。方法将BEAS-2B细胞随机分为对照组（常规培养）、TDI-人血清白蛋白（HSA）组(120.00 mg·L-1TDI-HSA)、低剂量组(100μmol·L-1熊去氧胆... 详细信息

目的探讨熊去氧胆酸改善甲苯二异氰酸酯（TDI）诱导的支气管上皮细胞损伤的作用及机制。方法将BEAS-2B细胞随机分为对照组（常规培养）、TDI-人血清白蛋白（HSA）组(120.00 mg·L-1TDI-HSA)、低剂量组(100μmol·L-1熊去氧胆酸+120.00 mg·L-1TDI-HSA)、高剂量组(200μmol·L-1熊去氧胆酸+120.00 mg·L-1TDI-HSA)、西罗莫司组(25 nmol·L-1西罗莫司+120.00 mg·L-1TDI-HSA)。用实时荧光定量聚合酶链反应、酶联免疫吸附试验法检测细胞炎性因子的表达，用DCFH-DA法检测活性氧（ROS）水平，用蛋白质印迹实验检测各细胞蛋白的相对表达水平。结果对照组、TDI-HSA组、低剂量组和高剂量组的白细胞介素（IL）-6 mRNA相对表达水平分别为1.00±0.13、2.20±0.24、1.87±0.12和1.48±0.14,IL-8水平分别为（22.65±1.96）、（81.42±6.35）、（56.36±5.88）和（38.28±3.25）pg·mL-1,ROS水平分别为（100.00±3.47）%、（351.25±22.52）%、（312.80±26.59）%和（242.15±13.60）%,线粒体动力相关蛋白1（DRP1）蛋白相对表达水平分别为0.23±0.03、0.82±0.08、0.69±0.10和0.55±0.05,苄氯素1（Beclin1）蛋白相对表达水平分别为0.23±0.04、0.60±0.07、0.44±0.04和0.37±0.03,磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（p-AMPK）蛋白相对表达水平分别为0.20±0.05、0.49±0.05、0.40±0.03和0.34±0.04;高剂量组和西罗莫司组的Beclin1蛋白相对表达水平分别为0.35±0.04和0.69±0.07,IL-6水平分别为（17.63±1.36）和（29.52±3.49）pg·mL-1,IL-18水平分别为（65.22±5.30）和（95.58±6.80）pg·mL-1。TDI-HSA组的上述指标与对照组比较，低、高剂量组的上述指标分别与TDI-HSA组比较，西罗莫司组的上述指标与高剂量组比较，在统计学上差异均有统计学意义（均P<0.05）。结论熊去氧胆酸可能介导ROS/AMPK/自噬通路改善TDI-HSA诱发的炎症反应和线粒体功能障碍。

关键词：熊去氧胆酸哮喘甲苯二异氰酸酯支气管上皮细胞炎症反应自噬

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支气管上皮细胞在气道高反应中的作用(英文)

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生理学报 2007年第4期59卷 454-464页

作者：秦晓群向阳刘持谭宇蓉屈飞彭丽花朱晓琳秦岭中南大学湘雅医学院生理学系长沙410078

气道高反应的发病机制目前仍然不清楚,但大多数人认同是气道的一种慢性炎症。近十年来,上皮缺陷学说逐渐成为解释气道高反应机制的主流观点。气道上皮不再被仅仅看作为单纯的机械屏障,而是机体内环境与外部环境相互作用的界面。气道上... 详细信息

气道高反应的发病机制目前仍然不清楚,但大多数人认同是气道的一种慢性炎症。近十年来,上皮缺陷学说逐渐成为解释气道高反应机制的主流观点。气道上皮不再被仅仅看作为单纯的机械屏障,而是机体内环境与外部环境相互作用的界面。气道上皮具有广泛的生理作用,包括抗氧化、内分泌和外分泌、黏液运输、生物代谢、结构性黏附、损伤修复、应激或炎症信号传递、抗原递呈作用等。借助这些生理作用,支气管上皮细胞在气道局部微环境稳态维持中发挥重要作用。有理由相信,气道上皮的结构完整性缺陷或功能紊乱是哮喘和慢性阻塞性肺疾病等气道高反应性疾病的启动环节。

关键词：支气管上皮细胞气道高反应性

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支气管上皮细胞IL-6和IL-8的表达

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上海第二医科大学学报 2005年第7期25卷 694-697页

作者：汤葳陈雪华张奕邓伟吾上海第二医科大学瑞金医院呼吸内科上海200025 上海第二医科大学瑞金医院上海消化外科研究所

目的以支气管上皮细胞株BEAS-2B细胞为研究对象,观察在Th2型细胞因子和促炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNFα)的作用下,IL-8和IL-6的表达变化。方法通过RT-PCR方法测定Th2型细胞因子IL-4、IL-13以及促炎症因子TNFα单独和协同刺激下BEAS-2B... 详细信息

目的以支气管上皮细胞株BEAS-2B细胞为研究对象,观察在Th2型细胞因子和促炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNFα)的作用下,IL-8和IL-6的表达变化。方法通过RT-PCR方法测定Th2型细胞因子IL-4、IL-13以及促炎症因子TNFα单独和协同刺激下BEAS-2B细胞IL-8和IL-6的基因表达;通过ELISA方法测定细胞培养上清液中蛋白质的表达。结果在IL-4、IL-13和促炎症因子TNFα的单独刺激下,IL-6和IL-8的基因和蛋白质表达均较未刺激组显著增高;但IL-4、IL-13和TNFα协同刺激后,IL-8的基因和蛋白质表达进一步增高,而IL-6反而降低。结论支气管上皮细胞在TNFα和Th2型细胞因子的协同刺激下,通过调节IL-6和IL-8的表达,进一步调节嗜酸粒细胞性和非嗜酸粒细胞性炎症。

关键词： IL-6 IL-8 肿瘤坏死因子-α 支气管上皮细胞

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环境致癌物二羟环氧苯并[α]芘诱导支气管上皮细胞恶性转化的机制

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生物化学与生物物理进展 2024年第12期51卷 3207-3223页

作者：尹张雅李聪亚竹俊兰宁波大学医学部宁波315211 宁波市北仑区人民医院精准医学研究中心宁波315800 临海市第二人民医院检验科台州317016

苯并[α]芘(benzo[α]pyrene, B[α]P)是一种常见的环境致癌物,主要来源于工业生产和生活过程中煤炭、石油和天然气等燃料不完全燃烧产生的烟气等,其在体内经过一系列代谢反应,最终生成活性代谢物二羟环氧苯并[α]芘(B[α]PDE)从而发挥... 详细信息

苯并[α]芘(benzo[α]pyrene, B[α]P)是一种常见的环境致癌物,主要来源于工业生产和生活过程中煤炭、石油和天然气等燃料不完全燃烧产生的烟气等,其在体内经过一系列代谢反应,最终生成活性代谢物二羟环氧苯并[α]芘(B[α]PDE)从而发挥强致癌作用。B[α]PDE与DNA碱基共价结合形成B[α]PDE-DNA加合物,引起DNA碱基突变,诱导支气管上皮细胞恶性转化,最终形成肿瘤。B[α]PDE亦可通过激活相关信号转导通路调控原癌基因、抑癌基因的表达或沉默,干扰DNA修复功能,导致细胞代谢及细胞周期紊乱从而诱导肺癌的发生发展。B[α]PDE也可以通过组蛋白修饰、DNA甲基化、mi RNA、多聚ADP核糖甘油水解酶、代谢重编程、lnc RNA等表观遗传变异来诱导支气管上皮细胞恶性转化。深入研究B[α]PDE诱导支气管上皮细胞恶性转化的机制,可以为潜在的抗肿瘤药物研发靶点研究提供理论依据,有利于指导污染环境及烟雾环境暴露下肺癌的防治措施,也为禁烟控烟的健康中国措施提供理论支持。

关键词： B[α]PDE 支气管上皮细胞恶性转化肺癌表观遗传变异

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支气管上皮细胞参与哮喘炎症的研究

支气管上皮细胞参与哮喘炎症的研究

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作者：汤葳上海第二医科大学上海交通大学

学位级别：博士

第一部分:哮喘患者IgE基因表达及卡介苗的治疗作用目的:通过体外模拟IgE产生的适宜环境,观察卡介苗多糖核酸对哮喘患者外周血单个核细胞表达IgE基因的影响.结论:卡介苗多糖核酸可以降低哮喘患者外周血产生IgE基因的表达,同时不影响细胞... 详细信息

第一部分:哮喘患者IgE基因表达及卡介苗的治疗作用目的:通过体外模拟IgE产生的适宜环境,观察卡介苗多糖核酸对哮喘患者外周血单个核细胞表达IgE基因的影响.结论:卡介苗多糖核酸可以降低哮喘患者外周血产生IgE基因的表达,同时不影响细胞的增殖和活力,为卡介苗用于哮喘等过敏性疾病的治疗提供进一步的依据.第二部分:支气管上皮细胞参与哮喘炎症的研究目的:支气管上皮细胞不仅是在支气管哮喘炎症反应中最主要的受累器官,也是导致炎症的参与者之一.为了进一步阐明支气管上皮细胞在参与哮喘炎症中的作用,以支气管上皮细胞株为研究对象,在以Th2型细胞因子为主的气道炎症微环境中,研究该细胞表达相应细胞因子和趋化因子方面的变化.结论:该研究通过对支气管上皮细胞的研究证实了支气管上皮细胞可以在炎症因子TNF-α和Th2型细胞因子的协同刺激下进一步表达eotaxin和eotaxin-2参与嗜酸粒细胞浸润;支气管上皮细胞还可以通过TNF-α的刺激表达IL-5特异性受体IL-5R α,并在IL-5和TNF α的刺激下进一步表达黏附分子VCAM-1,吸引嗜酸粒细胞及其前体细胞浸润至气道参与炎症.支气管上皮细胞在TNF-α和Th2型细胞因子的协同刺激下还可以通过调节IL-6和IL-8的表达调节非嗜酸粒细胞性炎症.

关键词：基因表达卡介苗多糖核酸支气管上皮细胞支气管哮喘炎症反应

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支气管上皮细胞与中性粒细胞混合培养诱导细胞表面黏附蛋白产生的机制研究

支气管上皮细胞与中性粒细胞混合培养诱导细胞表面黏附蛋白产生的...

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作者：唐红卫中国人民解放军医学院

学位级别：硕士

目的：1.构建支气管上皮细胞（BEAS-2B cells）和中性粒细胞（Neutrophils；NEU）混合培养体系。2.探讨支气管上皮细胞与中性粒细胞相互作用时，诱导细胞表面粘附分子表达及细胞因子（IL-6、IL-8）分泌的机制。方法：1.采用免疫磁珠阳... 详细信息

目的：1.构建支气管上皮细胞（BEAS-2B cells）和中性粒细胞（Neutrophils；NEU）混合培养体系。2.探讨支气管上皮细胞与中性粒细胞相互作用时，诱导细胞表面粘附分子表达及细胞因子（IL-6、IL-8）分泌的机制。方法：1.采用免疫磁珠阳选法分离纯化人外周血中性粒细胞，与支气管上皮细胞混合培养，构建实验体系。2.实验随机分成6组：①：单独培养的支气管上皮细胞组（BEAS-2B组）；②单独培养的中性粒细胞组（Neutrophils组）；③支气管上皮细胞和中性粒细胞混合培养组（BEAS-2B+Neutrphils组）；④混合培养并加入抑制剂SB203580组（B+N+SB203580组）；⑤混合培养并加入抑制剂MG-132组（B+N+MG-132组）；⑥混合培养并加入抑制剂SB203580和MG-132组（B+N+SB203580+MG-132组）。3.应用流式细胞术（FCM）检测BEAS-2B细胞和NEU细胞表面粘附分子（ICAM-1、ICAM-3和VCAM-1）的表达；应用westernblot技术检测BEAS-2B细胞内NF-KB及p38MAPK通路的激活；应用Real-timePCR法检测上述细胞中ICAM-1、ICAM-3和VCAM-1的基因表达；应用RocheCobas e411和ELISA技术检测细胞培养上清液中IL-6和IL-8的分泌。结果:1.用免疫磁珠阳选法可以分离得到纯度>98%、活力>98%的中性粒细胞。***-2B细胞表面粘附分子的表达：BEAS-2B细胞和NEU细胞混合培养，BEAS-2B细胞表面粘附分子ICAM-1、ICAM-3、VCAM-1的表达较其单独培养时明显增高；加入抑制剂后，三种粘附分子的表达均有明显减低；ICAM-3、VCAM-1对两种抑制剂的敏感程度并无明显差异，且未发现两种抑制剂间的相互作用；MG-132对ICAM-1的抑制作用明显强于SB203580，并且两种抑制剂联合使用可进一步降低ICAM-1的表达。3.中性粒细胞表面粘附分子的表达：BEAS-2B细胞和NEU细胞混合培养，中性粒细胞表面ICAM-1的表达较其单独培养时明显增高；加入抑制剂（SB203580、MG-132）表达量明显下降。4.与BEAS-2B细胞单独培养组相比，混合培养组BEAS-2B细胞ICAM-1、ICAM-3、VCAM-1的基因表达水平明显上调；与单独培养NEU细胞相比，混合培养组ICAM-1的基因表达水平也明显上调。*** blot结果显示BEAS-2B细胞与NEU细胞混合培养可以诱导BEAS-2B细胞体内Phospho-IKB及Phospho-P38MAPK蛋白的表达。***-2B细胞与NEU细胞混合培养时，细胞培养上清液中IL-6的表达量明显增加，加入抑制剂（SB203580、 MG-132）均可抑制IL-6的分泌，且MG-132的抑制效果强于SB-203580，同时两种抑制剂联合使用有协同作用；.7. BEAS-2B细胞与NEU细胞混合培养，细胞培养上清液中IL-8的分泌无变化。结论1.免疫磁珠阳选法可以分离得到高纯度、高活性的中性粒细胞。***-2B细胞与中性粒细胞接触后相互作用可活化BEAS-2B细胞内NF-KB和P38MAPK通路，进一步诱导相关基因的表达，从而调控细胞表面粘附分子ICAM-1、ICAM-3、VCAM-1及炎症因子（IL-6）的表达。

关键词：支气管上皮细胞中性粒细胞表面粘附分子 NF-KB p-38MAPK IL-6

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