检索结果-内蒙古大学图书馆

食品与生物技术学报 2024年第5期43卷 156-163页

作者：李文青祝孙婷李圣洁李梦瑶章航嘉顾青宋达峰浙江工商大学食品与生物工程学院浙江杭州310018

研究了羊栖菜多糖(Sargassum fusiforme polysaccharide,SFPS)及辅助超声降解对模式生物斑马鱼幼鱼和成鱼的降血脂作用。将斑马鱼幼鱼分为对照组、高脂组、200 mg/L超声降解羊栖菜多糖组(200-SFPSUD)、600 mg/L SFPSUD组(600-SFPSUD)和6... 详细信息

研究了羊栖菜多糖(Sargassum fusiforme polysaccharide,SFPS)及辅助超声降解对模式生物斑马鱼幼鱼和成鱼的降血脂作用。将斑马鱼幼鱼分为对照组、高脂组、200 mg/L超声降解羊栖菜多糖组(200-SFPSUD)、600 mg/L SFPSUD组(600-SFPSUD)和600 mg/L SFPS组(600-SFPS),实验周期为24 h。斑马鱼成鱼分为对照组、高脂组、30 mg羊栖菜粉组(SFP)、20 mg/L SFPSUD组(20-SFPSUD)、50 mg/L SFPSUD组(50-SFPSUD)和50 mg/L SFPS组(50-SFPS),实验周期为28 d。在斑马鱼幼鱼实验中,600-SFPS组斑马鱼较高脂组血管和腹部脂肪积累较少,600-SFPSUD组斑马鱼体内的脂肪积累更少。斑马鱼成鱼实验中,较高脂组,50-SFPS组斑马鱼肥满度变化率降低25.53%,肝脂酶(HL)、总脂酶(TL)活性分别提高153.00%、123.48%;50-SFPSUD组斑马鱼肥满度变化率降低27.18%,HL、TL活性分别提高168.20%、137.73%。通过苏木精-伊红染色(HE)观察到50-SFPS组和50-SFPSUD组斑马鱼肝脏内脂肪堆积均得到有效抑制,其中SFPSUD的干预效果更为显著。结果表明,SFPS具有降血脂功能,超声降解处理能够提高其降血脂能力,其机制可能是提高了斑马鱼HL和TL活性,从而加速体内脂质代谢速率。该研究可为SFPS、超声降解功能性食品的进一步开发提供理论参考,为人类高脂血症和养殖鱼类肥胖等问题提供新的解决思路。

关键词：羊栖菜多糖超声降解斑马鱼降血脂

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6种组合酶法制备羊栖菜多糖的理化性质及其抗氧化活性

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食品工业科技 2024年第23期45卷 248-257页

作者：欧阳丹张超杨莹林振苏来金温州大学生命与环境科学学院浙江省水环境与海洋生物资源保护重点实验室浙江温州325035 温州佳海食品有限公司省级博士创新站浙江温州325100

目的:探究不同组合酶制备的羊栖菜多糖的理化性质及功能变化。方法:应用纤维素酶-碱性蛋白酶(CA)、果胶酶-碱性蛋白酶(P-A)、黏酶-碱性蛋白酶(V-A)、纤维素酶-中性蛋白酶(C-N)、果胶酶-中性蛋白酶(P-N)、黏酶-中性蛋白酶(V-N)6种组合酶... 详细信息

目的:探究不同组合酶制备的羊栖菜多糖的理化性质及功能变化。方法:应用纤维素酶-碱性蛋白酶(CA)、果胶酶-碱性蛋白酶(P-A)、黏酶-碱性蛋白酶(V-A)、纤维素酶-中性蛋白酶(C-N)、果胶酶-中性蛋白酶(P-N)、黏酶-中性蛋白酶(V-N)6种组合酶对羊栖菜多糖进行辅助提取,分析6种组合酶制备的羊栖菜多糖的理化性质、结构组成和体内外抗氧化活性。结果:不同组合酶制备的羊栖菜多糖的总糖、糖醛酸、硫酸根等含量变化较大,单糖组成和化学结构相似,其中C-N组的总糖含量及多糖得率最高。V-N组的多糖Fe2+还原力和DPPH自由基清除能力最高,分别达到0.103±0.003(Abs)和0.540±0.022(mg/mL)(IC50),P-N组的多糖羟自由基清除能力最高,达到1.341±0.265(mg/mL)(IC50)。不同组合酶制备的羊栖菜多糖对AAPH(偶氮二异丁脒盐酸盐)诱导的氧化应激起到不同的保护作用,其中,与NO组相比,P-A、C-A、V-A和P-N组的多糖具有更强的降活性氧水平,P-A、P-N、V-N组的多糖具有显著的脂质过氧化抑制作用,与诱导组相比,C-N和V-N组的多糖显著提高CAT酶活性(P<0.01),P-A和C-N组的多糖显著提高T-SOD酶活性(P<0.01),P-A和V-N组的多糖显著降低MDA含量(P<0.01),P-A、P-N组的多糖能使gpx1b、NF-κB基因表达显著上调(P<0.01)。结论:不同组合酶制备的羊栖菜多糖的理化性质有所改变,但结构组成不变,不同组合酶处理能不同程度改善多糖的抗氧化活性。本研究为定向开发羊栖菜功能多糖提供了参考。

关键词：组合酶羊栖菜多糖理化性质抗氧化活性斑马鱼

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羊栖菜多糖抗A型塞内卡病毒感染PK-15细胞活性和机制探究

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山东农业科学 2024年第4期56卷 151-158页

作者：张诗悦张亮张伟陈九杨少华高星熠闫滨李宝国杨宏军山东中医药大学山东济南250100 山东省农业科学院畜牧兽医研究所/山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室山东济南250100 农业农村部畜禽生物组学重点实验室山东济南250100

研究羊栖菜多糖抗A型塞内卡病毒(Senecavirus A,SVA)感染PK-15细胞的活性及机制。首先采用水提法提取羊栖菜粗多糖,然后用不同孔径超滤膜将粗多糖分为不同分子量段;通过荧光定量PCR测定不同分子量粗多糖抗SVA活性,采用水提醇沉法将抗SV... 详细信息

研究羊栖菜多糖抗A型塞内卡病毒(Senecavirus A,SVA)感染PK-15细胞的活性及机制。首先采用水提法提取羊栖菜粗多糖,然后用不同孔径超滤膜将粗多糖分为不同分子量段;通过荧光定量PCR测定不同分子量粗多糖抗SVA活性,采用水提醇沉法将抗SVA活性最高分子量段的粗多糖进行纯化并测定其细胞毒性及抗SVA活性;通过在SVA感染周期不同阶段给药研究纯化多糖的抗SVA机制。结果表明,分子量越大的粗多糖抗SVA活性越强;多糖浓度和SVA浓度均与抗SVA活性呈现量效关系,纯化后的多糖对SVA(MOI=0.1)感染PK-15细胞的治疗指数为412,1 mg/mL的多糖对SVA(MOI=10-1~104)感染PK-15细胞病毒载量的抑制率在90%~99.999%之间;不同给药时间试验结果表明,多糖能在SVA吸附或穿入细胞以及病毒复制过程发挥抗病毒作用,其中抑制SVA吸附或穿入的活性最强。本研究分离纯化得到的羊栖菜多糖有很强的抗SVA活性,可为后续抗SVA药物的研发提供参考。

关键词：羊栖菜多糖 A型塞内卡病毒提取纯化抗病毒

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羊栖菜多糖对卵巢上皮癌裸鼠移植瘤TGF-β/Smad通路及癌细胞凋亡的影响

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武汉大学学报（医学版） 2023年第2期44卷 162-168页

作者：黄维洁叶彬彬温州市中西医结合医院中药房浙江温州325000

目的:探究羊栖菜多糖(SFPS)对卵巢上皮癌裸鼠移植瘤转化生长因子-β/Smad(TGF-β/Smad)通路及癌细胞凋亡的影响。方法:体外培养人卵巢上皮癌OVCAR3细胞,建立卵巢上皮癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为模型组(M组)、SFPS低[SFPS-L,10 mg/(kg... 详细信息

目的:探究羊栖菜多糖(SFPS)对卵巢上皮癌裸鼠移植瘤转化生长因子-β/Smad(TGF-β/Smad)通路及癌细胞凋亡的影响。方法:体外培养人卵巢上皮癌OVCAR3细胞,建立卵巢上皮癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为模型组(M组)、SFPS低[SFPS-L,10 mg/(kg·d)]、中[SFPS-M,20 mg/(kg·d)]、高[SFPS-H,40 mg/(kg·d)]剂量组,每组10只,干预21 d。观察给药期间各组裸鼠瘤生长情况;给药结束后,原位末端标记法(TUNEL)检测移植瘤中癌细胞凋亡情况,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测移植瘤组织中TGF-β(TGF-β)、Smad mRNA表达水平,免疫印迹(Western Blot)法检测移植瘤组织中Bax、Bcl-2、TGF-β1、Smad 4蛋白表达量。结果:随治疗时间延长,M组、SFPS-L组、SFPS-M组、SFPS-H组裸鼠移植瘤体积显著增加(P<0.05);与M组比较,治疗后第3、7、14、21 d SFPS-L组、SFPS-M组、SFPS-H组裸鼠移植瘤体积均依次降低(P<0.05)。治疗结束后,与M组比较,SFPS-L组、SFPS-M组、SFPS-H组裸鼠抑瘤率、癌细胞凋亡率、移植瘤组织Bax蛋白表达量及TGF-β1、Smad 4 mRNA和蛋白表达量依次增加(P<0.05),Bcl-2蛋白表达量依次降低(P<0.05)。结论:SFPS可促进卵巢上皮癌移植瘤中癌细胞凋亡,可能与促进TGF-β/Smad通路激活,上调Bax蛋白、下调Bcl-2蛋白表达有关。

关键词：卵巢上皮癌裸鼠移植瘤羊栖菜多糖转化生长因子-β/Smad通路凋亡

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羊栖菜多糖通过miR-7抑制MPP+诱导的SK-N-SH损伤

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沈阳药科大学学报 2023年第11期40卷 1449-1455页

作者：李茜李永秋张冬森高轩高海凤唐山市工人医院神经内科河北唐山063000

目的羊栖菜多糖(SFPS)对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导的SK-N-SH损伤的影响及分子机制。方法将SK-N-SH细胞用0.3 mmol·L^(-1)的MPP+处理作为模型(Model)组;以正常培养的细胞作为对照(Con)组,用质量浓度分别为10、30、100 mg... 详细信息

目的羊栖菜多糖(SFPS)对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导的SK-N-SH损伤的影响及分子机制。方法将SK-N-SH细胞用0.3 mmol·L^(-1)的MPP+处理作为模型(Model)组;以正常培养的细胞作为对照(Con)组,用质量浓度分别为10、30、100 mg·L^(-1)的羊栖菜多糖和0.3 mmol·L^(-1)的MPP+处理作为羊栖菜多糖低、中、高浓度组;将SK-N-SH细胞再分为Model+miR-NC组、Mod-el+miR-7组、Model+SFPS-H+anti-miR-NC组、Model+SFPS-H+anti-miR-7组;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-7表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹(Western blot)法检测蛋白表达;试剂盒检测细胞MDA含量、SOD活性和培养液中LDH含量。结果不同浓度羊栖菜多糖处理后,MPP+诱导的SK-N-SH细胞中miR-7表达水平升高,细胞的凋亡率降低,Bax表达水平降低,Bcl-2表达水平升高,MDA含量和LDH水平降低,SOD活性升高。过表达miR-7后,MPP+诱导的SK-N-SH细胞的凋亡率降低,Bax表达水平降低,Bcl-2表达水平升高,MDA含量和LDH水平降低,SOD活性升高。抑制miR-7逆转了羊栖菜多糖对MPP+诱导的SK-N-SH细胞损伤的作用。结论羊栖菜多糖可能通过上调miR-7抑制MPP+诱导的SK-N-SH细胞损伤。

关键词：羊栖菜多糖 miR-7 SK-N-SH细胞帕金森病

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组合酶制备羊栖菜多糖的工艺优化及其降血脂活性分析

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食品工业科技 2025年第12期46卷 237-247页

作者：刘温凯欧阳丹徐仰丽苏来金温州大学生命与环境科学学院浙江省水环境与海洋生物资源保护重点实验室浙江温州325035 温州市农业科学研究院温州市特色食品资源工程技术研究中心浙江温州325006

为了研究果胶酶与中性蛋白酶组合对羊栖菜多糖提取得率的影响及多糖产物的降血脂活性,本研究采用响应面法优化组合酶制备羊栖菜多糖的工艺,使用多糖纯化仪分离纯化多糖产物,通过扫描电子显微镜、傅里叶红外变换光谱及高效液相色谱法分... 详细信息

为了研究果胶酶与中性蛋白酶组合对羊栖菜多糖提取得率的影响及多糖产物的降血脂活性,本研究采用响应面法优化组合酶制备羊栖菜多糖的工艺,使用多糖纯化仪分离纯化多糖产物,通过扫描电子显微镜、傅里叶红外变换光谱及高效液相色谱法分析其理化性质,利用胆酸盐结合能力和抑制胰脂肪酶活性实验评估其体外降血脂能力,并在斑马鱼高脂血症模型中评价其体内降血脂活性。结果表明,组合酶法制备羊栖菜多糖的最佳工艺条件为:果胶酶和中性蛋白酶的比例4:1, pH5.5,温度50℃,加酶量2%,液料比25:1;分离纯化共得到4种羊栖菜多糖组分(SFP),其中SFP-4能有效结合胆酸盐(EC_(50)=0.3524 mg/mL)并抑制胰脂肪酶活性(IC_(50)=0.3568 mg/mL),具有最好降脂活性;进一步研究该组分的理化性质,发现SFP-4由岩藻糖、半乳糖、葡萄糖醛酸等七种单糖组成,具有孔隙结构和硫酸酯多糖的结构特征;在浓度为500μg/mL时能显著(P<0.01)降低斑马鱼体内脂质积累并下调脂肪酸合成相关基因mttp、pparg、fasn的表达,上调脂肪分解相关基因pparab和acaca的表达,与辛伐他汀具有相似降脂作用。因此,组合酶法提高了羊栖菜多糖得率,其多糖产物表现出了较好的降血脂活性,本研究为筛选制备降脂功能羊栖菜多糖的开发利用提供了理论依据。

关键词：组合酶羊栖菜多糖结构表征降血脂活性斑马鱼

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不同分子量羊栖菜多糖对烟草抗旱性和土壤微生物的影响

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江苏农业科学 2024年第16期52卷 141-148页

作者：陈芊如龚鹏飞杨波戴永平张哲王建华马斯琦邹平李义强荆常亮中国农业科学院烟草研究所山东青岛266000 陕西省烟草公司延安市公司陕西延安716000 山东临沂烟草有限公司山东临沂276003 云南省烟草公司保山市公司云南保山678000

羊栖菜多糖(Sargassum fusiforme polysaccharides,简称SFPS)是一种生物活性多样的水溶性多糖,被广泛应用于作物抗逆研究。为探究3种不同分子量羊栖菜多糖对烟草生长、抗旱性以及烟草根际土壤微生物的影响,测定不同分子量羊栖菜多糖处... 详细信息

羊栖菜多糖(Sargassum fusiforme polysaccharides,简称SFPS)是一种生物活性多样的水溶性多糖,被广泛应用于作物抗逆研究。为探究3种不同分子量羊栖菜多糖对烟草生长、抗旱性以及烟草根际土壤微生物的影响,测定不同分子量羊栖菜多糖处理下的烟叶农艺性状、营养特性及抗性相关指标,同时通过分析烟草根际土壤微生物多样性和群落组成来探究羊栖菜多糖对土壤微生物的影响。结果表明,经多糖处理后,干旱胁迫下的烟草渗透调节物质积累,防御酶活性升高、细胞膜脂过氧化程度减轻,其中,分子量为23 ku的羊栖菜多糖(D-20)处理效果最佳。α多样性分析结果表明,在干旱胁迫下添加羊栖菜多糖提高了土壤微生物的丰富度和多样性;主坐标分析(PCoA)结果表明,不同分子量羊栖菜多糖均显著改变了土壤微生物群落的物种多样性;此外,羊栖菜多糖还增加了放线菌门(Actinomycetes)、厚壁菌门(Firmicutes)的相对丰度,减小了酸杆菌门(Acidobacteria)的相对丰度,明显改善了土壤微环境。以上结果表明,羊栖菜多糖能够显著缓解烟草干旱,提高土壤微生物多样性。

关键词：羊栖菜多糖烟草抗旱机制微生物多样性主坐标分析

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羊栖菜多糖通过调控miR-29b-5p/AQP9表达对过氧化氢诱导的星形胶质细胞氧化损伤的影响及机制

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中国老年学杂志 2022年第1期42卷 186-191页

作者：廖忠正贝筝俞容吴小昙杨国正海南省干部疗养院(海南省老年病医院)神经内科海南海口571100 海南省人民医院神经内科

目的探讨羊栖菜多糖(SFPS)对过氧化氢(H_(2)O_(2))引起星形胶质细胞氧化损伤的影响及作用机制。方法用200μmol/L H_(2)O_(2)处理细胞24 h作为H_(2)O_(2)组,以正常培养细胞作为对照(Con)组;分别用15 mg/L、30 mg/L、60 mg/L的SFPS培养... 详细信息

目的探讨羊栖菜多糖(SFPS)对过氧化氢(H_(2)O_(2))引起星形胶质细胞氧化损伤的影响及作用机制。方法用200μmol/L H_(2)O_(2)处理细胞24 h作为H_(2)O_(2)组,以正常培养细胞作为对照(Con)组;分别用15 mg/L、30 mg/L、60 mg/L的SFPS培养液预处理24 h后用200μmol/L H_(2)O_(2)诱导处理24 h,分别记为H_(2)O_(2)+SFPS-L组、H_(2)O_(2)+SFPS-M组、H_(2)O_(2)+SFPS-H组。将miR-NC、miR-29b-5p转染至星形胶质细胞后用200μmol/L H_(2)O_(2)再诱导处理24 h,记为H_(2)O_(2)+miR-NC组、H_(2)O_(2)+miR-29b-5p组;将anti-miR-NC、anti-miR-29b-5p转染至星形胶质细胞后用60 mg/L的SFPS培养液处理24 h后再用200μmol/L H_(2)O_(2)诱导处理24 h,分别记为H_(2)O_(2)+SFPS+anti-miR-NC组、H_(2)O_(2)+SFPS+anti-miR-29b-5p组。丙二醛(MDA)试剂盒、超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)试剂盒分别检测MDA含量、SOD、GSH-Px活性;Western印迹检测水通道蛋白(AQP)9水平;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-29b-5p和AQP9 mRNA表达水平;荧光素酶报告实验检测miR-29b-5p和AQP9的靶向关系。结果与Con组相比,H_(2)O_(2)组星形胶质细胞中MDA水平显著升高,SOD、GSH-Px活性显著降低(均P<0.05);与H_(2)O_(2)组相比,不同浓度SFPS组星形胶质细胞中MDA含量逐渐降低,SOD、GSH-Px活性显著升高,呈浓度依赖性(均P<0.05)。与Con组相比,H_(2)O_(2)组星形胶质细胞中Bcl-2表达水平显著降低,Bax、酶切caspase-3表达水平及细胞凋亡率均显著升高(均P<0.05);与H_(2)O_(2)组相比,不同浓度SFPS组星形胶质细胞中Bcl-2表达水平显著升高,Bax、酶切caspase-3表达水平及细胞凋亡率均显著降低,且均呈浓度依赖性(均P<0.05),与Con组相比,H_(2)O_(2)组星形胶质细胞中miR-29b-5p表达水平显著降低,AQP9 mRNA和蛋白表达水平均显著升高(均P<0.05);与H_(2)O_(2)组相比,不同浓度SFPS糖组星形胶质细胞中miR-29b-5p表达水平显著升高,AQP9 mRNA和蛋白表达水平均显著降低,且均呈浓度依赖性(均P<0.05)。miR-29b-5p组荧光素酶活性显著低于miR-NC组(P<0.05)。相较于miR-NC组AQP9蛋白表达水平,miR-29b-5p组显著降低;相较于anti-miR-NC组AQP9蛋白表达水平,anti-miR-29b-5p组显著升高(均P<0.05)。与H_(2)O_(2)+miR-NC组相比,H_(2)O_(2)+miR-29b-5p组星形胶质细胞中miR-29b-5p表达水平显著升高,AQP9表达水平显著降低,MDA水平显著降低,SOD、GSH-Px活性显著升高,Bcl-2水平显著升高,Bax水平和细胞凋亡率显著降低(均P<0.05),与H_(2)O_(2)组相比,H_(2)O_(2)+SFPS组星形胶质细胞中miR-29b-5p水平显著升高,AQP9水平显著降低,MDA水平显著降低,SOD、GSH-Px活性显著升高,Bcl-2水平显著升高,Bax水平及细胞凋亡率显著降低(P<0.05);与H_(2)O_(2)+SFPS+anti-miR-NC组相比,H_(2)O_(2)+SFPS+anti-miR-29b-5p组星形胶质细胞中miR-29b-5p水平显著降低,AQP9水平显著升高,MDA水平显著升高,SOD、GSH-Px活性显著降低,Bcl-2水平显著降低,Bax水平及细胞凋亡率显著升高(均P<0.05)。结论SFPS可抑制H_(2)O_(2)诱导的星形胶质细胞氧化应激和凋亡,保护H_(2)O_(2)引起的星形胶质细胞氧化损伤,其机制可能与miR-29b-5p和AQP9有关。

关键词：羊栖菜多糖 miR-29b-5p AQP9 星形胶质细胞过氧化氢氧化损伤

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羊栖菜多糖抑制人肺癌细胞H1299血管生成拟态的作用

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现代实用医学 2025年第4期37卷 346-349,F0003页

作者：陈慧玲龙香娥张玲万勇况炜宁波卫生职业技术学院宁波315104

目的探讨羊栖菜多糖(SFPS)抑制人肺癌细胞H1299血管生成拟态(VM)的作用。方法采用CCK-8方法检测不同浓度SFPS(0、10、30、100、300及1 000 mg/L)作用的H1299细胞活性,应用三维细胞培养技术分析不同浓度SFPS对H1299细胞VM的影响,并通... 详细信息

目的探讨羊栖菜多糖(SFPS)抑制人肺癌细胞H1299血管生成拟态(VM)的作用。方法采用CCK-8方法检测不同浓度SFPS(0、10、30、100、300及1 000 mg/L)作用的H1299细胞活性,应用三维细胞培养技术分析不同浓度SFPS对H1299细胞VM的影响,并通过实时荧光定量PCR法测定H1299细胞中血管内皮生长因子-A (VEGF-A)及胞内磷脂酰肌醇激酶(PI3K)的mRNA表达水平。结果与对照组(SFPS浓度0 mg/L)相比,SFPS作用48 h后,H1299细胞存活率下降最为明显,30、100、300及1 000 mg/L浓度组与对照组差异均有统计学意义(均P <0.05)。随着SFPS处理浓度的增加,30、100及300 mg/L浓度组VM管道结构数量较对照组均明显减少(均P <0.05),并呈剂量依赖性。RT-PCR结果显示,不同浓度SFPS能够抑制H1299细胞中VEGF-A及PI3K的mRNA表达(均P <0.05)。结论 SFPS可降低人肺癌细胞H1299存活率,并抑制VM形成,这可能与下调VEGF-A与PI3K的表达有关。

关键词：羊栖菜多糖肺肿瘤癌血管生成拟态血管内皮生长因子胞内磷脂酰肌醇激酶

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羊栖菜多糖分离纯化及其对过氧化氢诱导肝细胞损伤的保护作用机制研究

羊栖菜多糖分离纯化及其对过氧化氢诱导肝细胞损伤的保护作用机制...

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作者：李佳睿广东海洋大学

学位级别：硕士

具有高抗氧化活性和促进健康作用的天然产物在治疗肝病方面受到广泛关注。研究发现,海藻多糖具有治疗或预防肝脏疾病的潜力。羊栖菜是一种褐藻,主要分布在太平洋西北部。研究表明,羊栖菜（Sargassum fusiforme）广泛应用于养生保健领域... 详细信息

具有高抗氧化活性和促进健康作用的天然产物在治疗肝病方面受到广泛关注。研究发现,海藻多糖具有治疗或预防肝脏疾病的潜力。羊栖菜是一种褐藻,主要分布在太平洋西北部。研究表明,羊栖菜（Sargassum fusiforme）广泛应用于养生保健领域,可以被用来治疗多种疾病,如神经疾病、内分泌疾病和胃肠道疾病等。此外,越来越多的证据表明,羊栖菜中的主要成分活性多糖具有多种生物活性如抗肿瘤、抗氧化、免疫增强和抗衰老活性等。本文以羊栖菜为研究对象,提取羊栖菜中的主要活性成分羊栖菜粗多糖（Sargassum fusiforme crude polysaccharides,SFPS）,并对其进行初步的结构表征。采用过氧化氢（HO）构建细胞氧化应激损伤模型,考察SFPS对HO诱导LO2肝细胞损伤的保护作用。在此基础上,进一步对具有护肝活性的SFPS进行分离纯化,通过体外抗氧化实验和对HO诱导肝细胞损伤的保护作用考察分离纯化后的羊栖菜多糖组分SFPS-1、SFPS-2和SFPS-3的抗氧化活性和护肝效应,从而筛选出具有最佳护肝活性的羊栖菜多糖组分。最后,运用Western Blot方法解析羊栖菜多糖组分在护肝效应过程中对相关蛋白的表达影响,从而阐明其具体的护肝作用机制,为羊栖菜多糖在护肝领域的临床应用提供理论依据和数据参考。主要研究内容和结果如下: （1）为了建立HO诱导LO2肝细胞损伤模型,采用MTT法考察不同浓度的HO处理LO2肝细胞不同时间后对其细胞存活率的影响。运用MTT法考察SFPS对HO诱导LO2肝细胞损伤的保护作用,并通过CAT、SOD、LDH、MDA和ROS等试剂盒评价SFPS对HO诱导LO2细胞损伤的保护效果。结果显示,当700μmol/L HO处理LO2细胞3 h时,细胞存活率达到53.00±1.68%,为中度损伤,故选取该浓度为HO诱导细胞损伤的作用浓度。2.5μg/m L SFPS能让LO2细胞的相对存活率从54.75±8.97%（HO处理组）提高到74.57±4.31%。同时,细胞内CAT和SOD的活力分别从3.23±0.28 U/m L、1.25±0.02 U/m L（HO处理组）升高到7.98±0.09 U/m L、1.62±0.06 U/m L,而LDH活力从296.48±11.13 U/m L（HO处理组）降低到76.68±3.76U/m L（P<0.05）。此外,细胞内MDA和ROS的含量分别从0.75±0.02 mmol/mgprot、298.52±5.18%（HO处理组）降低到0.32±0.04 mmol/mgprot、100.38±7.62%（P<0.01）。综上可知,SFPS通过提高细胞内抗氧化酶的活力和降低细胞内的氧化应激水平来缓解HO诱导的肝细胞损伤。（2）利用DEAE-52离子交换柱分离SFPS得到三个多糖组分SFPS-1、SFPS-2和SFPS-3,得率分别为17.9%、21.8%和23.3%。采用苯酚-硫酸法检测得到SFPS-1、SFPS-2和SFPS-3的总糖含量分别为66.17±0.84%、82.05±1.15%和50.01±1.09%。采用高效凝胶渗透色谱法检测得到SFPS-1、SFPS-2和SFPS-3的分子量分别为2.57KDa、14.11 KDa和50.09 KDa。单糖组成结果表明SFPS-2由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖和岩藻糖组成,SFPS-1、SFPS-3由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖组成。核磁氢谱显示,SFPS-2与SFPS-3含有α-糖苷键,SFPS-1与SFPS-3中含β-糖苷键。刚果红实验表明SFPS-1、SFPS-2和SFPS-3皆存在三股螺旋结构。（3）通过对羟基自由基、DPPH自由基和ABTS自由基的清除实验考察SFPS-1、SFPS-2和SFPS-3三个组分的体外抗氧化活性,并运用MTT方法考察上述三个组分对HO诱导LO2细胞损伤的保护作用。结果发现,当多糖浓度为2.5mg/m L时,SFPS-1、SFPS-2和SFPS-3对DPPH清除率分别为69.45±0.36%、67.10±0.22%和64.35±0.22%,对羟基自由基的清除率分别为48.55±0.22%、58.64±0.17%和54.84±0.27%,对ABTS的清除率分别为41.15±1.01%、46.31±1.08%和44.19±1.02%,表明三个组分对三种自由基均具有良好的清除能力。而且,SFPS-2对羟基自由基、ABTS自由基的清除能力高于SFPS-1和SFPS-3。进一步研究发现,SFPS-1、SFPS-2和SFPS-3预处理后,细胞存活率从HO损伤组的58.64±2.04%提高到79.89±7.56%、90.07±1.66%和78.18±2.64%,表明,S

关键词：羊栖菜多糖 LO2细胞 H2O2 氧化损伤保护机制

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