检索结果-内蒙古大学图书馆

中国临床药理学杂志 2022年第9期38卷 904-907页

作者：陈佳扬黎权辉岑柏宏陈章浦杨伶庞建新付卫明季爱民南方医科大学药学院南方医科大学第七附属医院药学科广州医科大学附属肿瘤医院放疗科

目的研究siRNA单独或多重沉默原代人脐静脉内皮细胞（HUVECs）中血管内皮细胞生长因子a（VEGFA）及血管内皮细胞生长因子受体1/2/3（VEGFR1/2/3）表达对其血管生成的影响。方法 HUVECs分为空白对照组，阴性对照组与实验组。空白对照组... 详细信息

目的研究siRNA单独或多重沉默原代人脐静脉内皮细胞（HUVECs）中血管内皮细胞生长因子a（VEGFA）及血管内皮细胞生长因子受体1/2/3（VEGFR1/2/3）表达对其血管生成的影响。方法 HUVECs分为空白对照组，阴性对照组与实验组。空白对照组不给予转染，阴性对照组转染100 nmol·L-1siNC,实验组分为4组并分别转染100 nmol·L-1siVEGFA及siVEGFR1/2/3。以反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测siRNAs的沉默效率。HUVECs分为空白对照组，阴性对照组，沉默单靶点组和多靶点组，空白对照组不给予转染，阴性对照组转染100 nmol·L-1siNC,沉默单靶点组分为4组并分别转染100 nmol·L-1siVEGFA及siVEGFR1/2/3,沉默多靶点组分为4组并分别转染100 nmol·L-1siVEGFA+siVEGFR1、siVEGFA+siVEGFR2、siVEGFA+siVEGFR3及siVEGFR1+siVEGFR2+siVEGFR3,以小管形成实验检测各组HUVECs小管形成情况。结果 siVEGFA组、siVEGFR1组、siVEGFR2组与siVEGFR3组沉默效率分别为（85.67±10.50）%,（71.67±7.02）%,（89.00±11.36）%与（90.00±3.60）%,与空白及阴性对照组相比，差异均有统计学意义（均P<0.01）。siVEGFA组血管总长度、分支管长度和血管交叉点分别为（32.67±3.79）%,（22.67±2.08）%及（25.33±6.43）%,在沉默单靶点组中抑制血管生成能力最强（均P<0.05）;siVEGFA+siVEGFR3组血管总长度、分支管长度和血管交叉点分别为（28.33±5.51）%,（10.00±2.65）%,（8.33±2.31）%,siVEGFR1+siVEGFR2+siVEGFR3组分别为（27.00±4.00）%,（9.33±2.89）%,（10.00±3.60）%,在沉默多靶点组中抑制血管生成能力最强（均P<0.05）。结论 siRNAs沉默VEGF通路中单靶点的表达，可有效抑制HUVECs诱导的血管生成；同时沉默多靶点的表达，其抑制血管生成的功效更强。

关键词：原代人脐静脉内皮细胞血管内皮细胞生长因子a 血管内皮细胞生长因子受体小干扰RNA 血管生成

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

BMP9通过Wnt/β-catenin和VEGFa信号诱导前脂肪细胞成骨分化

引用

中国细胞生物学学报 2025年第1期47卷 8-17页

作者：王景江刘洋重庆医科大学附属第二医院骨科重庆400010

该文旨在研究Wnt/β-catenin信号通路和血管内皮细胞生长因子a(VEGFa)在骨形态发生蛋白9(BMP9)诱导前脂肪细胞成骨分化中的作用。通过BMP9重组腺病毒(Ad BMP9)感染前脂肪细胞,利用Western blot检测β-catenin和VEGFa的蛋白表达水平,荧... 详细信息

该文旨在研究Wnt/β-catenin信号通路和血管内皮细胞生长因子a(VEGFa)在骨形态发生蛋白9(BMP9)诱导前脂肪细胞成骨分化中的作用。通过BMP9重组腺病毒(Ad BMP9)感染前脂肪细胞,利用Western blot检测β-catenin和VEGFa的蛋白表达水平,荧光素酶报告质粒检测Wnt/β-catenin信号活化程度。在过表达或沉默β-catenin及VEGFa后,用AdBMP9感染细胞,通过活性测定和染色检测成骨早期标志物碱性磷酸酶(ALP)的活性,利用Western blot检测成骨晚期标志物骨桥素(OPN)、骨钙素(OC)以及成骨转录因子Runt相关转录因子2(Runx2)的蛋白表达情况,茜素红染色检测钙盐沉积情况,Micro-CT和H&E染色检测前脂肪细胞在裸鼠皮下异位成骨情况。结果发现BMP9能上调前脂肪细胞中β-catenin和VEGFa的蛋白水平,并增加β-catenin/Tcf4转录活性;激活Wnt/β-catenin信号或过表达VEGFa能促进BMP9介导的ALP活性、OPN及OC蛋白表达和钙盐沉积;过表达β-catenin和VEGFa能促进BMP9诱导的前脂肪细胞裸鼠皮下异位成骨;过表达β-catenin和VEGFa均增加了BMP9诱导的成骨转录因子Runx2的活性,而沉默VEGFa抑制了BMP9上调β-catenin/Tcf4转录活性的作用。这些结果表明Wnt/β-catenin和VEGFa信号在BMP9诱导前脂肪细胞成骨分化的过程中起着至关重要的调控作用。

关键词：骨形态发生蛋白9 前脂肪细胞 Wnt/β-catenin信号血管内皮细胞生长因子a 成骨分化

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

VEGFA/VEGFR2在小鼠肝多房棘球蚴组织血管生成中的表达及作用

引用

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2020年第6期38卷 673-681页

作者：姜慧娇桂显伟郭黎姣杨雄峰王小义陈雪玲吴向未石河子大学医学院第一附属医院石河子832000 石河子大学医学院免疫学教研室石河子832000

目的检测多房棘球蚴感染后小鼠肝脏和肝细胞血管内皮细胞生长因子a(VEGFA)、血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)的mRNA水平及蛋白水平,探讨VEGFA/VEGFR2在多房棘球蚴组织血管生成中的作用。方法将20只雌性C57BL/6小鼠随机分为实验组和... 详细信息

目的检测多房棘球蚴感染后小鼠肝脏和肝细胞血管内皮细胞生长因子a(VEGFA)、血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)的mRNA水平及蛋白水平,探讨VEGFA/VEGFR2在多房棘球蚴组织血管生成中的作用。方法将20只雌性C57BL/6小鼠随机分为实验组和对照组(10只/组),实验组小鼠采用肝被膜注射法建立多房棘球蚴感染模型,对照组注射等量生理盐水。于感染后第0、16、37、58、81、105天,收集各组小鼠全血,分离血清。第120天安乐死小鼠后,开腹观察多房棘球蚴生长情况,取小鼠多房棘球蚴组织、多房棘球蚴周围肝组织、对照组小鼠正常肝组织。HE染色观察多房棘球蚴组织血管生成情况,免疫组化法检测各组织中VEGFA、VEGFR2表达及分布。取肝细胞和原头节进行体外培养,36个培养皿均分为共培养组(肝细胞+原头节)、肝细胞组、原头节组,分别于培养后1、2、3 d后取各组上清、肝细胞和原头节。qRT-PCR、蛋白质免疫印迹(Western blotting)检测正常肝组织、多房棘球蚴组织、多房棘球蚴周围4 mm处肝组织、原头节和肝细胞中VEGFA、VEGFR2 mRNA水平和蛋白水平。ELISA检测外周血中VEGFA的含量、正常肝组织、多房棘球蚴组织、多房棘球蚴周围肝组织、共培养组上清、肝细胞组上清和原头节组上清中VEGFA蛋白水平。采用SPSS 20.0软件进行统计学分析。结果qRT-PCR检测结果显示,正常肝组织、多房棘球蚴周围肝组织、多房棘球蚴组织VEGFA mRNA相对转录水平分别为1.033±0.102、1.222±0.501、0.276±0.092,多房棘球蚴组织的转录水平低于正常肝组织与多房棘球蚴周围肝组织(P<0.05);VEGFR2 mRNA相对转录水平分别为1.042±0.071、1.836±0.062、0.226±0.077,多房棘球蚴周围肝组织的转录水平高于正常肝组织(P<0.01),多房棘球蚴组织的转录水平低于正常肝组织与多房棘球蚴周围肝组织(P<0.01)。Western blotting分析结果显示,多房棘球蚴组织蛋白样品中未检出GAPDH、VEGFA和VEGFR2目的蛋白。多房棘球蚴周围肝组织、正常肝组织中,VEGFA蛋白相对表达量分别为0.920±0.961、0.816±0.129;VEGFR2蛋白相对表达量分别为1.439±0.160、0.515±0.222,二者差异有统计学意义(P<0.05)。ELISA检测结果显示,正常肝组织、多房棘球蚴周围肝组织、多房棘球蚴组织VEGFA含量分别为(6.581±0.722)、(6.363±0.638)、(0.670±0.105)pg。免疫组化检测结果显示,正常肝组织、多房棘球蚴周围肝组织、多房棘球蚴组织VEGFA评分分别为3.552±0.683、3.355±0.807、9.450±1.292,多房棘球蚴组织VEGFA表达高于正常肝组织和多房棘球蚴周围肝组织(P<0.05)。正常肝组织、多房棘球蚴周围肝组织、多房棘球蚴组织VEGFR2评分分别为0.361±0.547、4.093±1.042、5.275±1.003,多房棘球蚴周围肝组织、多房棘球蚴组织VEGFR2的表达均高于正常肝组织(P<0.01)。ELISA检测结果显示,实验组小鼠第0、16、37、58、81、105天外周血VEGFA含量分别为(73.233±7.651)、(156.925±5.111)、(176.571±40.343)、(204.212±9.601)、(201.335±24.161)和(185.745±37.902)pg/ml,对照组分别为(70.355±24.751)、(56.144±14.736)、(81.094±13.753)、(76.172±5.689)、(64.393±19.060)和(70.871±23.966)pg/ml,实验组小鼠外周血VEGFA含量高于对照组(P<0.05)。qRT-PCR检测结果显示,体外培养第2天,共培养组VEGFA、VEGFR2 mRNA相对转录水平分别为9.380±1.165和2.764±0.871,肝细胞组分别为1.028±0.252和1.062±0.201,共培养组VEGFA、VEGFR2转录水平均高于相应肝细胞组(P<0.05)。Western blotting结果显示,体外培养第2天,共培养组VEGFA、VEGFR2蛋白相对表达水平分别为1.500±0.148和1.540±0.079,肝细胞组分别为1.322±0.050和0.303±0.003,原头节组高于肝细胞组(P<0.01)。ELISA检测结果显示,肝细胞组上清第1、2、3天VEGFA含量分别为(24.923±1.427)、(151.760±4.282)、(223.033±10.06

关键词：多房棘球蚴血管内皮细胞生长因子a 血管内皮细胞生长因子受体2 血管生成

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

磷脂酰肌醇代谢缺陷诱导新生血管退化的机制研究

磷脂酰肌醇代谢缺陷诱导新生血管退化的机制研究

引用

作者：曹乐中国科学院大学

学位级别：博士

脊椎动物血管系统由动脉、静脉以及连接二者的毛细血管组成。血管网络遍布机体各个组织器官并发挥着输送氧气、营养物质以及运输代谢废物等功能。在诸多生理病理进程中，组成血管的内皮细胞通过响应不同的信号刺激引导血管的形成以维持... 详细信息

脊椎动物血管系统由动脉、静脉以及连接二者的毛细血管组成。血管网络遍布机体各个组织器官并发挥着输送氧气、营养物质以及运输代谢废物等功能。在诸多生理病理进程中，组成血管的内皮细胞通过响应不同的信号刺激引导血管的形成以维持机体稳态平衡。脊椎动物发育、生理和病理过程均伴随着大量的血管新生，其中血管内皮细胞生长因子a(VEGFA，vascularendothelialgrowfactorA)被证实是促进血管新生核心因子。VEGFA信号通路在调控血管发育与稳态的过程中特异性与可塑性是血管生物学领域中的重要科学问题。　　本研究发现作为磷脂酰肌醇(PI，phosphatidylinositol)代谢循环中的关键酶，胞苷二磷酸-二酰基甘油合成-2(CDS2，CDP-diacylglycerolsynthase-2)的缺失会导致血管微环境中VEGFA信号通路从经典的促进血管新生转变为诱导新生血管退化。首先，我们在斑马鱼cds2突变体中发现了血管缺陷程度和vegfamRNA表达水平成正比。进一步通过斑马鱼活体成像实验，我们发现在cds2突变体中过表达vegfa基因会诱发由血管内皮细胞凋亡或者逆向迁移介导的血管退化现象。其次，我们构建了内皮细胞特异性诱导敲除Cds2的小鼠，在视网膜血管模型和肿瘤移植血管模型中均证实VEGFA刺激会在内皮细胞CDS2缺失的情况下引发新生血管退化。最后，结合脂类定量和免疫荧光实验，我们发现在CDS2缺失的情况下，磷脂酰肌醇代谢循环中的磷脂酶C-γ(PLCγ，phospholipaseCγ)受到VEGFA信号通路影响，会加速磷脂酰肌醇二磷酸(PIP2，phosphatidylinositol(4，5)-bisphosphate)的水解，从而导致磷脂酰肌醇三磷酸(PIP3，phosphatidylinositol(3，4，5)-triphosphate)的产生受到阻滞。内皮细胞中PIP3水平的降低引发转录因子FOXO1(ForkheadboxproteinO1)入核，激活下游信号，最终导致新生血管退化。　　本研究揭示了敲除内皮细胞Cds2基因阻断磷脂酰肌醇代谢循环会引发VEGFA功能的多重效应。在小鼠肿瘤移植实验中，我们发现内皮细胞特异性诱导敲除Cds2会促进肿瘤分泌高水平的VEGFA，进而引起新生血管退化、肿瘤生长阻滞。目前，在诸如肿瘤、湿性黄斑病变等血管新生依赖性疾病的临床治疗中往往借助VEGFA中和抗体抑制病灶部位血管新生。本研究提示可以利用这类疾病血管新生微环境中VEGFA高水平的特征，以CDS2为靶点，在病灶部位定点抑制其活性，通过引发血管退化以阻断疾病进程。

关键词：新生血管退化磷脂酰肌醇代谢缺陷血管内皮细胞生长因子a

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

miR-497通过负反馈调节HIF-1α诱导的VEGFA和FGF2通路抑制角膜新生血管形成的机制研究

miR-497通过负反馈调节HIF-1α诱导的VEGFA和FGF2通路抑制角膜新...

引用

作者：吴晓玉武汉大学

学位级别：硕士

第一部分miR-497在角膜新生血管中的表达特性鉴定目的:预测微小RNA 497(micro RNA-497,miR-497)与血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)和成纤维细胞生长因子2(fibroblast growth factor 2,FGF2)的相关性,并鉴定miR-497在小鼠角膜碱烧伤后的表达变化。方法:1.通过生物信息学方法预测可以同时靶向作用于人和小鼠的VEGFA及其受体KDR(VEGFR-2)、FGF2及其受体FGFR1的micro RNAs;2.随后使用雌性C57BL/6野生型小鼠20只,构建小鼠角膜碱烧伤新生血管模型,通过实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,q PCR)检测小鼠角膜碱烧伤后0d、2d、4d、7d、14d的miR-497的表达以及VEGFA及其受体KDR(VEGFR-2)、FGF2及其受体的m RNA表达,观察其表达趋势。结果:1.通过基于miRanda、Pic Tar、Target Scan、star Base数据库预测来自miR-15/16/497家族均与人及小鼠的VEGFA及其受体KDR(VEGFR-2)、FGF2及其受体FGFR1存在结合位点;2.q PCR结果显示,在小鼠角膜碱烧伤后,与第0天相比,miR-497在第2天表达升高,于第4天时达到峰值,从第7天到第14天表达逐渐降低,且与第0天相比,角膜碱烧伤后第2、4、7、14天的miR-497 m RNA的相对表达变化具有统计学意义(P<0.05)。同时,VEGFA m RNA、KDR m RNA和FGFR1 m RNA的表达在第4天时达到峰值,第7天到第14天逐渐降低,且与第0天相比具有统计学意义,趋势与miR-497 m RNA的表达趋势一致,而FGF2 m RNA在第4天达到峰值,第7天降至接近基线水平,随后在第14天再次升高。结论:miR-497能同时靶向VEGFA和FGF2,并且在小鼠角膜碱烧伤新生血管模型中,miR-497 m RNA表达升高,在第4天时最高,VEGFA m RNA、KDR m RNA和FGFR1 m RNA的表达趋势与miR-497 m RNA表达趋势一致,FGF2m RNA的表达在第7天有所降低随后再次升高。第二部分miR-497表达变化对人角膜基质细胞和人脐静脉内皮细胞的生物学特性影响目的:验证miR-497能调节VEGFA和FGF2的表达水平,并且能通过VEGFA和FGF2抑制脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)的增殖和管腔形成能力。方法:1.构建VEGFA和FGF2的3'UTR野生型和突变型荧光素酶报告质粒,双荧光素酶试验验证miR-497能靶向结合VEGFA和FGF2的3'UTR;2.培养人角膜基质细胞,分别转染空白对照、agomir NC、agomir 497、antagomir NC、antagomir 497、雷珠单抗(Ranibizumab),之后通过蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测细胞内VEGFA和FGF2的蛋白表达;3.培养HUVECs,分别转染空白对照、agomir NC、agomir 497、antagomir NC、antagomir 497、雷珠单抗(Ranibizumab),之后通过CCK-8细胞增殖实验测定各组的细胞增殖能力,测定各组细胞的管腔形成能力。结果:1.成功构建VEGFA和FGF2的3'UTR野生型和突变型荧光素酶报告质粒,通过双荧光素酶报告基因实验证明miR-497能够靶向结合VEGFA和FGF2的3'UTR,其中对FGF2的活性抑制更为明显;*** Blot检测结果显示,角膜基质细胞中,与空白对照组和agomir NC组对比,antagomir 497组的VEGFA和FGF2的蛋白表达水平升高,agomir 497组的VEGFA和FGF2的蛋白表达水平降低;***的细胞增殖试验结果显示,与空白对照组相比,antagomir 497组的HUVECs的增殖能力增强(3.26±0.61,P<0.01),agomir 497组的HUVECs的增殖能力减弱(0.31±0.08,P<0.01),较雷珠单抗组(0.86±0.22)的抑制效果更好;***的管腔形成实验结果显示,与空白对照组相比,antagomir 497组的管腔形成明显增多,agomir 497组的管腔形成减少,与雷珠单抗组相比,管腔形成更少。结论:***-497能靶向结合VEGFA和FGF2的3'UTR从而抑制他们在RNA水平和蛋白水平的表达;2.过表达miR-497能抑制

关键词：微小RNA-497 角膜新生血管血管内皮生长因子A 成纤维细胞生长因子2 微小RNA-497 双荧光素酶实验人角膜基质细胞人脐静脉内皮细胞血管内皮生长因子A 成纤维细胞生长因子2 微小RNA-497 缺氧诱导因子1α 血管内皮细胞生长因子a 成纤维细胞生长因子2

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

Alamandine对肝纤维化大鼠肝窦血管生成的抑制作用

引用

现代消化及介入诊疗 2020年第12期25卷 1566-1570页

作者：宁佐伟李秀梅王亚东李洋南方医科大学南方医院消化科 510515

目的探讨Alamandine对CCL4诱导的肝纤维化大鼠肝窦血管生成的抑制作用及相应的分子机制。方法选取18只Wistar雄性大鼠,随机分为对照(Contorl)组、CCL4组和CCL4+Alamandine组。对照组Wistar雄性大鼠腹腔内以2 ml/kg的剂量注射橄榄油,每... 详细信息

目的探讨Alamandine对CCL4诱导的肝纤维化大鼠肝窦血管生成的抑制作用及相应的分子机制。方法选取18只Wistar雄性大鼠,随机分为对照(Contorl)组、CCL4组和CCL4+Alamandine组。对照组Wistar雄性大鼠腹腔内以2 ml/kg的剂量注射橄榄油,每两周注射一次;CCL4组Wistar雄性大鼠腹腔内以2 ml/kg的剂量注射浓度为40%溶于橄榄油的CCL4,每两周注射一次;CCL4+Alamandine组:CCL4制作肝纤维化模型,在腹腔埋入注射泵并以25μg·kg^-1·h^-1的速度持续注射Alamandine。4周后处死大鼠,取肝组织,行HE染色,进行肝纤维化评分;Masson胶原染色,测定胶原的表达;通过免疫组织化学染色、免疫印迹(Western blot)、组织免疫荧光染色检测血管生成的指标:血管性血友病因子(von Willebrand Factor,vWF),血管内皮细胞生长因子a(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)。结果与Contorl组相比,CCL4组肝纤维化评分,胶原面积,免疫组织化学检测vWF、VEGFA的表达,Western blot检测vWF、VEGFA的表达均明显增高(P均<0.01);免疫荧光检测CCL4组肝组织vWF、VEGFA阳性表达细胞较Contorl组明显增多。与CCL4组相比,CCL4+Alamandine组肝纤维化评分,胶原面积,免疫组织化学检测vWF的表达、VEGFA的表达,Western blot检测vWF的表达、VEGFA的表达均显著下降(P均<0.05);免疫荧光检测CCL4+Alamandine组vWF、VEGFA阳性表达的细胞较CCL4组明显减少。结论Alamandine可抑制肝纤维化大鼠肝窦血管生成。

关键词： Alamandine 肝纤维化肝窦血管生成血管内皮细胞生长因子a 血管性血友病因子

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

应用黄芪注射液预防子宫肌瘤术后腹部切口脂肪液化的研究

引用

妇产与遗传（电子版） 2018年第4期8卷 33-36页

作者：王芬余景芳游爱平鄂东医疗集团黄石市妇幼保健院妇产科黄石435000

目的探究黄芪注射液在预防子宫肌瘤术后腹部切口脂肪液化的价值。方法选取2016年6月至2017年3月于鄂东医疗集团黄石市妇幼保健院妇产科行开腹手术的34例子宫肌瘤患者作为研究对象进行前瞻性研究分析,随机分成两组后,对照组采用碘伏常规... 详细信息

目的探究黄芪注射液在预防子宫肌瘤术后腹部切口脂肪液化的价值。方法选取2016年6月至2017年3月于鄂东医疗集团黄石市妇幼保健院妇产科行开腹手术的34例子宫肌瘤患者作为研究对象进行前瞻性研究分析,随机分成两组后,对照组采用碘伏常规处理术后伤口,研究组加用黄芪注射液外敷伤口。Logistic多因素回归分析可能影响切口脂肪液化的因素,包括年龄、体重指数及外敷药物。培养人脐静脉内皮细胞,不同浓度(0、25、50、100 mg/L)黄芪注射液处理细胞,检测细胞增殖及血管内皮细胞生长因子a的mRNA表达。结果研究组的切口脂肪液化发生率显著降低; Logistic多因素回归分析显示年龄及体重指数对切口脂肪液化的发生无显著影响,而黄芪使用则有显著影响(r=0. 456,P=0. 0156);黄芪注射液可显著促进人脐静脉内皮细胞的增殖(P <0. 001)及血管内皮细胞生长因子a mRNA的表达(P <0. 001)。结论术后切口护理中加用黄芪注射液外用后可显著减少切口脂肪液化的发生率,可能与黄芪能够促进血管内皮细胞增殖及血管内皮细胞生长因子a的表达有关。

关键词：脂肪液化黄芪 Logistic回归血管内皮细胞生长因子a

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

角质细胞中FOXO1基因对正常和糖尿病小鼠牙龈伤口愈合的影响

角质细胞中FOXO1基因对正常和糖尿病小鼠牙龈伤口愈合的影响

引用

作者：陆永健第二军医大学

学位级别：博士

伤口愈合是有许多生物因子参与其中的一个复杂的生物学过程。同时,伤口愈合也与许多因素相关。其中伤口中血管生成是伤口愈合的关键因素之一。多种信号作用于内皮细胞（EC）后能够引起的血管生成,这个过程中受到许多因子的调控。在这些... 详细信息

伤口愈合是有许多生物因子参与其中的一个复杂的生物学过程。同时,伤口愈合也与许多因素相关。其中伤口中血管生成是伤口愈合的关键因素之一。多种信号作用于内皮细胞（EC）后能够引起的血管生成,这个过程中受到许多因子的调控。在这些因子中,VEGF是最有效的血管生成因子之一。角质细胞和巨噬细胞是VEGF主要来源。FOXO1属于叉头转录因子的大家族,它参与体内的许多生物过程,包括细胞周期停滞,DNA修复,凋亡,抗氧化应激和葡萄糖代谢。我们实验室的近期研究表明,在角质细胞中特异性敲除FOXO1,能干扰正常皮肤和粘膜伤口中上皮形成。由于角质细胞是生长因子VEGF的主要来源,角质细胞中的FOXO1活性可能影响结缔组织愈合。此外,上皮-间质转化（EMT）是另一个可能影响结缔组织愈合的因素,此过程有助于胚胎发生,组织重塑,纤维化和转移性恶性肿瘤。它是一个受调控编排的系列事件,在此期间上皮细胞失去许多其上皮特异性特征并获得间充质细胞典型的特征。糖尿病是一个普遍的健康问题,它能产生很多相关的并发症,伤口愈合减缓是其中之一。其表现为炎症反应增强,肉芽组织形成受损,生长因子减少和血管生成受阻等,这些因素都是影响伤口愈合的重要因素,有些研究发现,在糖尿病伤口中敲除FOXO1能够挽救糖尿病对伤口愈合的负面影响,表现出促进了伤口中上皮再形成。所以,基于以上的这些观点。本实验的中心假设是,在角质细胞中特异性敲除FOXO1,能够显著影响正常和糖尿病患者牙龈结缔组织愈合,其过程与刺激血管生成和EMT介质的调节有关。本研究目的:1),研究正常和糖尿病小鼠牙龈上皮及结缔组织愈合情况,评估在角化细胞中特异性敲除FOXO1对伤口愈合的影响;2)在正常和糖尿病小鼠牙龈及结缔组织伤口愈合过程中,确定FOXO1是否参与调节角化细胞的活性,调节血管发生;3)评价特异性敲除FOXO1的角质细胞对正常和糖尿病牙龈及结缔组织伤口愈合过程中的上皮-间质转化（EMT）的影响。方法:体内实验:动物模型使用Cre-loxp技术,使***小鼠和floxed FOXO1L/L小鼠杂交后得到上皮角质细胞中特异敲除FOXO1基因实验小鼠:实验组(***+.Foxo1L/L)以及对照组(***-.Foxo1L/L)小鼠。对于EMT研究,使用他莫昔芬诱导的K14CreERT-ROSA26杂交小鼠。糖尿病小鼠模型使用STZ（50mg/kg）连续5天腹腔注射,诱导I型糖尿病。小鼠维持高血糖10天后进行牙龈创口手术。创口位于右侧第一磨牙近中邻面中上腭区牙龈,创口为直径为1毫米的全厚伤口。在创伤后的第4天,第7天处死小鼠,收取伤口样本。组织学样本,经固定,脱钙,切片后,用苏木精和曙红（H&E）和Masson三色（MT）进行染色,对伤口样本的组织学形态进行测量。对于EMT研究,采用冰冻切片染色后行组织学形态进行测量;体内试验:分别用特异性抗体抗FOXO1,CD31,α-SMA,VEGFA和Ki67对组织的相应蛋白进行免疫荧光染色,使用荧光显微镜进行定量分析;使用TUNEL法和Ki67双染色方法对细胞组织内的细胞凋亡进行测量和分析研究。体外实验:用人类永生牙龈角质细胞（HIGK）和小鼠表皮角化细胞（MPEK）,实验组与ON-TARGET plus SMART pool siRNA抗人FOXO1进行转染,对照组与siRNA（ON-TARGET plus Non-targeting Control Pool）进行转染,对细胞内的FOXO1和VEGF-A蛋白水平进行检测;在荧光素酶报告实验中,HIGK细胞和MPEK细胞在实验组中用FOXO1,FOXO1-AAA质粒进行转染,pCDNA3.1对照质粒作为对照质粒。转染后利用双荧光素酶报告基因检测VEGF-A报告子的活性。基因阵列分析,用正常人表皮角质细胞（NHEK）细胞在低糖（5mM d-glucose）和高糖（25 mM d-glucose）培养基中培养5天,用FOXO1或scrambled siRNA转染相应的细胞,然后,使用提取总RNA。采用基因芯片人类基因1.0 ST阵列进行RNA分析。结果:体内实验结果:实验组小鼠(***+.Foxo1L/L)与对照组小鼠(***-.Foxo1L/L)比较,上皮中的FOXO1表达降低,在结缔组织中则没有明显的差异;在正常血糖情况下,***+.Foxo1L/L小鼠结缔组织愈合延迟,在第四天和第七天时结缔组边缘之间的间隙增加（P<0.05）;伤口中的肉芽组织和胶原产生均减少。但是在糖尿病组中,***+.Foxo1L/L与***-.Foxo1L/L小鼠没有明显的差异;***+.Foxo1L/L在结缔组织中成纤维细胞密度在血糖正常的伤口中降低56%（P<0.05）,但是在

关键词： FOXO1基因伤口愈合血管生成血管内皮细胞生长因子a 上皮间质转化糖尿病

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

体内外观察DHA抑制结肠癌的作用及相关蛋白的表达

引用

南通大学学报（医学版） 2014年第2期34卷 81-85页

作者：孟优俞士尤周俊东陶敏苏州大学附属第一医院肿瘤内科苏州215006 南京医科大学附属苏州医院肿瘤外科南京医科大学附属苏州医院肿瘤中心

目的:探讨二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)在抑制结肠癌发生、发展中的分子机制,为DHA新型抗癌药物的应用提供理论基础。方法:首先,建立人结肠癌裸鼠动物模型,观察DHA对裸鼠结肠癌移植瘤生长的影响;其次,应用半定量逆转录酶... 详细信息

目的:探讨二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)在抑制结肠癌发生、发展中的分子机制,为DHA新型抗癌药物的应用提供理论基础。方法:首先,建立人结肠癌裸鼠动物模型,观察DHA对裸鼠结肠癌移植瘤生长的影响;其次,应用半定量逆转录酶聚合酶链反应方法,检测环氧合酶2(cyclooxygenase 2,COX2)、低氧诱导因子-1α(hypoxiainducible factor-1α,HIF-1α)、血管内皮细胞生长因子a(vascular endothelial growth factor-A,VEGF-A)、软骨寡聚基质蛋白(cartilage oligomeric matrix protein,COMP)、基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1,MMP-1)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、固醇携带蛋白2(sterol carrier protein 2,SCP2)、多配体蛋白聚糖3(syndecan 3,SDC3)等多个与肿瘤发生发展密切相关基因的表达情况;最后,通过细胞水平实验对动物体内基因表达实验结果进行验证。结果:与对照组相比,DHA组裸鼠结肠癌移植瘤瘤块体积明显降低,证明DHA可以抑制结肠癌的发生发展;不管是在体内动物水平还是在体外细胞水平,DHA均可导致COX2、HIF-1α、VEGF-A、COMP、MMP-1、MMP-9、SCP2、SDC3基因表达水平明显降低。结论:DHA的抗癌作用涉及多方面、多层次的分子生物学机制。

关键词：结肠癌二十二碳六烯酸环氧合酶2 血管内皮细胞生长因子a 基质金属蛋白酶

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

血管紧张素（1—7）对胆管结扎诱导的肝纤维化大鼠肝窦血管生成的抑制作用

引用

中华肝脏病杂志 2013年第12期21卷 907-913页

作者：宁佐伟张文雍李洋蔡双明张莉莉李旭南方医科大学南方医院急诊科广州510515

目的探讨血管紧张素（1-7）（Ang（1—7））对胆管结扎所致肝纤维化大鼠肝窦血管生成的抑制作用及相应的分子机制。方法将18只Wistar雄性大鼠随机分为假手术（SHAM）组，胆总管结扎（BDL）组和Ang（1—7）治疗组。假手术组：行开腹术再... 详细信息

目的探讨血管紧张素（1-7）（Ang（1—7））对胆管结扎所致肝纤维化大鼠肝窦血管生成的抑制作用及相应的分子机制。方法将18只Wistar雄性大鼠随机分为假手术（SHAM）组，胆总管结扎（BDL）组和Ang（1—7）治疗组。假手术组：行开腹术再关腹，在腹腔埋注射泵，以25μg·kg-1·h-1。的速度持续注射等渗盐水；BDL组：开腹结扎胆总管建立肝纤维化模型，同时在腹腔埋注射泵，以25μg·kg-1·h-2的速度持续注射等渗盐水；Ang（1—7）治疗组：BDL建立肝纤维化模型，同时在腹腔埋注射泵，以25μg·kg-1·h-1的速度持续注射Ang（1—7）。4周后宰杀动物，取肝组织，行苏木素一伊红染色，进行肝纤维化评分；Masson胶原染色，测定胶原的表达；利用免疫组织化学，免疫印迹（Westernblot），组织免疫荧光检测血管生成的标志：血管性血友病因子（vwF），血管内皮细胞生长因子a（vEGFA），血小板一内皮细胞黏附分子CD31的表达。根据资料不同采用One-wayANOVA检验、LSD法、Welch法、Durmett’s T3法、t检验或相关性分析。结果研究结果显示：在BDL组中，与SHAM组相比，肝纤维化评分（4．83±0．75对比0．00±0．00，Ｐ=0．000）、胶原面积（87．27±5．33对比0．98±0．11，P=0．000）、免疫组织化学检测vWF的表达（灰度值3．11±0．3对比1．00±0．07，Ｐ=0．000）、VEGFA的表达（灰度值8．38±1．64对比1．00±0．08，Ｐ=0．003）、CD31的表达（灰度值3．05±0．44对比1．00±0．12，P=0．000），Westernblot检测vWF的表达（灰度值0．380±0．008对比0．270±0．007，P=0．000）、VEGFA的表达（灰度值0．270±0．005对比0．120±0．002，P=0．007）、CD31的表达（灰度值0．350±0．008对比0．060±0。004，P=0．000）均明显增高，差异有统计学意义护值均〈0．01）；免疫荧光检测BDL组肝组织vWF、VEGFA、CD31阳性表达细胞较SHAM组明显增多。与BDL组相比，Ang（1—7）治疗组中肝纤维化评分（2．50±0．55对比4．83±0．75，P=0．000）、胶原面积（24．46±3．45对比87．27±5．33，P=0．000）、免疫组织化学检测vWF的表达（灰度值1．60±0．06对比3．11±0．30，P=0．000）、VEGFA的表达（灰度值4．68±0．58对比8．38±．64，P=0．037）、CD31的表达（灰度值1．42±0．12对比3．05±0．44，P=0．009），Westernblot检测vWF的表达（灰度值0．190±0．007对比0．380±0．008，P=0．000）、vEGFA的表达（灰度值0．120±0．006对比0．270±0．005，P=0．000）、CD31的表达（灰度值0．130±0．006对比0．350±0．008，P=0．000）均显著下降，差异有统计学意义（P值均〈0．01）；免疫荧光检测Ang（1-7）治疗组vWF、VEGFA、CD31阳性表达的细胞较BDL组明显减少；各分组中VEGFA的表达与vwF表达呈现显著正相关关系（r=0．956，P=0．000）。结论Ang（1—7）可抑制BDL诱导肝纤维化大鼠肝窦血管生成。

关键词：肝硬化肝窦血管生成血管紧张素(1-7) 血管内皮细胞生长因子a 血管性血友病因子 CD31

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：