检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：胡玉红佳木斯大学附属第一医院

该项成果为以高血压为主的疾病的遗传学内在联系提供了依据,为该类疾病预测、早期诊断及基因治疗提供了理论依据。研究中采用PCR、限制性酶切、电泳分型、病例对照等方法对正常妊娠妇女、原发性高血压妇女以及妊高征患者血管紧张素Ⅱ1... 详细信息

标准号: 0400291675

该项成果为以高血压为主的疾病的遗传学内在联系提供了依据,为该类疾病预测、早期诊断及基因治疗提供了理论依据。研究中采用PCR、限制性酶切、电泳分型、病例对照等方法对正常妊娠妇女、原发性高血压妇女以及妊高征患者血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)基因A1166位等位基因变异频率明显增加,C基因频率增多,基因型AC、CC频率明显高于正常妊娠组,显示AT1R基因A1166位点的多态性与妊高征发病有关,该位点的变异增大了患妊高征的风险。妊高征与原发性高血压AT1R基因A1166位点等位基因相似,提示妊高征妇女可能携带了今后生活中发生原发性高血压的危险基因,即妊高征妇女的基因型特点起决定作用,说明妊高征与原发性高血压存在分子生物学内在联系。

关键词：血管紧张素ⅱ型受体基因突变妊娠高血压综合征病因

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血管紧张素2型受体诱导膀胱癌细胞（EJ）凋亡的实验研究

血管紧张素2型受体诱导膀胱癌细胞（EJ）凋亡的实验研究

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作者：万沛南方医科大学

学位级别：硕士

膀胱癌是泌尿系统常见的恶性肿瘤的。它在中国有很高的发病率。传统的治疗方法包括手术、放疗和化疗,化疗的价值有一定的局限性,这是因为化疗会伤害正常细胞并导致复发率增高。近年来,随着分子生物学取得了突飞猛进的进展,基因治疗现如... 详细信息

膀胱癌是泌尿系统常见的恶性肿瘤的。它在中国有很高的发病率。传统的治疗方法包括手术、放疗和化疗,化疗的价值有一定的局限性,这是因为化疗会伤害正常细胞并导致复发率增高。近年来,随着分子生物学取得了突飞猛进的进展,基因治疗现如今已成为一种治疗膀胱癌的新的策略。血管紧张素Ⅱ (Angiotensin Ⅱ, AngⅡ)是肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensin system, RAS)中的一种生物活性肽,它通过与某些特定器官的AT1受体(AT1R)和AT2受体(AT2R)结合,调控心血管系统的稳态和组织的生长。AT2R在胚胎组织中高度表达,而在人体出生后其表达急剧降低。当心血管系统或者神经系统发生损伤时,AT2R会在修复组织损伤的过程中重新表达。有研究发现AT2R具有抑制细胞周期的功能,它可能在癌症中能够发挥抑制肿瘤生长的作用。提高AT2R在多种癌细胞系,例如前列腺癌、肺癌、嗜铬细胞瘤和结直肠癌等细胞系中的水平,能够诱导细胞凋亡,而且癌细胞的生长会受到抑制。在我们的实验研究中,用表达AT2R的重组腺病毒载体将AT2R导入膀胱癌细胞中,以此来提高AT2R的表达水平,通过Q-PCR,流式细胞分选,凋亡染色等实验技术,检验AT2R的过度表达对膀胱癌细胞周期和凋亡的作用,并进一步探讨其可能的细胞内作用机制。方法与材料 1.细胞培养 1.1、复苏把冻存管从液氮中取出来,立即投入37℃水浴锅中,轻微摇动。液体都融化后,拿出来喷洒酒精后放到超净工作台里。把上述细胞悬液吸到装10ml培养基的15ml的离心管中1000转离心5分钟。把上清液倒掉,加1ml培养基把细胞悬浮起来。吸到装有10ml培养基的10cm培养皿中前后左右轻轻摇动,使培养皿中的细胞均匀分布。 1.2传代培养皿中的细胞覆盖率达到80%-90%时要传代。把原有培养基吸掉,加适当的胰蛋白酶,消化1-2分钟,细胞都变圆后加如入等体积的含血清的培养基终止消化,用移液枪吹打细胞,把细胞都悬浮起来。把细胞吸到15ml的离心管中,1000转离心5分钟。倒掉上清液,加1-2ml培养基,把细胞都吹起来。移入培养瓶继续培养。 2.重组腺病毒制备我们采用以下两种重组腺病毒载体,一种是腺病毒载体包含被巨细胞病毒启动子控制的增强绿色荧光蛋白基因(Ad-CMV-EGFP),而另一种腺病毒载体包含AT2R基因和被巨细胞病毒启动子控制的增强绿色荧光蛋白基因(Ad-G-AT2R-EGFP)。 293T细胞接种于150mm2的组织培养皿中。感染复数(multiplicity of infection, MOI,virus/cell)为10的重组腺病毒载体被转到入293T细胞中。36至48小时后可观察细胞病变。通过冻融和两个氯化铯密度梯度的超速离心进行提纯,根据腺病毒DNA的OD260nm和OD280nm计算病毒颗粒和纯度,并通过空斑实验检测病毒滴度。 3.测量提取RNA的浓度用含AT2R的腺病毒感染EJ细胞,48小时后,收集细胞,依据TRIZOL试剂盒说明书,提取RNA。之后,利用紫外分光光度计测定RNA的浓度及RNA在260nm和280nm的OD值。 4.检测AT2R的表达我们从两个方面去观察,(1),腺病毒感染膀胱癌(EJ)细胞后,分别在24h、48h、72h通过荧光显微镜观察膀胱癌细胞,是否有绿色荧光蛋白的高效表达。(2),运用QPCR的技术,在腺病毒(含有Ad-G-AT2R-EGFP),对照组腺病毒(Ad-CMV-EGFP),感染膀胱癌细胞48小时后。按照TRIZOL使用说明书,提取膀胱癌细胞RNA,进行逆转录,转录成CDNA, AT2R引物为5'-CCACCCTTGCCACTACTAGCA-3';5'-CATTGTTGCCAGAGAT GTTCACA-3'.然后使用荧光定量PCR技术,其目的是为了检测细胞内AT2的表达水平。 ***2R基因对EJ细胞形态的影响膀胱癌细胞(EJ细胞系,106/ml每孔)被接种于150mm2的组织培养皿中。第二天,Ad-CMV-EGFP或Ad-G-AT2R-EGFP被转导入膀胱癌细胞中。细胞培养液为添加10%FBS的DMEM。24小时、48小时和72小时后观察细胞形态。培养48小时后的细胞被用于凋亡试验。 ***2R基因对EJ细胞周期的影响。膀胱癌细胞经过腺病毒感染后48小时,胰酶消化,悬浮细胞,经过PBS洗涤和离心后,用冰冻的70%乙醇固定至少18小时。然后放置于保持室温的暗室中,细胞在300μL的0.1%PI(50mg/L propridium iodide,0.1%sodium-citrate,0.1%tritonX-100)中

关键词：膀胱癌血管紧张素ⅱ型受体腺病毒基因治疗

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扩张型心肌病大鼠胶原重塑与血管紧张素II及其I型受体变化

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岭南心血管病杂志 2004年第4期10卷 299-301页

作者：黄荣杰刘唐威庞玉生广西医科大学第二附属医院ICU 南宁市530007 广西心血管病研究所广西医科大学第一附属医院儿科

目的　探讨血管紧张素II及其I型受体在扩张型心肌病心室间质胶原重塑中的作用。方法　用呋喃唑酮饲养Wistar大鼠建立扩张型心肌病大鼠模型 ,超声心动图检测大鼠心功能 ,病理学测量大鼠左室内径和左游离壁厚度 ,HE和VG染色分别观察大鼠... 详细信息

目的　探讨血管紧张素II及其I型受体在扩张型心肌病心室间质胶原重塑中的作用。方法　用呋喃唑酮饲养Wistar大鼠建立扩张型心肌病大鼠模型 ,超声心动图检测大鼠心功能 ,病理学测量大鼠左室内径和左游离壁厚度 ,HE和VG染色分别观察大鼠心肌细胞和间质胶原纤维的变化 ,免疫组化检测血管紧张素Ⅱ及其I型受体表达水平。结果　扩张型心肌病大鼠左室收缩功能下降 ;左心室内径增大、游离壁变薄 ;心肌细胞肥大、变性 ,核增大、分裂、畸形 ,间质胶原纤维增生 ;左室心肌血管紧张素II表达水平升高 ,而血管紧张素III型受体表达水平降低。结论　血管紧张素II水平升高可能是呋喃唑酮扩张型心肌病大鼠心室间纤维化的原因之一。

关键词：扩张型心肌病大鼠胶原重塑血管紧张素ⅱ型受体血管紧张素Ⅰ型受体

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血管紧张素-(1-7)对自发性高血压大鼠去外膜颈动脉血管结构和功能的影响

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中国临床药理学与治疗学 2006年第12期11卷 1389-1394页

作者：王安才李俊曹蘅汪俊元曹晓霞吴明皖南医学院弋矶山医院心血管内科

目的:研究血管紧张素-(1-7)[Ang-(1-7)]对自发性高血压大鼠(SHR)一侧颈动脉去外膜血管结构和功能的影响。方法:24只SHR去除右侧颈动脉外膜后,随机分为3组(每组8只):SHR组、Ang-(1-7)组和Ang779[Ang-(1-7)拮抗剂]组;8只WKY鼠作为对照组(... 详细信息

目的:研究血管紧张素-(1-7)[Ang-(1-7)]对自发性高血压大鼠(SHR)一侧颈动脉去外膜血管结构和功能的影响。方法:24只SHR去除右侧颈动脉外膜后,随机分为3组(每组8只):SHR组、Ang-(1-7)组和Ang779[Ang-(1-7)拮抗剂]组;8只WKY鼠作为对照组(WKY组)。去除大鼠右侧颈动脉外膜左侧作假手术对照。颈静脉给药2周,测量尾动脉收缩压(SBP)、双侧颈动脉血流量和血浆及双侧颈动脉血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)浓度。取双侧颈动脉制成光镜标本,病理图象分析系统测定颈动脉内膜和中膜增生状况。免疫组织化学方法测定双侧颈动脉血管紧张素1(AT1)受体蛋白表达。TUNEL法检测血管组织细胞凋亡。结果:Ang-(1-7)组SBP较Ang779组和SHR组显著下降(P<0.01)。Ang-(1-7)组未去外膜侧和去外膜侧内膜增生较SHR组和Ang779组明显改善(P<0.01)。Ang-(1-7)组去外膜侧颈动脉血流量显著高于SHR组和Ang779组(P<0.01)。去外膜侧颈动脉AngⅡ浓度显著高于未去外膜侧(P<0.01)。SHR组和Ang779组去外膜侧颈动脉AT1受体蛋白表达显著高于未去外膜侧(P<0.01),Ang-(1-7)组未去外膜侧和去外膜侧颈动脉AT1受体蛋白表达明显低于SHR组和Ang779组(P<0.01)。Ang-(1-7)组未去外膜侧和去外膜侧凋亡指数较SHR组和Ang779组显著升高(P<0.01)结论:Ang-(1-7)能降低SHR的收缩压和血管阻力增加去外膜侧颈动脉血流量,抑制去外膜后颈动脉内膜增生。这一作用可能与Ang-(1-7)下调颈动脉AT1受体,促进血管组织细胞凋亡有关。

关键词：血管紧张素-(1-7) 大鼠外膜血管紧张素ⅱ型受体细胞凋亡

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脉冲电场介导AT2R基因在血管局部表达及其对血管新生内膜影响

脉冲电场介导AT2R基因在血管局部表达及其对血管新生内膜影响

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作者：刘德峰第三军医大学

学位级别：硕士

研究背景和目的:据世界卫生组织(World Health Organization WHO)统计,2010年,冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)所致死亡占总死亡人口的10%,位居第一[1]。随着经皮冠状动脉球囊成形术(PTCA)及经皮冠状动脉支架植入术(PCI)广泛应用于冠... 详细信息

研究背景和目的: 据世界卫生组织(World Health Organization WHO)统计,2010年,冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)所致死亡占总死亡人口的10%,位居第一[1]。随着经皮冠状动脉球囊成形术(PTCA)及经皮冠状动脉支架植入术(PCI)广泛应用于冠心病的治疗,使冠心病患者预后有了显著改善,死亡率明显降低,但PTCA及PCI术后有较高的再狭窄发生率[2,3],严重影响了PCI术的远期疗效,如何防治再狭窄成为冠心病介入治疗的重要课题之一。PTCA或PCI时,球囊损伤动脉内皮及中层,引起血管平滑肌细胞(VSMC)表型转化、迁移、增殖及细胞外基质合成,形成新生内膜,而新生内膜的形成和增殖是引起支架内再狭窄的主要病理改变。血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)受体主要有两型,即AngⅡ1型受体即AT1R和AngⅡ2型受体即AT2R。AngⅡ可通过AT1受体的激活发挥缩血管,促细胞增生迁移、促进新生内膜形成、细胞外基质沉积,促发炎症、血栓形成及氧化应激的效应,这些是再狭窄发生过程中主要因素之一。AT2受体激活则发挥舒张血管,抗增生抗血栓,诱导凋亡及产生一氧化氮NO的效应。因此我们选择血管紧张素Ⅱ2型受体基因(angⅡtype 2 receptor gene,AT2R gene)为靶点来观察其对再狭窄后新生内膜的影响。体内转基因(in vivo)是将目的基因直接导入病变部位细胞中,目的基因在原位表达而产生治疗效果。是最直接的基因治疗方法。但目前的困难主要是很难将目的基因送入血管局部并有效表达。现在常用基因载体介导基因转染,常用的基因载体有病毒类载体(如腺病毒载体、逆转录病毒载体)和非病毒类载体(如质粒载体、脂质体)载体,均距离理想的基因载体有一定的差距。腺病毒载体的毒性及免疫原性使其应用于临床受到限制。更有研究发现腺病毒载体对于动脉粥样硬化病灶的转染率低,而其他动脉被转染的危险增加。而且人群对病毒普遍具备免疫力,病毒载体易被宿主免疫系统清除致使基因表达时间短。非病毒类载体以质粒DNA为代表。它的主要优点是对携带基因的大小无限制,不易引起宿主细胞的免疫反应、不整合入宿主细胞DNA,缺点是转染效率低,特别是在活体组织局部转染时表达率更低。上世纪六七十年代,人们开始研究电穿孔法介导基因转染,细胞在电场的作用下可逆或者不可逆的出现细胞膜穿孔,这些孔道可以帮助基因分子进入细胞,大量研究证实[4,5],电穿孔法可增加基因的转染效果,并增加基因表达时间。但该方法多用于体外培养的细胞中,在活体组织中应用较少,而且查阅大量文献后活体血管电穿孔的研究比较少,本研究将电穿孔法用于活体血管组织中以达到增加AT2R在血管局部的过表达的目的,进而观察AT2R表达对大鼠血管损伤后新生内膜的影响作用。研究方法: 1.以pUHD-10.3/AT2R质粒为模板,PCR扩增AT2R基因的全长cDNA序列,再将其克隆入载体pEGFP2-N2,构建其真核表达载体pEGFP-N2/AT2R。 2.自制用于血管电穿孔的夹子状血管电极片及活体电穿孔仪器的准备。 ***球囊损伤法构建再狭窄动物模型,通过脉冲电场介导pEGFP-AT2R或pEGFP-N2在大鼠颈总动脉内膜局部表达。 4.免疫组织化学染色技术检测AT2R在大鼠颈总动脉内膜的表达 ***-PCR技术检测AT2R mRNA在大鼠颈总动脉的表达 ***染色检测AT2R表达对大鼠损伤后颈总动脉新生内膜的影响研究结果: ***-N2/AT2R成功构建,经测序与基因库完全一致。 2.自制夹子状电极片可用于电穿孔法介导重组AT2R真核表达质粒在体转染。 ***球囊损伤法能成功构建再狭窄动物模型。 4.免疫组化检测结果提示脉冲电场能有效介导AT2R在大鼠颈总动脉内膜表达,电穿孔转染组的颈总动脉内膜AT2R的表达水平显著高于单纯损伤组、空转组和不加电场转染组(P <0. 01),7d时仍维持较强表达,14d后迅速下降,21d时表达几乎消失。 ***-PCR结果提示脉冲电场能有效介导AT2R在大鼠颈总动脉内膜表达,电穿孔转染组的颈总动脉内膜AT2R的表达水平显著高于对照组、空转组和不加电场转染组(P <0. 01),7d时仍维持较强表达,14d时达到高峰,之后迅速下降,21d时有微弱表达。 ***染色结果提示:在转染21 d时,转染组的内膜面积与中膜面积比显著低于单纯损伤组和空转组[分别为(0.76±0.08)、(1.39±0.08)、(1.32±0.10),P<0.01],空转组和单纯损伤组之间无统计学差异(P>0.01)。研究结论; 1. PTCA球囊损伤法能成功构建再

关键词：电穿孔血管紧张素ⅱ型受体基因转染再狭窄内膜损伤

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AT2R通过NF-κB信号对人膝骨关节炎滑膜组织成纤维样细胞中IL-6、IL-1β表达的影响

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中国老年学杂志 2019年第9期39卷 2247-2251页

作者：宋鹏荆凯魏鹏飞孙永强谭斌河南省中医院烧伤显微修复科河南郑州450002 河南省骨科医院骨科中国人民解放军第113医院显微手足外科

目的探讨血管紧张素ⅱ型受体(AT2R)在膝骨关节炎(OA)滑膜组织中表达及其调控成纤维样滑膜细胞(FLS)中炎症因子白细胞介素(IL)-6、IL-1β表达的潜在机制。方法以54例OA患者手术切除膝关节滑膜组织为OA组,以36例正常膝关节滑膜标本为对照... 详细信息

目的探讨血管紧张素ⅱ型受体(AT2R)在膝骨关节炎(OA)滑膜组织中表达及其调控成纤维样滑膜细胞(FLS)中炎症因子白细胞介素(IL)-6、IL-1β表达的潜在机制。方法以54例OA患者手术切除膝关节滑膜组织为OA组,以36例正常膝关节滑膜标本为对照组,采用Western印迹检测滑膜组织中AT2R蛋白表达;分别从正常膝关节滑膜标本和膝关节炎滑膜组织中分离正常人成纤维样滑膜细胞(H-FLS)和OA患者成纤维样滑膜细胞(OA-FLS)。并用Western印迹检测CD14、CD90、波形蛋白(Vimentin)表达;Western印迹检测IL-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α对H-FLS和OA-FLS中AT2R表达影响;OA-FLS细胞沉默AT2R和激活AT2R后,qPCR检测IL-6、IL-1β表达变化,荧光素酶报告基因实验检测核因子(NF)-κB活性变化;噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖能力变化。结果与对照组相比,OA组中AT2R表达显著增加(P<0.05)。与Blank组相比,TNF-α组、IL-1β组及IL-1β+TNF-α组H-FLS细胞及TNF-α组、IL-1β+TNF-α组OA-FLS细胞中AT2R表达均显著增加(P<0.05)。与NC组相比,siAT2R组IL-6、IL-1βmRNA表达明显增加(P<0.05),而AT2R agonist组IL-6、IL-1βmRNA表达显著降低(P<0.05),与Control组相比,TNF-α组、siAT2R组NF-κB p65活性显著增加(P<0.05),AT2R agonist组NF-κB p65活性明显被抑制(P<0.05)。与Blank组相比,在48 h、72 h时TNF-α组、siAT2R组OA-FLS细胞增殖能力显著增强(P<0.05),而AT2R agonis组细胞增殖能力被显著抑制(P<0.05)。结论 AT2R激动剂可能成为临床治疗OA患者的一种新的治疗方法策略。

关键词：血管紧张素ⅱ型受体骨关节炎白细胞介素-6 白细胞介素-1β

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缬沙坦联合氨氯地平治疗中老年高血压并发蛋白尿148例

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陕西医学杂志 2013年第4期42卷 495-496页

作者：杨栋苏慧兰州军区临潼疗养院第二疗养区临潼710600 第四军医大学西京医院老年病科

目的:观察缬沙坦联合氨氯地平对中老年高血压合并尿微量白蛋白的治疗效果。方法:选择高血压合并尿微量白蛋白患者148例随机分为两组,氨氯地平组(A组),氨氯地平联合缬沙坦组(B组),疗程12周,观察治疗前后血压、尿微量白蛋白(MAU)、血(尿)... 详细信息

目的:观察缬沙坦联合氨氯地平对中老年高血压合并尿微量白蛋白的治疗效果。方法:选择高血压合并尿微量白蛋白患者148例随机分为两组,氨氯地平组(A组),氨氯地平联合缬沙坦组(B组),疗程12周,观察治疗前后血压、尿微量白蛋白(MAU)、血(尿)β2微球蛋白、血肌酐等指标。结果:治疗12周后,两组血压均明显下降,总有效率无显著差异。A组MAU、血(尿)β2微球蛋白无明显下降;B组MAU、血(尿)β2微球蛋白浓度均显著下降;两组间比较有显著性差异。结论:对中老年高血压合并尿微量白蛋白患者,缬沙坦与氨氯地平联合治疗不但可以有效降血压,同时,可显著降低尿微量白蛋白及血(尿)β2微球蛋白。

关键词：高血压药物疗法蛋白尿药物疗法血管紧张素ⅱ型受体阻滞消毒剂治疗应用氨氯地平治疗应用

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应用激光共聚焦显微镜图像扫描技术研究AT2R与PCNA的表达

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中国药理通讯 2005年第3期22卷 42-42页

作者：曹红卫王宁重庆第三军医大学附属西南医院中心实验室重庆400038

目的研究血管紧张素ⅱ型受体（angiotensinⅡ type 2 receptor，AT2R）与增殖细胞核抗原（proliferating—cell nuclear antigen，PCNA）表达之间的关系。方法应用免疫荧光双标检测颈动脉AT2R和PCNA蛋白表达的变化。大鼠颈动脉在体转... 详细信息

目的研究血管紧张素ⅱ型受体（angiotensinⅡ type 2 receptor，AT2R）与增殖细胞核抗原（proliferating—cell nuclear antigen，PCNA）表达之间的关系。方法应用免疫荧光双标检测颈动脉AT2R和PCNA蛋白表达的变化。大鼠颈动脉在体转染带有绿色荧光蛋白报告基因AT2R重组腺病毒目的基因，经血管球囊扩张再灌注术后横断取材，制成冰冻切片，用CY3红色荧光抗体标记AT2R，用AMCA蓝色荧光抗体标记PCNA，激光共聚焦显微镜以405、488、543nm激发波长同时检测三种荧光标记。

关键词： PCNA蛋白表达激光共聚焦显微镜共聚焦显微镜图像扫描技术 angiotensinⅡ 绿色荧光蛋白报告基因血管紧张素ⅱ型受体 receptor 荧光抗体标记

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降压药有助于避免老年性痴呆症

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心血管病防治知识 2007年第12期 27-27页

作者：董浩然

研究人员指出，降压药缬沙坦（Valsartan，血管紧张素ⅱ型受体（AT1）拮抗剂）具有减少老鼠出现阿尔茨海默病（也称老年性痴呆症）类似症状的能力。

关键词：老年性痴呆症降压药血管紧张素ⅱ型受体阿尔茨海默病研究人员缬沙坦拮抗剂

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