检索结果-内蒙古大学图书馆

扶正化瘀方调控TGF-β/Smad信号通路对博来霉素诱导小鼠肺纤维化的影响

中成药 2024年第6期46卷 2042-2047页

作者：冯嘉文黄恺景菲邢枫彭渊刘成海上海中医药大学附属曙光医院肝病研究所上海201203 上海市中医临床重点实验室上海201203 肝肾疾病病证教育部重点实验室上海201203

目的探讨扶正化瘀方对博来霉素诱导肺纤维化小鼠的作用。方法将小鼠随机分为模型组、扶正化瘀方组(5.6 g/kg)和尼达尼布组(60 mg/kg),每组15只,采用无创气管插管经气道滴注博来霉素(2.5 mg/kg)复制小鼠肺纤维化模型;另取10只正常小鼠予... 详细信息

目的探讨扶正化瘀方对博来霉素诱导肺纤维化小鼠的作用。方法将小鼠随机分为模型组、扶正化瘀方组(5.6 g/kg)和尼达尼布组(60 mg/kg),每组15只,采用无创气管插管经气道滴注博来霉素(2.5 mg/kg)复制小鼠肺纤维化模型;另取10只正常小鼠予气道滴注等体积生理盐水,作为正常组。造模7 d后,各组灌胃相应剂量药物,连续给药14 d。末次给药24 h后,使用肺功能仪测定小鼠气道狭窄指数、呼吸频率和潮气量,试剂盒检测血清羟脯氨酸(Hyp)水平,苏木素-伊红和Masson染色分别观察肺组织炎症和胶原沉积水平,ELISA法检测肺泡灌洗液中TNF-α、IL-6水平,免疫组化观察肺组织α-SMA表达,蛋白印迹法检测小鼠肺组织α-SMA、TGF-β1、Smad2/3、p-Smad2、p-Smad3蛋白表达。结果与正常组比较,模型组小鼠呼吸急促,体质量降低(P<0.01),Penh值增加(P<0.01),f、TV减少(P<0.01),肺组织大量炎性细胞浸润和大量胶原纤维沉积并有纤维节结生成,血清Hyp、IL-6、TNF-α水平升高(P<0.01),肺组织α-SMA、TGF-β1、Smad2/3、p-Smad2、p-Smad3蛋白表达升高(P<0.01);与模型组比较,扶正化瘀方组和尼达尼布组小鼠呼吸平稳,Penh值降低(P<0.01),f、TV增加(P<0.01),肺组织炎性细胞浸润和胶原纤维沉积减少(P<0.01),血清Hyp、IL-6、TNF-α水平降低(P<0.01),肺组织α-SMA、TGF-β1、Smad2/3、p-Smad2、p-Smad3蛋白表达降低(P<0.01)。结论扶正化瘀方可抑制博来霉素诱导的小鼠实验性肺纤维化,其作用机制可能与调控TGF-β/Smad信号通路有关。

关键词：扶正化瘀方博来霉素肺纤维化 TGF-β/Smad信号通路

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六味地黄汤加减联合氯沙坦钾对糖尿病肾病大鼠ACE1/AngⅡ/AT1R轴及肠道菌群的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年第6期30卷 1-9页

作者：杨超茅张顺宵李园园高建东上海中医药大学附属曙光医院宝山分院上海201999 上海中医药大学附属宝山医院上海201999 上海中医药大学附属曙光医院上海201203 上海中医药大学中医肾病研究所肝肾疾病病证教育部重点实验室上海市中医临床重点实验室上海201203

目的:基于血管紧张素转换酶1(ACE1)/血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)/血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)轴,探讨六味地黄汤加减防治糖尿病肾病(DKD)肾脏损伤的可能作用机制。方法:随机将50只雄性SD大鼠分为正常组8只,造模组42只,造模组大鼠高糖高脂饲料喂... 详细信息

目的:基于血管紧张素转换酶1(ACE1)/血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)/血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)轴,探讨六味地黄汤加减防治糖尿病肾病(DKD)肾脏损伤的可能作用机制。方法:随机将50只雄性SD大鼠分为正常组8只,造模组42只,造模组大鼠高糖高脂饲料喂养6周后,予一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)35 mg·kg^(-1)诱导建立DKD大鼠模型。造模成功后随机分为模型组、中药组(六味地黄汤加减颗粒剂21 g·kg^(-1))、西药组(氯沙坦钾33 mg·kg^(-1))、中西药组(氯沙坦钾33 mg·kg^(-1)联合六味地黄汤加减颗粒剂21 g·kg^(-1)),连续灌胃8周后检测各组大鼠空腹血糖(FBG)、尿蛋白(Up)、尿素氮(Bun)、血肌酐(SCr);酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清ACE1、AngⅡ、AT1R水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠肾组织ACE1、AngⅡ、AT1R蛋白表达水平;苏木素-伊红(HE)、马松(Masson)、过碘酸雪夫氏(PAS)染色后观察肾组织病理形态学改变;采集各组大鼠粪便标本进行16S rDNA高通量测序分析。结果:与正常组比较,模型组Up、FBG、Bun、SCr、ACE1、AngⅡ、AT1R水平显著升高(P<0.01),肾组织病变严重,ACE1、AngⅡ、AT1R蛋白表达显著增加(P<0.01),厚壁菌门/拟杆菌门(F/B)升高,乳杆菌属的物种丰度下降,穆氏菌属、双歧杆菌属的物种丰度升高;与模型组比较,各给药组Bun、SCr、ACE1、AngⅡ、AT1R水平均显著下降(P<0.01),肾脏病变程度有所改善,中药组、中西药组Up、FBG水平均显著下降(P<0.01),西药组和中西药组的ACE1、AngⅡ、AT1R蛋白,中药组的AngⅡ蛋白表达显著减少(P<0.01)、中药组ACE1、AT1R蛋白表达明显减少(P<0.05),中药组、中西药组的F/B降低;西药组和中药组布劳特氏菌属的物种丰度升高,中药组、中西药组乳杆菌属、瘤胃球菌科未定属、双歧杆菌属的物种丰度升高,穆氏菌属的物种丰度下降,中药组、中西药组Chao 1和Ace指数明显增加(P<0.05);与西药组比较,中西药组Up水平均显著下降(P<0.01),中西药组的Bun水平明显降低(P<0.05);中西药组ACE1、AT1R水平显著降低(P<0.01),ACE1、AngⅡ、AT1R蛋白表达明显减少(P<0.05),肾脏病变程度改善较明显,双歧杆菌属的物种丰度升高,Chao 1和Ace指数明显增加(P<0.05)。结论:六味地黄汤加减联合氯沙坦钾可通过调节ACE1/AngⅡ/AT1R轴减轻肾脏纤维化,提升大鼠乳杆菌属、双歧杆菌属的物种丰度,降低穆氏菌属的物种丰度,并改善肠道菌群的丰富度、均匀度,减轻肾脏病理损伤。

关键词：血管紧张素转换酶1 血管紧张素Ⅱ 血管紧张素Ⅱ1型受体肠道菌群六味地黄汤加减

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饮食对非酒精性脂肪性肝病肠道微生物菌型相关菌群的影响

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临床肝胆病杂志 2021年第4期37卷 939-942页

作者：刘巧红赵瑜胡义扬上海中医药大学附属曙光医院肝病研究所上海201203 上海市中医临床重点实验室上海201203 肝肾疾病病证教育部重点实验室上海201203

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是一种典型的慢性肝病,与肠道微生态的失调密切相关。饮食因素可能是影响肠道细菌组成和功能的最重要的驱动因素。基于肠道微生物菌型的概念,总结了饮食对NAFLD肠道微生物菌型相关菌群的影响,包含厚壁菌门/拟... 详细信息

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是一种典型的慢性肝病,与肠道微生态的失调密切相关。饮食因素可能是影响肠道细菌组成和功能的最重要的驱动因素。基于肠道微生物菌型的概念,总结了饮食对NAFLD肠道微生物菌型相关菌群的影响,包含厚壁菌门/拟杆菌门的比值、拟杆菌属、普雷沃菌属、瘤胃球菌属、变形菌门、放线菌门及其他菌。指出改善饮食进而调节肠道菌群是防治NAFLD的重要策略之一,具有良好的前景,但尚需进一步的机制和临床研究。

关键词：非酒精性脂肪性肝病饮食肠道微生物菌型肠道菌群

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国内外药物性肝损伤临床诊疗指南的比较分析

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中华肝脏病杂志 2023年第4期31卷 433-439页

作者：李容容李盟罗琼孙鑫刘成海上海中医药大学附属曙光医院肝病研究所上海201203 上海市中医临床重点实验室上海201203 肝肾疾病病证教育部重点实验室上海201203

药物性肝损伤的影响因素复杂,临床表现多样,尚缺乏简便可靠的诊断方法,毒理机制等也有待进一步明确。针对药物性肝损伤的诊治,国内外相关指南存在诸多差异,部分内容未形成共识。现选择国内外影响较大的5个药物性肝损伤临床指南——2021... 详细信息

药物性肝损伤的影响因素复杂,临床表现多样,尚缺乏简便可靠的诊断方法,毒理机制等也有待进一步明确。针对药物性肝损伤的诊治,国内外相关指南存在诸多差异,部分内容未形成共识。现选择国内外影响较大的5个药物性肝损伤临床指南——2021美国胃肠病学会临床指南、2021亚太肝病学会共识指南、2020国际医学组织理事会药物性肝损伤国际共识、2019欧洲肝病学会临床实践指南、2015中华医学会药物性肝损伤诊治指南等,并参考其他相关共识意见或指南,就药物性肝损伤尤其中草药肝损伤的流行病学、风险因素、诊断评估、治疗管理等内容进行比较分析,以期提高认识,为药物性肝损伤的临床诊断和治疗提供参考。

关键词：药物性肝损伤中草药肝损伤诊断治疗临床指南

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扶正化瘀方影响转化生长因子β1/Smad信号通路的抗肝纤维化作用机制

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中西医结合学报 2012年第5期10卷 561-568页

作者：王清兰陶艳艳沈丽崔红燕刘成海上海中医药大学曙光医院上海中医药大学肝病研究所上海201203 上海市中医临床重点实验室上海201203 上海中医药大学肝肾疾病病证教育部重点实验室上海201203

目的:探讨扶正化瘀方影响转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)/Smad信号转导的抗肝纤维化作用机制。方法:本研究分体内实验和体外实验两部分。在体内实验中,37只雄性Wistar大鼠分为正常组(5只)、模型组(18只)和扶... 详细信息

目的:探讨扶正化瘀方影响转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)/Smad信号转导的抗肝纤维化作用机制。方法:本研究分体内实验和体外实验两部分。在体内实验中,37只雄性Wistar大鼠分为正常组(5只)、模型组(18只)和扶正化瘀方组(14只)。模型组和扶正化瘀组大鼠采用二甲基亚硝胺(dimethylnitrosamine,DMN)腹腔注射复制大鼠肝纤维化模型。灌胃治疗4周后,采用盐酸水解法检测肝组织中羟脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)含量,蛋白质印迹法分析肝组织中TGF-β1、TGF-β1Ⅰ型受体(TGF-β1 type Ⅰ receptor,TβR-Ⅰ)、Smad2、Smad3及磷酸化Smad2/3蛋白的表达。体外实验采用培养4d的原代大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC),分为对照组、TGF-β1组、10%扶正化瘀方药物血清组及TβR-Ⅰ胞内激酶抑制剂(SB-431542)组。后3组用2.5ng/mLTGF-β1刺激24h后,对照组及TGF-β1组加10%正常大鼠血清,10%扶正化瘀方药物血清组加10%服用扶正化瘀方的大鼠血清,SB-431542组加10%正常大鼠血清及10μmol/LSB-431542。共孵育24h后,免疫荧光染色检测HSC中α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和Smad3蛋白的表达,蛋白质印迹法分析HSC中α-SMA蛋白的表达。结果:体内实验发现,扶正化瘀方可明显降低纤维化肝组织中异常升高的Hyp含量及TGF-β1、TβR-Ⅰ、磷酸化Smad2/3蛋白的表达。体外研究发现,正常HSC中α-SMA、TβR-Ⅰ表达较低,TGF-β1刺激可显著上调其表达;扶正化瘀方药物血清共孵育后,可明显抑制TGF-β1诱导的HSC中α-SMA的表达;正常HSCSmad3主要表达在细胞质中,细胞核中表达较低,TGF-β1可显著刺激Smad3向细胞核转移,扶正化瘀方药物血清可明显抑制TGF-β1诱导的Smad3核转位。结论:扶正化瘀方可下调纤维化大鼠肝脏及HSC中的TGF-β1/Smad病理信号转导通路,这可能是扶正化瘀方抗肝纤维化的部分作用机制。

关键词：中草药肝纤维化肝星状细胞转化生长因子β1 Smad蛋白质类,受体调节性大鼠

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血府逐瘀汤及其不同提取部位对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝病小鼠模型的影响

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临床肝胆病杂志 2022年第12期38卷 2728-2737页

作者：唐浩尹艺晓刘伟方怡王君胡义扬彭景华上海中医药大学附属曙光医院上海201203 上海中医药大学肝病研究所上海201203 教育部肝肾疾病重点实验室(上海中医药大学) 上海201203 上海市中医临床重点实验室上海201203

目的评价血府逐瘀汤对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的药效,解析血府逐瘀汤发挥效应的物质基础。方法实验一探究血府逐瘀汤对高脂饮食诱导的小鼠NAFLD的作用,将50只C57BL/6J健康雄性小鼠随机分为正常组、模型组、血府逐瘀汤高剂量和低剂量... 详细信息

目的评价血府逐瘀汤对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的药效,解析血府逐瘀汤发挥效应的物质基础。方法实验一探究血府逐瘀汤对高脂饮食诱导的小鼠NAFLD的作用,将50只C57BL/6J健康雄性小鼠随机分为正常组、模型组、血府逐瘀汤高剂量和低剂量组、奥贝胆酸对照组,每组10只。正常组小鼠予对照饮食,其余各组高脂饮食,造模第13周开始灌胃给药,16周末取材。记录进食量、体质量,酶联免疫法测定空腹血清胰岛素水平,检测空腹血糖并计算胰岛素抵抗指数。HE染色和NAFLD活动评分(NAS)观察小鼠肝组织病理;油红O染色观察脂质沉积;检测肝组织TG和血清ALT水平。实验二分析血府逐瘀汤各提取部位对高脂饮食诱导的小鼠NAFLD的作用,利用水煎、水提醇沉、石油醚萃取技术,获得血府逐瘀汤提取部位1、2、3。将54只C57BL/6J健康雄性小鼠随机分为正常组、模型组、血府逐瘀汤提取部位1、2、3和血府逐瘀汤对照组,每组9只。正常组予对照饮食,其余各组高脂饮食,造模第13周开始灌胃给药,16周末取材。记录进食量、体质量,酶联免疫法测定空腹血清胰岛素含量,检测空腹血糖并计算胰岛素抵抗指数。HE染色和NAS评分观察小鼠肝组织病理;油红O染色观察脂质沉积;检测肝组织TG、GGT、血清ALT水平。正态分布的计量资料两组间比较采用t检验;多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。非正态分布的计量资料多组间比较及进一步两两比较均采用Kruskal-Wallis H检验。结果实验一,血府逐瘀汤高、低剂量组和奥贝胆酸对照组均较模型组降低小鼠体质量和胰岛素抵抗指数(P值均<0.05),肝组织空泡状脂滴分布、小叶内炎症减少,肝细胞气球样变减轻,NAS评分下降(P值均<0.05),降低肝脏TG、血清ALT水平(P值均<0.05)。血府逐瘀汤高、低剂量降低体质量、胰岛素抵抗指数和NAS总分的作用均优于奥贝胆酸(P值均<0.05)。血府逐瘀汤低剂量改善血清ALT的作用优于奥贝胆酸(P<0.05)。实验二,与模型组比较,血府逐瘀汤提取部位1、2、3组均显著降低小鼠空腹血糖及胰岛素抵抗指数(P值均<0.05),减少肝组织脂滴分布、小叶内炎症灶和肝细胞气球样变,降低NAS总分和肝脏TG水平(P值均<0.05)。血府逐瘀汤提取部位1较模型组降低NAFLD小鼠体质量(P<0.05);提取部位2、3较模型组降低血清ALT水平(P值均<0.05);提取部位2较模型组降低肝组织GGT水平(P<0.05)。提取部位2的作用最接近血府逐瘀汤复方。结论血府逐瘀汤及其各提取部位均可不同程度改善高脂饮食诱导的小鼠NAFLD,其中提取部位2很可能是血府逐瘀汤发挥效应的主要物质基础。

关键词：非酒精性脂肪性肝病血府逐瘀汤小鼠近交C57BL

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尿酸排泄及其相关转运蛋白在高尿酸血症中的研究进展

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中国全科医学 2023年第15期26卷 1916-1922页

作者：辛家东周嘉宝吴志远张栩铭高建东上海中医药大学附属曙光医院肾病科上海市200120 上海中医药大学中医肾病研究所上海市200000 肝肾疾病病证教育部重点实验室上海市200000 上海市中医临床重点实验室 201203

高尿酸血症(HUA)是人体内尿酸生成和排泄稳态失调从而导致血清尿酸水平升高超过参考范围的一类异质性疾病。既往研究发现3个常见尿酸转运蛋白基因(ABCG2、SLC2A9和SLC22A12)对人体血清尿酸水平的影响程度较大,其他尿酸相关的转运蛋白基... 详细信息

高尿酸血症(HUA)是人体内尿酸生成和排泄稳态失调从而导致血清尿酸水平升高超过参考范围的一类异质性疾病。既往研究发现3个常见尿酸转运蛋白基因(ABCG2、SLC2A9和SLC22A12)对人体血清尿酸水平的影响程度较大,其他尿酸相关的转运蛋白基因(如SLC16A9、SLC22A6、SLC22A7、SLC22A8、SLC22A9、SLC22A11、SLC22A13和ABCC4等)也对尿酸水平的调节起着至关重要的作用。本文对上述已发现的与HUA发生和发展相关的尿酸转运蛋白做一综述,主要包括肾脏中的尿酸重吸收转运蛋白和尿酸分泌转运蛋白以及肠道中的尿酸转运蛋白,旨在为今后HUA的临床治疗提供理论和数据支持。

关键词：高尿酸血症尿酸尿酸转运蛋白基因表达综述

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栀子苷对大鼠肝损伤及血清、肝脏、粪便中胆汁酸的影响

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中国实验方剂学杂志 2021年第11期27卷 63-75页

作者：刘毓张聪聪胡永红陈高峰杨海琳张定棋陈佳美刘平刘伟张华上海中医药大学附属曙光医院肝病研究所肝肾疾病病证教育部重点实验室上海市中医临床重点实验室上海201203 上海中医药大学中药研究所交叉科学研究院上海201203 江西中医药大学现代中药制剂教育部重点实验室南昌330004

目的:探讨不同剂量栀子苷对大鼠肝脏的毒性,以及对其血清、肝组织及粪便中胆汁酸的影响。方法:60只SD大鼠,雌雄各半,按体质量随机分成空白组及栀子苷(50,100,200,400 mg·kg^(-1))组,共5组,每组12只,每天灌胃给药1次,连续7 d,于第8... 详细信息

目的:探讨不同剂量栀子苷对大鼠肝脏的毒性,以及对其血清、肝组织及粪便中胆汁酸的影响。方法:60只SD大鼠,雌雄各半,按体质量随机分成空白组及栀子苷(50,100,200,400 mg·kg^(-1))组,共5组,每组12只,每天灌胃给药1次,连续7 d,于第8天收集大鼠血清、肝组织和盲肠内容物。检测各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT),门冬氨酸氨基转移酶(AST),碱性磷酸酶(ALP)活性,白蛋白(ALB),总胆红素(TBIL),总胆汁酸(TBA),肌酐(Crea),尿素(Urea)含量,肝脏组织切片分别作苏木素-伊红(HE)染色,免疫组化检测细胞角蛋白7(CK7),细胞角蛋白19(CK19)蛋白表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)测定肝组织CK7,CK19蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1),胆固醇27α-羟化酶(CYP27A1),胆固醇12α-羟化酶(CYP8B1)mRNA表达情况,采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS)测定血清、肝脏及盲肠内容物中18种胆汁酸含量。结果:与空白组比较,各剂量栀子苷组TBIL水平显著升高(P<0.01);400 mg·kg^(-1)栀子苷组ALT,AST活性和TBA含量明显升高(P<0.05,P<0.01);HE染色表明,与空白组比较,栀子苷200,400 mg·kg^(-1)组肝组织的汇管区有胆管反应,胆管周围有炎症细胞的浸润,尤以栀子苷400 mg·kg^(-1)毒性明显。栀子苷400 mg·kg^(-1)栀子苷组肝组织中CK7,CK19表达较空白组明显增加(P<0.05,P<0.01)。与空白组比较,400 mg·kg^(-1)栀子苷组肝组织中甘氨熊脱氧胆酸(GUDCA),甘氨猪去氧胆酸(GHDCA)含量明显下降(P<0.05,P<0.01),牛磺鹅去氧胆酸(TCDCA),猪去氧胆酸(HDCA),胆酸(CA),鹅去氧胆酸(CDCA)含量显著升高(P<0.01),甘氨胆酸(GCA),甘氨鹅去氧胆酸(GCDCA),甘氨脱氧胆酸(GDCA),甘氨石胆酸(GLCA),牛磺熊去氧胆酸(TUDCA),GUDCA,GHDCA,熊去氧胆酸(UDCA),牛磺石胆酸(TLCA)的含量占比降低,TCDCA,HDCA,CA,CDCA,脱氧胆酸(DCA)的占比增加;血清中GHDCA,石胆酸(LCA)含量显著下降(P<0.01),牛磺猪去氧胆酸(THDCA),牛磺胆酸(TCA),GCA,TCDCA,UDCA,CA,CDCA,DCA含量明显增加(P<0.05,P<0.01),CA/DCA显著升高(P<0.01),且CA与CDCA含量占比分别上升19.60%和4.63%;与空白组比较,400 mg·kg^(-1)栀子苷组盲肠内容物中所有的胆汁酸含量均下降,其中GCA,UDCA,HDCA,GCDCA,GDCA,TLCA,GLCA,CDCA,DCA,LCA含量明显下降(P<0.05,P<0.01)。Real-time PCR结果显示,与空白组比较,400 mg·kg^(-1)栀子苷组肝组织中CYP7A1,CYP27A1mRNA表达明显增加(P<0.05,P<0.01)。结论:400 mg·kg^(-1)栀子苷灌胃,可导致大鼠明显的肝损伤,其肝脏、血清与粪便中胆汁酸发生显著改变,且同一种胆汁酸在肝脏、血清与粪便中的变化不尽相同。然而,由栀子苷所导致的肝损伤与体内胆汁酸变化间的因果关系尚不清楚,仍有待后续进一步研究给予阐明。

关键词：栀子苷肝脏毒性肝组织血清粪便胆汁酸

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基于UHPLC-Q-Orbitrap HRMS分析覆盆子不同部位的化学成分及其9种成分含量的快速测定

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中草药 2023年第15期54卷 4789-4803页

作者：沈瑶黄思红刘依茹李靖蕾陈昌伦刘考铧刘伟秦路平李荣胜吴建军浙江中医药大学药学院浙江杭州310053 上海中医药大学附属曙光医院宝山分院儿科上海201900 上海中医药大学附属曙光医院肝病研究所肝肾疾病病证教育部重点实验室上海市中医临床重点实验室上海201203

目的采用UHPLC-Q-Exactive Orbitrap HRMS法对覆盆子Rubus chingii不同部位(小核果和花托)化学成分进行分析鉴定,并建立快速测定覆盆子中9种成分含量的方法。方法采用Acquity UPLC HSS T_(3)(100 mm×2.1 mm,1.8μm)色谱柱,以0.1%... 详细信息

目的采用UHPLC-Q-Exactive Orbitrap HRMS法对覆盆子Rubus chingii不同部位(小核果和花托)化学成分进行分析鉴定,并建立快速测定覆盆子中9种成分含量的方法。方法采用Acquity UPLC HSS T_(3)(100 mm×2.1 mm,1.8μm)色谱柱,以0.1%甲酸水与乙腈为流动相,梯度洗脱;覆盆子化学成分鉴定时采用正负离子Full MS/dd-MS^(2)模式,通过化合物的一级、二级质谱信息,结合对照品比对确认,进行覆盆子不同部位主要化学成分的快速、精准识别。采用ACQUITY BEH C_(18)(50 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱在负离子Full MS/SIM模式,建立快速测定覆盆子不同部位中9种成分(没食子酸、芦丁、鞣花酸、金丝桃苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、紫云英苷、椴树苷、槲皮素和山柰酚)含量的UHPLC-Q-Exactive OrbitrapHRMS方法,并测定其含量。结果从覆盆子小核果和花托中共鉴定122种化学成分,包括黄酮类66种、有机酸类28种、萜类24种、其他类4种。成功建立一种6 min完成覆盆子中9种成分含量测定的方法,各成分在其线性范围内线性关系良好;精密度、重复性及稳定性良好(RSD≤6.30%);加样回收率在99.45%~105.30%(RSD≤4.43%),并发现小核果中芦丁的含量显著高于花托;而花托中的鞣花酸、山柰酚-3-O-芸香糖苷和椴树苷的含量显著高于小核果。结论覆盆子小核果和花托部位的化学成分存在差异性,运用UHPLC-Q-Exactive Orbitrap HRMS建立的定量方法分析时间短、灵敏度高、准确性好,方法学考察结果均符合含量测定的要求,可用于覆盆子中9种成分的快速测定。

关键词：覆盆子小核果花托超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱没食子酸芦丁鞣花酸金丝桃苷山柰酚-3-O-芸香糖苷紫云英苷椴树苷槲皮素山柰酚

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小鼠骨髓间充质干细胞移植对不同剂量X射线所致小鼠肝损伤的干预效应

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中华肝脏病杂志 2024年第11期32卷 1019-1027页

作者：梁悦罗蓝程天宇陈高峰刘伟慕永平陈佳美刘平上海中医药大学附属曙光医院上海市中医药研究院肝病研究所上海201203 肝肾疾病病证教育部重点实验室上海市中医临床重点实验室上海201203 上海中医药大学交叉科学研究院上海市中医药化学生物学前沿基地上海201203

目的探讨小鼠骨髓间充质干细胞(BMMSC)移植对不同剂量X射线致小鼠肝损伤的干预作用。方法将18只雌性C57BL/6J小鼠随机分为0、2、3 Gy照射组,0、2、3 Gy移植组:照射组作为对照,予等体积培养基注射;移植组小鼠予以不同剂量X射线辐照,并予... 详细信息

目的探讨小鼠骨髓间充质干细胞(BMMSC)移植对不同剂量X射线致小鼠肝损伤的干预作用。方法将18只雌性C57BL/6J小鼠随机分为0、2、3 Gy照射组,0、2、3 Gy移植组:照射组作为对照,予等体积培养基注射;移植组小鼠予以不同剂量X射线辐照,并予以BMMSC骨髓内注射;第21天末处死取材。每日记录小鼠体质量变化,全自动血液检测仪检测外周血淋巴细胞、红细胞、血小板、血红蛋白含量变化,苏木精-伊红染色观察小鼠肝组织形态变化,生物化学分析仪检测小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)活性,微板法检测肝组织还原型谷胱甘肽含量,硫代巴比妥酸法检测肝组织丙二醛含量,羟胺法检测肝组织总超氧化物歧化酶(T-SOD)含量,免疫组织化学法检测肝组织F4/80蛋白表达,蛋白免疫印迹法测定肝组织核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应检测肝组织核苷酸结合结构域富含亮氨酸重复序列和含热蛋白结构域受体3(NLRP3)、白细胞介素(IL)-6、Nrf2 mRNA表达。多组比较采用析因设计方差分析,组间比较采用LSD法进行统计学分析。结果与0 Gy照射组比较,3 Gy照射组小鼠外周血淋巴细胞、红细胞、血小板、血红蛋白含量显著降低(P<0.05),血清ALT和AST活性显著升高(P<0.05);肝组织丙二醛含量、F4/80蛋白表达水平、NLRP3与IL-6 mRNA表达水平显著升高(P<0.05),肝组织T-SOD与谷胱甘肽含量、Nrf2与HO-1蛋白表达水平、Nrf2 mRNA表达水平显著下降(P<0.05)。与3 Gy照射组比较,3 Gy移植组外周血淋巴细胞、红细胞、血小板、血红蛋白含量显著升高(P<0.05),血清ALT和AST活性显著下降(P<0.05),肝组织丙二醛含量、F4/80蛋白表达水平、NLRP3与IL-6 mRNA表达水平显著降低(P<0.05),肝组织T-SOD与谷胱甘肽含量、Nrf2与HO-1蛋白表达水平、Nrf2 mRNA表达水平显著升高(P<0.05)。结论3 Gy剂量X射线辐照可诱导小鼠形成肝脏氧化损伤,小鼠BMMSC移植可改善X射线辐照诱导的小鼠肝脏氧化损伤,其作用机制可能与调控Nrf2/HO-1通路有关。

关键词：骨髓间充质干细胞移植 X射线肝损伤氧化应激 Nrf2/HO-1通路治疗

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