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第九届全国药物和化学异物代谢学术会议

作者：王莹袁瑾安叡王新宏上海中医药大学中药学院化学教研室

目的:研究异黄酮类成分葛根素（puerarin,PUR）、大豆苷元（daidzein,DDE）和黄酮类成分黄芩苷（baicalin,BCL）、汉黄芩苷（wogonoside,WGS）的液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）检测方法,为开展中药复方葛根芩连汤提取物的药代动力学研究... 详细信息

目的:研究异黄酮类成分葛根素（puerarin,PUR）、大豆苷元（daidzein,DDE）和黄酮类成分黄芩苷（baicalin,BCL）、汉黄芩苷（wogonoside,WGS）的液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）检测方法,为开展中药复方葛根芩连汤提取物的药代动力学研究,建立灵敏可靠的血浆样品的定量分析方法。方法:血浆样品酸化后经乙酸乙酯提取浓缩,液相色谱分离[Waters C柱（3μm,2.1 mm×100 mm）柱,流动相乙腈-水（0.02%的甲酸）梯度洗脱,流速0.3 mL/min],电喷雾离子化三重四极杆串联质谱正离子多反应监测模式（MRM）检测,离子反应分别为m/z 417.1→m/z 399.1（PUR）、m/z 255.2→m/z 199.0（DDE）、m/z 447.1→m/z 271.0（BCL）、m/z 461.1→m/z 285.1（WGS）和内标物柚皮苷m/z581.4→m/z 273.0（Naringin,NRG）。结果:PUR,DDE和BCL,WGS的线性范围在6～4140 ng/mL之间,最低定量浓度为6 ng/mL;PUR,BCL和WGS的回收率>60%;DDE的回收率>50%。日内、日间RSD皆小于15%（n=5）。结论:成功建立了能够灵敏可靠地测定大鼠血浆样品中四种化合物浓度的分析方法,此方法能够用于葛根芩连提取物的药代动力学研究。

关键词：异黄酮黄酮葛根芩连提取物液相色谱-串联质谱法药动学

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补肾方药延缓老年大鼠学习记忆减退的分子机制

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皖南医学院学报 2009年第4期28卷 235-238页

作者：王亚娟金国琴戴薇薇张学礼徐品初上海中医药大学生物化学教研室上海201203 皖南医学院护理学系安徽芜湖241002

目的:观察补肾方药左归丸、右归丸对老年大鼠空间学习记忆能力,氨基酸神经递质以及NMDA受体、Ca2+/CaMKⅣ信号通路相关分子的mRNA表达变化的影响,以探讨老年大鼠学习记忆减退的分子机制以及补肾方药的药理作用。方法:以青年大鼠(5月龄)... 详细信息

目的:观察补肾方药左归丸、右归丸对老年大鼠空间学习记忆能力,氨基酸神经递质以及NMDA受体、Ca2+/CaMKⅣ信号通路相关分子的mRNA表达变化的影响,以探讨老年大鼠学习记忆减退的分子机制以及补肾方药的药理作用。方法:以青年大鼠(5月龄)为对照,以自然衰老大鼠(23月龄)为模型;Morris水迷宫法观察大鼠空间学习记忆能力;HPLC-荧光法检测大鼠杏仁核、海马氨基酸类神经递质含量;RT-PCR法检测大鼠海马NR1、CaMKⅣ、CREB、c-fos mRNA的表达变化;观察补肾方药左归丸、右归丸对老年大鼠上述各项指标的影响。结果:与青年对照组比较,老年大鼠上述指标都有不同程度的异常变化,而左归丸、右归丸可改善老年大鼠退化的空间学习记忆能力;降低老年大鼠杏仁核、海马Glu的含量;显著上调老年大鼠NR1、CaMKⅣmRNA的表达,对CREB及c-fos mRNA的表达也有升高。结论:左归丸、右归丸可以通过降低老年大鼠杏仁核、海马Glu含量,纠正NMDA受体介导的CaMKⅣ信号通路的异常变化,改善老年大鼠空间学习记忆能力,延缓衰老。

关键词：老年大鼠空间学习记忆能力氨基酸类神经递质 NMDAR Ca2+/CaMKⅣ信号通路

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玄参对压力超负荷大鼠心室重构及心肌组织ET-1表达的影响

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中药材 2008年第3期31卷 393-396页

作者：顾伟梁陈长勋上海中医药大学药理教研室上海201203

目的:探讨玄参对压力超负荷大鼠心室重构、心肌组织内皮素-1(ET-1)的影响及其作用机制。方法:腹主动脉不完全结扎法制备大鼠心室重构模型,同时设立假手术对照组。8周药物干预后,测量大鼠心率(HR)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)等指标;测定... 详细信息

目的:探讨玄参对压力超负荷大鼠心室重构、心肌组织内皮素-1(ET-1)的影响及其作用机制。方法:腹主动脉不完全结扎法制备大鼠心室重构模型,同时设立假手术对照组。8周药物干预后,测量大鼠心率(HR)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)等指标;测定左心室及全心质量指数(LVW I、HW I);紫外分光光度法测定心肌SOD活性;放免法测定ET-1含量;RT-PCR测定心肌组织ET-1 mRNA基因表达水平。结果:模型组大鼠HR、SBP、DBP、LVW I及HW I显著升高,而SOD活性则显著降低,ET-1浓度及ET-1 mRNA表达增加。玄参水提液能降低心率、血压、心脏质量指数,提升SOD活性,降低ET-1浓度及其基因表达水平。结论:压力超负荷导致心室重构、氧化应激,心肌ET-1表达增强。玄参水提液可抑制心室重构,其机制可能与其抗氧化应激、下调ET-1表达有关。

关键词：玄参心室重构氧化应激内皮素-1 基因表达

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葶苈子水提液对压力负荷大鼠左室心肌及心肌血管周围胶原的影响

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中国中药杂志 2008年第3期33卷 284-287页

作者：郭娟陈长勋顾伟梁杜军沈云辉上海中医药大学药理教研室上海201203

目的:研究葶苈子水提液对压力负荷大鼠血压及左心室心肌及心肌血管周围胶原增殖的影响。方法:腹主动脉不完全结扎法(abdominal aortic banding,AAB)制作大鼠心肌肥大、心肌纤维化模型。30 d药物干预后,测量大鼠收缩压(systolic blood pr... 详细信息

目的:研究葶苈子水提液对压力负荷大鼠血压及左心室心肌及心肌血管周围胶原增殖的影响。方法:腹主动脉不完全结扎法(abdominal aortic banding,AAB)制作大鼠心肌肥大、心肌纤维化模型。30 d药物干预后,测量大鼠收缩压(systolic blood pressure,SBP)、舒张压(diastolic blood pressure,DBP);心率(heart rate,HR);左心室心肌作病理切片,HE染色,测量左心室心肌细胞横断面面积(myocardium cell cross section,MCCS);Van Gieson胶原染色,测量心肌组织胶原容积分数(collagen volume fraction,CVF)和心肌血管周围胶原面积(perivascular collagenvolume area,PVCA),观察左室心肌形态学变化。结果:与假手术组比较,模型组动物SBP,DBP,HR,MCCS均增加,CVF,PVCA生成增多(P<0.05)。与模型组比较,阳性药卡托普利,葶苈子8 ***-1能明显降低模型动物SBP,DBP,减慢HR;降低MCCS,PVCA,CVF,差异有显著意义(P<0.05);葶苈子4 ***-1能明显降低MCCA及PVCA,CVF,差异有显著意义(P<0.05)。结论:葶苈子水提液具有一定降低压力负荷大鼠血压的作用,能抑制心肌细胞的肥大,减小左心室心肌细胞的横断面面积;降低间质和血管周围胶原沉积,改善心室重构大鼠心肌结构。

关键词：葶苈子心室重构心肌组织胶原容积分数心肌血管周围胶原面积

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葶苈子对压力负荷大鼠心肌CYP11B1、CYP11B2及TGF-β_1 mRNA表达的影响

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中药材 2008年第11期31卷 1691-1695页

作者：郭娟陈长勋杜军顾伟梁沈云辉上海中医药大学药理教研室上海201203

目的:研究葶苈子水提液对压力负荷大鼠心肌CYP11B1、CYP11B2及TGF-β1 mRNA表达的影响。方法:腹主动脉不完全结扎法(AAB)制作大鼠心肌肥厚、心室重构模型。药物干预30d后,称重法测定心脏指数(HW/BW)、左室重量指数(LVW/BW),Real-Time PC... 详细信息

目的:研究葶苈子水提液对压力负荷大鼠心肌CYP11B1、CYP11B2及TGF-β1 mRNA表达的影响。方法:腹主动脉不完全结扎法(AAB)制作大鼠心肌肥厚、心室重构模型。药物干预30d后,称重法测定心脏指数(HW/BW)、左室重量指数(LVW/BW),Real-Time PCR反应技术,以Rat 18S为内参照,测定心肌CYP11B1,CYP11B2,TGF-β1 mRNA的表达水平。结果:模型组大鼠心脏指数增高,醛固酮合成基因和转化生长因子β1表达增强。葶苈子水提液能改善心肌肥厚指数,降低大鼠心肌醛固酮合成基因CYP11B1、CYP11B2及TGF-β1的mRNA表达水平。结论:葶苈子水提液可能通过抑制心肌醛固酮合成相关基因CYP11B1、CYP11B2 mRNA表达水平,降低转化生长因子β1的合成而抑制心室重构的发生。

关键词：葶苈子醛固酮 CYP11B1 CYP11B2 TGF—β1 mRNA表达

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交感神经系统对心室重构的影响及中药对其的干预

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中成药 2008年第5期30卷 734-738页

作者：王樱陈长勋上海中医药大学药理教研室上海201203

由于分子生物学的发展和国际大样本、多中心、随机双盲对照的临床试验结果的公布,慢性心力衰竭(CHF)的治疗概念有了根本性的改变。以往血流动力学异常一直被认为是CHF发生发展的主要机制,目前已明确,导致CHF发生发展的基本机制是心室重... 详细信息

由于分子生物学的发展和国际大样本、多中心、随机双盲对照的临床试验结果的公布,慢性心力衰竭(CHF)的治疗概念有了根本性的改变。以往血流动力学异常一直被认为是CHF发生发展的主要机制,目前已明确,导致CHF发生发展的基本机制是心室重构。心室重构是由于一系列复杂的分子和细胞机制导致心肌结构、功能和表型的变化。[第一段]

关键词：交感神经心室重构中药

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玄参水提物对心室重构大鼠心肌纤维化的影响

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中草药 2008年第9期39卷 1371-1374页

作者：顾伟梁陈长勋王樱沈云辉上海中医药大学药理教研室上海201203

目的探讨玄参对心室重构大鼠心肌纤维化的影响及其作用机制。方法腹主动脉缩窄法制备大鼠心室重构模型。8周药物干预后,测定大鼠左室及全心肥厚指数(LVWI、HWI);紫外分光光度法测心肌羟脯氨酸的量(hydroxproline,Hyp);病理切片HE染色观... 详细信息

目的探讨玄参对心室重构大鼠心肌纤维化的影响及其作用机制。方法腹主动脉缩窄法制备大鼠心室重构模型。8周药物干预后,测定大鼠左室及全心肥厚指数(LVWI、HWI);紫外分光光度法测心肌羟脯氨酸的量(hydroxproline,Hyp);病理切片HE染色观察心肌细胞横断面面积;RT-PCR测定心肌组织转化生成因子β1基因(TGF-β1mRNA)表达水平。结果玄参水提液能降低心肌肥厚指数、羟脯氨酸量,减小左心室心肌细胞的横断面面积;显著降低TGF-β1mRNA表达水平。结论玄参水提液对心肌细胞和间质胶原重构两方面都有显著的抑制作用,抗心室重构的作用机制与抑制TGF-β1mRNA表达有关。

关键词：玄参心室重构羟脯氨酸 TGF-β1 基因表达

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新云芝糖肽对S180荷瘤小鼠环磷酰胺化疗的增效减毒作用

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肿瘤 2008年第7期28卷 572-576页

作者：沈旭华陈长勋上海中医药大学中药学院药理教研室上海201203

目的:观察云芝糖肽(polysaccharide peptide,PSP)对S180荷瘤小鼠环磷酰胺(cyclophospamide,CTX)化疗后的增效减毒作用,探讨相关免疫学机制,并比较PSP新旧产品(PSP2、PSP1)的作用差异。方法:建立S180荷瘤小鼠模型,设荷瘤模型组,CTX对照... 详细信息

目的:观察云芝糖肽(polysaccharide peptide,PSP)对S180荷瘤小鼠环磷酰胺(cyclophospamide,CTX)化疗后的增效减毒作用,探讨相关免疫学机制,并比较PSP新旧产品(PSP2、PSP1)的作用差异。方法:建立S180荷瘤小鼠模型,设荷瘤模型组,CTX对照治疗组,CTX+PSP2低、中、高剂量组(200、400、800mg/kg)、CTX+PSP1中剂量组(400mg/kg),单用PSP2、PSP1中剂量组(400mg/kg),另设正常对照组。观察小鼠存活时间、抑瘤率、血常规、胸腺指数、脾指数、骨髓有核细胞数以及FCM法检测脾脏T细胞亚群分类。结果:PSP2(高剂量组)联用CTX能延长小鼠生存期(P<0.05);单用PSP2、PSP1有抑瘤作用,能提高抑瘤率(P<0.05);PSP2、PSP1联用CTX都能明显增强抑瘤作用,提高抑瘤率(P<0.05或0.01),且PSP2、PSP1对CTX毒性所致的骨髓和免疫抑制均有保护或促进恢复的作用;单用PSP2、PSP1都能提高脾细胞CD3+CD4+/CD3+CD8+比值,联用CTX对该比值也能提高(P<0.05,PSP2中剂量联用CTX)或有提高趋势。结论:PSP2、PSP1的抑瘤作用和对CTX化疗的增效减毒作用与其提高脾细胞CD3+CD4+/CD3+CD8+比值有关,在抑瘤增效与免疫调节方面PSP2比PSP1更具优势。

关键词：云芝糖肽环磷酰胺 T淋巴细胞亚群免疫功能抗肿瘤剂(中药) 蛋白聚糖类

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玄参和附子抗鼠心肌肥厚作用的对比实验研究

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中西医结合学报 2008年第4期6卷 376-380页

作者：顾伟梁陈长勋王樱上海中医药大学药理学教研室上海201203

目的:探讨寒性药玄参和热性药附子对大、小鼠心肌肥厚及神经内分泌因子的影响。方法:采用注射异丙肾上腺素及L-甲状腺素两种方法分别制备小鼠和大鼠心肌肥厚模型。随机分为5组:正常组、模型组、美托洛尔组(或卡托普利组)、玄参组和附子... 详细信息

目的:探讨寒性药玄参和热性药附子对大、小鼠心肌肥厚及神经内分泌因子的影响。方法:采用注射异丙肾上腺素及L-甲状腺素两种方法分别制备小鼠和大鼠心肌肥厚模型。随机分为5组:正常组、模型组、美托洛尔组(或卡托普利组)、玄参组和附子组。灌胃给药干预7～9d,称体质量后取血和心脏备用。称心脏质量测定左心室及全心质量指数;放射免疫法测定血浆环磷酸腺苷(cyclic adenosine mono- phosphate,cAMP)和心肌组织血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)的水平:病理切片HE染色观察心肌细胞横断面面积大小。结果:寒性药玄参能显著改善心脏质量指数,降低cAMP、AngⅡ的含量,明显缩小心肌细胞横断面面积。而热性药附子则无此作用。结论:寒性药玄参能通过抑制心肌肥厚大鼠交感神经系统活性,降低AngⅡ水平而抑制心肌肥厚。而热性药附子抗心肌肥厚及抑制神经内分泌因子分泌的作用不显著。

关键词：玄参附子心肌病肥厚性对比研究大鼠小鼠

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二氮嗪对长时程低温保存大鼠心脏Fas/FasL蛋白表达的影响

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生理学报 2008年第1期60卷 11-16页

作者：范莹郑鸣之郭炜蒋建平朱立沈岳良陈莹莹浙江大学医学院生理系浙江医学高等专科学校药理教研室上海中医药大学病理教研室

本文旨在研究线粒体ATP敏感性钾(mitochondrial ATP-sensitive potassium channel, mitoKATP)通道开放剂二氮嗪(diazoxide,DE)对离体长时程低温保存的大鼠心脏促凋亡蛋白 Fas 和 FasL 表达的影响。利用 Langendorff 离体大鼠心脏灌注法... 详细信息

本文旨在研究线粒体ATP敏感性钾(mitochondrial ATP-sensitive potassium channel, mitoKATP)通道开放剂二氮嗪(diazoxide,DE)对离体长时程低温保存的大鼠心脏促凋亡蛋白 Fas 和 FasL 表达的影响。利用 Langendorff 离体大鼠心脏灌注法,观察心脏在4 oC 含或不含(对照组) DE 的Celsior 保存液保存8 h 后,复灌期心脏作功量(rate-pressure product, RPP)变化情况,采用原位末端标记(TdT-mediated dUTP nick end labeling, TUNEL)染色法检测心肌细胞凋亡和免疫组织化学方法检测Fas 和FasL蛋白表达情况。结果显示,在Celsior 保存液中加入DE (30 μmol/L),复灌期RPP 的恢复率在多个复灌时间点上优于对照组;同时可降低长时程低温保存心脏心肌细胞凋亡指数,减少 Fas 和FasL 蛋白的表达。DE 的上述作用可被 mitoKATP 通道特异性阻断剂5- 羟基葵酸盐(5-hydroxydecanoate, 5-HD)所取消。以上结果提示,DE 可能通过激活 mitoKATP 通道来减少Fas 和FasL 蛋白表达,从而减轻大鼠心肌缺血 / 再灌注损伤后的心肌细胞凋亡。

关键词：二氮嗪 Fas/FasL 线粒体ATP敏感性钾通道心脏保存心肌保护

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